专利名称：一种复方a-酮酸片及其制备方法和检测方法
技术领域：
本发明涉及一种一种复方a_酮酸片及其制备方法和检测方法，属于医药技术领域。
背景技术：
在发达国家，普通人群慢性肾病(CKD)的患病率达6. 5% 10%，美国肾病患者已超过2000万。据中华肾脏病学会天津分会提供的资料，最新调查结果显示，我国40岁以上的人群慢性肾病的患病率高达8% 9%，且发病仍呈增高趋势。营养治疗一直是延缓CKD进展、缓解尿毒症症状的一种有效措施，在限制蛋白摄入的同时补充必需氨基酸可以使病人达到氮平衡。而根据Brenner的“超滤学说”理论，残余肾单位的过度滤过,引起球内压力增高，同时增加肾小球滤过率,使残余肾单位劳损,造成慢性肾脏病的不断进展与恶化。其中，饮食蛋白的含量是调节肾小球滤过的最主要因素。因此，饮食疗法的目的不仅仅在于减少尿毒症的症状，还在于保护残余肾功能。申请号为201010105058. 4名称为“一种复方α -酮酸片剂及其制备方法”的专利申请及专利号为200810224131. 2名称为“一种复方α -酮酸分散片”的专利文件分别公开了一种复方α -酮酸制剂，该制剂可延缓肾衰进展，纠正代谢紊乱，配合低蛋白饮食可预防和治疗因慢性肾功能不全而造成蛋白质代谢失调引起的损害。但是上述的复方α-酮酸片选用的辅料制粒差，颗粒可压性、流动性及颗粒的硬度和溶出度也不够理想；此外，现有技术中还没有任何关于复方α -酮酸制剂的检测方法的报道，因而并不能保证制备的制剂质量，也不能方便工业化生产的要求。因此，寻求稳定的检测方法是我们目前急需解决的事情。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种复方a_酮酸片及其制备方法和检测方法，可制备出颗粒可压性、流动性及硬度和溶出度均较为理想的片剂，同时可保证制备的复方a-酮酸片的质量，方便工业化生产的要求，同时能够医疗部门和患者的治疗提供更好的保障。本发明是这样构成的一种复方a_酮酸片，按重量份计算，由下述组分消旋酮异亮氨酸钙67份、酮亮氨酸钙101份、酮苯丙氨酸钙68份、酮缬氨酸钙86份、消旋羟蛋氨酸钙59份、醋酸赖氨酸105份、苏氨酸53份、色氨酸23份、组氨酸38份、酪氨酸30份、淀粉95份、交联聚维酮15份、滑石粉20份、硬脂酸镁20份及润湿剂6% PVP k30异丙醇溶液制备而成。具体的说，按重量计算，由下述组分消旋酮异亮氨酸钙67mg、酮亮氨酸钙lOlmg、酮苯丙氨酸韩68mg、酮缴氨酸韩86mg、消旋轻蛋氨酸韩59mg、醋酸赖氨酸105mg、苏氨酸53mg、色氨酸23mg、组氨酸38mg、酪氨酸30mg、淀粉95mg、交联聚维酮15mg、滑石粉20mg、硬脂酸镁20mg及6% PVP k30异丙醇溶液制备而成。前述的复方a_酮酸片的一种制备方法，包括以下步骤取消旋酮异亮氨酸钙、酮亮氨酸钙、酮苯丙氨酸钙、酮缬氨酸钙、消旋羟蛋氨酸钙、醋酸赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸、酪氨酸，将上述主药分别粉碎过100目筛；取淀粉、滑石粉、硬脂酸镁分别过80目筛；将上述各主药和淀粉混合均匀，并用6% PVP k30异丙醇溶液制软材，20目筛制粒，40°C烘干；整粒，并加入上述硬脂酸镁、滑石粉及交联聚维酮，混合均匀；中间体检测，确定片重，压片；包衣，即得。所述的复方a_酮酸片的检测方法，该检测方法包括以下步骤(I)性状复方a_酮酸片为黄色薄膜衣片，去除薄膜衣后为白色或类白色；(2)鉴别(A) α -酮(或羟)代氨基酸钙峰 (B)氨基酸峰(3)含量测定(a)照高效液相色谱法《中国药典》2005 二部附录V D测定，用氢型强阳离子交换色谱柱，硫酸溶液为流动相；出峰顺序依次为酮缬氨酸钙、消旋酮异亮氨酸钙、酮亮氨酸钙、消旋羟蛋氨酸钙和酮苯丙氨酸钙；理论板数按酮缬氨酸钙峰计算不低于2000 ;分别称取酮缬氨酸钙、消旋酮异亮氨酸钙、酮亮氨酸钙、消旋羟蛋氨酸钙、酮苯丙氨酸钙置于量瓶中，力口水稀释至刻度，作为对照品溶液；取复方a-酮酸片，研细，称取细粉适量，置于量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过；精密量取滤液，置于量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积分别计算酮缬氨酸钙、消旋酮异亮氨酸钙、酮亮氨酸钙、消旋羟蛋氨酸钙和酮苯丙氨酸I丐的含量。(b)取复方a_酮酸片，精密称定，研细，精密称取细粉适量置于量瓶中，加盐酸溶液超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取滤液，用氨基酸分析仪或高效液相色谱仪进行分离测定，得供试品溶液；另取相应的氨基酸对照品，用盐酸溶液溶解并稀释制成相应浓度的对照品溶液，分别精密吸取上述供试品溶液和对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积分别计算醋酸赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸和酪氨酸的含量。(C)取复方a-酮酸片20片，精密称定，研细，取细粉50. 4g，加水微热使溶解，加氢氧化钠试液与钙紫红素指示剂少许，用乙二胺四乙酸二钠滴定至溶液由紫红色转变为纯蓝色，计算钙的含量。优选的，所述的含量测定具体包括(a)照高效液相色谱法《中国药典》2005 二部附录V D测定，用氢型300_X7. 8mm的强阳离子交换色谱柱，O. 021mol/L硫酸溶液为流动相，柱温为30°C，流速为O. 6ml/min ；检测波长为205nm ;出峰顺序依次为酮缬氨酸钙、消旋酮异亮氨酸钙、酮亮氨酸钙、消旋羟蛋氨酸钙和酮苯丙氨酸钙；理论板数按酮缬氨酸钙峰计算不低于2000 ;分别精密称取酮缬氨酸钙25mg、消旋酮异亮氨酸钙20mg、酮亮氨酸钙28mg、消旋羟蛋氨酸钙17mg、酮苯丙氨酸钙18mg置于50ml量瓶中，加水稀释至刻度50ml，摇匀；精密量取5ml，置50ml量瓶中，力口水超声使溶解并稀释至刻度50ml，作为对照品溶液；取复方a-酮酸片10片，精密称定，研细，精密称取细粉183mg置于50ml量瓶中，加水稀释至刻度50ml，摇匀，滤过；精密量取滤液5ml，置于50ml量瓶中，加水超声使溶解并稀释至刻度50ml，摇匀，作为供试品溶液；分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积分别计算酮缬氨酸钙、消旋酮异亮氨酸钙、酮亮氨酸钙、消旋羟蛋氨酸钙和酮苯丙氨酸钙的含量。(b)取复方a-酮酸片10片，精密称定，研细，精密称取细粉63mg置于IOOml量瓶中，加O. lmol/L的盐酸溶液超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取滤液，用氨基酸分析仪或高效液相色谱仪进行分离测定，得供试品溶液；另取相应的氨基酸对照品，用O. Imol/L的盐酸溶液溶解并稀释制成浓度为O. 105mg/ml的对照品溶液，分别精密吸取上述供试品溶液和对照品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积分别计算醋酸赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸和酪氨酸的含量。(c)取复方a-酮酸片20片，精密称定，研细，取细粉50. 4g，加水IOOml微热使溶解，加氢氧化钠试液15ml与钙紫红素指示剂少许，用浓度为O. 05mol/L的乙二胺四乙酸二 钠滴定至溶液由紫红色转变为纯蓝色，每Iml的乙二胺四乙酸二钠滴定液相当于2. 004mg的Ca，计算钙的含量。上述的检测方法或者进一步包括检查取复方a-酮酸片，照溶出度测定法《中国药典》2005年版二部附录XC第二法测定，以O. lmol/L的盐酸溶液IOOOml为溶剂，转速为每分钟100转，经40分钟，取溶液滤过；(A)试验仪器溶出仪器RCZ-5A智能药物溶出度仪天津大学精密仪器厂；测定仪器原子吸收分光光度仪，Vrain240FS原子吸收分光光度计(美国Vrain公司)；火焰法；波长422. 7nm ；VARSAL钙灯(3mA);气体乙炔；(B)实验方法对照品贮备液的制备精密量取钙对照溶液(1000 μ g/ml)适量，加O. lmol/L的盐酸溶液稀释成Iml中含钙100 μ g的溶液，作为对照品贮备液；对照品溶液的制备精密量取钙对照贮备液(100μ g/ml) 3. 0ml,4. 0ml,6. 0ml及8. 0ml，分别置100ml量瓶中，各加0. lmol/L的盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，制成每Iml中含钙分别为3. O μ g、4. O μ g、6. Oyg及8. Oyg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备精密量取溶出的续滤液5ml，置50ml量瓶中，加0. lmol/L的盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得；测定法取对照品溶液和供试品溶液，照原子吸收分光光度法《中国药典》2005年版二部附录IV D含量测定第一法测定，以0. lmol/L的盐酸溶液为空白对照组，在422. 7nm的波长处测定，计算。本发明提供的检测方法能有效的控制产品质量；另外，本申请人进行了一系列实验来选择本发明提供的药物制剂的制备工艺；保证科学、合理、可行；保证得到的制剂具有有效的治疗效果，生产企业可以根据本发明直接生产、制备药物制剂，而不再需要进行新的摸索、研究；实际上对于制剂技术来讲，其关键就在于生产工艺条件的选择，尤其是辅料的选择也至关重要；如果选择不当，要么制备不出有效的产品、有时甚至危害健康，要么制剂品种的成本高昂、又不符合市场要求。实验例I :辅料的选择
(I)粘合剂的选择以常用溶剂制成的PVP溶液作为粘合剂，考察各处方外观、硬度、脆碎度及溶出度等项目，对处方进行筛选，处方组成见表I。表I复方α -酮酸片粘合剂组成筛选试验
权利要求
1.一种复方a-酮酸片，其特征在于，按重量份计算，由下述组分消旋酮异亮氨酸钙67份、酮亮氨酸钙101份、酮苯丙氨酸钙68份、酮缬氨酸钙86份、消旋羟蛋氨酸钙59份、醋酸赖氨酸105份、苏氨酸53份、色氨酸23份、组氨酸38份、酪氨酸30份、淀粉95份、交联聚维酮15份、滑石粉20份、硬脂酸镁20份及润湿剂6% PVP k30异丙醇溶液制备而成。
2.根据权利要求I所述的复方a-酮酸片，其特征在于，按重量计算，由下述组分消旋酮异亮氨酸1丐67mg、酮亮氨酸|丐lOlmg、酮苯丙氨酸|丐68mg、酮缴氨酸|丐86mg、消旋轻蛋氨酸隹丐59mg、醋酸赖氨酸105mg、苏氨酸53mg、色氨酸23mg、组氨酸38mg、酪氨酸30mg、淀粉95mg、交联聚维酮15mg、滑石粉20mg、硬脂酸镁20mg及润湿剂6% PVP k30异丙醇溶液制备rfu 。
3.权利要求I或2所述的复方a-酮酸片的一种制备方法，其特征在于，包括以下步骤取消旋酮异亮氨酸钙、酮亮氨酸钙、酮苯丙氨酸钙、酮缬氨酸钙、消旋羟蛋氨酸钙、醋酸赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸、酪氨酸，将上述主药分别粉碎过100目筛；取淀粉、滑石粉、硬脂酸镁分别过80目筛；将上述各主药和淀粉混合均匀，并用6% PVP k30异丙醇溶液制软材，20目筛制粒，40°C烘干；整粒，并加入上述硬脂酸镁、滑石粉及交联聚维酮，混合均匀；中间体检测，确定片重，压片；包衣，即得。
4.权利要求I或2所述的复方a-酮酸片的检测方法，其特征在于，该检测方法包括以下步骤 (1)性状 复方a-酮酸片为黄色薄膜衣片，去除薄膜衣后为白色或类白色； (2)鉴别 (A)a -酮或羟代氨基酸钙峰 (B)氨基酸峰 (3)含量测定 Ca)照高效液相色谱法《中国药典》2005 二部附录V D测定，用氢型强阳离子交换色谱柱，硫酸溶液为流动相；出峰顺序依次为酮缬氨酸钙、消旋酮异亮氨酸钙、酮亮氨酸钙、消旋羟蛋氨酸钙和酮苯丙氨酸钙；理论板数按酮缬氨酸钙峰计算不低于2000 ;分别称取酮缬氨酸钙、消旋酮异亮氨酸钙、酮亮氨酸钙、消旋羟蛋氨酸钙、酮苯丙氨酸钙置于量瓶中，加水稀释至刻度，作为对照品溶液；取复方a-酮酸片，研细，称取细粉适量，置于量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过；精密量取滤液，置于量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积分别计算酮缬氨酸钙、消旋酮异亮氨酸钙、酮亮氨酸钙、消旋羟蛋氨酸钙和酮苯丙氨酸钙的含量； (b)取复方a-酮酸片，精密称定，研细，精密称取细粉适量置于量瓶中，加盐酸溶液超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取滤液，用氨基酸分析仪或高效液相色谱仪进行分离测定，得供试品溶液；另取相应的氨基酸对照品，用盐酸溶液溶解并稀释制成相应浓度的对照品溶液，分别精密吸取上述供试品溶液和对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积分别计算醋酸赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸和酪氨酸的含量； (c)取复方a-酮酸片20片，精密称定，研细，取细粉50.4g，加水微热使溶解，加氢氧化钠试液与钙紫红素指示剂少许，用乙二胺四乙酸二钠滴定至溶液由紫红色转变为纯蓝色，计算钙的含量。
5.根据权利要求4所述的复方a-酮酸片的检测方法，其特征在于，所述的含量测定具体包括 Ca)照高效液相色谱法《中国药典》2005 二部附录V D测定，用氢型300mmX 7. 8mm的强阳离子交换色谱柱，0. 021mol/L硫酸溶液为流动相，柱温为30°C，流速为0. 6ml/min ;检测波长为205nm ;出峰顺序依次为酮缬氨酸钙、消旋酮异亮氨酸钙、酮亮氨酸钙、消旋羟蛋氨酸钙和酮苯丙氨酸钙；理论板数按酮缬氨酸钙峰计算不低于2000 ;分别精密称取酮缬氨酸钙25mg、消旋酮异亮氨酸钙20mg、酮亮氨酸钙28mg、消旋羟蛋氨酸钙17mg、酮苯丙氨酸钙18mg置于50ml量瓶中，加水稀释至刻度50ml，摇匀；精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水超声使溶解并稀释至刻度50ml，作为对照品溶液；取复方a-酮酸片10片，精密称定，研细，精密称取细粉183mg置于50ml量瓶中，加水稀释至刻度50ml，摇匀，滤过；精密量取滤液5ml，置于50ml量瓶中，加水超声使溶解并稀释至刻度50ml，摇匀，作为供试品溶液；分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各10 yl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积分别计算酮缬氨酸钙、消旋酮异亮氨酸钙、酮亮氨酸钙、消旋羟蛋氨酸钙和酮苯丙氨酸钙的含量； (b)取复方a-酮酸片10片，精密称定，研细，精密称取细粉63mg置于IOOml量瓶中，加0. lmol/L的盐酸溶液超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取滤液，用氨基酸分析仪或高效液相色谱仪进行分离测定，得供试品溶液；另取相应的氨基酸对照品，用0. lmol/L的盐酸溶液溶解并稀释制成浓度为0. 105mg/ml的对照品溶液，分别精密吸取上述供试品溶液和对照品溶液各10 yl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积分别计算醋酸赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸和酪氨酸的含量； (c)取复方a-酮酸片20片，精密称定，研细，取细粉50.4g，加水IOOml微热使溶解，力口氢氧化钠试液15ml与钙紫红素指示剂适量，用浓度为0. 05mol/L的乙二胺四乙酸二钠滴定至溶液由紫红色转变为纯蓝色，每Iml的乙二胺四乙酸二钠滴定液相当于2. 004mg的Ca，计算钙的含量。
6.根据权利要求4或5所述的复方a-酮酸片的检测方法，其特征在于，还包括 检查取复方a-酮酸片，照溶出度测定法《中国药典》2005年版二部附录XC第二法测定，以0. lmol/L的盐酸溶液IOOOml为溶剂，转速为每分钟100转，经40分钟，取溶液滤过； (A)试验仪器 溶出仪器RCZ-5A智能药物溶出度仪天津大学精密仪器厂； 测定仪器原子吸收分光光度仪，美国Vrain公司的Vrain240FS原子吸收分光光度计；火焰法；波长422. 7nm ；3mA的VARSAL钙灯；气体乙炔； (B)实验方法 对照品贮备液的制备精密量取IOOOii g/ml钙对照溶液适量，加0. lmol/L的盐酸溶液稀释成Iml中含I丐100 u g的溶液，作为对照品备液； 对照品溶液的制备精密量取100 u g/ml钙对照贮备液3. Oml,4. 0ml、6. Oml及8. 0ml，分别置IOOml量瓶中，各加0. lmol/L的盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，制成每Iml中含钙分别为,3.Ou g、4. 0 u g、6. Oiig及8. Oiig的溶液,作为对照品溶液； 供试品溶液的制备精密量取溶出的续滤液5ml，置50ml量瓶中，加0. lmol/L的盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得； 测定法取对照品溶液和供试品溶液，照原子吸收分光光度法《中国药典》2005年版二部附录IV D含量测定第一法测定，以0. lmol/L的盐酸溶液为空白对照组，在422. 7nm的波长 处进行测定、计算。
全文摘要
本发明公开了一种复方a-酮酸片及其制备方法和检测方法，所述制备方法包括取消旋酮异亮氨酸钙、酮亮氨酸钙、酮苯丙氨酸钙、酮缬氨酸钙、消旋羟蛋氨酸钙、醋酸赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸、酪氨酸，将上述主药分别粉碎过100目筛；取淀粉、滑石粉、硬脂酸镁分别过80目筛；将上述各主药和淀粉混合均匀，并用6％PVP k30异丙醇溶液制软材，20目筛制粒，40℃烘干；整粒，加入上述硬脂酸镁、滑石粉及交联聚维酮，混合均匀；中间体检测，压片；包衣，即得。通过利用上述方法可制备出颗粒可压性、流动性及硬度和溶出度均较为理想的片剂，另外，通过本发明所提供的检测方法，可进一步保证制备的复方a-酮酸片的质量。
文档编号A61K31/19GK102961378SQ20121048844
公开日2013年3月13日 申请日期2012年11月27日 优先权日2012年11月27日
发明者张观福 申请人:贵州信邦制药股份有限公司