含有新颖前药的分子组合物和其用途
【专利摘要】本发明提供新颖前药组合物和其用途。
【专利说明】含有新颖前药的分子组合物和其用途
【技术领域】
[0001] 本发明涉及含有新颖前药的分子（PDCM)，其中所述PDCM包含一或多个含有至少 一个非天然编码氨基酸的多肽。本发明大体上涉及使用化学以及重组DNA技术利用分子生 物学方法制造和选择用于PDCM的多肽的领域。
【背景技术】
[0002] 治疗性分子（如本文所述的那些）被称为含有前药的分子（PDCM)。PDCM包含一 或多个含有至少一个非天然编码氨基酸的多肽。
[0003] 前药包括（但不限于）生物活性母体化合物的化学衍生物，其在投与后最终在体 内释放母体化合物。前药可允许技工修改药剂在体内的作用的起始和/或持续时间且可修 改药物在体内的输送、分布、可溶性或稳定性以及生物可用性。此外，前药调配物可减小毒 性和/或以其它方式克服在投与药物制剂时遇到的困难。一种策略是将药物掩盖为非活性 前药，所述非活性前药利用目标细胞的一些特殊特性解除掩盖。丹米德S. R. (Denmeade，S. R.)等人，癌症研究（Cancer Research) 58, 2537-2540 (1998)。
[0004] 前药是母体或活性化合物的生物惰性或实质上非活性形式。活性药物的释放速率 受到数种因素影响，包括（但不限于）键、连接基团或聚合物的类型、母体药物与改性剂的 连接。这些前药应仅在体内转化成活性药物。一旦前药被注入患者，其就应有效转化成活 性药物。必须注意避免制备在出现足够量的母体化合物水解之前例如经由肾脏或网状内皮 系统消除的前药。
[0005] 前药可能的生物活性母体化合物包括（但不限于）细胞毒性剂、多肽、酶、毒素、 药物、放射性核素、抗病毒剂、诊断探针、显影剂以及其它通过从PDCM余部解离而活化的药 剂。
[0006] 细胞毒性剂的前药具有治疗性用途，因为其可将细胞毒性前药传递到特定细胞 群体以实现以靶向方式酶促转化成细胞毒性药物。已出现许多针对用单克隆抗体药物 结合物革C向肿瘤细胞的报导{塞拉（Sela)等人，免疫结合物（Immunoconjugates),第 189-216 页（C.沃格尔（C. Vogel)编 1987);高斯（Ghose)等人，靶向药物（Targeted Drugs),第 1-22 页（E?戈德伯格（E. Goldberg)编 1983);迪勒（Diener)等人，抗体 介导的传递系统（Antibody Mediated Delivery Systems),第 1-23 页（J?罗德韦尔 (J.Rodwell)编1洲8);彼得斯（Pietersz)等人，抗体介导的传递系统，第25-53页 (J.罗德韦尔编1 988);布莫（Bumol)等人，抗体介导的传递系统，第55-79页（J.罗 德韦尔编I988) ;G_A.彼得斯（G_A_ Pietersz)和K.克劳尔（K. Krauer)，2药物革巴向杂 志（J. Drug Targeting)，183_215 (1994) ;R.V. J?夏里（R.V.J. Chari), 31 先进药物传递 综述（Adv. Drug Delivery Revs. ),89-104(1998) ;W.A.布莱特勒（W.A. Blattler)和 R.V.J.夏里，抗癌剂，癌症化学疗法前沿（Anticancer Agents, Frontiers in Cancer Chemotherapy) ,317-338, ACS 会议系列 796 (ACS Symposium Series796);和 I?小岛 (LOjima)等人编，美国化学协会（American Chemical Society) 2001}。细胞毒性药物 如甲氨蝶呤（methotrexate)、道诺霉素（daunorubicin)、阿霉素（doxorubicin)、长春新碱 (vincristine)、长春碱（vinblastine)、美法仑（melphalan)、丝裂霉素 C(mitomycin C)、 苯丁酸氮芥（chlorambucil)、刺孢霉素（calicheamicin)以及美登醇（maytansinoid)已偶 联到多种鼠类单克隆抗体。在一些情况下，药物分子经由如血清白蛋白的中间载体分子与 抗体分子连接{伽里特（Garnett)等人，46癌症研究（Cancer Res. )2407-2412 (1986);大 川（Ohkawa)等人，23 癌症免疫与免疫疗法（Cancer Immunol. Immunother. )81-86(1986); 远藤（Endo)等人，们癌症研究1076-1〇8〇 (198〇) }、葡聚糖{赫维茨（Hurwitz)等 人，2应用生物化学（Appl. Biochem.) 25-35 (1980);马纳比（Manabi)等人，34生物化 学药理学（Biochem. Pharmacol. )289-291 (1985);迪尔曼（Dillman)等人，46 癌症研究 4886-4891(1986);和绍瓦勒（Shoval)等人，85美国国家科学院院刊（Proc. Natl. Acad. Sci. U.S. A. )8276-8280(1988)}或多聚谷氨酸{冢田（Tsukada)等人，73国家癌症学会 杂志（J. Natl. Cane. Inst. )721-729 (1984);加藤（Kato)等人，27 医药化学杂志（J. Med. Chem. ) 1602-1607 (1984);冢田等人，52 英国癌症杂志（Br. J. Cancer) 111-116(1985)}。一 系列广泛的连接基团可用于制备这类免疫结合物，包括可裂解和非可裂解连接基团两者。
[0007] 螯合为前药的药剂包括多肽。所述多肽可包含一或多个非天然编码氨基酸。多肽 可螯合为前药，从而例如调节多肽的释放、将多肽靶向特定细胞类型或实现其它所需结果。 靶向需要在所需条件下（包括（但不限于）在所需部位处）产生治疗有效量的活性药物的 方式。
[0008] 多种多肽可与前药连接以将前药的母体或活性化合物传递到所需目标。所述多肽 包括（但不限于）具有已知结合特异性的靶向药剂如抗原结合多肽（ABP)、肽和多肽。根 据所选细胞结合剂所结合的细胞类型，可在体内、离体或体外治疗许多疾病。所述疾病包括 (但不限于）癌症，包括淋巴瘤、白血病、肺癌、乳房癌、结肠癌、前列腺癌、肾癌、胰脏癌等。
[0009] 前药的释放可通过许多方式实现，包括（但不限于）暴露于生理条件，通过酶促裂 解（包括（但不限于）利用由特定细胞类型分泌或表达的酶，利用通过诱导表达或过度表 达的酶），或通过暴露于特定条件或药剂实现。作为PDCM的一部分的连接基团或聚合物可 变得不稳定且自身从活性化合物解离。PDCM中存在的键可能不稳定且在所需条件下释放活 性化合物。
[0010] 共价连接亲水性聚合物聚（乙二醇）（缩写为PEG)是一种增加许多生物活性分子 (包括蛋白质、肽和尤其疏水性分子）的水溶性、生物可用性、增加其血清半衰期、增加其治 疗半衰期、调节其免疫原性、调节其生物活性或延长其循环时间的方法。PEG已被广泛用于 医药品或人工移植物以及生物相容性、无毒和无免疫原性极为重要的其它应用中。为了使 PEG的所需特性最大化，与生物活性分子连接的PEG聚合物的总分子量和水合状态必须足 够高，以便赋予通常与PEG聚合物连接相关的有利特征，如增加的水溶性和循环半衰期，同 时不会不利地影响母体分子的生物活性。
[0011] PEG衍生物时常经由反应性化学官能团（如赖氨酸、半胱氨酸和组氨酸残基、N端 和碳水化合物部分）与生物活性分子连接。蛋白质和其它分子通常具有有限数目的反应性 位点可供聚合物连接。通常，最适于经由聚合物连接而修饰的位点在受体结合中起到重要 作用，并且是保留分子的生物活性所必需的。因此，聚合物链与生物活性分子上此类反应性 位点的不加选择的连接常常导致经聚合物修饰的分子的生物活性明显减少或甚至全部丧 失。R.克拉克（R-Clark)等人，(19%).牛物化学杂志（T_ Biol. Chem. )，271:21969-21977。 为形成聚合物分子量足够赋予目标分子所需优势的结合物，【背景技术】方法通常涉及大量聚 合物臂与分子的无规连接，由此增加母体分子的生物活性减少或甚至完全丧失的风险。
[0012] 形成用于将PEG衍生物与蛋白质连接的基因座的反应性位点受蛋白质结构支配。 蛋白质（包括酶）是由各种a -氨基酸序列构成，这些序列的一般结构为H2N一CHR一C00H。 一个氨基酸的 a氨基部分（H2N--)与相邻氨基酸的羧基部分（一C00H)连接形成酰胺键， 其可表示为一(NH--CHR-CO) n--,其中下标"n"可等于数百或数千。R表示的片段可含有 关于蛋白质生物活性和连接PEG衍生物的反应性位点。
[0013] 举例来说，在氨基酸赖氨酸的情况下，在e位置以及a位置中存在一NH2部分。 e -NH2在碱性pH条件下自由反应。用PEG进行蛋白质衍生化领域中的很多技术都是针对 开发用于连接蛋白质中存在的赖氨酸残基的 e--NH2部分的PEG衍生物。"用于先进聚乙 二醇化技术的聚乙二醇和衍生物（Polyethylene Glycol and Derivatives for Advanced PEGylation)"，奈克塔分子工程目录（Nektar Molecular Engineering Catalog) ,2003,第 I-17页。然而，这些PEG衍生物都具有共有的局限性，即，无法将其选择性地安装于蛋白质 表面上存在的常见的多种赖氨酸残基上。在赖氨酸残基对于蛋白质活性极为重要（例如存 在于酶活性位点中）的情况下，或在赖氨酸残基对于介导蛋白质与其它生物分子的相互作 用起作用的情况下，如在受体结合位点的情况下，这将会成为显著的局限性。
[0014] 用于蛋白质聚乙二醇化的现有方法的第二同样重要的新增问题在于：除所需反应 之外，PEG衍生物可经历与残基的不合需要的副反应。组氨酸含有结构以--N(H)--表示的 反应性亚氨基部分，而许多与S-NH 2反应的化学反应性物质也可与一N(H)-反应。类似 地，氨基酸半胱氨酸的侧链带有游离硫氢基，结构上表示为-SH。在一些情况下，针对赖氨 酸e--NH 2基团的PEG衍生物还与半胱氨酸、组氨酸或其它残基反应。这可产生经PEG衍 生化的生物活性分子的复杂不均匀混合物，并且有破坏作为目标的生物活性分子活性的风 险。需要开发出这样的PEG衍生物，其允许在蛋白质内的单一位点引入化学官能团，随后使 一或多种PEG聚合物能够在蛋白质表面上明确界定且可预测的特定位点与生物活性分子 选择性偶联。
[0015] 除赖氨酸残基外，此项技术中还曾就开发靶向其它氨基酸侧链（包括半胱氨酸、 组氨酸和N端）的活性PEG试剂进行了大量尝试。例如，参看以引用的方式并入本文中的 美国专利第6, 610, 281号，以及"用于先进聚乙二醇化技术的聚乙二醇和衍生物"，奈克塔 分子工程目录，2003,第1-17页。可以使用定点诱变和此项技术中已知的其它技术，将半 胱氨酸残基位点选择性地引入蛋白质结构中，并且可使由此得到的游离硫氢基部分与具有 硫醇反应性官能团的PEG衍生物反应。但这种方法比较麻烦，因为引入游离硫氢基会使所 得蛋白质的表达、折叠和稳定性变得复杂。因此，需要具有一种将化学官能团引入生物活性 分子中的方式，其能使一或多种PEG聚合物与蛋白质选择性偶联，同时还与硫氢基以及蛋 白质中常见的其它化学官能团相容（即，不会与之发生不当副反应）。
[0016] 从此项技术的抽样（sampling)中可以了解到，所开发的用于连接蛋白质侧链，尤 其赖氨酸氨基酸侧链上的一NH 2部分和半胱氨酸侧链上的-SH部分的许多此类衍生物都证 实在其合成和使用方面存在问题。一些衍生物与蛋白质形成不稳定键，这些键将经历水解， 并因此分解、降解，或者另外在水性环境（例如血流）中不稳定。一些衍生物可形成较为稳 定的键，但会在形成键之前经历水解，这意味着PEG衍生物上的反应性基团可能会在连接 蛋白质之前就失活。一些衍生物略带毒性，因此不太适于体内使用。一些衍生物反应过慢 而无法实际使用。一些衍生物会因连接到负责蛋白质活性的位点而导致蛋白质活性丧失。 -些衍生物对其将连接的位点不具特异性，这也会导致丧失所需活性以及缺乏结果的可再 现性。为克服与用聚（乙二醇）部分修饰蛋白质相关的挑战，己开发出更稳定（例如，美国 专利6, 602, 498,其以引用的方式并入本文中）或与分子和表面上的硫醇部分选择性反应 (例如，美国专利6,610, 2S1，其以引用的方式并入本文中）的PEG衍生物。此项技术中无 疑需要在生理环境中具化学惰性，而只有在需要的情况下才选择性反应形成稳定化学键的 PEG衍生物。
[0017]近来，在蛋白质科学中已报导一种全新的技术，其有望克服与蛋白质的 位点特异性修饰相关的许多局限性。具体点说，已将新的组分加入到原核生物 大肠杆菌（Escherichia coli，E_coli)(例如 L?王（L. Wang)等人，(2001),科 学（Science)292:498-500)和真核生物酿酒酵母菌（Sacchromyces cerevisia， S. cerevisiae)(例如J.秦（J. Chin)等人，科学301 :964-7 (2003))的蛋白质生物合 成机器中，使得所述机器能够在体内将非基因编码氨基酸并入蛋白质中。已经使用此 方法将多种具有新颖化学、物理或生物学特性的新氨基酸，包括光亲和标记和可光异 构化氨基酸、光交联氨基酸（参见例如秦J.W. (Chin, J.W.)等人(2002)美国国家科 学院院刊，99:11020-11024 ;和秦J. W.等人，（2002)聿围化学学会杂志(LAm. Chem. D 124:9〇26-9027)、酮氨基酸、含有重原子的氨基酸和糖基化氨基酸有效地且高保真 地并入大肠杆菌中和酵母中响应于琥珀密码子（TAG)的蛋白质中。参见例如J.W.秦 (J_ ff. Chin)等人，（2002),美国化学学会杂志（Tournal of the American Chemical Society) 124:9026-9027 ： L W.真和 P. G.舒尔茨(P. G. Schultz), (2002),化学牛物化 学（ChemBioChem) 3 (11) :1135-1137 ;J.W?秦等人，(2002).美国国家科学院院刊（PMS United States of America)99:11020-11024 :和 L 王和 P. G.舒尔茨，(2002),化学诵讯 (Chem. Comm.), 1:1-11〇所有参考文献都以全文引用的方式并入本文中。这些研究已证实， 有可能选择性地以常规方式引入未见于蛋白质中、对可见于20种常见的基因编码氨基酸 中的所有官能团具化学惰性且可用于有效选择性反应而形成稳定共价键的化学官能团，如 酮基、炔基和叠氮部分。
[0018] 将非基因编码的氨基酸并入到蛋白质中的能力允许引入可提供天然存在的官能 团（如赖氨酸的S-NH2、半胱氨酸的硫氢基-SH、组氨酸的亚氨基等）的有价值的替代物 的化学官能团。已知某些化学官能团对见于2〇种常见的基因编码氨基酸中的官能团是惰 性的但完全且有效地反应以形成稳定的键。例如此项技术中已知，叠氮基和乙炔基在催化 量铜存在下，可在水性条件中进行胡伊斯根（Huisgen) [3+2]环加成反应。例如，参见托尔 诺（Tornoe)等人，(2002)有机化学杂志（L Org. Chem.)67:3057-3064 :和眾坜坧丰平夫 (Rostovtsev)等人，(2002)应用化学国际版（Angew. Chem. Int. Ed. )41:25%-%叫-举例 来说，通过将叠氮部分引入蛋白质结构中，能够并入对见于蛋白质中的胺、硫氢基、羧酸、羟 基呈化学惰性但也与乙炔部分平稳并有效地反应以形成环加成产物的官能团。重要的是， 在不存在乙炔部分的情况下，叠氮基在其它蛋白质侧链存在下且在生理条件下保持化学惰 性，而且不发生反应。
[0019] 本发明尤其解决与PDCM的活性和制造相关的问题并且还解决生物学或药理学特 性改良的I3DCM的制造。
【发明内容】
[0020]本发明提供含有前药的分子（PDCM)，其包含一或多个含有一或多个非天然编码氨 基酸的多肽。在一些实施例中，PDCM是具有通式A-L-B的化合物，其中：A代表包含一或多 个非天然编码氨基酸的多肽；L代表连接基团或聚合物；且B代表可分离的分子。在一些实 施例中，I 5DCM是具有通式A: :B的化合物，其中：A代表包含一或多个非天然编码氨基酸的多 肽；"：："代表B的官能团与A中存在的非天然氨基酸之间的键；且B代表可分离的分子。在 一些实施例中，PDCM的多肽组分包含完整抗体重链。在一些实施例中，roCM的多肽组分包 含完整抗体轻链。在一些实施例中，PDCM的多肽组分包含抗体轻链的可变区。在一些实施 例中，PDCM的多肽组分包含抗体重链的可变区。在一些实施例中，Pdcm的多肽组分包含抗 体轻链的至少一个CDR。在一些实施例中，PDCM的多肽组分包含抗体重链的至少一个CDR。 在一些实施例中，PDCM的多肽组分包含轻链的至少一个CDR和重链的至少一个CDR。在一 些实施例中，PDCM的多肽组分包含Fab。在一些实施例中，PDCM的多肽组分包含两个或两 个以上Fab'。在一些实施例中，PDCM的多肽组分包含scFv。在一些实施例中，PDCM的多 肽组分包含两个或两个以上scFv。在一些实施例中，PDCM的多肽组分包含微抗体。在一些 实施例中，PDCM的多肽组分包含两个或两个以上微抗体。在一些实施例中，ToCM的多肽组 分包含双功能抗体。在一些实施例中，PDCM的多肽组分包含两个或两个以上双功能抗体。 在一些实施例中，I 3DCM的多肽组分包含轻链的可变区和重链的可变区。在一些实施例中， H)CM的多肽组分包含完整轻链和完整重链。在一些实施例中，PDCM的多肽组分包含一或多 个Fc域或其部分。在一些实施例中，PDCM的多肽组分包含以上实施例中的任一者的组合。 在一些实施例中，PDCM包含以上实施例中的任一者的同型二聚物、异质二聚物、同型多聚物 或异质多聚物。
[0021] rocM的多肽组分可为任何长度的多肽，包括（但不限于）源于胰高血糖素基因的 多肽，如GLP-1、T_ 2〇多肽和肽YY肽，其包含一或多个非天然编码氨基酸。本发明可使用 具有治疗活性的任何多肽、片段、类似物或其变异体。已提供可用于本发明的多肽的大量实 例。然而，所提供的清单并非穷举性的且不以任何方式限制可用于本发明的多肽的数目或 类型。因此，从任何多肽（包括新颖多肽）制造的任何多肽和/或片段、类似物和变异体可 根据本发明修饰且以治疗方式使用。
[0022] 在一些实施例中，非天然编码氨基酸用连接基团连接于水溶性聚合物。在一些实 施例中，非天然编码氨基酸用可生物降解的连接基团或前药连接于水溶性聚合物。在一些 实施例中，非天然编码氨基酸连接于酰基部分或酰基链。在一些实施例中，非天然编码氨基 酸利用连接基团连接于酰基部分或酰基链。在一些实施例中，非天然编码氨基酸利用聚合 物、聚（乙二醇）连接基团、另一分子或前药连接于酰基部分或酰基链。在一些实施例中， 非天然编码氨基酸连接于血清白蛋白。在一些实施例中，非天然编码氨基酸利用连接基团、 聚合物、另一分子或前药连接于血清白蛋白。在一些实施例中，连接基团是前药。在一些实 施例中,连接基团为两次裂解（dual cleavage)的前药，其中第1步骤为如白蛋白的分子的 控制释放并且第2步骤为释放连接基团或其部分的第二次裂解。在一些实施例中，非天然 编码氨基酸用连接基团连接于生物活性分子。在一些实施例中，非天然编码氨基酸用可生 物降解的连接基团或前药连接于生物活性分子。
[0023] 在一些实施例中，PDCM的多肽组分包含一或多个翻译后修饰。在一些实施例中， PDCM的多肽组分连接于连接基团、聚合物或生物活性分子。在一些实施例中，PDCM的多肽 组分连接于双官能聚合物、双官能连接基团或至少一个其它分子。在一些实施例中，包含非 天然编码氨基酸的roCM的多肽组分连接于一或多个也可包含非天然编码氨基酸的其它多 肽。
[0024] 在一些实施例中，非天然编码氨基酸连接于连接基团、聚合物、水溶性聚合物、分 子或直接连接于前药组分。在一些实施例中，水溶性聚合物包含聚（乙二醇）部分。在- 些实施例中，聚（乙二醇）分子是双官能聚合物。在一些实施例中，双官能聚合物连接于第 二多肽。
[0025] 在一些实施例中，PDCM的多肽组分包含至少两个与包含聚（乙二醇）部分或生物 活性分子的水溶性聚合物连接的氨基酸。在一些实施例中，至少-个氨基酸是非天然编码 氨基酸。
[0026] 在一些实施例中，PDCM包含多肽,所述多肽至少含有利用双官能连接基团连接于 分子的非天然编码氣基酸。双官能连接基团可在每一端处具有相同或不同的反应性基团。 与多肽或与分子形成的键在某些条件下可能是可降解或不稳定的。 PDCM的活性化合物可在 包括（但不限于）酸性PH值、酶的存在和活性、福射、生理条件等的条件下释放。连接基团 可具有广泛范围的分子量或分子长度。较大或较小分子量的连接基团可用于提供多肽与所 连接实体之间的所需空间关系或构象。具有较长或较短分子长度的连接基团也可用于提供 多肽与所连接实体之间的所需空间或柔性。类似地，可利用具有特定形状或构象的连接基 团在PDCM到达其目标之前或之后赋予多肽或所连接实体以特定形状或构象。对多肽与所 连接实体之间的空间关系的此优化可为分子提供新的经调节的或所需特性。
[0027] 在一些实施例中，PDCM的多肽组分包含在与无取代、添加或缺失的PDCM的相应多 肽组分的亲和力相比时调节PDCM的多肽组分对抗原、其目标或结合蛋白的亲和力的取代、 添加或缺失。在一些实施例中， PDCM的多肽组分包含在与无取代、添加或缺失的PDCM的相 应多肽组分的稳定性相比时提高I 3DCM的多肽组分的稳定性的取代、添加或缺失。在一些实 施例中，PDCM的多肽组分包含在与无取代、添加或缺失的PDCM的相应多肽组分的免疫原性 相比时调节PDCM的多肽组分的免疫原性的取代、添加或缺失。在一些实施例中，PDCM的多 肽组分包含在与无取代、添加或缺失的I 3DCM的相应多肽组分的血清半衰期或循环时间相 比时调节rocM的多肽组分的血清半衰期或循环时间的取代、添加或缺失。
[0028] 在一些实施例中，PDCM的多肽组分包含在与无取代、添加或缺失的TOCM的相应 多肽组分相比时提高PDCM的相应多肽组分的水溶性的取代、添加或缺失。在一些实施例 中，PDCM的多肽组分包含在与无取代、添加或缺失的PDCM的相应多肽组分的可溶性相比时 提高宿主细胞中产生的rocM的多肽组分的可溶性的取代、添加或缺失。在一些实施例中， PDCM的多肽组分包含在与无取代、添加或缺失的I 3DCM的相应多肽组分的表达或合成相比 时提高宿主细胞中PDCM的多肽组分的表达或提高体外合成的取代、添加或缺失。在一些实 施例中，PDCM的多肽组分包含在与无取代、添加或缺失的PDCM的相应多肽组分的蛋白酶抗 性相比时提高PDCM的多肽组分的蛋白酶抗性的取代、添加或缺失。在一些实施例中，TOCM 的多肽组分包含在与无取代、添加或缺失的rocM的相应多肽组分的蛋白酶抗性相比时降 低PDCM的多肽组分的蛋白酶抗性的取代、添加或缺失。
[0029] 本发明的TOCM的特征可不同于其单独多肽组分的特征。可改变的特征包括（但 不限于）对抗原、目标或结合蛋白的亲和力；稳定性；免疫原性；血清半衰期；循环时间；水 溶性；在宿主细胞中的表达；蛋白酶抗性；和定位在特定部位处的能力。
[0030] 在一些实施例中，PDCM的多肽组分中的氨基酸取代可以天然存在或非天然存在的 氨基酸进行，其限制条件为至少一个取代是以非天然编码氨基酸进行。
[0031] 在一些实施例中，并入PDCM的多肽组分中的非天然编码氨基酸残基包含羰基、乙 酰基、氨氧基、肼基、酰肼基、氨基脲基、叠氮基或炔基。在一些实施例中，非天然编码氨基酸 包含胺基。
[0032] 在一些实施例中，非天然编码氨基酸包含羰基。在一些实施例中，非天然编码氨基 酸具有以下结构：
[0033]
【权利要求】
1. 一种具有通式A-L-B的化合物，其中：A代表包含一或多个非天然编码氨基酸的多 肽；L代表连接基团或聚合物；且B代表可分离的分子。
2. 根据权利要求2所述的化合物，其中A-L-B的一或多个组分在L水解之后变得有活 性。
3. 根据权利要求3所述的化合物，其中变得有活性的所述A-L-B的组分选自由以下组 成的群组：A、B或（A以及B)。
4. 根据权利要求2所述的化合物，其中连接基团L在生理条件下水解。
5. 根据权利要求2所述的化合物，其中所述连接基团L以酶促方式裂解。
6. 根据权利要求2所述的化合物，其中所述连接基团L利用酸性pH值水解。
7. 根据权利要求2所述的化合物，其中所述连接基团L利用辐射水解。
8. 根据权利要求2所述的化合物，其中所述连接基团L在目标部位处水解。
9. 根据权利要求1所述的化合物，其中所述可分离的分子B选自由以下组成的群组： 生物活性部分和生物惰性部分。
10. -种具有通式A::B的化合物，其中：A代表包含一或多个非天然编码氨基酸的多 肽；"：："代表B的官能团与A中存在的非天然氨基酸之间的键；且B代表可分离的分子。
11. 根据权利要求10所述的化合物，其中A-: :B的一或多个组分在"：："水解之后变得 有活性。
12. 根据权利要求11所述的化合物，其中变得有活性的所述A: :B的组分选自由以下组 成的群组：A、B或（A以及B)。
13. 根据权利要求11所述的化合物，其中"：："在生理条件下水解。
14. 根据权利要求11所述的化合物，其中"：："利用酸性pH值水解。
15. 根据权利要求11所述的化合物，其中"：："利用辐射水解。
16. 根据权利要求11所述的化合物，其中"：："在目标部位处水解。
17. 根据权利要求10所述的化合物，其中所述可分离的分子B选自由以下组成的群组： 生物活性部分和生物惰性部分。
【文档编号】A61K39/00GK104244989SQ201380021600
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2013年2月28日 优先权日:2012年2月29日
【发明者】苗振伟, 周豪崇, 布鲁斯·E.·基梅尔 申请人:Ambrx公司