本发明涉及牙膏组合物，该组合物包含：在碳酸钙基料中的高含量的氯化钠，和锌源。本发明还提供治疗口腔病症例如齿龈炎的方法。
背景技术：
齿龈疾病影响着全世界的大量人群，并且是牙齿缺失的主要原因。齿龈疾病通常始于齿龈炎，在齿龈炎中细菌以牙斑形式累积，从而导致齿龈变得发炎。牙斑是一种形成在牙齿上并且包含细菌和细菌副产物的堆积物的软质沉积物。斑块坚韧地粘着在不规则或不连续位点处，例如在粗糙牙垢表面上、在齿龈线处等。在本领域中已表明多种多样的抗菌剂会阻滞斑块形成。例如，诸如三氯生(triclosan)的卤化羟基二苯基醚化合物因它们的抗菌活性而为本领域所熟知，并且已在口腔组合物中用于对抗由于口腔中的细菌堆积而导致的斑块形成。然而，许多人更加喜欢使用天然产品来提供抗菌活性。因此，需要使用具有抗菌活性的天然产品来治疗齿龈炎的方法。
锌是一种熟知的用于牙膏组合物的抗微生物剂。在有效浓度下，已证实，锌抑制细菌糖酵解和细菌蛋白酶活性。锌也是熟知的人类健康的必需矿物质，并且据报道有助于强化牙釉质并促进细胞修复。遗憾的是，常规的牙膏配方通常需要高浓度的锌(例如，2重量％或更多)才能实现功效。在此浓度下，锌向组合物赋予明显的涩味。因此，需要不存在常规组合物的缺点的改进的抗菌牙膏配方。
技术实现要素：
除非另外指示，否则术语“％”或“百分比”在与本文所述的牙膏组合物结合使用时意指指示的成分在牙膏组合物中的重量百分比。
在一些实施方案中，本发明提供治疗和/或预防口腔疾病或病症例如齿龈炎或口臭的方法，该方法包括使对其有需要的患者的口腔表面例如牙齿和齿龈与牙膏组合物接触，以牙膏组合物的重量计，该牙膏组合物在包含碳酸钙和保湿剂的牙膏基料中包含至少5％的氯化钠。在一些另外的实施方案中，用于该方法的牙膏包含5％至15％的氯化钠，例如8％至12％的氯化钠。在一些实施方案中，该牙膏包含约10％的氯化钠。
在一些实施方案中，以牙膏组合物的重量计，该牙膏包含量为10％至45％、或25％至40％、或30％至35％、或约32％的天然碳酸钙。
在一些实施方案中，该牙膏还包含锌盐，例如柠檬酸锌。例如，在包含5％至15％氯化钠的基于天然碳酸钙的组合物中，牙膏可包含量为约0.1至1％，例如0.1至0.5％，或例如0.2％的锌盐，例如柠檬酸锌。
在另外的实施方案中，本发明提供一种牙膏，其包含：(a)天然碳酸钙、(b)氯化钠和(c)抗微生物有效量的锌盐。在一些另外的实施方案中，以牙膏组合物的重量计，天然碳酸钙以10％至45％、或25％至40％、或30％至35％、或约32％的量存在。在一些另外的实施方案中，氯化钙以5％至15％的量存在，例如8％至12％的氯化钙，例如约10％。在一些另外的实施方案中，抗微生物锌盐以0.1至1％，例如0.1至0.5％，或例如0.2％的量存在。在一些另外的实施方案中，锌盐为柠檬酸锌。
在另外的实施方案中，前述实施方案中任一个的牙膏还包含一种或多种保湿剂。在一些实施方案中，保湿剂是山梨糖醇，以牙膏组合物的重量计，其以16％至26％、或18％至24％、或约21％的量存在。
在一些实施方案中，前述实施方案中任一个的牙膏还包含一种或多种清洁剂或表面活性剂。在一些实施方案中，牙膏还包含月桂基硫酸钠和泊洛沙姆(poloxamer)，例如而不限于泊洛沙姆407。在一些实施方案中，以牙膏组合物的重量计，月桂基硫酸钠以1％至3％，例如约2％的量存在，并且泊洛沙姆407以0.5％至2％，例如约1％的量存在。
在一些实施方案中，前述实施方案中任一个的牙膏还包含一种或多种粘合剂。在一些实施方案中，粘合剂包含羧甲基纤维素或由羧甲基纤维素组成，例如而不限于cmc2000s，以牙膏组合物的重量计，其量为0.5％至1.2％、或0.7％至1％、或例如0.8％至0.9％。
在一些实施方案中，前述实施方案中任一个的牙膏还包含氟化物源，例如而不限于单氟磷酸盐(mfp)、氟化钠或氟化亚锡。住一些实施方案中，氟化物源是mfp，以牙膏组合物的重量计，其以0.5％至1％、或0.6％至0.9％例如0.7％至0.8％的量存在。
在一些实施方案中，前述实施方案中任一个的牙膏还包含增稠剂，例如而不限于增稠剂二氧化硅，例如以牙膏组合物的重量计，其量为1％至3％，例如约2％。
在一些实施方案中，前述实施方案中任一个的牙膏还包含一种或多种选自甜味剂、调味剂和着色剂的佐剂。在一些实施方案中，以牙膏组合物的重量计，牙膏包含量为0.5％至3.0％、0.8％至1.6％或约1.2％的调味剂。
在一些实施方案中，前述实施方案中任一个的牙膏包含5％至15％的氯化钠，例如8％至12％的氯化钠；30％至35％的碳酸钙；16％至26％的山梨糖醇；1％至3％的sls；和0.5％至2％的泊洛沙姆407。在一些这样的实施方案中，牙膏还包含0.5％至1.0％的mfp和0.5％至1.2％的cmc2000s。在一些另外的这样的实施方案中，牙膏还包含例如量为1％至3％的增稠剂，例如增稠剂二氧化硅；和例如量为0.5％至2.0％的调味剂。
在一些实施方案中，前述实施方案中任一个的牙膏包含约32％的碳酸钙、约21％的山梨糖醇、约10％的氯化钠、约2％的增稠剂二氧化硅、约2％的月桂基硫酸钠、约1％的泊洛沙姆407、0.8％-0.9％的cmc2000s和0.7％-0.8％的单氟磷酸盐。
具体实施方式
根据本发明已发现，高含量的天然成分氯化钠可在牙膏中充当有效的抗菌剂而用于治疗齿龈炎。抗菌活性通过防止或阻滞储存期间和使用中牙膏中的细菌生长而提供显著的益处。在一些实施方案中，本发明提供用于治疗和/或预防口腔病症例如齿龈炎的牙膏，该牙膏具有用基于山梨糖醇的保湿剂体系连同碳酸钙研磨剂一起配制的非常高含量的氯化钠。
本发明提供用于治疗和/或预防口腔病症例如齿龈炎或口臭的牙膏，该牙膏包含至少约5％的氯化钠连同研磨剂和保湿剂。在一些实施方案中，按牙膏的重量计，该牙膏包含5％至15％的氯化钠，例如8％至12％的氯化钠。在一些实施方案中，该牙膏包含约10％的氯化钠。在不希望受任何理论束缚下，据信根据本发明包含高含量的氯化钠会向组合物赋予抗菌性质，从而在储存期间使细菌生长减至最少和在使用期间的抗菌功效方面提供益处。
本发明还提供进一步包含锌盐例如柠檬酸锌的如上所述的牙膏组合物。本发明人已出人意料地发现，以远低于在传统基于二氧化硅的牙膏组合物中的有效浓度的浓度，锌在高盐、基于天然碳酸钙的牙膏组合物中是一种有效的抗微生物强化剂。例如，在包含5％至15％氯化钠的基于天然碳酸钙的组合物中，柠檬酸锌以约0.1至1％，例如0.1至0.5％，或例如0.2％的量是有效的。相比之下，常规的含锌牙膏组合物通常采用1％至2或更高浓度的锌盐，从而导致令人不悦的涩味。
前述实施方案中任一个的牙膏还包含研磨剂，例如选自研磨剂二氧化硅和/或钙盐，例如碳酸钙和/或磷酸钙研磨剂，例如磷酸三钙(ca3(po4)2)、羟磷灰石(ca10(po4)6(oh)2)或磷酸二钙二水合物(cahpo4·2h2o，有时也在本文中称为dical)或焦磷酸钙。在一个特定实施方案中，研磨剂包含碳酸钙或由碳酸钙构成。已知可用于洁牙剂的任何碳酸钙均适于包含在本发明的牙膏中。在一些实施方案中，碳酸钙是天然碳酸钙(ncc)，优选地处于其中99.5％或更多的粒子通过325目(44微米)筛的粒度或粒度分布。碳酸钙在用于治疗齿龈炎的牙膏中的量为例如10％至60％，例如10％至45％。在一些实施方案中，碳酸钙在用于治疗指引眼的牙膏中的量为25％至40％，或30％至35％。在一些实施方案中，碳酸钙以约32％的量存在。
前述实施方案中任一个的牙膏也可含有氟化物源-即对口腔的护理和卫生具有有益作用的含有氟化物的化合物，所述有益作用例如减弱在酸中的牙釉质溶解性和避免牙齿被蛀蚀。合适的氟化物源的实例包括氟化钠、氟化亚锡、氟化钾、氟化亚锡钾(snfz-kf)、氟锆酸钾、六氟锡酸钠、氯氟化亚锡和单氟磷酸钠(mfp)。当存在时，氟化物源将以足以供给约25ppm至约25,000ppm，通常至少约500ppm，例如约500至约2000ppm，例如约1000至约1600ppm，例如约1450ppm的氟化物离子的量提供氟化物离子。氟化物的适当含量将取决于特定应用。供一般消费者使用的牙膏将典型地具有约1000至约1500ppm，其中儿童牙膏略低。供专业应用的洁牙剂或涂布剂可具有多达约5,000或甚至约25,000ppm的氟化物。以解离或释放氟化物或含氟离子的这些物质的重量计，量将取决于平衡离子的分子量以及特定应用，但适当地可以有效但无毒的量存在，通常在以重量计0.1至2％的范围内。在一些实施方案中，使用选自氟化钠、氟化亚锡、单氟磷酸钠及其混合物的氟化物源，例如本发明的牙膏可包含有效量的单氟磷酸钠。在一些实施方案中，以重量计，氟化物源是量为0.5％至1.0％、或0.6％至0.9％例如0.7％至0.8％的单氟磷酸钠。
前述实施方案中任一个的牙膏还包含保湿剂，即，一种或多种保湿剂。合适的保湿剂的实例包括多羟基醇(多元醇)，诸如丙二醇、甘油、山梨糖醇、木糖醇或低分子量聚乙二醇(peg)。在多种实施方案中，保湿剂可防止糊剂或凝胶组合物在暴露于空气后硬化，并且也充当甜味剂。在一些实施方案中，以牙膏组合物的重量计，保湿剂体系主要或仅仅由例如量为16％至26％、或18％至24％或约21％的山梨糖醇组成。然而，也预期存在仍然提供满意的牙膏性质的其他保湿剂。
前述实施方案中任一个的牙膏还包含一种或多种清洁剂或表面活性剂。适用于本发明的表面活性剂包括不限于：阴离子、非离子和两性表面活性剂。表面活性剂可例如用于提供增强的配方稳定性，帮助通过洗净来清洁口腔表面，以及例如在刷牙期间增加搅动后组合物的起泡。合适的阴离子表面活性剂包括例如水溶性c8-20烷基硫酸盐、c8-20脂肪酸的磺化甘油单酯、肌氨酸盐和牛磺酸盐；例如月桂基硫酸钠、椰子甘油单酯磺酸钠、月桂基肌氨酸钠、月桂基羟乙基磺酸钠、月桂基聚氧乙烯醚羧酸钠和十二烷基苯磺酸钠及其混合物。合适的非离子表面活性剂包括例如泊洛沙姆、聚氧化乙烯脱水山梨醇酯、脂肪醇乙氧化物、烷基酚乙氧化物、叔胺氧化物、叔膦氧化物、二烷基亚砜及其混合物。在一个实施方案中，牙膏包含例如量为1％至3％或约2％的月桂基硫酸钠。牙膏也可或替代地含有一种或多种非极性表面活性剂，例如乙二醇和丙二醇的聚合物和共聚物，例如泊洛沙姆，即由侧接有两条聚氧化乙烯(聚(氧化乙烯))亲水链的中心聚氧化丙烯(聚(氧化丙烯))疏水链组成的非离子三嵌段共聚物。在一些实施方案中，两个peg嵌段的大致长度是平均约50-150个重复单元，例如约100个重复单元，而丙二醇嵌段的大致长度是平均约25-75个重复单元，例如约50-60个重复单元。在一个实施方案中，泊洛沙姆是泊洛沙姆407，也根据basf商标名普洛尼克(pluronic)f127而得知，例如量为0.5％至2％，例如约1％。例如，在某些实施方案中，用于治疗齿龈炎的牙膏可包含月桂基硫酸钠和诸如泊洛沙姆407的泊洛沙姆两者。
在一些实施方案中，前述实施方案中任一个的牙膏还包含一种或多种粘合剂和/或增稠剂。粘合剂可包括聚合物，包括聚乙二醇、多糖(例如纤维素衍生物，例如羧甲基纤维素；或多糖胶状物，例如黄原胶或角叉菜胶)。例如聚丙烯酸系凝胶的酸性聚合物可以它们的游离酸或部分或完全中和的水溶性碱金属(例如钾和钠)或铵盐的形式提供；并且包括合成的阴离子聚合聚羧酸系物，诸如马来酸酐或马来酸与另一可聚合的烯键式不饱和单体的1∶4至4∶1共聚物，优选是具有约30,000至约1,000,000，最优选约300,000至约800,000的分子量(m.w.)的甲基乙烯基醚/马来酸酐。在一些实施方案中，粘合剂衍生自纤维素。在一些实施方案中，粘合剂包含纤维素醚或由纤维素醚组成，例如羧甲基纤维素，例如cmc2000s，其量为0.5％至1.2％、或0.7％至1.0％、或0.8％至0.9％。
在一些实施方案中，前述实施方案中任一个的牙膏还包含一种或多种增稠剂，其有助于获得适当的组合物粘度。通常，增稠剂以1％至5％的量存在于组合物中。增稠剂的实例包括但不限于也改变粘度的上述粘合剂，例如羧基乙烯基聚合物、角叉菜胶(也称为爱尔兰藓(irishmoss)，更具体地讲卡拉胶(iota-carrageenan))、纤维素聚合物(诸如羟乙基纤维素、羧甲基纤维素(羧甲纤维素)及其盐(例如羧甲纤维素钠))、大然胶状物(诸如刺梧桐树胶、黄原胶、阿拉伯胶和黄蓍胶)、胶体硅酸铝镁、胶体二氧化硅及其混合物。一种增稠剂是例如量为1％至3％的增稠剂二氧化硅。
如将为本领域技术人员所显而易知，本发明的一些组分可执行多种功能，并目在本文中将某一化合物鉴定为具有一种功能无意排除它在特定组合物中用于达成其他功能。例如，诸如羧甲基纤维素的化合物可充当粘合剂，但也具有保湿和增稠性质，或诸如泊洛沙姆的化合物尽管在上文被鉴定为非离子表面活性剂，但也具有保湿和增稠性质。
也应了解，配方中的化合物可天然地起反应、解离和/或彼此形成复合物。因此，某些成分可原位形成(例如应了解氯化钠可通过使氢氧化钠与盐酸反应来形成)，并且也可在配方中以不同形式存在(例如与固体盐相对比，就氯化钠被溶解来说，它将天然地解离成单独的钠离子和氯离子)。如本领域中所常见，本发明的组合物依据示例性配方成分米描述，而无意排除产生相同最终组合物的其他成分的组合，或排除所述成分组合的天然反应产物。
在一些实施方案中，前述实施方案中任一个的牙膏包含5％至15％的氯化钠，例如8％至12％的氯化钠；30％至35％的碳酸钙；16％至26％的山梨糖醇；1％至3％的sls；和0.5％至2％的泊洛沙姆407。在一些这样的实施方案中，牙膏还包含0.5％至1.0％的mfp和0.5％至1.2％的cmc2000s。在一些另外的这样的实施方案中，牙膏还包含例如量为1％至3％的增稠剂二氧化硅。
在一个实施方案中，前述实施方案中任一个的牙膏包含约32％的碳酸钙、约21％的山梨糖醇、约10％的氯化钠、约2％的增稠剂二氧化硅、约2％的sls、约1.0％的泊洛沙姆407、0.8％至0.9％的cmc2000s和0.7％至0.8％的mfp。
在上述一些实施方案中，前述实施方案中任一个的牙膏还可以包含一种或多种甜味剂、调味剂和着色剂。可采用任何合适的调味物质或甜味物质。合适的调味组分的实例包括调味油，例如绿薄荷油、胡椒薄荷油、冬青油、丁香油、鼠尾草油、桉树油、马郁兰油、肉桂油、柠檬油和橙油；以及水杨酸甲酯。合适的甜味剂包括蔗糖、乳糖、麦芽糖、木糖醇、环己基氨基磺酸钠、紫苏糖(perillartine)、amp(天冬氨酰基苯基丙氨酸甲酯)、糖精等。适当地，调味剂和甜味剂可各自或共同占口腔护理组合物的约0.1％至5％以上。在一些实施方案中，前述实施方案中任一个的牙膏包含量为约0.5％至约3.0％、约0.8％至约1.6％、或约1.2％的一种或多种调味剂。
各种其他物质可并入本发明的口腔制剂中，诸如增白剂，包括过氧化脲、过氧化钙、二氧化钛、过氧化氢、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)和过氧化氢的复合物；防腐剂；维生素，诸如维生素b6、b12、e和k；硅酮；叶绿素化合物；用于治疗牙过敏的钾盐，诸如硝酸钾；以及抗牙垢剂，诸如三聚磷酸钠以及焦磷酸二碱金属盐和焦磷酸四碱金属盐，诸如焦磷酸二钠和焦磷酸四钠。这些试剂在存在时以不实质上不利地影响所需性质和特征的量并入本发明的组合物中。
一般来讲，前述佐剂中的每一者可通常以多达5％的量并入本发明的牙膏中，前提条件是它们不会不利地影响本发明的非渗色(non-bleeding)条纹化洁牙剂的稳定性和清洁性质。
本发明因此在一个实施方案中提供一种牙膏，例如，用于治疗和/或预防对其有需要的患者中的口腔疾病或病症例如齿龈炎或口臭的牙膏，该牙膏在包含例如碳酸钙研磨剂和保湿剂的牙膏基料中包含至少5％的氯化钠、5％至15％的氯化钠、8％至12％的氯化钠或约10％的氯化钠(组合物1)。
1.1.组合物1，其中研磨剂包含量为10％至45％、25％至40％、30％至35％或约32％的天然碳酸钙。
1.2.组合物1或1.1，还包含量为0.1至1％、0.1至0.5％或约0.2％的锌盐，例如柠檬酸锌。
1.3.任何前述组合物，其中保湿剂包含多元醇，例如山梨糖醇，例如量为16％至26％、或18％至24％或约21％的山梨糖醇。
1.4.任何前述组合物，还包含量为1％至3％或约2％的一种或多种阴离子清洁剂或表面活性剂，例如月桂基硫酸钠；以及量为0.5％至2％或约1％的一种或多种非离子表面活性剂，例如泊洛沙姆，例如泊洛沙姆407。
1.5.任何前述组合物，其中粘合剂包含纤维素衍生物，例如羧甲基纤维素(cmc)，例如具有中聚合度至高聚合度，例如1000至3000，例如约2000，例如呈钠盐形式，例如cmc2000s，其量有效提供所需的粘度，例如0.5％至1.2％、0.7％至1.0％或0.8％至0.9％。
1.6.任何前述组合物，还包含有效量的氟化物离子源；例如量为0.5％至1.0％、或0.7％至0.8％例如约0.76％的单氟磷酸钠(mfp)。
1.7.任何前述组合物，包含：
30％至35％的碳酸钙；
16％至26％的山梨糖醇；
1％至3％的月桂基硫酸钠；
0.5％至2％的泊洛沙姆407；
0.5％至1.0％的单氟磷酸钠；
0.5％至1.2％的cmc；以及
量为1％至3％或约2％的增稠剂二氧化硅。
1.8.具有任何前述组合物的牙膏，还包含一种或多种选自甜味剂、调味剂和着色剂的佐剂，例如包含量为0.5％至3.0％、0.8％至1.6％或约1.2％的调味剂。
1.9.任何前述组合物，包含约32％的碳酸钙、约21％的山梨糖醇、约10％的氯化钠、约2％的增稠剂二氧化硅、约2％的sls、约1.0％的泊洛沙姆407、0.8％至0.9％的cmc和0.7％至0.8％的mfp。
本发明还在另一个实施方案中提供一种用于治疗和/或预防对其有需要的患者中的口腔疾病或病症例如治疗齿龈炎或口臭的方法(方法1)，包括向患者的齿龈施加牙膏，其中该牙膏是根据组合物1或1.1-1.9中任一者的牙膏。例如，其中该牙膏在包含碳酸钙研磨剂和保湿剂的牙膏基料中包含至少5％的氯化钠、5％至15％的氯化钠、8％至12％的氯化钠或约10％的氯化钠。例如，本发明提供了
1.1.方法1，其中研磨剂包含量为10％至45％、25％至40％、30％至35％或约32％的天然碳酸钙。
1.2.方法1或1.1，其中牙膏还包含量为0.1至1％、0.1至0.5％或约02％的锌盐，例如柠檬酸锌。
1.3.任何前述方法，其中保湿剂包含多元醇，例如山梨糖醇，例如量为16％至26％、或18％至24％或约21％的山梨糖醇。
1.4.任何前述方法，其中牙膏还包含量为1％至3％或约2％的一种或多种阴离子清洁剂或表面活性剂，例如月桂基硫酸钠；以及量为0.5％至2％或约1％的一种或多种非离子表面活性剂，例如泊洛沙姆，例如泊洛沙姆407。
1.5.任何前述方法，其中粘合剂包含纤维素衍生物，例如羧甲基纤维素(cmc)，例如具有中聚合度至高聚合度，例如1000至3000，例如约2000，例如呈钠盐形式，例如cmc2000s，其量有效提供所需的粘度，例如0.5％至1.2％、0.7％至1.0％或0.8％至0.9％。
1.6.任何前述方法，其中牙膏还包含有效量的氟化物离子源；例如量为0.5％至1.0％、或0.7％至0.8％例如约0.76％的单氟磷酸钠(mfp)。
1.7.任何前述方法，其中牙膏包含：
30％至35％的碳酸钙；
16％至26％的山梨糖醇；
1％至3％的月桂基硫酸钠；
0.5％至2％的泊洛沙姆407；
0.5％至1.0％的单氟磷酸钠；
0.5％至1.2％的cmc；以及
量为1％至3％或约2％的增稠剂二氧化硅。
1.8.任何前述方法，其中牙膏还包含一种或多种选自甜味剂、调味剂和着色剂的佐剂，例如包含量为0.5％至3.0％、0.8％至1.6％或约1.2％的调味剂。
1.9.任何前述方法，其中牙膏包含约32％的碳酸钙、约21％的山梨糖醇、约10％的氯化钠、约2％的增稠剂二氧化硅、约2％的sls、约1.0％的泊洛沙姆407、0.8％至0.9％的cmc和0.7％至0.8％的mfp。
1.10.任何前述方法，其中牙膏至少每天施加，例如一天一次、两次或三次，直到看见效果，例如经过至少一周，例如至少两周，例如至少一个月的周期。
1.11.任何前述方法，其中口腔疾病或病症为齿龈炎或口臭。
本发明还在另一个实施方案中提供氯化钠在制造用于在根据方法1及其以下任一者的方法中治疗对其有需要的患者中的齿龈炎的牙膏(例如根据组合物1及其以下任一者的牙膏)中的用途。
以下实施例进一步说明本发明的性质，但应了解本发明不限于这些实施例。除非另外指示，否则本文中以及随附权利要求书中提及的所有量和比例都以重量计。
实施例1-微观稳健性测试
微观稳健性测试(mrt)是组合物经受微生物挑战的能力的定量量度。因此，结果是对组合物针对一池微生物的抗微生物功效的评估。
以下十一种微生物被包括在微生物池中：洋葱伯克霍尔德菌(burkholderiacepacia)、阴沟肠杆菌(enterobactercloacae)、大肠杆菌(escherichiacoli)、产酸克雷伯氏菌(klesiellaoxytoca)、肺炎克雷伯氏菌(klebsiellapneumoniae)、粘质沙雷氏菌(serratiamarcescens)、雷氏普罗威登斯菌(providenciarettgeri)、绿胺假单胞菌(pseudomonasaeruginosa)、恶臭假单胞菌(pseudomonasputida)、金黄色葡萄球菌(staphylococcusaureus)和，腐生葡萄球菌(staphylococcussaprophyticus)。
总微生物的溶液水平是107cfu/ml。在60分钟间隔下用107个来自上述微生物池的细菌挑战样品三次。在4、6和24小时之后，测试等分试样以测量细菌水平的对数降低。下表1显示对具有以下组成的本发明的牙膏的抗微生物测试的结果：
碳酸钙32％
水27.9347％
山梨糖醇21％
nacl10％
增稠剂二氧化硅2％
sls2％
调味剂1.2％
泊洛沙姆4071.0％
cmc2000s0.85％
mfp0.76％
和微量成分。
表1
抗微生物测试的结果
表1显示所测试的细菌经证实在4小时内从6.4×107cfu/ml的初始水平有效降低至低于＜10cfu/ml，其中在6小时或24小时接种物中无生长。因此，本发明的高盐含量牙膏具有抗菌能力，并且可抑制多种细菌在牙膏中生长。
实施例2-生物膜缩减测试
方法：从4名健康志愿者采集牙斑，并且一起汇合成接种物。使接种物的o.d与610nm下0.3的吸光度相匹配。使无菌hap圆盘在37℃下在厌氧条件下与1ml无菌人工唾液(具有0.01％蔗糖)和1ml汇合唾液一起在24孔微板中温育24小时。将新鲜制备的处理溶液(1份以上实施例1的牙膏对应于2份无菌蒸馏水)添加至孔中，并且使其与hap圆盘接触10分钟。
移除液相，并且用2ml无菌人工唾液替换。将各对照和测试洁牙剂的圆盘一式三份地处理8天。在2、4和8天的间隔下，无菌收集圆盘，并转移至强度被预先降低一半的巯基乙醇酸盐培养基中。将各圆盘的100ml10-4、10-5和10-6稀释物一式两份地涂铺在新霉素万占霉素(nv)琼脂上以测定总革兰氏阴性厌氧菌。使用无菌涂布器涂布各板表面，并且在37℃下厌氧温育72小时，随后对菌落计数。使用液相对整个研究周期监测ph。用于测试中的样品的组成显示于下表2a和表2b中。样品1-5包含具有二氧化硅基料以及1.0％zno和0.5％柠檬酸锌而非氯化钠的相同配方骨架。这些样品也含有不同水平的精油：
样品1：具有1.0％zno和0.5％柠檬酸锌的二氧化硅基料配方，具有完全精油混
合物水平。
样品2：具有1.0％zno和0.5％柠檬酸锌的二氧化硅基料配方，具有半数精油混
合物水平。
样品3：具有1.0％zno和0.5％柠檬酸锌的二氧化硅基料配方，具有完全精油混
合物水平但半数麝香草酚(thymo1)水平。
样品4：具有1.0％zno和0.5％柠檬酸锌的二氧化硅基料配方，具有完全精油但
半数麝香草酚和桉树油水平。
样品5：具有1.0％zno和0.5％柠檬酸锌的二氧化硅基料配方，无精油。
样品6：安慰剂，无zno、柠檬酸锌和精油的二氧化硅基料配方。
样品7：具有10％nacl的ncc基料配方(实施例1的配方)
样品8：具有0.58％柠檬酸锌的商业产品
表2a
用于生物膜缩减测试的样品的组成
表2b
用于生物膜缩减测试的样品的组成(续)
表3
生物膜缩减测试的结果
由表3中的数据可以看出的是，据发现活性物的功效按以下顺序排序(从最有效至不太有效)：
a.样品7：具有10％nacl的ncc基料配方
b.样品1：具有1.0％zno和0.5％柠檬酸锌的二氧化硅基料配方，具有完全精油混合物水平
c.样品2：具有1.0％zno和0.5％柠檬酸锌的二氧化硅基料配方，具有半数精油混合物水平
d.样品3：具有1.0％zno和0.5％柠檬酸锌的二氧化硅基料配方，具有完全精油混合物水平但半数麝香草酚(thymol)水平
e.样品4：具有1.0％zno和05％柠檬酸锌的二氧化硅基料配方，具有完全精油但半数麝香草酚和桉树油水平。
f.样品5：具有1.0％zno和05％柠檬酸锌的二氧化硅基料配方，无精油
g.样品8：具有0.58％柠檬酸锌的商业产品
h.样品6：安慰剂，无zno、柠檬酸锌和精油的二氧化硅基料配方
结果表明与二氧化硅研磨剂基料相对比，具有10％氯化钠与天然碳酸钙基料组合的牙膏关于生物膜缩减所具有的功效优干多种包含多种抗菌剂的基于二氧化硅的牙膏。该生物膜缩减对应于在定期使用牙膏时牙斑量的降低，由此提供齿龈炎的发生率和严重性的降低。
实施例3-体外抗菌功效研究
方法：选择四种样品牙膏组合物用于研究
样品1：具有10％氯化钠和0.2％柠檬酸锌的ncc基料
样品2：具有10％氯化钠的ncc基料
样品3：具有10％氯化钠和0.2％柠檬酸锌的二氧化硅基料
样品4：具有10％氯化钠的二氧化硅基料
在无菌水中以5倍系列稀释测试样品。将4.5ml样品用于每个时间间隔。将接种物在所选培养基中配制并调至0.5麦氏标准(mcfarlandstandard)(粘性放线菌(actinomycetesviscous)atcc43146、口腔链球菌(streptococcusoralis)atcc35037、小韦荣菌(veillonelllaparvula)atcc17745、干酪乳杆菌(lactobacilluscasei)atcc334和具核梭杆菌(fusobacteriumnucleatum)atcc10953)。将各样品和对照用0.5ml配制的培养基接种。在所选的接触时间结束时，将0.5接种样品用移液器吸取到4.5mld/e中和肉汤中。将混合物彻底涡旋。使用d/e肉汤制备各样品的1∶10稀释物。将100μl各稀释物用移液器吸取到无菌血琼脂板上，并使用无菌涂布器涂在整个表面上。将板倒置，在37℃和厌氧条件下温育48-72小时。对于每块板，对菌落计数，以确定所有稀释物的cfu计数，并因而确定各稀释物的平均cfu/ml。然后如下计算减少百分比：对照cfu计数-平均cfu计数/对照cfu计数×100。还计算了对数减少值。
结果：下表汇总所得的结果：
从上文得到的结果，显而易见的是，向ncc/氯化钠牙膏添加0.2％柠檬酸锌将细菌减少效率提高了约13％至35％，具体取决于细菌菌株(对比样品1与样品2)。相比之下，向二氧化硅/氯化钠牙膏添加0.2％柠檬酸锌无明显影响(对比样品3与样品4)。在细菌减少效率方面既无一致的提高也无降低。此外，对比样品1与样品3，显而易见的是，在存在柠檬酸锌的情况下，对于五种所研究菌株中的四种而言，基于ncc的牙膏在细菌减少方面明显比基于二氧化硅的牙膏有效(例如，对于粘性放线菌而言，ncc减少了50.49％，但二氧化硅仅减少了41.00％)。相比之下，对比样品2与样品4，显而易见的是，在不存在柠檬酸锌的情况下，对于五种所研究菌株中的四种而言，基于ncc的牙膏在细菌减少效率方面与基于二氧化硅的牙膏相当(例如，对于粘性放线菌而言，ncc减少了37.96％，二氧化硅减少了39.33％)。
尽管已参照实施方案描述了本发明，但本领域的技术人员将了解，可在不脱离如由随附权利要求书限定的本发明范围的情况下可在其中进行各种修改和变化。