专利名称：一种实验大鼠的采血方法
技术领域：
本发明属于生物学及医学实验的技术领域，涉及动物实验技术。具体地说，本发明涉及一种实验大鼠的采血方法。
背景技术：
大鼠是生物学、医学科研和教学中较理想而常用的实验动物之一。大鼠实验时，需采血进行血液学指标检测。实验大鼠的采血是大鼠实验中经常运用的实验技术。
若采血量不足或溶血，将直接影响血液学指标的检测及实验数据的准确，甚至影响到整个实验的成败。大鼠红细胞每45 68d(天)更新一代，每小时进入血循环中的红细胞达2. 4X107个，一次失血不超过全血的30%不会导致失血性休克，且I 2周内可以恢复。以I只250g体重的大鼠为例，血容量约占其体重的6% 8%，大约相当于16mL全血。一次采血2mL，低于全身血量的30%，不会导致失血性休克；若间隔7d (天)再采血2mL，对大鼠血液成份、营养状况及生命活动无明显影响。采血方法不同及采血标本的优劣，直接影响血液学指标的检测及实验数据的准确，甚至影响到整个实验的成败。目前大鼠的采血主要有腹主动脉采血、眼眶后静脉丛采血、心脏穿刺采血、尾尖采血、尾V刺血法、颈外静脉或颈总动脉采血；还有断头取血等。由于大鼠体型小、血管细微且性情较凶猛，受惊时易攻击咬人，这给实验大鼠的采血带来了一定的困难。以上采血大多在麻醉状态下进行，对动物损伤较大，且不能反复多次的采血。这些采血方法在部分项目的实验中，有其优点，但在有些实验中就不太适合了。大鼠实验中，特别是对于那些要求排除麻药的干扰、实验大鼠在非麻清醒状态下、对大鼠损伤小且短时间能反复多次的实验采血，至今未见有很好的解决办法。注射器是通过负压来采血的，它对于大型动物的采血，如牛、马、羊等较为适合，而对那些小型动物的采血，如小鼠、大鼠等就不太适合，因小鼠、大鼠血流量小，若注射器拉杆拉快了，血管内负压过大，血管就瘪下阻止血液流出；若拉杆拉慢了，血液流速减慢、血液易凝结，导致不易采血。
发明内容
本发明提供一种实验大鼠的采血方法，其目的是实现在非麻状态下的大鼠尾静脉采血，使大鼠避免损伤、受刺激产生的应激反应小。为了实现上述目的，本发明采取的技术方案为本发明所提供的实验大鼠的采血方法，其中，所述的实验大鼠为SD或Waster大鼠，体重120 350g ；所述采血方法使用的材料及用具包括
捉鼠手套、卵圆钳、尾静脉采血针、消毒酒精、棉棒、纱布、EP采血管、套装大鼠用的深色布袋、弯止血钳、500ml容积的塑杯；所述的尾静脉采血针后端接软质硅胶管；所述采血方法包括采血前实验大鼠饲养、采血准备、采血步骤，其过程为将所述的实验大鼠适应性饲养2 3天，然后进行采血；采血时室温设定为25°C ±2°C ；所述塑杯内盛45 50°C的热水；实验人员的一只手戴捉鼠手套，另一只手持卵圆钳；用卵圆钳夹镊实验大鼠颈部皮肤；用戴手套的手轻柔地捉拿实验大鼠，将实验大鼠轻柔装进深色布袋，后只露鼠尾，收 紧深色布袋的袋口；或者，实验人员的一只手持卵圆钳；用卵圆钳夹镊实验大鼠颈部皮肤；另一只手徒手轻柔地捉拿实验大鼠，将实验大鼠轻柔装进深色布袋，后只露鼠尾，收紧深色布袋的袋Π ；将鼠尾洗干净，再将鼠尾放入所述塑杯进行热浴，然后擦干鼠尾；实验人员的一手固定实验大鼠，另一只手的拇指和食指捏住鼠尾两侧，使两侧尾静脉形成回流障碍、充盈显露；另一位实验人员在距鼠尾末端1/4处用醮有消毒酒精的棉棒消毒，然后持尾静脉采血针，沿着一侧尾静脉向心方向穿刺进针；若穿刺进入尾静脉，血液则进入针头，并沿着软质硅胶管流出；这时，采用EP采血管接住，待血液流出、实验大鼠稳定后，用捏鼠尾的拇指及食指轻轻按摩鼠尾，有利血液流出；若要取抗凝血，则先将抗凝剂注入采血针硅胶管再采血，则得到了抗凝血；采血完毕，消毒止血，待血止后将实验大鼠从深色布袋拿出；若需要再次采血，则将鼠尾再次放入所述塑杯热水里热浴，再次采血穿刺点选在首次穿刺点向尾根部方向前移一段距离。所述的实验大鼠的分组120 160g ； 10只；雌雄各半；每只米血O. 5ml ；120 160g ；10只；雌雄各半；每只采血I. Oml ；161 200g ； 10只；雌雄各半；每只米血I. 5ml ；201 250g ；10只；雌雄各半；每只采血2. Oml ；251 300g ； 10只；雌雄各半；每只米血2. 5ml ；301 350g ； 10只；雌雄各半；每只米血3. 0ml。所述的深色布袋，采用大厚度的深色布料制作，其袋体尺寸大于实验大鼠身体的尺寸；所述的深色布袋，其一端设有透气孔，另一端设有用于露出实验大鼠尾巴的开口，该开口采用棉绳收紧结构。所述的尾静脉采血针采用静脉输液针，其规格为7号或8号，拔下针头，除去导管，在针头后端接上外径为2. 0mm、长度为O. 5cm的软质娃胶管；所述的软质娃胶管在采血前洗净并烤干。
或者，所述的尾静脉采血针为7号或8号的静脉输液针，所述的软质硅胶管替换为静脉输液针导管。本发明采用上述技术方案，使实验大鼠采血不受麻药的干扰，避免损伤、使大鼠受刺激应激反应小，采血量足，不易溶血，能短时间反复多次的采血，适用于药代动力学等需连续多次少量取血的实验研究。
具体实施例方式下面通过对实施例的描述，对本发明的具体实施方式
作进一步详细的说明，以帮助本领域的技术人员对本发明的发明构思、技术方案有更完整、准确和深入的理解。本发明为一种实验大鼠的采血方法，是一种大鼠非麻状态尾静脉采血方法，该法不是采用惯用的注射器采血，而是采用特制的尾静脉采血针采血。 为了解决现有技术存在的问题并克服其缺陷，实现在非麻状态下的大鼠尾静脉采血，使大鼠避免损伤、受刺激产生的应激反应小的发明目的，本发明采取的技术方案为本发明所提供的实验大鼠的采血方法，其中，所述的实验大鼠为SD或Waster大鼠，体重120 350g ；所述采血方法使用的材料及用具包括捉鼠手套、卵圆钳、尾静脉采血针、消毒酒精、棉棒、纱布、EP采血管、套装大鼠用的深色布袋、弯止血钳、500ml容积的塑杯；弯止血钳在尾静脉采血时，刮摸尾静脉，起到按摩尾静脉，使血液充盈，流得更快、更多。所述的尾静脉采血针后端接软质硅胶管。大鼠尾静脉解剖结构大鼠尾静脉有3根，大鼠尾巴左右两侧和背侧各一根，左右两侧静脉较表浅显露，为采血穿刺首选；背侧正中位置较深次选之。穿刺在鼠尾末1/4处较适宜，此处静脉表浅显露，血管粗细适中。大鼠尾部表面常露有一层角鳞，在操作前用小镊子轻刮或用温水浸润去之，并用自来水将大鼠尾巴污垢清洗干净。所述采血方法包括采血前实验大鼠饲养、采血准备、采血步骤，其过程为将所述的实验大鼠适应性饲养2 3天，然后进行采血；采血时室温设定为25°C ±2°C ；所述塑杯内盛45 50°C的热水；实验人员的一只手戴捉鼠手套，另一只手持卵圆钳；用卵圆钳夹镊实验大鼠颈部皮肤；用戴手套的手轻柔地捉拿实验大鼠，将实验大鼠轻柔装进深色布袋，后只露鼠尾，收紧深色布袋的袋口；或者，实验人员的一只手持卵圆钳；用卵圆钳夹镊实验大鼠颈部皮肤；另一只手徒手轻柔地捉拿实验大鼠，将实验大鼠轻柔装进深色布袋，后只露鼠尾，收紧深色布袋的袋Π ；将鼠尾洗干净，再将鼠尾放入所述塑杯进行热浴，然后擦干鼠尾；实验人员的一手固定实验大鼠，另一只手的拇指和食指捏住鼠尾两侧，使两侧尾静脉形成回流障碍、充盈显露；
另一位实验人员在距鼠尾末端1/4处用醮有消毒酒精的棉棒消毒，然后持尾静脉采血针，沿着一侧尾静脉向心方向穿刺进针；若穿刺进入尾静脉，血液则进入针头，并沿着软质硅胶管流出；这时，采用EP采血管接住，待血液流出、实验大鼠稳定后，用捏鼠尾的拇指及食指轻轻按摩鼠尾，有利血液流出；若要取抗凝血，则先将抗凝剂注入采血针硅胶管再采血，则得到了抗凝血；采血完毕，消毒止血，待血止后将实验大鼠从深色布袋拿出；若需要再次采血，则将鼠尾再次放入所述塑杯热水里热浴，再次采血穿刺点选在 首次穿刺点向尾根部方向前移一段距离。本发明采用上述技术方案，使实验大鼠采血不受麻药的干扰，避免损伤、使大鼠受刺激应激反应小，采血量足，不易溶血，能短时间反复多次的采血，适用于药代动力学等需连续多次少量取血的实验研究。所述的实验大鼠的分组120 160g ；10只；雌雄各半；每只采血O. 5ml ;尾静脉穿刺均数I. I ；120 160g ；10只；雌雄各半；每只采血I. Oml ;尾静脉穿刺均数I. 4 ；161 200g ；10只；雌雄各半；每只采血I. 5ml ;尾静脉穿刺均数I. 8 ；201 250g ；10只；雌雄各半；每只采血2. Oml ;尾静脉穿刺均数2. 4 ；251 300g ；10只；雌雄各半；每只采血2. 5ml ;尾静脉穿刺均数3. 2 ；301 350g ；10只；雌雄各半；每只采血3. Oml ;尾静脉穿刺均数3. 6。根据上述实验结果可以看出，随着采血量的不断增大，尾V穿刺均数也在增大，这主要是血液经针头软质硅胶管流出时间长了，使血液凝固了，这就需要再次甚至多次穿刺才能采足所需血量；其次采血时间长，大鼠长时间固定，表现出强烈的挣扎、不顺从，使鼠尾扭转，采血针逸出脱落尾静脉等，需要重新穿刺采血，重新穿刺部位要在老穿刺部位向尾根部方向前移一点。所述的深色布袋，采用厚度大于布料平均厚度的深色布料制作，其宽度和长度大于大鼠身体的尺寸；所述的深色布袋，其一端设有透气孔，另一端设有用于露出大鼠尾巴的开口，该开口采用棉绳收紧结构。所述的尾静脉采血针采用静脉输液针，其规格为7号或8号，拔下针头，除去导管，在针头后端接上外径为2. 0mm、长度为O. 5cm的软质娃胶管；所述的软质娃胶管在采血前洗净并烤干。或者，所述的尾静脉采血针为7号或8号的静脉输液针，所述的软质硅胶管替换为静脉输液针导管。采用大鼠尾静脉采血针，当采血针头穿刺进入尾V时，血液就会进入针头沿着软质硅胶管流出，这样流出的血不易溶血。该方法的特点是在实验大鼠非麻清醒状态下的采血，不受麻药的干扰；不是采用惯用的注射器采血，而是采用特制的尾静脉采血针采血；对大鼠损伤小，因而受刺激应激反应小，采血量足，不易溶血；能短时间反复多次的采血，适用于药代动力学等需连续多次少量取血的实验研究，在大鼠实验中具有重要的实用价值。
由于大鼠尾静脉细微，穿刺采血有一定的难度，采血者要具备一定的实验技术和熟练程度采血才能获得成功。只要按照本发明提供的方法，经过练习，大鼠尾静脉采血的技术和熟练程度将会大大提高。上面对本发明进行了示例性描述，显然本发明具体实现并不受上述方式的限制， 只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种非实质性的改进，或未经改进将本发明的构思和技术方案直接应用于其它场合的，均在本发明的保护范围之内。
权利要求
1.一种实验大鼠的采血方法，其特征在于所述的实验大鼠为SD或Waster大鼠，体重120 350g ； 所述采血方法使用的材料及用具包括 捉鼠手套、卵圆钳、尾静脉采血针、消毒酒精、棉棒、纱布、EP采血管、套装大鼠用的深色布袋、弯止血钳、500ml容积的塑杯； 所述的尾静脉采血针后端接软质硅胶管； 所述采血方法包括采血前实验大鼠饲养、采血准备、采血步骤，其过程为 将所述的实验大鼠适应性饲养2 3天，然后进行采血； 采血时室温设定为25°C ±2°C ； 所述塑杯内盛45 50°C的热水； 实验人员的一只手戴捉鼠手套，另一只手持卵圆钳，用卵圆钳夹镊实验大鼠颈部皮肤；用戴手套的手轻柔地捉拿实验大鼠，将其轻柔地装进深色布袋，从深色布袋的袋口露出鼠尾；收紧深色布袋的袋口 ； 或者，实验人员的一只手持卵圆钳，用卵圆钳夹镊实验大鼠颈部皮肤；另一只手徒手轻柔地捉拿实验大鼠，将其轻柔地装进深色布袋，从深色布袋的袋口露出鼠尾；收紧深色布袋的袋口 ；将鼠尾洗干净，再将鼠尾放入所述塑杯进行热浴，然后擦干鼠尾；实验人员的一手固定实验大鼠，另一只手的拇指和食指捏住鼠尾两侧，使两侧尾静脉形成回流障碍、充盈显露；另一位实验人员在距鼠尾末端1/4处用醮有消毒酒精的棉棒消毒，然后持尾静脉采血针，沿着一侧尾静脉向心方向穿刺进针；若穿刺进入尾静脉，血液则进入针头，并沿着软质硅胶管流出； 这时，采用EP采血管接住，待血液流出、实验大鼠稳定后，用捏鼠尾的拇指及食指轻轻按摩鼠尾，有利血液流出； 若要取抗凝血，则先将抗凝剂注入采血针硅胶管再采血，则得到了抗凝血； 采血完毕，消毒止血，待血止后将实验大鼠从深色布袋拿出； 若需要再次采血，则将鼠尾再次放入所述塑杯热水里热浴，再次采血穿刺点选在首次穿刺点向尾根部方向前移一段距离。
2.按照权利要求I所述的实验大鼠的采血方法，其特征在于所述的实验大鼠的分组 120 160g ； 10只；雌雄各半；每只米血O. 5ml ； 120 160g ；10只；雌雄各半；每只米血I. Oml ； 161 200g ；10只；雌雄各半；每只米血I. 5ml ； 201 250g ；10只；雌雄各半；每只采血2. Oml ； 251 300g ；10只；雌雄各半；每只采血2. 5ml ； 301 350g ；10只；雌雄各半；每只采血3. Omlo
3.按照权利要求I所述的实验大鼠的采血方法，其特征在于 所述的深色布袋，采用大厚度的深色布料制作，其袋体尺寸大于实验大鼠身体的尺寸； 所述的深色布袋，其一端设有透气孔，另一端设有用于露出实验大鼠尾巴的开口，该开ロ采用棉绳收紧结构。
4.按照权利要求I所述的实验大鼠的采血方法，其特征在于所述的尾静脉采血针采用静脉输液针，其规格为7号或8号，拔下针头，除去导管，在针头后端接上外径为2. 0_、长度为0. 5cm的软质硅胶管；所述的软质硅胶管在采血前洗净并烤干。
5.按照权利要求I所述的实验大鼠的采血方法，其特征在于所述的尾静脉采血针为7号或8号的静脉输液针，所述的软质硅胶管替换为静脉输液针导管。
全文摘要
本发明公开了一种实验大鼠的采血方法，一只手固定大鼠，另一只手的拇指和食指捏住鼠尾两侧，使两侧尾静脉形成回流障碍、充盈显露；另一位实验人员在距鼠尾末端1/4处用醮有消毒酒精的棉棒消毒，然后持尾静脉采血，尾静脉采血针沿着一侧尾静脉向心方向穿刺进针；穿刺进入尾静脉，血液则进入针头，并沿着软质硅胶管流出；采用EP采血管接住，待血液流出、大鼠稳定后，用捏鼠尾的拇指及食指轻轻按摩鼠尾，有利血液流出。采用上述技术方案，使实验大鼠采血不受麻药的干扰，避免损伤、使大鼠受刺激应激反应小，采血量足，不易溶血，能短时间反复多次的采血，适用于药代动力学等需连续多次少量取血的实验研究。
文档编号A61B5/153GK102727222SQ201210239909
公开日2012年10月17日 申请日期2012年7月12日 优先权日2012年7月12日
发明者姜玉新, 徐蕾, 李伟, 江晔, 汪全海, 王国光, 谢天承, 陆晓华 申请人:陆晓华