一种抗单纯疱疹1型病毒的中药组合物及其制备方法
【专利摘要】一种抗单纯疱疹1型病毒的中药组合物，其特征在于，由以下重量配比的原药材制备而成：甘青青兰10-30份，蓝花荆芥10-25份，栀子5-20份，甘草5-15份，大黄5-15份，穿心莲5-15份。本发明提供的抗单纯疱疹1型病毒的中药组合物抗单纯疱疹病毒活性强，并且经毒性实验结果表明，本发明提供的有效剂量较小，毒性小，无不良反应，使用更安全，并且原材料易得，成本较低，可持续开发，应用前景广泛。
【专利说明】一种抗单纯疱疹1型病毒的中药组合物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药组合物及其制造【技术领域】，特别是涉及一种抗单纯疱疹1型病毒 的中药组合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 单纯疱疹I型病毒是广泛存在于人体的一种病毒，发展中国家90%以上的人血清 HSV-I抗体阳性，HSV-I还具有复制周期短，致细胞病变作用强，在细胞培养中容易扩散，在 神经节中常形成潜伏感染等特点。HSV-I主要感染口、眼、唇的皮肤和黏膜以及中枢神经系 统，可造成口唇疱疹、脑炎、角膜结膜炎等疾病。目前临床常用的治疗药物主要是无环鸟苷 (ACV)类药物，这些药物的共同特点是容易易产生交叉耐药性，毒副作用大并且价格比较 高。中药是中国乃至世界的医学宝库，中药治疗病毒性感染的疾病已经有几千年的历史。中 药抗病毒疗效显著，抗病毒谱广，全身用药无明显组织细胞毒性、致畸、致突变、免疫抑制或 骨髓抑制，一般无耐药性产生，对持续性和整和性感染有效。因此，很有必要在现有技术的 基础之上，寻找开发一种抗单纯疱疹1型病毒作用强、不良反应小的本发明提供的中药 组合物及其制备方法。
【发明内容】
[0003] 为了解决上述技术问题，本发明提供了一种抗单纯疱疹1型病毒的中药组合物及 其制备方法。
[0004] 本发明的技术方案如下： 一种抗单纯疱疹1型病毒的中药组合物，其特征在于，由以下重量配比的原药材制备 而成：甘青青兰1〇_30份，蓝花荆芥10-25份，桅子5-20份，甘草5-15份，大黄5-15份，穿 心莲5-15份。
[0005] 进一步，本发明提供的抗单纯疱疹1型病毒的中药组合物最佳为按以下重量配比 的原药材制备而成：甘青青兰20份，蓝花荆芥15份，桅子15份，甘草10份，大黄10份，穿 心莲10份。
[0006] 按重量配比取上述各味原药材，取甘青青兰、蓝花荆芥和桅子，粉碎至40-80目， 加入10倍体积的95%乙醇，在60°C水浴中回流提取2小时，抽滤，滤渣重复处理2次，合并 滤液，将滤液浓缩、干燥、粉碎得醇提物；取甘草、大黄和穿心莲，粉碎至40-80目，加入8倍 量水提取两次，每次2小时，合并滤液，将滤液浓缩、干燥、粉碎得水提物；将以上得到的醇 提物和水提物混合均匀既得所述中药组合物。
[0007] 本发明提供的抗单纯疱疹1型病毒的中药组合物具有以下优点： 抗单纯疱疹病毒活性强，并且经毒性实验结果表明，本发明提供的有效剂量较小，毒性 小，无不良反应，使用更安全，并且原材料易得，成本较低，可持续开发，应用前景广泛。
[0008]
【具体实施方式】
[0009] 以下通过实施例和实验例对本发明作进一步说明。
[0010] 实施例1 取甘青青兰20克，蓝花荆芥15克，桅子15克，甘草10克，大黄10克，穿心莲10克；将 上述甘青青兰、蓝花荆芥和桅子，粉碎至60目，加入10倍体积的95%乙醇，在60°C水浴中 回流提取2小时，抽滤，滤渣重复处理2次，合并滤液，将滤液浓缩、干燥、粉碎得醇提物；将 上述甘草、大黄和穿心莲，粉碎至60目，加入8倍量水提取两次，每次2小时，合并滤液，将 滤液浓缩、干燥、粉碎得水提物；将以上得到的醇提物和水提物混合均匀既得所述中药组合 物。
[0011] 实验例1 1、试剂与仪器 DMEM培养基，除菌过滤后用碳酸氢钠调pH至7. 0?7. 2 ;新生牛血清，杭州四季青，经 56°C，30min灭活补体，除菌分装；维持液为含2%小牛血清的DMEM培养基；96孔培养板；C02 培养箱；超净工作台；相差显微镜。
[0012] 病毒和细胞株单纯疱疹病毒I型毒株。Vero细胞用含10%胎牛血清的DMEM培养 基连续传代3次保持对数生长期备用。
[0013] 2.实验药物 将实验例1中得到的中药组合物用DMSO稀释为lOOPg/^L贮存液备用。
[0014] 3.病毒滴度测量 将活化好的毒株作10倍系列稀释，10-1?10-9，常规方法感染致密单层Vero细胞， 设8个复孔，同时设正常细胞对照，37°C、5%C02培养3天，观察细胞病变效应（CPE)情况， CPE程度可分为从+?++++，经MTT法计算TCID50。结果为：10-7. 5,即接种滴度为10-7. 5 的病毒每孔0. lmL，可使50%细胞发生明显病变。实验用病毒浓度为100TCID50 4. 细胞毒性测定 将消化后的Vero细胞加入96孔板中，每孔I. 5 X 105个细胞。待细胞长成致密单层后， 弃去生长液，用维持液将藏药提取物倍比稀释成8个浓度，起始浓度为50(^g/mL，每个浓度 10〇μ?，设4个复孔，同时设立正常细胞对照组，置于37°C、5%C02培养48h，每天观察细胞的 变化，并计算药物的最大无毒浓度TC0。倒置显微镜下观察细胞形态，药物的细胞毒性表现 为细胞肿胀，增殖缓慢，胞质颗粒增多，折光性差，边界模糊、破碎，但未见脱落坏死[18]。以 细胞无死亡，无病变的最高药物稀释浓度为对Vero细胞的最大无毒浓度TCO 5. 药效学实验方法和结果 Vero细胞在96孔板培养至单层，弃生长液，用维持液分别将样品稀释成8个系列浓度 (从样品的最大无毒浓度开始)，每孔加入含样品维持液和病毒稀释液各5〇μ?，每个浓度设4 个复孔，同时设病毒对照组和正常细胞对照组，置5% C02孵箱中37°C培养36?48h，其间 置倒置显微镜下观察细胞病变的情况。待病毒对照组的细胞病变达到75 %以上而正常细 胞对照组正常时，观察并记录各孔的CPE。CPE的记录方法为：无细胞病变为?25% 细胞出现病变为" + " ；26%?50%细胞病变为"++" ；51 %?75%细胞病变为"+++" ；76%? 100%的细胞病变为"++++"。结果如下表所示。
[0015] 中药组合物抗单纯疱疹I塑病毒结果
【权利要求】
1. 一种抗单纯疱疹1型病毒的中药组合物，其特征在于，由以下重量配比的原药材制 备而成：甘青青兰1〇_30份，蓝花荆芥10-25份，桅子5-20份，甘草5-15份，大黄5-15份， 穿心莲5-15份。
2. 如权利要求1所述的抗单纯疱疹1型病毒的中药组合物，其特征在于，由以下重量配 比的原药材制备而成：甘青青兰20份，蓝花荆芥15份，桅子15份，甘草10份，大黄10份， 穿心莲10份。
3. 如权利要求1或2所述的抗单纯疱疹1型病毒的中药组合物的制备方法，其特征在 于：按重量配比取所述各味原药材，取甘青青兰、蓝花荆芥和桅子，粉碎至40-80目，加入10 倍体积的95%乙醇，在60°C水浴中回流提取2小时，抽滤，滤渣重复处理2次，合并滤液，将 滤液浓缩、干燥、粉碎得醇提物；取甘草、大黄和穿心莲，粉碎至40-80目，加入8倍量水提取 两次，每次2小时，合并滤液，将滤液浓缩、干燥、粉碎得水提物；将以上得到的醇提物和水 提物混合均匀既得所述中药组合物。
【文档编号】A61K36/744GK104367664SQ201410721750
【公开日】2015年2月25日 申请日期:2014年12月3日 优先权日:2014年12月3日
【发明者】周同永 申请人:西宁意格知识产权咨询服务有限公司