专利名称：一种获取哺乳期大鼠鼠奶的方法
技术领域：
本发明属于生物领域，涉及动物实验技术。
背景技术：
大鼠是生物学、医学科研和教学中较理想且常用的实验动物之一。因鼠的基因与人类的具有很高的同源性，大鼠在生物医学试验领域中具有不可或缺的代替作用。生物医学中采用的动物实验，是模拟人体生理病理状态，观测各种毒性物质的影响和机制，研究各种诊断和治疗药物的作用机制，推动生物医学发展的重要方法。但对于科学研究尤其是对于人体胸腺分离到的乳杆菌在鼠胸腺中的定殖情况，及纳米粒子通过鼠奶传递对子代毒性效应的研究等，均可以应用到大鼠奶。鼠奶中经荧光染料的细菌和荧光纳米粒子可通过激光共聚焦显微镜直接检测，能够很明显的反应鼠奶中细菌和纳米粒子的存在状态。同时，对鼠奶中的纳米粒子或其他毒性物质的检测可直接通过ICP-MS技术，更高效的定量纳米粒子或毒性物质的含量。通常情况下，大鼠奶尤其是无菌大鼠奶是很难得到。哺乳期的母鼠性情躁动、比较凶悍，实验人员较不容易抓取和进行实验操作，加上母鼠乳含量不是很充足，乳头较小等因素致使鼠奶的获得更加困难。同时，哺乳期的母鼠需要喂养幼仔一直到20天左右，取得母鼠乳之后，应该不影响母鼠对幼仔的正常哺乳行为和幼仔的正常生长发育。因此，需要一种快速、高效取奶的实验技术，同时又要对母鼠的伤害降低到最小。
发明内容
本发明目的在于提供一种方便实用的获取哺乳期大鼠鼠奶的方法， 为了实现上述目的，本发明技术方案如下:
一种获取哺乳期大鼠鼠奶的方法，包括如下步骤:(I)在无菌室中操作，取实验大鼠，消毒后置于无菌工作台中，依照6-7mL/kg体重对大鼠腹腔注射5%水合氯醛。待大鼠昏迷后，将大鼠固定在无菌工作台上，快速清理大鼠胸腹毛发，乳头裸露；(2)用酒精对胸腹裸露皮肤消毒，依照1.5-2.0mL/kg体重对大鼠腹腔注射10 IU/mL催产素，5-10min后进行取奶操作。为了达到更好的技术效果，取奶时无菌室室温为25±2°C。实验大鼠为哺乳期的SD或Waster大鼠，体重200_350g。250-300g大鼠，每次取奶0.5mL;301-350g大鼠，每次取奶lmL。步骤(2)中所述取奶操作为轻轻挤动乳头周围，用灭菌胶头滴管吸取奶水，将转移
至无菌离心管。为了使获得的鼠奶为无菌状态，整个实验过程严格依照无菌操作。一般不能只从一个乳头处吸取奶水，需从不同的乳头吸取；
吸取奶水时也应当特别小心，不取有触碰到母鼠毛发和手套的奶水，应但消毒后在进行取奶操作，动作要轻柔；这些都是常规实验技术，不在赘述。
本发明的有益效果:
1、目前，尚未发现对哺乳期母鼠取奶的技术，本发明提供了一种有效取奶的实验技术，本实验采用的实验器材中除需要特制的玻璃吸管，其他器材简单、容易获取，实验操作流程简单，能在哺乳期对母鼠进行多次取奶，获得无菌大鼠奶，适合于药代动力学等需连续多次取奶的实验研究，在利用大鼠实验科研中具有重要的意义。2、该方法是在麻醉情况下进行的取奶技术，不受母鼠挣扎、反抗的影响，能够比较顺利的进行实验操作；对母鼠注射催产素也有利于母鼠产奶，能够获得相对足量的奶水。
图1哺乳期大鼠正常胸腹部脱毛的图样。图2实验中对母大鼠的无菌取奶操作。
具体实施例方式 以下结合附图对具体实施方式
作详细说明，以帮助本领域的技术人员对本发明构思、技术方案有更全面的了解。应当理解，此处所描述的具体实施仅用于解释本发明，并不用于限定本发明。本发明是一种实验取奶的技术方法，是一种大鼠麻醉状态胸腹部乳头处采奶方式，该类取奶方式目前未见，本技术方法为科研需要提供了一种技术手段。本发明所提供的实验哺乳期大鼠的取奶方法，其中，所述的实验大鼠为SD或Waster 大鼠，体重为 200-350 g ；
所述取奶的方法使用的材料和用具包括: 无菌实验室、抓鼠手套、取奶无菌手套、消毒酒精、水合氯醛麻醉剂、催产素、I mL无菌离心管、剪刀、取奶玻璃吸管、无菌注射器、婴儿理发器、胶布、超净台、棉棒；
所述的取奶前实验大鼠准备、取奶准备、取奶步骤，其过程为:
实验前对无菌实验室进行紫外灯灭菌20 min，关紫外灯后等待5-10 min中才可进入实
验室；
取奶时室温设定25±2°C ;
用注射器吸5%水合氯醛麻醉剂备用；
左手戴上抓鼠手套，将所述的哺乳期母鼠从饲养笼内取出，消毒后大鼠左手抓大鼠置于无菌超净台；
右手将准备好的麻醉针按6-7mL/kg大鼠体重腹腔注射于母鼠体内；
待1-2 min后大鼠处于昏迷状态，将大鼠放置于无菌超净台，用胶布将大鼠固定在超净台上，进一步用婴儿理发器开始快速、谨慎地清理胸腹部毛发，直至乳头清晰可见，尤其要理干净乳头附近的毛发；
如图1，毛发清理干净后，用酒精再次对胸腹部裸露皮肤进行消毒；
依照大鼠体重1.5-2.0mL/kg,向大鼠腹腔注射10 IU/mL催产素,约5_10 min后即可进行取奶操作；
戴上无菌取奶手套，左手轻轻的挤动乳头周围，使乳头上有少量奶水冒出，右手采用已套好胶管的玻璃吸管吸取乳头上的奶水(如图2)；
将所述离心管置于母鼠上方超净台内；将前所述的奶水吸取到玻璃管内，当达到一定含量时则排到无菌离心管内；
取奶成功后，再次对母鼠消毒，放回母鼠饲养笼中；
实验结果:
250-300 g大鼠；5只；每只取奶0.5 mL ;
301-350 g大鼠；5只；每只取奶1.0 mL ;
母鼠约在生产幼仔后的两三天开始产奶，这时才可对母鼠进行取奶；
清理母鼠毛发时，应特别小心，切忌不能伤到母鼠皮肤和乳头，将剪刀和理发器配合使
用；
一般不能只从一个乳头处吸取奶水，需从不同的乳头吸取；
吸取奶水时也应当特别小心，不取有触碰到母鼠毛发和手套的奶水，应但消毒后在进行取奶操作，动作要轻柔；
所述取奶耗时不应过长，一般控制在10-15 min内完成；
该方法是在麻醉情况下进行的取奶技术，不受母鼠挣扎、反抗的影响，能够比较顺利的进行实验操作；对母鼠注射催产素也有利于母鼠产奶，能够获得一定量的奶水；能在哺乳期间反复多次的取奶，适合于药代动力学等需连续多次取奶的实验研究，在利用大鼠实验的科研中具有重要的意义。
权利要求
1.一种获取哺乳期大鼠鼠奶的方法，包括如下步骤:(I)在无菌室中操作，取实验大鼠，消毒后置于无菌工作台中，依照6-7mL/kg体重对大鼠腹腔注射5%水合氯醛；待大鼠昏迷后，将大鼠固定在无菌工作台上，快速清理大鼠胸腹毛发，乳头裸露；(2)用酒精对胸腹裸露皮肤消毒，依照1.5-2.0mL/kg体重对大鼠腹腔注射10 IU/mL催产素，5-10min后进行取奶操作。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于无菌室室温为25±2°C。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于实验大鼠为哺乳期的SD或Waster大鼠，体重200-350go
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于体重250-300g大鼠，每次取奶0.5mL ;体重301-350g大鼠，每次取奶lmL。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(2)中所述取奶操作为轻轻挤动乳头周围，用灭菌胶头滴管吸 取奶水，将转移至无菌离心管。
全文摘要
本发明涉及一种获取哺乳期大鼠鼠奶的方法。先通过麻醉哺乳期的母鼠；小心谨慎地清理母鼠胸腹部的毛发；采用酒精消毒后，再腹腔注射催产素于母鼠体内，再进行取奶操作。采用本方法能够较容易的取得母鼠奶水，不受母鼠挣扎反抗的影响；能长时间的对哺乳期母鼠反复多次取奶，适用于药代动力学等特殊科研需要的实验研究。
文档编号A61B10/00GK103142254SQ201310075680
公开日2013年6月12日 申请日期2013年3月11日 优先权日2013年3月11日
发明者许恒毅, 杨林 申请人:南昌大学