一种检测药物的致类过敏性的方法及其用途
【专利摘要】本发明涉及医疗评价、检测【技术领域】，具体涉及一种检测静脉注射类药物的致类过敏性的方法。通过对实验动物静脉注射给予不同剂量的受试药物，观察给药后一定时间内实验动物的类过敏反应症状，按类过敏反应症状表分值评判受试药物静脉注射给药的类过敏反应强度等级。本发明方法以动物给药后发生的类过敏反应症状作为“金标准”，可较好地模拟临床上全身类过敏反应发生的动态反应的全过程，故可用于静脉注射类药物类过敏反应的检测和定性，也可以用于抗类过敏药物的筛选及全身类过敏发病机制和药物作用机理的研究，具有操作方法简便，实验周期短，检测重现性好、结果贴近临床等优点。
【专利说明】一种检测药物的致类过敏性的方法及其用途
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医疗评价、检测【技术领域】，具体涉及一种检测药物的致类过敏性的方 法、及相关用途。
【背景技术】
[0002] 类过敏反应的概念相对于其它各型超敏反应提出较晚，目前在过敏反应中的定位 尚不明确，大多认为可将其与由IgE介导的I型超敏反应并列，作为急性过敏反应的亚类。 其药物体内致病机制包括以下过程：药物进入体内后激活效应细胞-组织肥大细胞和血液 嗜碱性粒细胞，效应细胞脱颗粒释放组胺等过敏活性介质，作用于机体靶器官出现过敏症 状。
[0003] 肥大细胞激活后可释放多种活性物质，作用于广泛的机体靶器官，使其发生病理 改变，如血管扩张、支气管收缩、粘液分泌、神经刺激及白细胞迁移、粘附、激活等。在其病理 改变中，组胺发挥重要作用，是炎症反应和免疫损伤的主要介质，能引起毛细血管扩张、平 滑肌收缩和刺激胃酸分泌等。研究证实，在临床症状(皮肤反应、心动过速、血压变化）与血 浆组胺浓度的关系中，组胺作为围手术期不良反应检测的敏感性96%、特异性93%，并将组 胺定义为检测这些症状的"金标准" [1]。
[0004] 国内有学者基于类过敏发生时耳廓血管通透性增高这一生理病理特点，通过尾静 脉给予含伊文思蓝的类过敏药物使其血管通透性增高，观察给药后30min内动物的行为变 化及耳廓蓝染情况，依据耳廓蓝染数量和蓝染面积评分，评判类过敏反应性质，建立了小鼠 耳廓血管通透性试验模型。但在对该模型进行应用时发现，伊文思蓝染液对一些类过敏药 物致肥大细胞脱颗粒具有明显的抑制作用，严重影响了类过敏反应的检测敏感性，同时，因 染液注入机体，极大干扰了血液和组织中类过敏反应生物标志物的检测。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种检测药物的致全身类过敏反应 程度的方法，本发明方法以动物给药后发生的类过敏反应症状作为"金标准"，可较好地模 拟临床上全身类过敏反应发生的动态反应的全过程，用于静脉注射类药物类过敏反应的检 测和定性时，具有操作方法简单，实验周期短，检测重现性好，结果贴近临床等优点。
[0006] 本发明首先公开了一种检测药物的致类过敏性的方法，为以实验动物为受试对 象，通过静脉注射给予不同剂量的受试药物，观察用药后一定时间内实验动物所表现的类 过敏反应症状，根据症状严重程度将类过敏反应症状分成不同类过敏反应症状等级，按照 强度系数公式计算类过敏反应的强度系数，得出不同剂量的受试药物的致全身类过敏反应 强度等级。
[0007] 优选的，所述实验动物的类过敏反应症状包括活动减少，坚毛，发抖，搔鼻，搔耳， 呼吸急促，口鼻肿胀，流泪，呼吸困难，步态不稳，跳跃，痉挛，旋转，以及死亡。更优选的，所 述根据症状严重程度将类过敏反应症状分成不同类过敏反应症状等级具体为，将实验动物 的类过敏反应症状按照严重程度划分为五个等级：
[0008] 第一等级包括前述活动减少，坚毛，发抖，搔鼻，以及搔耳的症状；
[0009] 第二等级包括前述呼吸急促，口鼻肿胀，以及流泪的症状；
[0010] 第三等级包括前述呼吸困难，步态不稳，跳跃，痉挛，以及旋转的症状；
[0011] 第四等级的症状为死亡；
[0012] 零等级即无前述的任何一种症状，属无类过敏反应症状的正常动物。
[0013] 按症状等级对实验动物进行打分，症状分值为：仅出现第一等级症状者为1分；仅 出现第二等级症状者，或者出现第二等级并且也同时出现第一等级症状者为2分；仅出现 第三等级症状者，或者出现第三等级症状并且也同时出现第一等级和/或第二等级症状者 为3分；仅出现第四等级症状者，或者出现第四等级症状并且也同时出现第一等级、第二等 级和/或第三等级症状者为4分；未出现第一、第二、第三、第四等级症状中的任何一种症状 的零等级者为〇分。具体见下表1。所述出现第一等级症状者，为出现活动减少，坚毛，发 抖，搔鼻，以及搔耳中任意一种或多种症状的实验动物；出现第二等级症状者，为出现呼吸 急促，口鼻肿胀，以及流泪中任意一种或多种症状的实验动物；其他等级症状者同理。
[0014] 表1类过敏反应症状评价标准
【权利要求】
1. 一种检测药物的致类过敏性的方法，为w实验动物为受试对象，通过静脉注射给予 不同剂量的受试药物，观察用药后一定时间内实验动物所表现的类过敏反应症状，根据症 状严重程度将类过敏反应症状分成不同类过敏反应症状等级，按照强度系数公式计算类过 敏反应的强度系数，得出不同剂量的受试药物的致类过敏反应强度等级； 其中，实验动物的所述类过敏反应症状包括活动减少，竖毛，发抖，搔鼻，搔耳，呼吸急 促，口鼻肿胀，流巧，呼吸困难，步态不稳，跳跃，痊李，旋转，W及死亡； 所述根据症状严重程度将类过敏反应症状分成不同类过敏反应症状等级具体为，将实 验动物的类过敏反应症状按照严重程度划分为五个等级： 1) 第一等级包括前述活动减少，竖毛，发抖，搔鼻，W及搔耳的症状； 2) 第二等级包括前述呼吸急促，口鼻肿胀，W及流巧的症状； 3) 第H等级包括前述呼吸困难，步态不稳，跳跃，痊李，W及旋转的症状； 4) 第四等级的症状为死亡； 5) 零等级即无前述的任何一种症状，属无类过敏反应症状的正常动物； 所述类过敏反应的强度系数的计算公式如下：
实验动物中，仅出现第一等级症状者为1分；仅出现第二等级症状者，或者出现第二等 级并且也同时出现第一等级症状者为2分；仅出现第H等级症状者，或者出现第H等级症 状并且也同时出现第一等级和/或第二等级症状者为3分；仅出现第四等级症状者，或者出 现第四等级症状并且也同时出现第一等级、第二等级和/或第H等级症状者为4分；未出现 第一、第二、第H、第四等级症状中的任何一种症状的零等级者为0分。
2. 如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述实验动物选自小鼠或大鼠。
3. 如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，实验动物静脉注射给药剂量为受试药 物人临床使用最高剂量的（1?8)n倍；所述n为W体表面积折算的动物与人等效剂量比。
4. 如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述通过静脉注射给予不同剂量的受 试药物，是指将实验动物分为多组，同一剂量组的实验动物静脉注射体积相同，浓度也相同 的受试药物；不同剂量组的实验动物静脉注射体积相同，而浓度不同的受试药物。
5. 如权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述受试药物的浓度为该受试药物人 临床最高使用浓度的0. 5-16倍。
6. 如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述观察时间为受试药物静脉注射后 的 5 ?60min。
7. 如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述受试药物的致类过敏反应强度包 括阴性、弱阳性、阳性、强阳性，W及极强阳性五个等级；并且，阴性对应的类过敏反应强度 系数为0 ;弱阳性对应的类过敏反应强度系数大于0,小于等于1 ;阳性对应的类过敏反应强 度系数大于1，小于等于2 ;强阳性对应的类过敏反应强度系数大于2,小于等于3 ;极强阳 性对应的类过敏反应强度系数大于3。
8. 如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测药物的致类过敏性的方法还 包括与类过敏反应高度相关的生物标志物含量检测。
9. 如权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述生物标志物包括血液组胺、目-氨 基己糖巧酶、类膜蛋白酶、血清补体总活性、补体成分中的至少一种。
10. 如权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述补体成分选自03八4、(：4、8因子 和C1醋酶抑制物。
11. 权利要求1-10任一权利要求所述检测方法在检测和定性药物类过敏，筛选抗类过 敏药物，W及研究药物性类过敏机理中的用途。
【文档编号】A61K49/00GK104415354SQ201310390564
【公开日】2015年3月18日 申请日期:2013年8月30日 优先权日:2013年8月30日
【发明者】谢家骏, 张立波, 易娟娟, 康黎静, 赵琳 申请人:上海中医药大学