技术领域
本发明涉及天然药物化学技术领域，具体涉及一种神秘果叶提取物及其在制备具有降血糖或降血脂作用的药物或保健品中的应用。
背景技术：
神秘果，其拉丁学名为Synsepalum dulcificum Daniell，是典型热带常绿灌木，
原产地在西非、加纳、刚果一带。20世纪60年代，周恩来总理到西非访问时，
加纳共和国把神秘果作为国礼送给周总理。此后，神秘果开始在我国栽培。
虽然有公开说明神秘果叶子用来泡茶或做菜能调整高血糖、高血压、保护心脏、美颜瘦身、排毒通便、控制尿酸、减轻痛风痛证、且能解酒。但尚无利用中药现代化技术制备有效部位的报道，本领域技术人员对于神秘果叶中的降血糖、降血脂的有效部位以及有效成分还不明确，以及如何制备具有很好降血糖、降血脂效果的有效部位仍需研究探索。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是，为了克服现有技术对神秘果叶有效部位的开发不足，提供一种神秘果叶提取物。该提取物具有非常显著的降血糖以及降血脂作用，可以用于制备具有降血糖或降血脂作用的药物或保健品。
本发明所要解决的上述技术问题，通过以下技术方案予以实现：
一种神秘果叶提取物，采用超临界二氧化碳萃取方法提取得到，所述超临界二氧化碳萃取方法为：将神秘果叶粉碎，置于超临界二氧化碳萃取仪中，控制超临界二氧化碳萃取仪中的压力为20~40兆帕，温度为30~50℃，流速为20~30升/小时，提取时间为1～4 小时。
优选地，所述超临界二氧化碳萃取方法为：将神秘果叶粉碎，置于超临界二氧化碳萃取仪中，控制超临界二氧化碳萃取仪中的压力为35兆帕，温度为48℃，流速为25升/小时，提取时间为2小时。
优选地，所述超临界二氧化碳萃取方法中加入了提携剂。
更优选地，所述提携剂是乙醇。
为了得到具有更好的降血糖以及降血脂效果的有效部位，所述的神秘果叶经超临界二氧化碳萃取方法提取后，再大孔吸附树脂柱层析法富集。
更优选地，所述的大孔吸附树脂柱层析法包含如下步骤：首先将神秘果叶经超临界二氧化碳萃取方法提取后得到的提取物上大孔吸附树脂柱，然后用体积分数为30~50%的乙醇洗脱，再用体积分数为70%~95%的乙醇洗脱，收集体积分数为70%~95%的乙醇洗脱部位，浓缩、干燥即得所述提取物。
最优选地，所述的大孔吸附树脂柱层析法包含如下步骤：首先将神秘果叶经超临界二氧化碳萃取方法提取后得到的提取物上大孔吸附树脂柱，然后用体积分数为45%的乙醇洗脱，再用体积分数为80%的乙醇洗脱，收集体积分数为80%的乙醇洗脱部位，浓缩、干燥即得所述提取物。
上述神秘果叶提取物，在制备具有降血糖或降血脂作用的药物中的应用。
上述神秘果叶提取物，在制备具有降血糖或降血脂作用的保健品中的应用。
有益效果：本发明提供了一种利用中药现代化技术制备得到的一种全新的神秘果叶提取物，实施例中的实验数据显示，其具有非常显著的降血脂以及降血糖作用。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步解释本发明，但实施例对本发明不做任何形式的限定。
实施例1
称取1Kg干燥的神秘果叶粉碎，过60目筛，置于超临界CO2 萃取仪中，控制超临界二氧化碳萃取仪中的压力为35兆帕，温度为48℃，流速为25升/小时，提取时间为2小时，得神秘果叶临界CO2 萃取物80.2g。
实施例2
称取1Kg干燥的神秘果叶粉碎，过60目筛，置于超临界CO2 萃取仪中，控制超临界二氧化碳萃取仪中的压力为35兆帕，温度为48℃，流速为25升/小时，加入体积分数为95%的乙醇作为提携剂，提取时间为2小时，得神秘果叶临界CO2 萃取物89.7g。
实施例3
称取1Kg干燥的神秘果叶粉碎，过60目筛，置于超临界CO2 萃取仪中，控制超临界二氧化碳萃取仪中的压力为40兆帕，温度为50℃，流速为30升/小时，加入体积分数为95%的乙醇作为提携剂，提取时间为2小时，得神秘果叶临界CO2 萃取物84.4g。
实施例4
称取实施例1 中所得的萃取物40g，溶于体积分数为95％的乙醇中，超声波脱气后，加入D101大孔树脂柱中，先用体积分数为45％的乙醇洗脱柱子至流出液无色，再用体积分数为80％的乙醇水溶液洗脱柱子至流出液无色，收集体积分数为80％的乙醇水溶液洗脱所得的流份，浓缩干燥得神秘果叶提取物18.5g。
实施例5
称取实施例1中所得的萃取物40g，溶于体积分数为95％的乙醇中，超声波脱气后，加入D101大孔树脂柱中，先用体积分数为30％的乙醇洗脱柱子至流出液无色，再用体积分数为95％的乙醇水溶液洗脱柱子至流出液无色，收集体积分数为95％的乙醇水溶液洗脱所得的流份，浓缩干燥得神秘果叶提取物29.3g。
实施例6
称取实施例1中所得的萃取物40g，溶于体积分数为95％的乙醇中，超声波脱气后，加入D101大孔树脂柱中，先用体积分数为50％的乙醇洗脱柱子至流出液无色，再用体积分数为70％的乙醇水溶液洗脱柱子至流出液无色，收集体积分数为70％的乙醇水溶液洗脱所得的流份，浓缩干燥得神秘果叶提取物13.7g。
实施例7 降血脂实验
取SD大鼠90只，雌雄各半，分为正常组(喂普通饲料)、高脂饲料组、实验组1（实施例1制备得到的提取物）、实验组2（实施例2制备得到的提取物）、实验组3（实施例3制备得到的提取物）、实验组4（实施例4制备得到的提取物）、实验组5（实施例5制备得到的提取物）、实验组6（实施例6制备得到的提取物） 、阳性对照组（洛伐他汀）每组各为10只，高脂饲料组、实验组、以及阳性对照组喂养高脂饲料，另外实验组同时每天按20mg/kg的量喂相应实施例制备得到的提取物，阳性对照组每天按3mg/kg的量喂洛伐他汀。
按组别喂养各组大鼠，自由饮水，连续给药35天后，处死动物，腹腔静脉取血，测定血脂。用酶法、沉淀法测定在全自动生化分析仪上测定血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量。实验结果如表1所示。
从表1中可以看出，高脂饲料组大鼠血清的TC，TG 和LDL-C 浓度均显著高于正常饲料组(P <0.01)，HDL-C浓度低于正常饲料组 (P <0.05)说明建模成功。
实验组1~3大鼠的血清TC，TG 和LDL-C浓度均明显低于高脂饲料组(P <0.01)；HDL-C的浓度明显高于高脂饲料组(P <0.05)，说明经超临界萃取得到的神秘果叶提取物具有明显的降血脂作用。从表1中还可以看出，实验组4~6大鼠的血清TC，TG 和LDL-C浓度降低得更为明显，与阳性对照药洛伐他汀相当，可以应用与降血压的药物或保健品中。这也说明神秘果叶在经超临界萃取后再通过大孔树脂柱层析技术后得到的神秘果叶提取物的降血脂效果进一步提高，效果更显著。此外，从表1中还可以看出，本发明提取物的用量为20mg/kg，相比提取物来说，用量相当少了，说明本发明提取得到了神秘果叶具有降血脂作用的精华部位。
实施例8 降血糖实验
取80只小鼠(7周龄雄性ICR小鼠)，体重22-25g，除10只作为正常对照组外，其余小鼠均腹腔注射100mg/kg链脲佐菌素溶液，72小时后测血糖值，11.1mmol/L 以上者进行实验，随机分为5组，即：模型组和实验组1（实施例1制备得到的提取物）、实验组2（实施例2制备得到的提取物）、实验组3（实施例3制备得到的提取物）、实验组4（实施例4制备得到的提取物）、实验组5（实施例5制备得到的提取物）、实验组6（实施例6制备得到的提取物）。每组10只，每天灌胃给药1次（实验组每天给药剂量为20mg/kg），连续给药30d，每7d称体重1次，根据体重调整给药量；分别于第10，20，30d 末次灌胃2h后(禁食12h)，小鼠尾部取血测血糖值。正常对照组及模型对照组灌胃给予等量生理盐水(10ml/kg)。实验结果如表2所述：
从表2中可以看出，模型组小鼠与正常对照组相比，血糖水平明显升高，说明链脲佐菌素造成糖尿病小鼠模型成功。实施例1~3制备的提取物在给药第10d后小鼠体内的血糖含量显著降低，在给药后20d和30d后，血糖含量进一步降低。说明实施例1~3制备的提取物具有显著的降血糖效果。实施例4~6所述的提取物是在实施例1~3经二氧化碳超临界萃取的基础上进一步用大孔树脂柱层析技术精制得到的提取物，从表2数据可以看出，其降血糖效果较实施例1~3制备的得到的提取物进一步提高。此外，从表2中还可以看出，本发明提取物的用量为20mg/kg，相比提取物来说，用量相当少了，说明本发明提取得到了神秘果叶具有降血糖作用的精华部位。