一种藏边大黄有效成分的提取方法及其用途
【专利摘要】本发明公开了一种藏边大黄有效成分的提取方法及其用途。包括清洗、筛选、打浆、酶解、过滤、浸提、均质、干燥、筛分、灭菌等步骤。本发明采用酶法提取藏边大黄中的多种有效成份，更好地保留其生物活性，使藏边大黄抑真菌、收敛、止泻、降低血脂和轻度致泻等作用更有效地、充分地保留；本发明酶法提取藏边大黄中的各种有效成分使有效成分更多地提取出来，减少高温提取对功能性成分的破坏，更好地发挥藏边大黄的有益功效。本发明提取方法采用复合酶法提取藏边大黄中的有效成分，缩短了提取时间，提高了藏边大黄提取物的得率。
【专利说明】一种藏边大黄有效成分的提取方法及其用途
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物有效成分提取方法及其提取物的用途【技术领域】，特别是涉及一种 藏边大黄有效成分的提取方法及其用途。
【背景技术】
[0002] 藏边大黄系寥科大黄属波叶组植物藏边大黄RheumemodiWall的根与根莖，味酸、 苦，性寒；主要分布在西藏中东部、青海、四川、云南等省区，多为野生，西藏部分地区有种 植；藏、蒙医用于治疗胃肠炎、肾炎，外用止血、治疮、消炎、愈伤口等。藏边大黄的化学成 分主要有蒽醌类、二苯乙烯类和鞣质类化合物。其中，二苯乙烯类化合物含量较高，特别是 Piceatannol- 4' 一0 - 0 -D-吡喃葡萄糖苷（藏黄苷A，PGP)的含量平均达7.5%， 具有抗氧化、改善脑功能、改善心血管、降血脂和降血糖等作用。
[0003] 藏边大黄含有丰富的蒽醌类化合物，如大黄素、大黄素甲醚和大黄酚，其具有明显 的抗菌消炎、免疫调节、抗衰老以及抗肿瘤等作用。
[0004] 藏边大黄中含有丰富的芪类化合物，目前有文献报道其具有较好的降血糖作用， 已成为研究热点。芪类（Stilbene)是具有二苯乙烯母核或其聚合物的一类物质总称，它具 有广泛的生物活性，除早已知道的抗菌作用，近年来又发现有降血脂，降血糖，保肝、扩张毛 细血管改善微循环、扩张冠状血管及降压等作用。藏边大黄中含有较多的鞣质，有多种药理 功效，能改善肾功能、抗病毒、抗凝血，能治疗精神病、治疗胃出血等疾病。
[0005] 藏边大黄根及根茎含总蒽醌5. 94%，其中以大黄素、芦荟大黄素及大黄酚为甙元 的结合型蒽醌为5. 66%，游离型仅为0.28%，还含上大黄甙及多量鞣质。藏医用于治疗胃 肠炎症，外用止血消炎。据卫生部药检所动物实验表明，本品无下泄作用。
[0006] 藏边大黄与大黄（又称正品大黄、生品大黄或掌叶组大黄，是指药典收载的植物 来源为掌叶大黄、药用大黄和唐古特大黄的干燥根茎和根）具有明显不同药性，后者主要 药效成分为蒽醌类化合物，包括有强烈致泄作用的双蒽醌，如有番泻苷A、B、C、D、E、F等； 前者含有土大黄音、波叶大黄多糖、大黄酚、大黄素甲醚与微量的大黄素，并含少量的芦荟 大黄素，有抑真菌、收敛、止泻、降低血脂和轻度致泻等作用，其中所含的波叶大黄多糖有抗 癌、抗辐射、抗炎、抗凝血、抗血栓、强心、降低血压、降低血脂、降低血糖、增强机体免疫功能 和核酸、蛋白质合成及抗衰老的作用，其与正品大黄显著不同的是所含蒽醌中没有强烈致 泄作用的双蒽醌类。
[0007] 目前，藏边大黄主要用于保健品及一些医药原材料中。对于藏边大黄的加工方法 均存在有不同程度的问题，如中国专利申请201110124226. 9-种藏边大黄提取物及其制 备方法提供了一种寥科大黄属波叶组植物藏边大黄的提取物，是藏边大黄依次经乙醇渗漉 浸提与乙醇洗脱的提取物。此方法的提取时间长，提取率低，有效成分比例及吸收降低等问 题。
【发明内容】
[0008] 本发明根据现有技术的不足公开了一种藏边大黄有效成分的提取方法及其用途。 本发明的目的是提供一种资源高效利用，提取率高，提取时间短，提取成分易被人体吸收， 采用生物酶解方法提取藏边大黄中有效成分的方法及其提取物的应用。
[0009] 本发明通过以下技术方案实现：
[0010] 藏边大黄有效成分的提取方法，依次包括以下步骤：
[0011] 清洗：筛选无损坏的新鲜藏边大黄，用水清洗干净；
[0012] 打浆：将清洗干净的藏边大黄与水按1:1的重量比例混合打浆，使藏边大黄的颗 粒大小均匀；
[0013] 酶解：
[0014] (1)在上述打浆得到的原料中加入65IU/100ml、2万U/g的纤维素酶，温度控制在 40?55°C，PH控制在3. 5?6. 5,酶解时间1?2h;
[0015] (2)将上述⑴中的酶解液制成16?17°B6的淀粉浆，调pH至6?7,加入按 原料重量计0. 2 %CaCl2，将a-淀粉酶调浆后加入淀粉浆中，每克原料用酶6u，搅拌，60? 70°C液化 20min;
[0016] (3)将上述（2)中的酶解液冷却至40?50°C左右，加入120u/g复合酶，用量在 0? 2?0? 8g/kg，PH控制在5. 0?8. 0,酶解1?2h;
[0017] 过滤：将酶解后的酶解液过滤；
[0018] 浸提：将过滤后的滤渣用纯水浸提；
[0019] 均质：将浸提液用均质机均匀混合；
[0020] 干燥：将过滤后的酶解溶液和浸提得到的浸提液通过高速离心喷雾干燥机干燥；
[0021] 筛分：将干燥后的藏边大黄提取物通过80-120目的筛孔进行分筛，使颗粒大小均 匀；
[0022] 灭菌：将筛分后的藏边大黄提取物粉末进行灭菌，形成成品。
[0023] 所述过滤是将酶解后的酶解液经过硅藻土过滤器过滤，过滤条件包括过滤面积 15. 9m2,理论流量以白酒为单位13-15T/H。
[0024] 所述浸提是将过滤后的滤渣进行浸提处理，在原料中加入体积比为1-1. 5倍的纯 水，混合搅拌20-40分钟，然后通过离心机离心，得到浸提溶液，重复两次，收集浸提酶解溶 液；将浸提后的干渣部分加入体积比为4-6倍、浓度为50 %的乙醇溶液浸提，浸提时控制温 度50-70°C，时间1-2小时，不断搅拌，干渣浸提2次，离心收集浸提液。
[0025] 所述干燥是将过滤后的酶解溶液通过高速离心喷雾干燥机进行干燥，干燥条件： 入口温度140-350°C，出口温度80-90°C，水份蒸发量25kg/h，雾化器转速25000rmp，得到藏 边大黄提取物；另外由干渣浸提得到的浸提液，通过喷雾干燥进行干燥，回收乙醇溶液，得 到的乙醇浸提物。
[0026] 本发明上述提取方法中利用的各种酶：纤维素酶、a-淀粉酶、复合酶均有市售。
[0027] 本发明上述藏边大黄有效成分提取方法得到的提取物可用于医药、食品、日化产 品的制备，各制成品可充分利用提取物具有的抑真菌、收敛、止泻、降低血脂，还有抗癌、抗 辐射、抗炎、抗凝血、抗血栓、强心、降低血压、降低血脂、降低血糖、增强机体免疫功能和核 酸、蛋白质合成及抗衰老的作用。
[0028]本发明有益性：本发明采用酶法提取藏边大黄中的多种有效成份，更好地保留其 生物活性，使藏边大黄抑真菌、收敛、止泻、降低血脂和轻度致泻等作用更有效地、充分地保 留；本发明酶法提取藏边大黄中的各种有效成分，使有效成分更多地提取出来，减少高温提 取对功能性成分的破坏，更好地发挥藏边大黄的有益功效。本发明提取方法采用复合酶法 提取藏边大黄中的有效成分，缩短了提取时间，提高了藏边大黄提取物的得率。
【专利附图】
【附图说明】
[0029] 图1是本发明提取工艺流程示意图；
[0030] 图2是本发明检测蒽醌类化合物测定的标准曲线；
[0031] 图3是本发明检测例二苯乙烯类化合物测定的标准曲线；
[0032] 图4是本发明鞣质类化合物测定的标准曲线。
【具体实施方式】
[0033] 下面通过实施例对本发明进行进一步的描述，实施例只用于对本发明进行进一步 的说明，但不能理解为对本发明保护范围的限制，本领域的技术人员可以根据上述本发明 的内容作出一些非本质的改进和调整属于本发明保护的范围。
[0034] 实施例1
[0035] 藏边大黄有效成分的提取方法
[0036] 本方法从资源高效利用，提取率高，提取时间短，提取成分易被人体吸收等方面考 虑，采用生物酶解的方法提取藏边大黄中的有效成分。
[0037] 结合图1。
[0038] 1、清洗：筛选无损坏的新鲜藏边大黄，清洗干净；
[0039] 2、打浆：将清洗干净的藏边大黄进行打浆，使藏边大黄的颗粒大小均匀，利于酶解 提取；
[0040] 3、酶解：
[0041] (1)在原料中加入65IU/100ml2万U/g的纤维素酶，温度控制在40?55°C，PH控 制在3. 5?6. 5,酶解时间1?2h;
[0042] (2)将上述⑴中的酶解液制成16?17°B6的淀粉浆，调pH至6?7,加入按 原料重量计0. 2%CaCl2，将a-淀粉酶调浆后加入淀粉浆中，每克原料用酶6u，搅拌，60? 70°C液化20min左右；
[0043] (3)将上述（2)中的酶解液冷却至40?50°C左右，加入120u/g复合酶，用量在 0? 2?0? 8g/kg，PH控制在5. 0?8. 0,酶解1?2h;
[0044] 4、过滤：将酶解后的酶解液经过硅藻土过滤器过滤，过滤条件：过滤面积15. 9m2， 理论流量以白酒为单位13-15T/H;
[0045] 5、浸提：将过滤后的滤渣进行浸提处理，在原料中加入体积比为1-1. 5倍的纯水 溶液，混合搅拌20-40分钟，然后通过离心机离心，分离水解溶液，重复两次，收集酶解溶 液。再收集干渣部分，然后加入4-6倍浓度为50%的乙醇溶液浸提干渣部分，浸提时控制温 度50-70°C，搅拌浸提时间1-2小时，反复将干渣浸提2次，以便更多的提出藏边大黄中的有 效成分，最后离心收集浸提液；
[0046]6、均质：将步骤4中滤液和步骤5中浸提液通过均质机，使物料能更均匀的相互混 合；
[0047] 7、干燥：将过滤后的酶解溶液通过高速离心喷雾干燥机进行干燥，干燥条件：入 口温度140-350°C，出口温度80-90°C，水份蒸发量25kg/h，雾化器转速25000rmp，得到藏边 大黄提取物；另外由干渣浸提得到的浸提液，也通过喷雾干燥进行干燥，回收乙醇溶液，得 到的乙醇浸提物用于其他食品的开发；
[0048] 8、筛分：将干燥后的藏边大黄提取物通过80-120目的筛孔进行分筛，使颗粒大小 均匀；
[0049] 9、灭菌成品：将筛分后的藏边大黄提取物粉末进行灭菌，形成成品。
[0050] 实施例2
[0051] 提取方法对比实验
[0052] 将物料平均分成6组，分别为①、②、③、④、⑤、⑥，每组10kg，①、②、③组以本发 明方法提取，具体实施方法按实施例1试验步骤进行；④、⑤、⑥为一般提取法，以物料：水 =1:8的比例进行提取，提取8小时，过滤，干燥，称量。
[0053] -般水提法和本发明酶法提取藏边大黄有效成分的得率如下表1 :
[0054] 表1 :六组藏边大黄的提取对比实验
[0055]
【权利要求】
1. 一种藏边大黄有效成分的提取方法，其特征是依次包括以下步骤： 清洗：筛选无损坏的新鲜藏边大黄，用水清洗干净； 打浆：将清洗干净的藏边大黄与水按1:1的重量比例混合打浆，使藏边大黄的颗粒大 小均匀； 酶解： (1) 在上述打浆得到的原料中加入65IU/100ml、2万U/g的纤维素酶，温度控制在40? 55°C，PH控制在3. 5?6. 5,酶解时间1?2h ; (2) 将上述（1)中的酶解液制成16?17° Β?的淀粉浆，调pH至6?7,加入按原料重 量计0. 2% CaCl2，将α -淀粉酶调浆后加入淀粉浆中，每克原料用酶6u，搅拌，60?70°C液 化 20min ; (3) 将上述（2)中的酶解液冷却至40?50°C左右，加入120u/g复合酶，用量在0· 2? 0· 8g/kg，PH控制在5. 0?8. 0,酶解1?2h ; 过滤：将酶解后的酶解液过滤； 浸提：将过滤后的滤渣用纯水浸提； 均质：将浸提液用均质机均匀混合； 干燥：将过滤后的酶解溶液和浸提得到的浸提液通过高速离心喷雾干燥机干燥； 筛分：将干燥后的藏边大黄提取物通过80-120目的筛孔进行分筛，使颗粒大小均匀； 灭菌：将筛分后的藏边大黄提取物粉末进行灭菌，形成成品。
2. 根据权利要求1所述的藏边大黄有效成分的提取方法，其特征是：所述过滤是将 酶解后的酶解液经过硅藻土过滤器过滤，过滤条件为过滤面积15.9m 2,流量以白酒为单位 13-15吨/小时。
3. 根据权利要求1所述的藏边大黄有效成分的提取方法，其特征是：所述浸提是将过 滤后的滤渣进行浸提处理，在原料中加入体积比为1-1. 5倍的纯水，混合搅拌20-40分钟， 然后通过离心机离心，得到浸提溶液，重复两次，收集浸提酶解溶液；将浸提后的干渣部分 加入体积比为4-6倍、浓度为50%的乙醇溶液浸提，浸提时控制温度50-70°C，时间1-2小 时，不断搅拌，干渣浸提2次，离心收集浸提液。
4. 根据权利要求1所述的藏边大黄有效成分的提取方法，其特征是：所述干燥是将过 滤后的酶解溶液通过高速离心喷雾干燥机进行干燥，干燥条件：入口温度140_350°C，出口 温度80-90°C，水份蒸发量25kg/h，雾化器转速25000rmp，得到藏边大黄提取物；另外由干 渣浸提得到的浸提液，通过喷雾干燥进行干燥，回收乙醇溶液，得到的乙醇浸提物。
5. -种权利要求1至4所述的藏边大黄有效成分提取方法得到的提取物的用途，其特 征是：所述提取方法得到的提取物在医药、食品、日化产品中的用途。
【文档编号】A61P3/06GK104257767SQ201410482713
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年9月19日 优先权日:2014年9月19日
【发明者】蒋川湘 申请人:西藏藏真堂藏药产业有限公司