专利名称：藿香油在制备治疗阴道炎的药物中的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及藿香油的新用途，属医药卫生领域。
背景技术：
阴道炎是阴道粘膜及粘膜下结缔组织的炎症，是妇科门诊的常见疾病。正常健康妇女，由于解剖学及生物化学特点，阴道对病原体的侵入有自然防御功能，当阴道的自然防御功能遭到破坏，则病原体易于侵入，导致阴道炎症。目前，对阴道炎的治疗以抗感染、抗炎为主，同时辅以物理治疗，常用的治疗方法有药用阴道冲洗、局部放药、口服用药等。常见的阴道炎有细菌性阴道炎、念珠菌性阴道炎、滴虫性阴道炎、老年性阴道炎。细菌性阴道炎，是阴道内正常菌群失调所致的一种混合感染，是阴道内有大量的细菌、伴有阴道分泌物性质改变的一组症候群，主要症状为阴道分泌物增多，呈稀薄均质状或稀糊状，为灰白色或灰黄色，有鱼腥臭味，性交后加重，可伴有轻度外阴瘙痒或烧灼感，有的人可发生下腹部疼痛、性交困难或尿痛。治疗细菌性阴道炎的常见药物为四环素等抗生素和磺甲硝咪唑等广谱抗细菌化药。念珠菌性阴道炎，是由念珠菌感染引起的阴道炎，主要致病菌为白色念珠菌。念珠菌为酵母菌，是条件致病性真菌，其致病性是相对的，是否发病取决于人体免疫力的高低及感染菌的数量、毒力。在正常机体中，其数量少，呈卵圆形，与机体处于共生状态，不引起疾病。当机体在机体某些生理、病理因素影响下，机体抵抗力或免疫力降低时，平衡状态被破坏，念珠菌由酵母相转为菌丝相，在局部大量生长繁殖，引起阴道炎。表现为白带增多，夕卜阴、阴道瘙痒、灼烧感，小便疼痛，外阴周围常发红、水肿，表皮变化多种多样；可发生很浅的水疱丘疹，成群出现；亦可形成湿疹状糜烂，局限于外阴或向周围扩展至会阴、肛门周围及股生殖皱裝，直至大腿内侦彳、外表，完全类似急性或亚急性湿疹；阴唇及阴蒂附近黏膜增厚，互相接触的皮肤表面潮红糜烂；个别可引起微小的白色脓疱，严重时发生溃疡、外阴疼痛及局部淋巴结肿大。治疗念珠菌性阴道炎的常见药物为制霉菌素等抗生素和氟康唑、伊曲康唑等广谱抗真菌化药。滴虫阴道炎(trichomonas vaginitis)是常见的阴道炎，由阴道毛滴虫所引起。临床上以白带增多、质稀有泡沫、秽臭，阴道瘙痒为主要表现。检查时可见阴道粘膜充血，严重者有散在的出血斑点，后穹窿有多量白带，呈灰黄色、黄白色稀薄液体或为黄绿色脓性分泌物，常呈泡沫状。常见治疗药物为甲硝唑等灭虫化药。老年性阴道炎常见于绝经后的老年妇女，因卵巢功能衰退，雌激素水平降低，阴道壁萎缩，粘膜变薄，上皮细胞内糖原含量减少，阴道内PH值上升，局部抵抗力降低，致病菌容易入侵繁殖并且引起炎症。主要症状为阴道分泌物增多及外阴瘙痒、灼热感。检查见阴道呈老年性改变，上皮萎缩，皱襞消失，上皮变平滑、菲薄。阴道粘膜充血，有小出血点，有时见浅表溃疡，若溃疡面与对侧粘连，阴道检查时粘连可被分开而引起出血，粘连严重时可造成阴道狭窄甚至闭锁，炎症分泌物引流不畅可形成阴道积脓甚或宫腔积脓。补充少量雌激素是老年性阴道炎的治疗原则，可使阴道黏膜增厚，增强抵抗力。
目前，常用治疗阴道炎的药物大多为抗生素和广谱抗菌药物，副作用大，且广泛使用会产生耐药。中药来源广泛，毒性小，药效长，因此，从中草药中寻求治疗阴道炎的新药非
常必要。广藿香Pogostemon cablin (Blanco) Benth.为唇形科多年生草本植物，又名枝香，原产菲律宾，现广泛分布在中国、印度、日本、印度尼西亚、马来西亚、马达加斯加、巴西、巴拉圭和俄罗斯等，广藿香油为唇形科多年生草本植物广藿香Pogostemon cabl in (Blanco)Benth.的叶子、枝杆及根部经水蒸气蒸馏所得或者经发酵处理的干叶提油。藿香Agastacherugosa(Fisch. Et Mey. )0. Ktze.为唇形科植物,含有挥发油，功效同广藿香。 广藿香油主要含有广藿香醇及广藿香酮(总量占40%以上)，具有抗炎、抗过敏、提高免疫、抗菌、镇痛、抗痉挛、抗氧化、止吐等作用，藿香油主要含甲基胡椒酚(占80%以上)，具有抗菌、解痉、镇静及升高白细胞的作用(刘亮峰等，“广藿香油及藿香油的研究概况”，中国中医药信息杂志2009年2月第16卷第2期)。其中，关于广藿香油和藿香油体外抗菌的文献报道较多，如，莫小路等，“广藿香精油对植物病原真菌的抑菌活性研究”，中药材2004年11月第27卷第11期报道了广藿香油对13种植物病原真菌均有不同程度的抑制作用，其中，对檀香多毛孢、番茄早疫病菌、核盘菌的抑制作用较强；莫小路等，“两种广藿香油的抗菌作用研究”，中国现代中药2011年9月第13卷第9期公开了广藿香油可抑制大肠杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、普通变形杆菌、枯草芽孢杆菌、绿脓杆菌、粪肠球菌8种细菌，以及产黄青霉、黑曲霉和白色念珠菌3种真菌；杨得坡等，“藿香和广藿香挥发油的抗皮肤细菌活性与化学成分的研究”，微生物学杂志1998年12月第18卷第4期公开了藿香和广藿香挥发油对16种皮肤细菌的体外抑制作用，如干燥棒杆菌、固着微球菌等；“藿香和广藿香挥发油对皮肤癣菌和条件治病真菌的抑制作用”，中国药学杂志2000年I月第35卷第I期报道了藿香油和广藿香油对红色癣菌等皮肤癣菌以及烟曲霉等霉菌有抑制作用；张广文等，“广藿香精油化学成分分析及其抗菌活性(II)”，中草药2002年第33卷第3期公开了广藿香油对黑曲霉、黄曲霉等致病真菌以及大肠杆菌等细菌的抗菌作用。现有关于广藿香油和藿香油抗菌抑菌的研究多集中于植物致病菌和皮肤病菌，主要目的在于提供抗菌外用新药。
发明内容
本发明的目的在于提供藿香油的新用途，以及以藿香油为活性成分的药物组合物。首先，本发明提供了藿香油在制备治疗阴道炎的药物中的用途。其中，所述药物是治疗念珠菌性阴道炎或者滴虫性阴道炎的药物。优选地，所述药物是治疗白色念珠菌引起的念珠菌性阴道炎。其中，所述的藿香油来源于广藿香Pogostemon cabl in (Blanco) Benth.或藿香Agastache rugosa(Fisch. Et Mey. )0. Ktze.提取的挥发油。其中，所述的藿香油来源于广藿香Pogostemon cablin(Blanco)Benth 提取的挥发油，该挥发油中含百秋李醇不得低于26. 0% w/w。其中，所述的藿香油是由以下方法制备得到的取广藿香Pogostemoncablin (Blanco) Benth.或藿香 Agastache rugosa (Fisch. Et Mey. ) 0. Ktze.的全草，粉碎成粗粉，加水，浸泡，采用水蒸气蒸馏法提取，即得藿香油。本发明还提供了一种治疗阴道炎的药物组合物，它是以藿香油为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的药剂。其中，所述的药剂是外用制剂、口服制剂或注射制剂。优选地，所述外用制剂为洗齐U、栓剂、涂膜剂或搽剂。其中，所述制剂中藿香油的含量为0. 1% 100% w/w。本发明藿香油具有治疗阴道炎的作用，尤其是对念珠菌性阴道炎和滴虫性阴道炎具有确切的疗效，具有良好的临床应用前景。显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离 本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。 以下通过实施例形式的具体实施方式
，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
图I本发明药物对阴道毛滴虫超微结构的影响。图A为未经任何药物作用的阴道毛滴虫的正常超微结构，其中I为细胞核，2为粗面内质网，3为过氢化酶体，4为鞭毛横断面；图B至图H为药物作用后阴道毛滴虫的超微结构变化，a :空泡，b :自噬泡，c :核周隙增宽，d :粗面内质网扩张，e :染色质积聚，f :核糖体消失，g :核膜消失，细胞核逐渐崩解，h :核固缩，i :细胞器崩解，j :胞膜损坏，胞浆漏出，虫体死亡。
具体实施例方式实施例I本发明藿香油的制备取广藿香Pogostemon cablin (Blanco) Benth.全草，粉碎过 20-40 目筛，加入10-14倍重量的蒸馏水，浸泡1-5小时后，采用水蒸气蒸馏法提取2-6小时，即得本发明藿香油，其中含百秋李醇(C15H26O)不得低于26.0%。实施例2本发明藿香油的制备取藿香Agastache rugosa (Fisch. Et Mey. ) 0. Ktze.全草，粉碎过 20-40 目筛，力口A 10-14倍重量的蒸馏水，浸泡1-5小时后，采用水蒸气蒸馏法提取2-6小时，即得本发明
藿香油。本发明藿香油也可按照药典(2005年版)附录XD挥发油测定法提取，还可采用有机溶剂提取、超临界CO2萃取等现有技术进行提取，或者通过购买市售产品获得。以下通过药效试验证明本发明的有益效果实验例I本发明藿香油治疗念珠菌性阴道炎的活性I、材料及仪器I. I实验菌株①标准株白色念珠菌标准株(ATCC14053)，来自美国临床实验室菌种保藏中心；白色念珠菌标准株(CICC32819)和白色念珠菌标准株(CICC31284)，购自中国工业微生物
菌种保藏管理中心。
②临床分离株14株白色念珠菌，于2011年9月至12月期间分离于四川省妇幼保健院妇科门诊患者阴道分泌物，并经BIO-KONT公司的KC-16鉴定板条与药敏纸片鉴定为白色念珠菌。I. 2 药物试验药物本发明藿香油(按照实施例I的方法制备)。阳性药物克霉唑阴道片(济南利民制药有限公司，批号1108148)，洁尔阴洗液(四川恩威制药有限公司，批号:1107102)。I. 3实验动物小鼠(SPF级)[成都中医药大学实验动物研究中心，生产许可证号SCXK (川)2008-11，使用合格证号=SCXK (川)2008-049]。
I. 4培养基、试剂及耗材沙氏琼脂培养基(每升含氯霉素0. lg，广东环凯微生物科技有限公司)。苯甲酸雌二醇注射液(天津金耀氨基酸有限公司，批号1007061)，一次性无菌培养皿(江苏康健生物有限公司)等。I. 5主要仪器多点接种仪(日本佐久间制作所，SAKUMA MIT-P型)，实验室用高压灭菌器(SANYO，MLS-3780型)，C02INCUBATOR (SANYO, M0C-15A)，节能净化工作台(成都新光非兰特净化工程有限公司)。2、实验方法2. I本发明药物治疗念珠菌性阴道炎的体内活性2. I. I小鼠念珠菌性阴道炎模型的建立受试菌活化将白色念珠菌标准株CICC32819接种于沙氏琼脂培养基，37 °C培养48h，活化后备用。模型制备通过预实验对影响模型建立的各项因素进行优化，确定念珠菌性阴道炎模型的建立方法。在正式实验中，选取SPF昆明小鼠70只，体重(20±2)g，其中60只在感染前6d开始，每只小鼠隔日背部皮下注射lmg/ml苯甲酸雌二醇油剂0. 1ml，并于最后I次注射后接种白色念珠菌I. 5 X IO7CFU/只，24h后重复感染I次。并于最后I次感染后48h和72h分别取阴道分泌物进行涂片镜检，观察菌丝及芽生孢子生成情况，同时接种于沙氏琼脂平板上，观察菌株的生长情况；并观察阴道分泌物等变化。在最后I次感染48h后用接种环取小鼠阴道分泌物接种于沙氏琼脂平板上培养24tT48h，观察平板上白色念珠菌的菌落生长情况，显微镜观察菌丝生长情况。若在平板中生长有典型的白色念珠菌，显微镜下观察到菌丝及芽生孢子，说明念珠菌性阴道炎模型小鼠制备成功。2. I. 2实验分组待小鼠造模成功后，每只小鼠用0. Iml无菌生理盐水进行阴道冲洗，将冲洗液进行菌落计数，根据小鼠阴道菌落计数结果将小鼠随机分为6组，包括本发明药物高、中、低三个剂量组，阳性药物克霉唑组和洁尔阴组，模型组，每组10只。另以10只不感染白色念珠菌的小鼠作为空白对照。其中各组小鼠阴道内感染白色念珠菌的情况分析见表I。表I :各组小鼠阴道感染白色念珠菌的情况分析
权利要求
1.藿香油在制备治疗阴道炎的药物中的用途。
2.根据权利要求I所述的用途，其特征在于所述药物是治疗念珠菌性阴道炎或者滴虫性阴道炎的药物。
3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于所述药物是治疗白色念珠菌引起的念珠菌性阴道炎。
4.根据权利要求r3任意一项所述的用途，其特征在于所述的藿香油来源于广藿香Pogostemon cablin (Blanco) Benth.或藿香Agastache rugosa(Fisch. Et Mey. ) 0. Ktze.提取的挥发油。
5.根据权利要求r3任意一项所述的用途，其特征在于所述的藿香油来源于广藿香Pogostemon cabl in (Blanco) Benth.提取的挥发油，该挥发油中含百秋李醇不得低于26. 0% w/w。
6.根据权利要求f3任意一项所述的用途，其特征在于所述的藿香油是由以下方法制备得到的取广藿香Pogostemon cabl in (Blanco) Benth.或藿香Agastacherugosa(Fisch. Et Mey. )0. Ktze.的全草,粉碎成粗粉,加水,浸泡,采用水蒸气蒸懼法提取，即得藿香油。
7.一种治疗阴道炎的药物组合物，其特征在于它是以藿香油为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的药剂。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于所述的药剂是外用制剂、口服制剂或注射制剂。
9.根据权利要求8所述的药物组合物，其特征在于所述外用制剂为洗剂、栓剂、涂膜剂或搽剂。
10.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于所述制剂中藿香油的含量为.0.I 100% w/w。
全文摘要
本发明公开了藿香油在制备治疗阴道炎的药物中的用途。本发明还公开了一种治疗阴道炎的药物组合物，它是以藿香油为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的药剂。藿香油治疗阴道炎的疗效显著，有较强的实际应用价值。
文档编号A61P31/04GK102743432SQ20121023156
公开日2012年10月24日 申请日期2012年7月5日 优先权日2012年7月5日
发明者代敏, 彭成, 彭颖, 林大胜, 王天祥, 王蓬勃 申请人:成都中医药大学, 成都华神集团股份有限公司