降低血液酒精浓度的樟芝萃取液的制作方法
【专利摘要】本发明是有关于一种降低血液酒精浓度的樟芝萃取液。其包含由樟芝菌丝体破裂的细胞壁中油萃出的顺丁烯二酰亚胺化合物作为有效成分，并与一食用油混合呈溶液状，其中，所述食用油与所述有效成分是以9∶1-7∶3的重量比混合。由此，喂食本发明的樟芝萃取液的小白老鼠，其体内酒精去氢酶的活性明显地相对增加约50-60％，且血液中酒精浓度亦明显地相对降低约30-40％。
【专利说明】降低血液酒精浓度的樟芝萃取液
【技术领域】
[0001]本发明是有关于一种降低血液酒精浓度的樟芝萃取液，尤其是指一种可提高负责酒精代谢的酒精去氢酶活性，以刺激酒精代谢来降低血液中的酒精浓度的樟芝萃取液。
【背景技术】
[0002]随着社会多元化的发展以及人们经济、工作压力的日趋激烈，饮酒已成为一种普遍的行为，于商务接待、同事或熟人之间的应酬、家庭聚会等场合，饮酒的机会也愈来愈增加，造成许多人因频繁的饮酒和过饮而发生宿醉，进而影响隔日的正常工作生活；宿醉是对饮酒后出现的肉体和精神上不适感的总称，其客观的症状有认知能力降低、恶心、呕吐、头痛、运动能力降低等。[0003]对于引起宿醉的原因，虽然还未完全研究清楚，但是，有很多学术观点认为其原因是因酒精以及酒精的代谢物(乙醛、甲醛、丙酮)的毒性作用所衍生的反应；酒精中所含的主要成分即为酒精，因此当饮酒之后，酒精将随着血液迅速分布全身，而对人体的器官与细胞来说，酒精是有毒物质，需经过一系列的化学反应将其代谢，就目前了解的人体内代谢机制，少部份酒精可透过呼吸或尿液方式排出，而剩余90-95%的酒精在肝脏中经酒精去氢酶(alcohol dehydrogenase, ADH)转换成乙醒，乙醒再通过乙醒去氢酶(aldehydedehydrogenase, ALHD)代谢成乙酸及二氧化碳与水而排出体外；对于一本领域一般技术人员而言，将体内用于代谢酒精的酒精去氢酶的比活性(specific activity)提升，可加速酒精的代谢排除是合理的推论。
[0004]一般传统市面上的解酒液是一种在饮酒后用于降低酒精浓度的液体，其大都是以化学药液混合或提炼而成，在饮用后虽能立即降低酒精浓度，但相对地，在多次饮用后也会有副作用产生，有鉴于此，为了避免解酒液伤身及引起的副作用，多数使用者仍是倾向于饮用以天然植物提炼而成的解酒液；目前，以天然植物萃取物(例如:人参、当归、甘草、芝麻素等)或以维生素B、维生素C、氨基酸等成分制成的解酒液充其量只能称为精气补神的健康饮料，尚不足以达到真正解酒功能；且几乎所有产品或偏方都没有具体的实验数据证明其具有降低饮酒后血液酒精浓度的功效，经常被认为有不实的疑虑，因此如何以天然食品作为可降低酒精浓度的解酒液仍有研发改进的空间。
[0005]樟芝(Antrodia camphorata)是一种野生燕菌,为台湾森林中一种极为珍贵且特有种的生药植物；早期的传说为台湾原住民在采伐时，无意间发现了牛樟树上的樟芝，原住民因生活型态或乐天个性使然，较喜欢喝酒、宿醉在所难免；但是，在喝过樟芝的烹煮液后竟发现其具有解酒的效力，使得樟芝成为原住民的传统珍贵药材；在过去的数年间，由于樟芝广泛的药理活性以及低毒性特质，使其在国际间渐渐受到重视，而由樟芝萃取出具有药效的天然物也被各方学者及业界所重视，而基于上述的各种因素，以樟芝萃取物作为降低血液酒精浓度的成分，以改善宿醉的症状是具有相当的可行性。
[0006]鉴于上述现有的天然植物萃取制成的解酒液在实际实施上仍具有多处的缺失，因此，研发出一种天然植物提炼得到的可有效降低血液酒精浓度的解酒液，仍是本领域亟待解决的问题之一。
【发明内容】
[0007]为解决上述问题，本发明主要目的为提供一种可提高负责酒精代谢的酒精去氢酶活性，以刺激酒精代谢来降低血液中的酒精浓度的樟芝萃取液。
[0008]为了达到上述目的，本发明提供一种降低血液酒精浓度的樟芝萃取液，其包含由樟芝菌丝体破裂的细胞壁中油萃出的顺丁烯二酰亚胺化合物作为有效成份，并与一食用油混合呈溶液状，其中该食用油与该有效成份以9: 1-7: 3的重量比混合；值得注意的，本发明的樟芝萃取液是以樟芝菌丝体粉末为原料，先将细胞破壁后，再以油萃技术提纯(purify)樟芝菌丝体细胞壁中的顺丁烯二酰亚胺化合物，并将其溶解于食用油中。
[0009]如上所述的降低血液酒精浓度的樟芝萃取液，其中，优选地，所述食用油与所述有效成份以8: 2的重量比混合。
[0010]如上所述的降低血液酒精浓度的樟芝萃取液，其中，所述食用油可选自中链三酸甘油酯、玉米油、橄榄油、大豆油、红花籽油、棉籽油、花生油、芝麻油、葵花籽油、葡萄籽油以及其混合物所构成的群组。
[0011]由此，喂食本发明的樟芝萃取液的小白老鼠，其体内酒精去氢酶的活性明显地相对增加约50-60%，且血液中酒精浓度亦明显地相对降低约30-40%，可合理推论本发明的樟芝萃取液是借着提高负责酒精代谢的酒精去氢酶活性，刺激酒精代谢来降低血液中的酒精浓度；此外，本发明对于预期具有降低血液酒精浓度的樟芝成分进一步实施动物试验，具体地支持本发明的樟芝萃取液能降低食用酒精后血液酒精浓度的功效。
【专利附图】
【附图说明】
[0012]图1为以熊果酸为三萜类标准品，以说明书中的定量方法，绘制的标准品曲线图；
[0013]图2为以无菌蒸馏水、食用油与樟芝萃取液测得喂食酒精的小白老鼠丧失与恢复翻正反应时间的效果图；
[0014]图3为于所有实验组及对照组测得小白老鼠血液酒精浓度的效果图；
[0015]图4为于未口喂及口喂酒精的实验组及对照组测得小白老鼠体内酒精去氢酶活性的效果图。
【具体实施方式】
[0016] 本发明是关于一种可增加人体酒精去氢酶活性，进而降低血液酒精浓度的樟芝萃取液，其包含有由樟芝菌丝体破裂的细胞壁中油萃出的顺丁烯二酰亚胺化合物作为有效成份，并与一食用油混合呈溶液状，其中该食用油与该有效成份以9:1-7:3的重量比混合(优选地，该质量比为8: 2);其中，食用油可选自中链三酸甘油酯(medium-chaintriglyceride, MCT oil)、玉米油、橄榄油、大豆油、红花籽油、棉籽油、花生油、芝麻油、葵花籽油、葡萄籽油以及其混合物所构成的群组；值得注意的，本发明的樟芝萃取液是以樟芝菌丝体粉末为原料，先将细胞破壁后，再以油萃技术提纯樟芝菌丝体细胞壁中的顺丁烯二酰亚胺化合物，并将其溶解于食用油中，相对于粉末状的樟芝菌丝体，其具有较佳的吸收率及功效。具体的油萃方式是将樟芝菌丝体与食用油混合后，经由均质机使细胞壁破裂，再将均质后的樟芝菌丝体置于超音波机台中萃取，随后使用高速离心机将细胞碎屑与萃取液分离，再分析上述萃取液中顺丁烯二酰亚胺化合物的含量。萃出的顺丁烯二酰亚胺化合物是属总三職类化合物(Triterpenoids);其中，总三職类化合物亦包含有与顺丁烯二酰亚胺化合物的化学结构类似的衍生物，例如熊果酸(ursolic acid)、白桦脂酸(betulinic acid)、白样脂酮酸(betulonic acid)、3_ 异丁基 _4-[4_(3-甲基-2-丁烯氧基)苯基]-1H-吡咯-2，5- 二酮以及3-异丁基-4- [4- (3-甲基-2- 丁烯氧基)苯基]-1H-吡咯-1-醇-2，5- 二酮化合物等。上述分析樟芝萃取液中所包含的有效成份含量是由以下方法进行的:首先，取0.125g樟芝菌丝体萃取液加40mL无水酒精，以回流萃取8小时；再将ImL回流萃取后的萃取液置于样品瓶中，以通风柜吹至干燥；之后,加入0.4mL(质量浓度5% )的香草醛-冰醋酸，再加入0.SmL的过氯酸；接着，上述混合物以60°C水浴加热15分钟，接着以4°C冷却2分钟，然后再加入5mL冰醋酸，静置10分钟；以上步骤完成后，测所得混合物在波长550nm的吸光值；请参阅图1所示，图1为以熊果酸做为三萜类标准品，并以上述方法绘制的标准曲线，而本发明实际检测结果总三萜类化合物含量为6.7wt%。
[0017]此外，再根据下述的实验，可确认本发明的樟芝萃取液具有显著增加酒精去氢酶活性且降低血液酒精浓度的功效；首先，进行小白老鼠的丧失翻正反应(loss ofrightingreflex, L0RR)试验,用以模拟小白老鼠喝酒后的酒醉时间及酒醒时间；本发明试验的小白老鼠(ICR strain)每只重量为26-30公克，其饲养温度为25土 1°C、相对湿度为65±5%、并维持于12小时切换的光暗循环，以标准实验室等级的饲料(Laboratory RodentDiet7PMT Feed,St.Louis,U,S,A)喂食，饲养期间不限制饲料及水的供应；小白老鼠的饲养条件均依循国家卫生研究院公告的相关实验动物管理指南进行；于所有小白老鼠禁食12小时后，将其随机分成三组，一组为对照组，另二组为实验组，每组至少具有4只小白老鼠；试验模式是将对照组中的小白老鼠口喂每10公克体重0.0SmL的无菌蒸馏水，而将一实验组中的小白老鼠口喂每10公克体重0.08mL的食用油(中链三酸甘油脂)，而另一实验组的小白老鼠口喂每10公克体重0.0SmL的本发明的降低血液酒精浓度的樟芝萃取液；于间隔30分钟后，将上述的小白老鼠每10公克体重口喂体积百分率52%的酒精0.15mL，并对小白老鼠的丧失翻正反应进行观察；当小白老鼠确实丧失翻正反应能力时，即为酒醉时间(即图2中长条状图形的斜线区域)，又在小白老鼠醉倒并于腹部朝上的状态下继续观察，当小白老鼠恢复翻正反应能力(定义I分钟内小白老鼠能自行翻正3次以上)所需的时间视为酒醒时间(即图2中长条状图形的点状区域)，请参阅图2所示，图2为以无菌蒸馏水、食用油以及樟芝萃取液测得喂食酒精的小白老鼠丧失翻正反应能力时间及恢复翻正反应能力时间的效果图，由图2可清楚看出，喂食本发明的樟芝萃取液的小白老鼠延缓丧失翻正反应(即延缓酒醉)，大约可延长二倍的时间；而仅喂食无菌蒸馏水或食用油的小白老鼠其丧失翻正反应时间大约介于30-40分钟间，喂食本发明的樟芝萃取液的小白老鼠丧失翻正反应的时间大约为对照组的二 倍长；再者，仅喂食无菌蒸馏水或食用油的小白老鼠其恢复翻正反应能力所需的时间约为300分钟，而喂食本发明的樟芝萃取液的小白老鼠其恢复翻正反应能力所需的时间仅需100分钟，此大幅缩短小白老鼠的醉倒时间，提升小白老鼠的醒酒能力，由此结果可推论本发明的樟芝萃取液对于进食酒精后的小白老鼠，具有延缓酒醉且提前恢复清醒的显著功效。
[0018]再者，对小白老鼠进行血液中酒精浓度以及酒精去氢酶活性的试验分析；同样地，本试验的小白老鼠(ICR strain)每只重量为26-30公克，其饲养温度为25土 1°C、相对湿度为65±5%、并维持于12小时光照，12小时黑暗的生理状况，以标准实验室等级的饲料喂食，饲养期间不限制饲料及水的供应；小白老鼠的饲养条件均依循国家卫生研究院公告的相关实验动物管理指南进行；于所有小白老鼠禁食12小时后，将其随机分成六组，分别为对照组、无菌蒸馏水组、樟芝萃取液组、酒精+无菌蒸馏水组、酒精+樟芝萃取液组，以及樟芝萃取液+无菌蒸馏水组，每组至少具有3只小白老鼠；其中，对照组不提供任何的喂食、无菌蒸馏水组口喂老鼠每10公克体重0.0SmL的无菌蒸馏水、樟芝萃取液组口喂老鼠每10公克体重0.0SmL的本发明的降低血液酒精浓度的樟芝萃取液、酒精+无菌蒸馏水组于口喂老鼠每10公克体重0.0SmL的无菌蒸馏水后，间隔30分钟，喂食老鼠每10公克体重口喂体积百分率52%的酒精0.15mL，而酒精+樟芝萃取液组于口喂老鼠每10公克体重0.0SmL的本发明的樟芝萃取液后，间隔30分钟，再喂食老鼠每10公克体重口喂体积百分率52%的酒精0.15mL ;本试验模式是于喂食后经过60分钟，分析小白老鼠血清中的酒精浓度以及酒精去氢酶活性；请参阅图3所示，图3为未口喂酒精的实验组(包括对照组)及口喂酒精的实验组测得的小白老鼠血液中酒精含量，由图3可清楚看出，本发明的樟芝萃取液确实能够减少老鼠体内血液中酒精的含量；且喂食本发明的樟芝萃取液的小白老鼠，其体内血液中酒精含量明显地相对减少许多(30-40%);此外,请参阅图4所示，图4为未口喂酒精及口喂酒精的实验组(包括对照组)测得小白老鼠体内酒精去氢酶活性的效果图，由图4可清楚看出，本发明的樟芝萃取液确实能够增加老鼠体内酒精去氢酶的活性，符合目前酒精代谢反应需经由酒精去氢酶使其加速分解以转换成乙醛的推论，且喂食本发明的樟芝萃取液的小白老鼠，其体内酒精去氢酶的活性明显地相对增加许多(50-60%);而根据目前的酒精代谢推论，酒精主要是由消化道吸收，被吸收到体内的酒精中有90-95%在肝脏进行代谢，其余的5-10%会经由呼气、尿及汗排出体外，通过血液进入肝脏的酒精，被肝脏生成的酒精去氢酶氧化成乙醛，乙醛再被乙醛去氢酶氧化成对身体无害的乙酸而排出体外；由此，可以合理推论本发明的樟芝萃取液确实可增加酒精去氢酶活性，进而降低血液中酒精浓度的功效；值得注意的，虽然本发明的樟芝萃取液的药理机制并未明确建立，但合理推论本发明的樟芝萃取液可借着提高负责酒精代谢的酒精去氢酶活性，刺激酒精代谢来降低血液中的酒精浓度。
[0019]由上述的实验结果说明可知，本发明与现有技术相较之下，本发明具有以下优
占-
^ \\\.[0020]1、本发明的降低血液酒精浓度的樟芝萃取液可于饮酒后刺激肝脏分泌更高活性的酒精去氢酶进行酒精代谢，与未投予本发明的樟芝萃取液相较下，可以更快速的速率降低血液酒精浓度，因而降低酒精对肝脏的毒性影响。
[0021]2、本发明的降低血液酒精浓度的樟芝萃取液对于预期具有降低血液酒精浓度的成分进一步实施动物试验，具体地支持本发明的降低在食用含酒精物质后的血液酒精浓度的功效。
[0022]综上所述，本发明的降低血液酒精浓度的樟芝萃取液，的确能通过上述所揭露的实施例，达到所预期的使用功效。
[0023]但是，上述所揭露的附图及说明，仅为本发明的优选实施例，并非为限定本发明的保护范围；凡本领域一般技术人员依照本发明的内容，所做的其它等效变化或修饰，皆应视为不脱离本发明的保护范围。
【权利要求】
1.一种降低血液酒精浓度的樟芝萃取液，其包含由樟芝菌丝体破裂的细胞壁中油萃出的顺丁烯二酰亚胺化合物作为有效成分，并与一食用油混合呈溶液状，其中，所述食用油与所述有效成分是以9: 1-7: 3的重量比混合。
2.如权利要求1所述的降低血液酒精浓度的樟芝萃取液，其中，所述食用油与所述有效成分是以8: 2的重量比混合。
3.如权利要求1所述的降低血液酒精浓度的樟芝萃取液，其中，所述食用油选自中链三酸甘油酯、玉米油、橄榄油、大豆油、红花籽油、棉籽油、花生油、芝麻油、葵花籽油、葡萄籽油以及其混合物所构成的群组。
【文档编号】A61P1/16GK103893221SQ201210586450
【公开日】2014年7月2日 申请日期:2012年12月28日 优先权日:2012年12月28日
【发明者】梁士贤, 余英杰, 金晋德, 张晓莉, 吴嘉怡 申请人:金颖生物科技股份有限公司