本发明属于畜禽用中药领域，具体而言，涉及一种用于新城疫、温和型流感等病毒病治疗的中药发酵液及其制备工艺。
背景技术：
新城疫、温和型流感等是造成影响家禽养殖效益的主要疾病，温和型流感能够引起免疫抑制，引起免疫失败，造成其他疾病的爆发，给广大养殖户带来了巨大的经济损失。
温和型流感没有典型临床症状，主要表现为气管环出血，造成免疫抑制，激发各类感染，新城疫主要表现高热、呼吸困难、下痢和出现神经症状。腺胃乳头肿胀、出血或溃疡，尤以在与食管或肌胃交界处最明显。
中药发酵技术是模拟中药在人体内的消化分解过程，采用现代生物工程技术，在体外建立一个“工业化肠胃系统”，采用的多种益生菌，对中药进行预消化、分解和转化，把大分子的中间物质，分解转化成为能够被直接吸收的有效小分子物质。因此，发酵中药疗效快、效果确切。发酵后的中药经过预消化和转化。彻底解除药物有害毒性，并去除了传统中药汤剂“苦口”的缺陷，口味好转，患者可以长期服用。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供一种抗病毒的发酵液及制备方法。本发明中药发酵液，使用方便，适合在规模化养殖中使用。
为了解决上述技术问题，本发明的技术方案是：一种抗病毒的中药发酵液的原料中药材，包括以下重量份数比的原料药材：钩藤5～10份、黄连5～10份、栀子5～20份、地黄5～10份、陈皮5～15份、连翘叶10～30份、白术5～15份和白扁豆5～15份。
所述抗病毒中药发酵液中各原料药材及其重量份数比优选为：钩藤5份、黄连5份、栀子5份、地黄5份、陈皮5份、连翘叶10份、白术5份和白扁豆5份。
所述抗病毒中药发酵液中各原料药材及其重量份数比还可以优选为：钩藤10份、黄连10份、栀子20份、地黄10份、陈皮15份、连翘叶30份、白术15份和白扁豆15份。。
所述抗病毒中药发酵液中各原料药材及其重量份数比又可以优选为：钩藤7份、黄连8份、栀子12份、地黄7份、陈皮10份、连翘叶20份、白术10份和白扁豆10份。
为了更好的实现上述发明目的，本发明还提供了抗病毒中药发酵液的制备方法，制备方法包括以下步骤：
（1）中药提取步骤：将各原料药材按重量配比投入到中药提取罐，煎煮提取2次；
（2）复合菌种发酵步骤：将所述中药提取步骤中得到中药提取液转移到发酵罐中，接种混合菌种，发酵，得到抗病毒中药发酵液。
其中，所述中药提取步骤包括：将各原料药材按重量份称重后，放置于中药提取罐中，按混合物总重量的6～12倍量加水下浸泡2小时，然后加温至100℃煎煮1～2小时，过滤，得到第一次提取药液；在盛放药渣的中药提取罐中按原料药材总重量的6～10倍量第二次加水，煎煮1～2小时，过滤，得到第二次提取药液，将第二次提取药液与第一次提取药液混合，浓缩至每升含生药0.2kg，过滤，得到中药提取液。
所述复合菌种发酵步骤优选为：将中药提取液转移到发酵罐中，加入酵母膏，葡萄糖，硫酸铵、硫酸镁，酵母膏加入量为中药提取液量的0.05%～0.5%，加入葡萄糖的量为中药提取液量的0.1～0.5%，加入硫酸铵的量为中药提取液量的0.01%～0.1%，硫酸镁的加入量为中药提取液量的0.001%～0.01%，加入氢氧化钙调节ph值至6.0～7.0。加热加入辅料的中药提取液，温度至90℃以上，保持30～60分钟，降低温度至20～37℃，按照中药提取液的1%接种发酵用的混合菌种Ⅰ，搅拌发酵48h～96h，转速为10～30r/min，结束后，接种1%的混合菌种Ⅱ，密封，保持温度20～37℃，厌氧发酵12～36h。发酵结束后，即得中药发酵液。
其中，所述复合菌种发酵步骤中的混合菌种Ⅰ为：米曲霉109～1011个/mL、酿酒酵母107～109个/mL、短小芽孢杆菌109～1011个/mL、凝结芽孢杆菌108～1010个/mL。所述复合菌种发酵步骤中混合菌种Ⅱ为：发酵乳杆菌109～1011个/mL、动物双歧杆菌107～109个/mL。
本发明中药组方采用清热泻火、凉血解毒、健脾祛湿的中医治疗原则，科学组方，调整机体功能，杀灭病毒、降低病毒对机体的损伤，促进采食。本发明中钩藤、黄连作为君药，钩藤清热平肝，黄连清热泻火；栀子、地黄作为臣药，栀子善清三焦之火，加强黄连泻火作用，地黄滋阴生津，防治黄连泻下太过，陈皮、白扁豆、白术具有健脾作用，促进采食增加，提高机体恢复，上述诸药组合，共同起到防治病毒病的作用，且通过发酵技术,改善中药“苦口”的特点，中药发酵液中含有有益菌，改善肠道功能，改善机体抵抗力。
本发明还提供了抗病毒中药发酵液的使用方法，在每吨肉鸡饮水中加入所述中药发酵液3～8L。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
（1）本发明在中药提取技术基础上加入了有益菌的发酵，与中药提取制备的提取液相比，每只鸡中药使用量减少50-70%；
（2）本发明将中药提取液发酵后，提高有效成分含量，与提取液相比，部分有效成分含量提高50%以上；
（3）对新城疫、流感等病毒的防治效果明显，攻毒保护率在80%以上。
具体实施方式
以下通过具体实施例说明本发明，但本发明并不仅仅限定于这些实施例。
实施例1
本实施例的中药发酵液由原料药材组成：钩藤5kg、黄连5kg、栀子5kg、地黄5kg、陈皮5kg、连翘叶10kg、白术5kg和白扁豆5kg。
本实施例的中药发酵液制备方法如下.
（1）制备中药提取液：将钩藤5kg、黄连5kg、栀子5kg、地黄5kg、陈皮5kg、连翘叶10kg、白术5kg和白扁豆5kg，放置于中药提取罐中，煎煮提取2次，合并提取液、浓缩至每升含生药0.2kg，过滤，得到中药提取液。
（2）复合菌种发酵为：将中药提取液转移到发酵罐中，每升中药提取液中加入酵母膏5g，葡萄糖5g，硫酸铵1g，硫酸镁0.1g，加入氢氧化钙调节ph值至6.0～7.0。加热至90℃以上，保持30～60分钟，降低温度至37℃后，每升中药提取液中接种发酵用的混合菌种Ⅰ10ml，搅拌发酵48h，转速为10r/min，结束后，按照每升中药提取液再次接种的混合菌种Ⅱ10ml，密封，保持温度20℃，厌氧发酵12h，发酵结束后，即得中药发酵液。
复合菌种发酵中的混合菌种Ⅰ为：米曲霉109个/mL、酿酒酵母107个/mL、短小芽孢杆菌109个/mL、凝结芽孢杆菌108个/mL。所述复合菌种发酵步骤中混合菌种Ⅱ为：发酵乳杆菌109个/mL、动物双歧杆菌107个/mL。
技术效果：
通过高效液相法测定实施例1中药提取液和中药发酵液中小檗碱和连翘苷的含量，发酵液中小檗碱含量为0.52mg/ mL，连翘苷含量为0.34mg/ mL，提取液中小檗碱含量为0.31mg/ mL，连翘苷含量为0.22mg/ mL，由此可见，本发明实施例1的中药发酵液中小檗碱含量增加67%，连翘苷含量增加54%。
在实验室条件下，人工建立流感和新城疫疾病模型，在发病后分别在饮水中添加本实施例1中的中药提取液和中药发酵液，中药提取液的使用量为每吨饮水中添加12L，中药发酵液的使用量为每吨饮水中添加5L，死亡率分别为：中药提取液组22%、中药发酵液组18%，攻毒对照组36%，发病率分别为中药提取液组46%、中药发酵液组32%，攻毒对照组72%，由此可见，使用本实施例1的中药发酵液每只鸡的使用量可减少58%，攻毒保护率为82%，显著降低肉鸡发病率。
本实施例发酵过程中的采用的接种量，发酵时间，转速等因素，尽可能的保证发酵的充分进行；当然，通过本实施例的说明，本领域内的普通技术人员不经过创造性劳动也可得出如下方法：将发酵接种量在1%以上，转速小于10r/min，发酵时间小于48h，这些地方也应在本发明的保护范围之内。
实施例2
本实施例的中药发酵液由以下原料药材组成：钩藤10kg、黄连10kg、栀子20kg、地黄10kg、陈皮15kg、连翘叶30kg、白术15kg和白扁豆15kg。
本实施例的中药发酵液制备方法如下.
（1）制备中药提取液：将钩藤10kg、黄连10kg、栀子20kg、地黄10kg、陈皮15kg、连翘叶30kg、白术15kg和白扁豆15kg，放置于中药提取罐中，煎煮提取2次，合并提取液、浓缩至每升含生药0.2kg，过滤，得到中药提取液。
（2）复合菌种发酵为：将中药提取液转移到发酵罐中，每升中药提取液中加入酵母膏0.5g，葡萄糖1g，硫酸铵0.1g，硫酸镁0.01g，加入氢氧化钙调节ph值至6.0～7.0。加热至90℃以上，保持30～60分钟，降低温度至20℃后，每升中药提取液中接种发酵用的混合菌种Ⅰ10ml，搅拌发酵96h，转速为10r/min，结束后，按照每升中药提取液再次接种的混合菌种Ⅱ10ml，密封，保持温度37℃，厌氧发酵36h，发酵结束后，即得中药发酵液。
复合菌种发酵中的混合菌种Ⅰ为：米曲霉1011个/mL、酿酒酵母109个/mL、短小芽孢杆菌1011个/mL、凝结芽孢杆菌1010个/mL。所述复合菌种发酵步骤中混合菌种Ⅱ为：发酵乳杆菌1011个/mL、动物双歧杆菌109个/mL。
技术效果：
通过高效液相法测定实施例2中药提取液和中药发酵液中栀子苷和橙皮苷的含量，发酵液中栀子苷含量为0.32mg/ mL，橙皮苷含量为0.64mg/ mL，提取液中栀子含量为0.17mg/ mL，橙皮苷含量为0.42mg/ mL，由此可见，本发明实施例1的中药发酵液中栀子苷含量增加88%，橙皮苷含量增加52%。
2015年12月，莱阳市某肉鸡场，25日龄肉鸡，发生疾病，死淘率大幅增加，每天死淘率在0.5%以上，采食量降低，饮水减少，肉鸡出现咳喘现象，解剖发现气管出血，肺部实质化，拉绿色粪便，部分出现新城疫的典型神经症状。选择一栋鸡舍，15113只，按照每吨饮水中添加8L实施例2的中药发酵液，连续使用5天，5天后与未使用药物的鸡舍相比，死淘率显著降低，每天死淘数量不足0.05%，未使用药物的鸡舍每天死淘1.5%以上，实验后全部使用实施例2的中药发酵液治疗，最终出栏成活率在88%以上。
本实施例发酵过程中的采用的接种量，发酵时间，转速等因素，尽可能的保证发酵的充分进行；当然，通过本实施例的说明，本领域内的普通技术人员不经过创造性劳动也可得出如下方法：将发酵接种量在1%以上，转速大于30r/min，发酵时间大于96h，这些地方也应在本发明的保护范围之内。
实施例3
本实施例的中药发酵液由以下原料药材组成：钩藤7kg、黄连8kg、栀子12kg、地黄7kg、陈皮10kg、连翘叶20kg、白术10kg和白扁豆10kg。
本实施例的中药发酵液制备方法如下.
（1）制备中药提取液：将钩藤7kg、黄连8kg、栀子12kg、地黄7kg、陈皮10kg、连翘叶20kg、白术10kg和白扁豆10kg，放置于中药提取罐中，煎煮提取2次，合并提取液、浓缩至每升含生药0.2kg，过滤，得到中药提取液。
（2）复合菌种发酵为：将中药提取液转移到发酵罐中，每升中药提取液中加入酵母膏0.25g，葡萄糖0.5g，硫酸铵0.05g，硫酸镁0.005g，加入氢氧化钙调节ph值至6.0～7.0。加热至90℃以上，保持30～60分钟，降低温度至30℃后，每升中药提取液中接种发酵用的混合菌种Ⅰ10ml，搅拌发酵60h，转速为20r/min，结束后，按照每升中药提取液再次接种的混合菌种Ⅱ10ml，密封，保持温度30℃，厌氧发酵28h，发酵结束后，即得中药发酵液。
复合菌种发酵中的混合菌种Ⅰ为：米曲霉1010个/mL、酿酒酵母108个/mL、短小芽孢杆菌1010个/mL、凝结芽孢杆菌109个/mL。所述复合菌种发酵步骤中混合菌种Ⅱ为：发酵乳杆菌1010个/mL、动物双歧杆菌108个/mL。
技术效果：
通过高效液相法测定实施例3中药提取液和中药发酵液中栀子苷和连翘苷的含量，发酵液中栀子苷含量为0.44mg/ mL，连翘苷含量为0.38mg/ mL，提取液中栀子苷含量为0.29mg/ mL，连翘苷含量为0.24mg/ mL，由此可见，本发明实施例3的中药发酵液中小檗碱含量增加51%，连翘苷含量增加58%。
在实验室条件下，人工建立新城疫疾病模型，在人工攻毒前分别在饮水中连续3天添加本实施例3中的中药提取液和中药发酵液，作为预防用药，中药提取液的使用量为每吨饮水中添加10L，中药发酵液的使用量为每吨饮水中添加3L，攻毒后，每天的死亡数量见表1。
死淘数量变化
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。