一种制备蒲公英叶水溶活性提取物的方法
【专利摘要】本发明公开了一种制备蒲公英叶水溶活性提取物的方法，属于天然产物有效成分提取分离【技术领域】。本发明是以含蒲公英干叶为原料，在适宜条件下，水为溶剂提取蒲公英叶中水溶活性物，该方法包括如下步骤：称取一定量的过40目的蒲公英叶粉与水以1∶30～1∶50（w/v）的比例混合，在温度80-100℃，进行4h的提取，趁热抽滤，冷却至是室温，离心转速4000-8000r/min和离心时间为6-10mins，收集上层清液，旋蒸浓缩。最后浓缩液通过喷雾冷冻干燥或者真空冷冻干燥制备水溶活性成分的蒲公英叶提取物。本发明具有设备投入低、操作简单、时间短、效率高、品质优，适合产业化等特点。
【专利说明】一种制备蒲公英叶水溶活性提取物的方法
[0001]【技术领域】
本发明涉及天然产物化学有效成分提取纯化【技术领域】，涉及的是一种制备蒲公英叶水溶活性提取物的制备方法。
[0002]【背景技术】
蒲公英始载于《唐本草》，《图经本草》作仆公罂，《本草纲目》作地丁蒲公英属7-3X3--Webar.全世界约2000余种。我国有70种，I变种。其中以蒲公英T1.mong0.分布最广，几遍及全国多数地区。药蒲公英T1.0fficinale FiM?分布于欧洲、北美,在我国新疆也有分布。蒲公英含有蛋白质、脂肪、碳水化合物、微量元素及维生素等，有丰富的营养价值，可生吃、炒食、做汤，是药食兼用的植物。蒲公英Mogonon, TM)是药食同源的菊科多年生草本植物，被卫生部列入既是食品又是药品的名单，具有清热解毒、消肿散结、利尿通淋、健胃消炎、保肝利胆等功效。
[0003]蒲公英叶作为蒲公英种植产业的副产物，不仅含有上述描述含有的营养物质，同时也含有很多其他生物活性物质，如酚酸和黄酮类等。黄酮类包括木樨草素、槲皮素、芹菜素和芸香苷及其单糖类的衍生物，如木犀草素-7- 3 -D-葡萄糖苷，槲皮素-3-0-葡萄糖苷。蒲公英叶中酚酸包括绿原酸和咖啡酸等。黄酮类和酚酸类都具有抗炎、抗菌、抗病毒和抗肿瘤等作用。关于蒲公英中黄酮和酚酸的提取分离，从最近几年的国内外申请的专利发现，国外专利对蒲公英专利研究较少，尤其是水溶性活性物质，国外专利名称为而7io/7processes, compositions /Trot/wcts,该专利申请号为 US201113068283。此专利提供了从蒲公英的根中提取橡胶和碳水化合物的方法，而与本专利中涉及的目标产物黄酮、酚酸不同。国内申请涉及蒲公英中黄酮、酚酸提取分离的专利包括:①一种蒲公英总黄酮的提取方法，专利申请号:CN201110062814.4，该专利在提取黄酮的过程中，使用了石油醚脱色，而且它蒲公英提取物应用于制药，对其存在的有机溶剂残留可能存在问题，此外，该专利使用的原料是整株蒲公英，而本专利使用的原料为蒲公英叶。②一种蒲公英中总黄酮的提取方法，专利申请号:CN201210521873.8，该专利采用的溶剂为65%以上的醇-水混合液，还向此混合液添加了无机强酸(盐酸)或乙酸，可能容易造成浸提过程中，金属提取容器(假如使用金属作为提取容器)的腐蚀，从而提高了生产成本不利于提高企业的生产效益。③一种蒲公英总黄酮的分离纯化方法，专利申请号:CN201210595305.2，该专利从蒲公英分离提纯获得总黄酮，采用的是85%以上的甲醇-水混合液，另外过大孔树脂时，使用了甲醇-丙酮洗脱液，甲醇丙酮都是有毒的有机溶剂，虽提高了总黄酮得率，但此提取物应用于食品、药品和化妆品等的安全使用性上将受到限制。如④专利名称为一种蒲公英制剂及制备方法，专利申请号为CN02111738.1，该专利在制备蒲公英药物制剂时，从安全性角度考虑，采用的就是蒲公英水提物为原料。该专利蒲公英水提取物的制备方法虽与本专利的提取方法相似，但本专利制备的目标产物是同时富含水溶性黄酮、多酚和绿原酸及咖啡酸，而前者是通过蒲公英水提取物和药用辅料配伍成蒲公英制剂，两者专利目的不一。
[0004]综上所述，以蒲公英叶为原料制备水溶活性物干粉是本专利的特点，通过本专利制备的蒲公英叶水提取物可直接应用于保健品、药品和化妆品中，无需考虑有毒溶剂残留而使安全性使用的问题，假如应用于保健品开发，人体对蒲公英水溶活性物的吸收效果佳。本专利对处理水提取蒲公英叶活性物的浓缩液，采用了喷雾冷冻干燥或真空冷冻干燥技术，最大限度的保留蒲公英叶水提取物中的活性成分，针对本专利制备蒲公英叶水提物的过程中，减少了不必要的有机溶剂使用和后处理需要，降低了溶剂投入成本，同时也利于蒲公英的工业化生产。因此，进行水提取蒲公英叶制备富含酚酸和黄酮的提取物，是加工蒲公英叶的一条重要途径，同时对蒲公英叶活性物的提取方法研究也是进一步奠定蒲公英叶深加工的应用基础。
[0005]
【发明内容】
本发明的目的在于充分有效利用蒲公英叶，提取其中活性高的水溶性黄酮和酚酸活性成分，为蒲公英叶食品或保健品的开发提供支持。
[0006]本发明所采取的技术方案包括如下:
1.一种蒲公英叶水溶活性提取物的制备方法，其特征在于该方面包括以下步骤:
(I)水浸提:称取适量的蒲公英叶，药物粉碎机粉碎，过40目筛，加入适量水，固液比为1:10-1:50 (w/v)，提取温度为4(Tll(TC，提取时间为1飞h的条件下进行提取，然后趁热抽滤收集。所述的蒲公英叶为江苏泗阳产通过自然阴干处理。
[0007](2)离心:将上述(I)的收集液在3000~6000 r/min，5~20 mins，进行离心。
[0008](3)干燥:将(2)最后收集到的溶液，在30_50°C下进行旋蒸浓缩，最后真空冷冻干燥或者喷雾冷冻干燥，所获的蒲公英叶干粉中，总多酚含量最高可达25.90%,总黄酮约为16.15%，绿原酸和咖啡酸的含量分别为0.55%和1.09%的蒲公英叶水溶活性粗提物。
[0009]2.根据权利要求1所述的制备蒲公英叶水溶性活性提取物的方法，其特征在于步骤(I)中所述的水为蒸馏水或去离子水。
[0010]3.根据权利要求1所述的制备蒲公英叶水溶性活性提取物的方法，其特征在于步骤(3)中所述的真空冷冻干燥的时间为36~48h，或喷雾冷冻干燥的时间为6~10h。真空冷冻干燥的温度最大不超过2(T30°C，喷雾冷冻干燥的温度最大不超过_15°C。
[0011]步骤(I)中所述的蒲公英叶粉碎的粒度约为40-60目。
[0012]步骤(4)中所述的真空冷冻干燥的时间为36~48 h，或喷雾冷冻干燥的时间为6-10 h。真空冷冻干燥的温度最大不超过2(T30°C，喷雾冷冻干燥的温度最大不超过_15°C。
[0013]与现有技术相比，本发明的有益效果:1、本发明采用以水为溶剂，无需考虑有机溶剂残留，和有机溶剂对提取釜的腐蚀，从而可减少投资成本，并为食品、化妆品和保健品提供了安全优质原料。2、蒲公英叶水溶提取物同时富含总多酚，总黄酮和绿原酸及咖啡酸的水溶性蒲公英叶提取物。3、本发明工艺稳定，产品收率高且结果重现性好，所获产品品质好，易于实现工业化生产。
[0014]【专利附图】
【附图说明】
图1本发明的蒲公英叶加工工艺流程图。
[0015]图2蒲公英叶水溶活性提取物HPLC图。
【具体实施方式】
[0016]实施例1
称取30g蒲公英干叶粉，加入IOOOmL蒸馏水于玻璃提取器中，在温度为80°C下，提取4h，重复提取3次，趁热抽滤，在4000r下离心7mins，收集液在45°C下再旋蒸浓缩，收集浓缩液，浓缩液通过真空冷冻干燥，获得固体含量6.16g，其中可得到含总多酚可达21.75%，总黄酮约为13.65%，有机酸中绿原酸和咖啡酸的含量分别为0.33%和0.76%的蒲公英叶水溶活性粗提物。
[0017]实施例2
称取70g蒲公英干叶粉，加入2000mL蒸馏水于玻璃提取器中，在温度为90°C下，提取4h，重复提取3次，趁热抽滤，在4500r下离心8mins，收集液在50°C下再旋蒸浓缩，收集浓缩液，浓缩液通过真空冷冻干燥，获得固体含量13.21g，通过测定发现其中可得到含总多酚可达23.75%，总黄酮约为15.87%，有机酸中绿原酸和咖啡酸的含量分别为0.46%和0.96%的蒲公英叶水溶活性粗提物。
[0018]实施例3
称取IOOg蒲公英干叶粉，加入3000mL蒸馏水于玻璃提取器中，在温度为100°C下，提取4 h，重复提取3次，趁热抽滤，在5000r下离心10 mins，收集液在60°C下再旋蒸浓缩，收集浓缩液，浓缩液通过真空冷冻干燥，获得固体含量21.55g，其中可得到含总多酚可达25.75%，总黄酮约为17.93%，测的有机酸中绿原酸和咖啡酸的含量分别为0.55%和1.09%的蒲公英叶水溶活性粗提物。
【权利要求】
1.一种制备蒲公英叶水溶活性提取物的方法，其特征在于该方面包括以下步骤: (I)水浸提:称取适量的蒲公英叶，药物粉碎机粉碎，过40目筛，加入适量水，固液比为1:10-1:50 (w/v)，提取温度为4(noo°c，提取时间为1飞h的条件下进行提取，然后趁热抽滤收集。
2.所述的蒲公英叶为江苏泗阳种植，采摘后通过自然阴干处理。
3.(2)离心:将上述(I)的收集液在300(T6000r/min，5~20 mins，在常温下，进行离心。
4.(3)干燥:将(2)最后收集到的溶液，在30-50°C下进行旋蒸浓缩，最后再真空冷冻干燥或者喷雾冷冻干燥，可得到总多酚含量最高可达25.75%，总黄酮约为17.93%，所测有机酸中绿原酸和咖啡酸的含量分别为0.5%和1.09%的蒲公英叶水溶活性粗提物。
5.根据权利要求1所述的制备蒲公英叶水溶性活性提取物的方法，其特征在于步骤(I)中所述的水为蒸馏水或去离子水。
6.根据权利要求1所述的制备蒲公英叶水溶性活性提取物的方法，其特征在于步骤(4)中所述的真空冷冻干燥的时间为36~48h，或喷雾冷冻干燥的时间为6~10h。
7.真空冷冻干燥的温度最高不超过2(T30°C，喷雾冷冻干燥的温度最高不超过_15°C。
【文档编号】A61K8/97GK103445173SQ201310416853
【公开日】2013年12月18日 申请日期:2013年9月13日 优先权日:2013年9月13日
【发明者】黄立新, 谢普军, 张彩虹, 游凤, 张耀雷 申请人:中国林业科学研究院林产化学工业研究所