专利名称：改善大鼠血液流变障碍用的含有麻黄碱注射液的制备方法
技术领域：
改善血液流变障碍用的含有麻黄碱的注射液的制备方法，属于防治脑缺血药物的制造技术领域。
背景技术：
申请号为200880001478. 9，名为“ー种防治脑缺血性脑卒中的药物组合物及其制备方法”的中国发明专利提示了一种用于防治缺血性脑卒中的药物组合物，是由瑟丹酸内酷、蒿本内酯和天麻素共同组合成的。其中，天麻素是纯度为98 %以上的市售产品，瑟丹酸内酯和蒿本内酯的纯度均在98 %以上，相应地提出了纯度为99. 17%的瑟丹酸内酯及纯度为98. 32%的蒿本内酯的制备方法。其实验结果表明该三种成分的配伍可以有效地减少缺 血性脑梗塞的范围(用脑梗塞百分数表示)和肢体偏瘫的程度(用行为症状评分表示)。即作为注射剂治疗给药时，大鼠脑梗塞面积百分比在13. 03% —18. 58 %之间；行为评分在I. 50分一2. 30分之间；作为ロ服剂预防给药时，大鼠脑梗塞面积百分比在21. 36% —21. 67%之间，行为评分在3. 36分一4. 33分之间。其药效好于常用临床用药脉络宁(注射剂)和川芎嗪(注射剂和ロ服剂)。但缺少改善身体微循环(用血液流变学指标表示)的实验数据。在目前检索到的文献中，未发现药物组合物中有采用麻黄碱、天麻素与瑟丹酸内酯来配伍的。
发明内容
本发明的目的在于提取并配制ー种对改善血液流变障碍用的含有麻黄碱的注射液制备方法。本发明是ー种改善血流变障碍用的含有麻黄碱的注射液的制备方法其特征之一，称取纯度至少为98%的瑟丹酸内酯O. 16g、纯度至少为98%的天麻素O. 024g、纯度至少为98%的麻黄碱O. 24g，在体积百分比为5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐单油酸酷85ml，搅拌均匀，使所述的瑟丹酸内酷、天麻素和麻黄碱的组合物在体积百分比为5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐单油酸酯水溶液中的浓度为5mg/ml。其特征之ニ，称取纯度至少为98%的瑟丹酸内酯O. 16g、纯度至少为98%的天麻素O. Olg、纯度至少为98%的麻黄碱O. 24g，加入体积百分比为5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐单油酸酷82ml，搅拌均匀，使所述的瑟丹酸内酷、天麻素和麻黄碱的组合物在体积百分比为5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐单油酸酯水溶液中的浓度为5mg/ml。实验证明，上述两种受试物均能改善血液流变学指标，从而发挥抗脑缺血作用。与临床用药尼膜同相当。其中实施例I好于实施例2。
具体实施例方式一、受试物配制实施例I :称取98%纯度的瑟丹酸内酯O. 16g，98%纯度的天麻素O. 024g, 98%纯度的麻黄碱O. 24g，加入体积百分比为5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐单油酸酯85ml，搅拌均匀，使所述的瑟丹酸内酷、天麻素和麻黄碱的组合物在5% (体积比)的聚氧こ烯山梨糖醇酐单油酸酯水溶液中的浓度为5mg/ml。实施例2 称取98%纯度的瑟丹酸内酯O. 16g，98%纯度的天麻素O. Olg, 98%纯度的麻黄碱O. 24g，加入体积百分比为5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐单油酸酯82ml，搅拌均匀，使所述的瑟丹酸内酷、天麻素和麻黄碱的组合物在5% (体积比)的聚氧こ烯山梨糖醇酐单油酸酯水溶液中的浓度为5mg/ml。所述的瑟丹酸内酯按申请号200880001478. 9、名称为ー种防治脑缺血性脑卒中的药物组合物及其制备方法的发明专利申请所述的方法配制，天麻素和麻黄碱为市售产品。 ニ、试验方法实验由首都医科大学宣武医院完成。模型制造实验用大鼠以25%乌拉坦I. 5 g/kg腹腔注射麻酔，在大鼠头顶骨部位，前囟中心向前2mm，向右2. 5mm处，用牙科钻打一直径约2mm的骨窗，将测量电极插入软脑膜下2mm，測定结扎前脑组织血流量(rCBF)，然后结扎双侧颈总动脉，分别测定结扎后lOmin、60min及120min时rCBF。血流量以ml/100g/min计。并计算相对血流量。检测原理根据
氢气清除法。
獅血流量=χ ιοο%实验动物处死前，经腹主动脉取血O. 8ml，抗凝，用血液粘度仪进行检测，以高切QOOS—1)、中切(30 S—1)和低切(5 S—1)时血液粘度表示全血粘度(见表I);另取抗凝血以2000转离心8min，其上清液即为血浆，取O. 8ml血浆用血液粘度仪测试100 S—1时的血浆粘度(见表2)。以红细胞最大变形指数(MAXDI)表示红细胞变形性(见表3);以红细胞最大聚集指数(MAXD)表示红细胞聚集性(见表3)。大脑中动脉血栓模型的制备按Tamura等的方法改进而成。实验动物采用350g±20g SD大白鼠，以水合氯醛O. 35g/kg腹腔注射麻酔。大鼠右侧卧位固定，在眼外眦和外耳道连线中点作ー长I. 5cm的弧形切ロ，暴露颞骨，用牙科钻在颧骨与颞鳞骨接合处向鼻侧Imm处作ー直径2. 5mm的骨窗，暴露大脑中动脉，将吸有10 μ I 50% FeCl3液的小片滤纸敷在大脑中动脉上，手术在体视显微镜下进行。待30min后大脑中动脉变黑，取下滤纸，用生理盐水冲洗局部组织，逐层縫合。假手术组不敷FeCl3，余同模型组。实验分组实验动物采用SD大白鼠，体重为350±20g。实验共分5组空白对照组和模型对照组给予生理盐水，给药量均为O. 04ml/100g体重；阳性对照药为临床治疗脑缺血常用药尼膜同的O. 02%灭菌注射液，由德国拜耳公司生产，批号CBWLL11B。给药剂量为8μ g/100g，给药量为O. 04ml/100g体重；实施例I组、实施例2组，给药量均为O. 16ml/IOOg体重。给药方法实施例I、尼膜同于造模前、造模后10 min、造模后Ih共舌下静脉注射给药3次；实施例2术前预防给药3日，毎日I次，末次给药后0. 5h造模，术后给药方法同实施例I。
实验数据统计采用均数土标准差(X 土SD)表示。实验结果经组间比较，进行t检验。结果以P值表示。均数是表示一组数据之间的平均数。标准差是表示ー组数据离散程度的指标。t检验是对回归參数的显著性进行检验，P值为结果可信程度的递减指标。P〈0. 05为组间有显著性差异，P〈0. 01为组间有非常显著性差异。ニ、药效:两个实施例均能改善血液流变学指标。例如，能升高红细胞变形性，降低红细胞聚集性，降低血小板聚集率。能降低全血粘度和血浆粘度。提示对血液流变学的改善作用是其抗脑缺血作用的机制之一。其中 实施例I好于实施例2。表现如下(详见表1-3)I.大鼠形成大脑中动脉血栓后，可引起红细胞变形性降低，红细胞聚集性升高，血小板聚集率升高，全血粘度(高切200S'中切30 S—1和低切5 S—1 )及血浆粘度(100 S—1)均较正常组有所増加，说明在脑缺血的发生过程中，血液流变学呈粘、浓、凝、聚状态的变化。2.实施例I对24小时大脑中动脉血栓模型鼠血液粘度和血液流变学的改善作用比实施例2好，并且在以下指标上具有显著性差异24h全血还原粘度(高切)实施例I组明显低于实施例2组，Ρ〈0· 05; 24h全血还原粘度(低切)实施例I组明显低于实施例2组，P〈0. 05。表I.受试物对24h大脑中动脉血栓模型血液粘度的影响(χ 土SD)
I 剂量"II全血粘度「血衆粘度
组别动物数 ^-—Γ—;-:~~—-:--,
(ml IOOg)咼切(200S—1)中切 ￠3(^1) 低切(IS—1)(100S'1)
空白对照组一84.47±0.49**6.07±0.78 25.2(^5.51^1.28 + 0.06
模型对照组—85.54 + 0.537.92±0.92 38.49±7.381.54±0.06
阳性药尼膜同组0.0484.79 + 0.23**6.66±0.44**29.72±4.73*1.37 + 0.06**
实施例 I 组0.1685.11±0.577.17±0.8133.01±5.921.38+0.04
实施例 2 组0.1684.69±0.54*6.51 ±0.88*28.99±5.70*1.39±0.06 注各组与模型组相比，* Ρ〈0· 05 ;#Ρ〈0· 01表2.受试物对48h大脑中动脉血栓模型血液粘度的影响(χ 土SD)
"!剂量"fΓ Jm 粘度 |_血衆粘度 "
组别动物数^-. -,^^———,——,
(ml IOOg)—咼切(200S—1) ^ 中切(30S-1) 低切(IS.1)(IOOS.1)
空白对照组一84.47±0.49**6.07±0.78**25.20±5.51**1.28±0.06**
模型对照组一85.61±0.637.85±0.8335.71±4.711.47±0.06
阳性药尼膜同组0.0485.07 + 0.3 57.02 ±0.53*30.90±3.631.36±0.07*
实施例 I 组0.1685.00+0.417.26±1.0532.26±4.51#1.42±0.08
实施例 2 组dl685.42±0.327.75±0.3637.51±3.401.46 + 0.16注:各组与模型组相比，*P〈0. 05 ;**Ρ〈0· 01 ;实施例I与实施例2相比，# Ρ〈0· 05表3.受试物对24h大脑中动脉血栓模型血液流变学的影响(X 土SD)
权利要求
1.改善大鼠血液流变障碍的含有麻黄碱注射液的制备方法，其特征在干， 称取纯度至少为98%的瑟丹酸内酯O. 16g、纯度至少为98%的天麻素O. 024g、纯度至少为98%的麻黄碱O. 24g，加在体积百分比为5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐单油酸酯85ml中，搅拌均匀，使所述的瑟丹酸内酷、天麻素和麻黄碱的组合物在体积百分比为5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐单油酸酯水溶液中的浓度为5mg/ml。
2.改善大鼠血液流变障碍的含有麻黄碱注射液制备方法，其特征在干， 称取纯度至少为98%的瑟丹酸内酯O. 16g、纯度至少为98%的天麻素O. Olg、纯度至少为98%的麻黄碱O. 24g中，在体积百分比为5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐单油酸酯82ml中，搅拌均匀，使所述的瑟丹酸内酷、天麻素和麻黄碱的组合物在体积百分比为5%的聚氧こ烯山梨糖醇酐单油酸酯水溶液中的浓度为5mg/ml。
全文摘要
改善大鼠血液流变障碍用的含有麻黄碱注射液的制备方法，属于改善生物血液障碍药物制备领域，其特征在于，在有效成分中由纯度至少为98%的瑟丹酸内酯、由纯度至少为98%的瑟丹酸内酯、纯度至少为98%的天麻素、纯度至少为98%的麻黄碱，在体积百分比为5%的聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯水溶液中共同按比例搅拌而成，瑟丹酸内酯、天麻素和麻黄碱的组合物在5%的聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯水溶液中的浓度为5mg/ml。相对于临床相应常用药尼莫酮而言，在血液粘度，红细胞最大变形指数，红细胞最大聚集指数和血小板聚集率上均有明显改善。
文档编号A61K31/7034GK102688184SQ20121015140
公开日2012年9月26日 申请日期2012年5月15日 优先权日2012年5月15日
发明者丁明玉, 季梁, 李衍达, 韩慧婉 申请人:清华大学