专利名称：一种纯化野生党参皂苷的新方法
技术领域：
本发明属于天然有机化学领域，涉及一种从大兴安岭野生党参里提取党参皂苷的方法，特别是涉及一种利用生物酶解、离子液体提取、超高压纯化党参皂苷的新方法。
背景技术：
党参，草质缠绕藤本，有白色乳汁。根胡萝卜状圆形，长约30厘米，常在中部分枝。 茎长约1. 5米，分枝多，无毛。叶互生，叶片卵形或狭卵形，长1. 2 6. 5厘米，宽O. 6 5厘米，边缘有波状锯齿，两面有密或疏的短伏毛；叶柄长O. 6 2. 5厘米，常疏生开展的短毛， 花I 3朵生分枝顶端，花萼无毛，裂片5，狭矩圆形或矩圆状披针形，长1. 6 1. 8厘米，花冠淡黄绿色，宽钟状，长1. 8 2. 4厘米，无毛，5浅裂，裂片正三角形，急尖，雄蕊5 ;子房半下位，3室，蒴果3瓣裂，有宿存花萼。
国内一般用溶剂浸提法或微波提取，大孔树脂纯化生产党参皂苷，存在着纯度低， 产品质量不稳定等缺点。本发明的不同之处在于采用生物酶解加速有效成分的溶出，再用离子液体提取使皂苷提充分，超高压进一步纯化党参皂苷，原料利用度高，产品纯度高，它的意义不仅在于综合利用当地野生资源，开发新产品，而且也对充分利用类似的林下资源提供了参考依据。
发明内容
本发明优点
本发明主要采用生物酶解、离子液体提取、超高压纯化技术。本发明方法简单易操作，适合大生产，成本低，选用的离子液体安全，无化学残留。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是
—种采用生物酶解、离子液体提取、超高压纯化党参皂苷的新方法，其步骤如下
(I)党参根粉碎至20-40目，采用复合纤维素酶，酶用量为底物的O. 5-1%，在合适温度下保温2-4h ；
(2)用离子液体，在70_85°C提取l_2h，得到固液混合物；
(3)将混合物倒入超高压容器中，在超高压力200-400MPA下处理2_4min ；
(4)将所得液在60°C真空干燥，得皂苷粗品；
(5)将所得粗 品粉末，溶于甲醇加适量硅胶搅拌，烘干过60-80目筛，干法上样，上工业级柱硅胶柱层析；
(6)以2_4BV/ h流速，用一定体积浓度乙醇在3 1-5 I条件下进行梯度洗脱， 薄层色谱法跟踪监测；
(7)收集各阶段洗脱液浓缩，回收乙醇，减压60°C真空干燥，得到含量为99%以上的皂苷成品。
具体实施例方式
实施例1 :一种采用生物酶解、离子液体提取、超高压纯化党参皂苷的新方法，其步骤如下
(I) 50g党参根粉碎至20目，采用复合纤维素酶，酶用量为底物的0.5%，保温沉淀 2h ；
(2)用离子液体1-丁基-3-甲基咪唑盐，在70°C，提取lh，得到固液混合物；
(3)将混合物倒入超高压容器中，在超高压200MPA条件下处理2min ；
(4)将所得液在60°C真空干燥，得皂苷粗品；
(5)将所得粗品粉末，溶于甲醇加适量硅胶搅拌，烘干过60目筛，干法上样，上工业级柱200目硅胶柱层析；
(6)以2BV/h流速，用体积分数70^^80^^85%乙醇在3 I条件下进行梯度洗脱，薄层色谱法跟踪监测；
(7)收集各阶段洗脱液浓缩，回收乙醇，减压60°C真空干燥，得到含量为99. 2%的成品。
实施例2 :—种采用生物酶解、离子液体提取、超高压纯化党参皂苷的新方法，其步骤如下
(I) 50g党参根粉碎至30目，采用复合纤维素酶，酶用量为底物的O. 8%，保温沉淀 3h ；
(2)用离子液体1- 丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐，在80°C提取1. 5h，得到固液混合物；
(3)将混合物倒入超高压容器中，在超高压300MPA条件下处理3min ；
(4)将所得液在60°C真空干燥，得皂苷粗品；
(5)将所得粗品粉末，溶于甲醇加适量硅胶搅拌，烘干过80目筛，干法上样，上工业级柱300目硅胶柱层析；
(6)以3BV/h流速，用体积分数70^^80^^85%乙醇在4 I条件下进行梯度洗脱，薄层色谱法跟踪监测；
(7)收集各阶段洗脱液浓缩，回收乙醇，减压60°C真空干燥，得到含量为99. 5%的成品。
实施例3 :—种采用生物酶解、离子液体提取、超高压纯化党参皂苷的新方法，其步骤如下
(I) IOOg党参根粉碎至40目，采用复合纤维素酶，酶用量为底物的1%，保温沉淀 4h ；
(2)用离子液体1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐，在85°C提取2h，得到固液混合物；
(3)将混合物倒入超高压容器中，在超高压400MPA，条件下处理4min ；
(4)将所得液在60°C真空干燥，得皂 苷粗品；
(5)将所得粗品粉末，溶于甲醇加适量硅胶搅拌，烘干过60目筛，干法上样，上工业级柱200目硅胶柱层析；
(6)以4BV/h流速，用体积分数70^^80^^85%乙醇在5 I条件下进行梯度洗脱，薄层色谱法跟踪监测；
(7)收集各阶段洗脱液浓缩，回收乙醇，减压60°C真空干燥，得到含量为99. 1%的成品 。
权利要求
1.一种采用生物酶解、离子液体提取、超高压纯化党参皂苷的新方法，其步骤如下 (1)党参根粉碎至20-40目，采用复合纤维素酶，酶用量为底物的0.5-1%，保温沉淀时间 2~4h ； (2)用离子液体，在70-85°C提取l_2h，得到固液混合物； (3)将混合物倒入超高压容器中，在超高压200-400MPA条件下处理2_4min； (4)将所得液在60°C真空干燥，得皂苷粗品； (5)将所得粗品粉末，溶于甲醇加适量硅胶搅拌，烘干过60-80目筛，干法上样，上工业级柱硅胶柱层析； (6)以2-4BV/h流速，用一定体积浓度乙醇在3 1-5 I条件下进行梯度洗脱，薄层色谱法跟踪监测； (7)收集各阶段洗脱液浓缩，回收乙醇，减压60°C真空干燥，得到含量为99%以上的成品。
2.根据权利要求1所述的一种采用生物酶解、离子液体提取、超高压纯化党参皂苷的新方法，其特征是在所述的步骤(I)中，酶解温度为45-50°C。
3.根据权利要求2所述的一种采用生物酶解、离子液体提取、超高压纯化党参皂苷的新方法，其特征是在所述的步骤(2)中，离子液体为1- 丁基-3-甲基咪唑盐或1- 丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐或1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐的一种。
4.根据权利要求3所述的一种采用生物酶解、离子液体提取、超高压纯化党参皂苷的新方法，其特征是在所述的步骤(5)中，层析硅胶为200-300目。
5.根据权利要求4所述的一种采用生物酶解、离子液体提取、超高压纯化党参皂苷的新方法，其特征是在所述的步骤￠)中，洗脱的乙醇体积浓度分别为
全文摘要
本发明属于天然有机化学领域，涉及一种从大兴安岭野生党参里提取党参皂苷的方法，特别是涉及一种利用生物酶解、离子液体提取、超高压纯化党参皂苷的新方法。本发明优点1、应用生物酶解技术，使细胞内有效成分充分溶出。2、离子液体提取，具有良好的溶解有效成分能力，且具有溶剂和催化剂的双重功能。3、超高压提取是在常温下进行的，因此避免了因热效应引起的有效成分结构变化、损失以及生理活性降低，同时超高压技术减少杂质成分溶出的同时，提高了皂苷的收率。本发明利用生物酶解、离子液体提取与超高压藕联技术，先用生物酶解促使皂苷充分溶出，再用离子液体催化提取，再经超高压纯化，最后经过硅胶柱层析二次纯化，使党参皂苷纯度提高到99.5％。
文档编号A61K36/344GK103040902SQ20121059553
公开日2013年4月17日 申请日期2012年12月13日 优先权日2012年12月13日
发明者张亚红, 姚德坤, 姚德利, 万莉 申请人:大兴安岭林格贝有机食品有限责任公司