三七皂苷r1对心脏的保护作用的制作方法
【专利摘要】本申请公开了三七皂苷R1预给药可以预防缺血再灌注引起的心脏微循环障碍的应用，该作用与其减少心肌梗死面积，改善心功能，减少心肌细胞的调亡，血管内皮细胞和心肌细胞超微结构的损伤相关。该作用机制还与其抑制ATP5D降解,增加了心肌能量ATP,从而抑制Src活化，防止紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5、VE、JAM-1降解相关。
【专利说明】三七皂苷R1对心脏的保护作用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种药物的应用，特别涉及三七皂苷R1对心脏的保护作用。
【背景技术】
[0002] 随着人们生活水平的提高及生活习惯的改变，人类的疾病谱发生了重大的变化， 心血管疾病成为威胁人类健康和生命的主要因素之一，同时也加重了各国卫生保健系统的 财政负担。每年全世界因心血管病而死亡的人数大约有1650万人，在美国2001年大约有 1. 5亿人患有新发或再发的心血管病，并且大约有1/3的人因此而死亡；在意大利2000年 因心血管疾病而死亡人数大约为42万人；在中国心血管病每年死于心血管疾病的人数大 约300万人，占总死亡人数的45%左右。介入治疗已经成为急性冠脉综合征的主要治疗方 法，但是，由于缺血再灌注损伤，介入治疗并没有降低严重心脏事件的发生率，所以，抑制缺 血再灌注损伤对于减少介入后心肌再损伤有重要的临床意义。缺血再灌注损伤由血管阻塞 期的缺血缺氧和血管再通后的再灌注损伤共同构成。缺血引起的ATP降解，不仅是再灌注 后过氧化物产生的基础，也可引起心肌和血管内皮细胞损伤。以往的研究多关注过氧化物 产生、粘附分子表达、炎性因子释放、细胞凋亡等环节，已经取得了一些研究进展，但是，在 临床上尚没有获得满意的疗效。
[0003] 缺血再灌注引起的心肌ATP的降解，可引起心肌细肌丝的F-actin降解，及粗肌丝 的MLC磷酸化。有报道称肌丝细胞骨架的变化能降低ATP合酶的水平，并最终造成心功能 损伤。ATP合成酶α、δ是ATP合成酶的两个亚基，可以增加 ATP含量。但是，缺血再灌注 后心肌ΑΤΡ合成酶α、δ发生了哪些变化，尚不清楚。因此，通过调控能量代谢，增加心肌 的ΑΤΡ含量，可能成为维护心肌结构，进而改善心功能的新的靶点。
[0004] 另一方面，ΑΤΡ的降解引起的F-actin解聚，可以导致微血管内皮细胞紧密连接蛋 白Z0-l、VE、JAM-l、Claudin-5的解聚，从而增加微血管通透性。另外，心脏血管内皮细胞的 Caveolae也影响血管内皮细胞通透性。Src激酶活化细胞质膜微囊上的白蛋白受体gp60、 Caveolin-1,使白蛋白与gp60其结合,通过跨膜转运途径引起白蛋白漏出。因此,通过调 控心肌ATP，可能是减轻缺血再灌注后心脏微循环通透性增高的一个新的策略。
[0005] 复方丹参滴丸（CP)由丹参、三七、冰片的活性成份组成，在中国、韩国、俄罗斯和 越南等国主要用来治疗心血管疾病。我们以往的研究已证明了复方丹参滴丸可以保护缺血 再灌注损伤引起的大鼠心脏微循环障碍。其中主成分三七为Panax notoginseng的干燥 根，而三七总阜苷（Panaxnotogiseng Saponins，PNS)为三七中的主要有效组分，主要包括 30余种皂苷类成分。临床上广泛用于心脑血管疾病、肝功能障碍等与微循环障碍相关疾病 的治疗。其机制可能与三七的免疫调节功能，改善微循环障碍，减少白细胞粘附于血管内皮 以及提高内皮的功能相关。以PNS为主要成分的传统中药复方制剂脉流能改善缺血再灌注 (I/R)引起的大鼠肠系膜微循环障碍，包括抑制白细胞粘与细静脉管壁的黏附、细静脉壁过 氧化物的产生和血管周围肥大细胞脱颗粒，PNS还可以改善血管内皮功能。我们以往的体 内研究结果证明在LPS投入之前给予PNS能够抑制白细胞与细静脉的粘附，抑制体内肥大 细胞脱颗粒，体外研究结果证明了 PNS可以抑制LPS诱导的粒细胞粘附分子CD18和CDllb 的表达。
[0006] 然而，作为三七中的特有成分，三七皂苷R1对缺血再灌注损伤引起的心脏微循环 障碍和心肌损伤是否有保护作用，对缺血再灌注后大鼠心肌的ATP合成酶、心肌ATP含量、 心肌结构和功能有何影响，对心脏微血管内皮细胞Caveolae、内皮细胞紧密连接和心脏微 循环通透性有何影响，尚不清楚。
[0007] 因此，本研究探讨三七皂苷R1对缺血再灌注引起的大鼠心肌ATP合成酶亚基 心肌能量、心肌结构、心功能的影响；并通过观察心脏微血管内皮细胞Caveolae、内皮细胞 紧密连接的变化，探讨其对心脏微血管通透性的影响，阐明三七皂苷R1抑制缺血再灌注引 起的心肌损伤和心脏微血管通透性变化的作用机理，为缺血再灌注损伤的治疗提出新的干 预策略。
【权利要求】
1. 三七皂苷R1在制备治疗心脏能量代谢异常、心脏细静脉通透性升高、心肌损伤、心 功能异常、心脏灌流量降低的药物中的应用。
2. 如权利要求1中所述的应用，是通过三七皂苷R1预给药实现预防缺血再灌注引起的 微循环障碍。
3. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用是七皂苷R1能抑制缺血再灌注引 起的红细胞流速的降低。
4. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用是七皂苷R1能抑制再灌注引起心 脏细静脉FITC标记白蛋白的血管外漏出。
5. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用是三七皂苷R1可改善缺血再灌注 引起的心脏血流量的降低。
6. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用是三七皂苷R1使梗死区明显减少， 改善缺血再灌注引起Infarct area/LV的显著变化，改善心肌的梗死。
7. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用是三七皂苷R1能抑制再灌注诱导 的LVSP和+dp/dtmax的降低。抑制再灌注诱导的-dp/dtmax的上升。
8. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用是三七皂苷R1使I/R心肌间质水 肿和心肌纤维断裂得到改善。三七皂苷R1抑制了 I/R诱导的F-actin减少、心肌断裂。
9. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用是三七皂苷R1能改善心脏心肌细 胞的超微结构，纤维排列整齐，线粒体肿胀减轻，包膜完整，形态规则，心脏微血管内皮 细胞间连接完好；能减少血管内皮细胞中质膜微囊。
10. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用是三七皂苷R1能减少MPO阳性细 胞。
11. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用是三七皂苷R1能降低ICAM-1及 ⑶18的阳性表达。
12. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用是三七皂苷R1能减少TUNEL阳性 心肌细胞。
13. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用是三七皂苷R1能抑制缺血再灌注 引起的心脏ATP含量下降，以及ADP/ATP、AMP/ATP比值的增加，抑制I/R引起的ATP?的降 低。
14. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用是三七皂苷R1能抑制再灌注诱导 的心肌组织中ZO-1、VE、JAM-1、Claudin-5蛋白表达的降低，Claudin-5的断裂。
15. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用是三七皂苷R1能抑制再灌注心肌 组织中Cav-1、Cav-3蛋白表达的升高，抑制再灌注组心肌组织中P-Src蛋白表达的升高。
【文档编号】A61K31/704GK104147028SQ201310175976
【公开日】2014年11月19日 申请日期:2013年5月14日 优先权日:2013年5月14日
【发明者】韩晶岩 申请人:天士力制药集团股份有限公司