茶黄素的制备方法
【专利摘要】本发明提供了一种茶黄素的制备方法，包括以下步骤：1)将茶叶粉碎，按料液比为1:5～10的比例加水混合，装入发酵罐中，加入氯化铁溶液至浓度为1.5～2mol/L，再加入盐酸溶液调节pH值至2～2.5，在温度28～29℃、供氧13.0～15.0ml/min的条件下发酵55～60min，得到发酵液；2)将发酵液离心、过滤，取滤液调pH值至中性，上AB-8大孔树脂柱层析，分别用10～30v％乙醇和70～85v％乙醇洗脱，收集70～85v％乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得到茶黄素。本方法制得的茶黄素纯度大，且茶黄素中茶黄素-3，3’-没食子酸酯含量高，药理功效好。
【专利说明】茶黄素的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于植物活性成分提取【技术领域】，具体涉及一种茶黄素的制备方法。
【背景技术】
[0002]茶黄素(TFs)是多酚类物质氧化聚合形成的一类具有苯并卓酚酮结构的植物酚性色素的总称，主要由茶黄素(TF)、茶黄素-3-没食子酸酯(TF-3-G)、茶黄素-3’ -没食子酸酯(TF-3’ -G)以及茶黄素_3，3’ -没食子酸酯(TFDG)组成。茶黄素(TFs)具有多种与人体健康有关的潜在功能，如抗氧化、防治心血管疾病、降血脂、抗癌防癌等功效，而以TFDG的药理功效最高，TF-3-G、TF-3’ -G功效次之，而TF功效最弱。目前，现有的茶黄素的制备方法包括溶剂提取法、体外酶促氧化法和体外化学氧化法，溶剂提取法需要耗费大量的有机溶剂，且提取效率极低，十分不经济，体外酶促氧化法则存在多酚氧化酶容易失活且不易重复利用的难题，而体外化学氧化法缺乏底物专一性，副产品复杂，产品纯度不高。不仅如此，以上三种制备方法共同的缺点就是提取得到的茶黄素一般以非酯型茶黄素为主(TF)，酯型茶黄素含量次之，双酯型茶黄素(TFDG)最低，一定程度上降低了茶黄素的药理功效。
【发明内容】
[0003]本发明要解决的技术问题是提供一种茶黄素的制备方法，该方法能显著提高茶黄素中茶黄素_3，3’ -没食子酸酯的含量。
[0004]本发明提供的技术方案是提供茶黄素的制备方法，包括以下步骤:
[0005]I)将茶叶粉碎，按料液比为1: 5?10的比例加水混合，装入发酵罐中，加入氯化铁溶液至浓度为1.5?2mol/L，再加入盐酸溶液调节pH值至2?2.5，在温度28?29°C、供氧13.0?15.0ml/min的条件下发酵55?60min,得到发酵液；
[0006]2)将发酵液离心、过滤，取滤液调pH值至中性，上AB-8大孔树脂柱层析，分别用10?30v%乙醇和70?85v%乙醇洗脱，收集70?85v%乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得到茶黄素。
[0007]作为优选，上述步骤I)中，所述温度为28.8V。
[0008]作为优选，上述步骤I)中，调节pH值至2.4。
[0009]作为优选，上述步骤I)中，供氧为14.2ml/min。
[0010]作为优选，上述步骤I)中，步骤I)中，盐酸溶液浓度为I?2mol/L。
[0011]作为优选，上述步骤2)中，采用I?2mol/L的氢氧化钠溶液调滤液pH值。
[0012]与现有技术相比，本发明在强酸性条件下对茶叶进行体外酸性发酵，茶叶中的儿茶素可大量转化为双酯型茶黄素，大大提高茶黄素_3，3’ -没食子酸酯的含量，从而提高了茶黄素的药理功效，更富经济价值。
【具体实施方式】
[0013]以下具体实施例对本发明作进一步阐述，但不作为对本发明的限定。
[0014]实施例1
[0015]I)将茶叶粉碎，按料液比为1:5的比例加水混合，装入发酵罐中，加入氯化铁溶液至浓度为1.5mol/L，再加入lmol/L的盐酸溶液调节pH值至2，在温度28°C、供氧13.0ml/min的条件下发酵55min,得到发酵液；
[0016]2)将发酵液离心、过滤，取滤液调pH值至中性，上AB-8大孔树脂柱层析，上样流速为0.5BV/h，分别用10v%乙醇和70v%乙醇洗脱，10v%乙醇的洗脱流速为2.5BV/h，洗脱量为5BV ;70V%乙醇洗脱流速为2BV/h，洗脱量为4BV ;收集70v%乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得到茶黄素。经检测，茶黄素的纯度为为56.2%，其中TFDG的含量为35.4%。
[0017]实施例2
[0018]I)将茶叶粉碎，按料液比为1:10的比例加水混合，装入发酵罐中，加入氯化铁溶液至浓度为2mol/L，再加入2mol/L的盐酸溶液调节pH值至2.5，在温度29°C、供氧15.0ml/min的条件下发酵60min,得到发酵液；
[0019]2)将发酵液离心、过滤，取滤液调pH值至中性，上AB-8大孔树脂柱层析，上样流速为0.5BV/h，分别用30v%乙醇和85v%乙醇洗脱，30v%乙醇的洗脱流速为2.5BV/h，洗脱量为5BV ;85V%乙醇洗脱流速为2BV/h，洗脱量为4BV ;收集85v%乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得到茶黄素。经检测，茶黄素的纯度为为53.9%，其中TFDG的含量为33.7%。
[0020]实施例3
[0021]I)将茶叶粉碎，按料液比为1:5的比例加水混合，装入发酵罐中，加入氯化铁溶液至浓度为2mol/L，再加入lmol/L的盐酸溶液调节pH值至2.5，在温度28°C、供氧15.0ml/min的条件下发酵55min,得到发酵液；
[0022]2)将发酵液离心、过滤，取滤液调pH值至中性，上AB-8大孔树脂柱层析，上样流速为0.5BV/h，分别用30v%乙醇和70v%乙醇洗脱，30v%乙醇的洗脱流速为2.5BV/h，洗脱量为5BV ;70V%乙醇洗脱流速为2BV/h，洗脱量为4BV ;收集70v%乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得到茶黄素。经检测，茶黄素的纯度为为55.8%，其中TFDG的含量为34.8%。
[0023]实施例4
[0024]I)将茶叶粉碎，按料液比为1:8的比例加水混合，装入发酵罐中，加入氯化铁溶液至浓度为1.8mol/L，再加入lmol/L的盐酸溶液调节pH值至2.4，在温度28.8°C、供氧14.2ml/min的条件下发酵58min,得到发酵液；
[0025]2)将发酵液离心、过滤，取滤液调pH值至中性，上AB-8大孔树脂柱层析，上样流速为0.5BV/h，分别用20v%乙醇和75v%乙醇洗脱，20v%乙醇的洗脱流速为2.5BV/h，洗脱量为5BV ;75V%乙醇洗脱流速为2BV/h，洗脱量为4BV ;收集75v%乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得到茶黄素。经检测，茶黄素的纯度为为55.2%，其中TFDG的含量为40.5%。
【权利要求】
1.茶黄素的制备方法，其特征在于:包括以下步骤: 1)将茶叶粉碎，按料液比为1:5?10的比例加水混合，装入发酵罐中，加入氯化铁溶液至浓度为1.5?2mol/L，再加入盐酸溶液调节pH值至2?2.5，在温度28?29°C、供氧13.0?15.0ml/min的条件下发酵55?60min,得到发酵液； 2)将发酵液离心、过滤，取滤液调pH值至中性，上AB-8大孔树脂柱层析，分别用10?30ν%乙醇和70?85ν%乙醇洗脱，收集70?85ν%乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得到茶黄素。
2.根据权利要求1所述的茶黄素的制备方法，其特征在于:步骤I)中，所述温度为28.8。。。
3.根据权利要求1所述的茶黄素的制备方法，其特征在于:步骤I)中，调节pH值至2.4。
4.根据权利要求1所述的茶黄素的制备方法，其特征在于:步骤I)中，供氧为14.2ml/mir1
5.根据权利要求1?4中任一项所述的茶黄素的制备方法，其特征在于:步骤I)中，盐酸溶液浓度为I?2mol/L。
6.根据权利要求1所述的茶黄素的制备方法，其特征在于:步骤2)中，采用I?2mol/L的氢氧化钠溶液调滤液pH值。
【文档编号】A61K36/82GK104383125SQ201410715179
【公开日】2015年3月4日 申请日期:2014年11月28日 优先权日:2014年11月28日
【发明者】周冠旻 申请人:桂林市和胤祥新型材料有限公司