本发明是属于药品的制剂技术领域，涉及一种盐酸法舒地尔注射液的制备。
背景技术：
盐酸法舒地尔是六氢-1-(5-磺酰基异喹啉)-1(H)-1，4-二氮杂卓盐酸盐，是一种新型的高效血管扩张剂。该产品由日本旭化成制药株式会社和名古屋大学药理学研究室合作开发，于1995年在日本批准进入临床，用于防止慢性缺血性脑血管痉挛。通过现有技术来看，盐酸法舒地尔注射液的光稳定性是需要解决的难题，从现有发布的专利上看为解决在光照下的稳定性问题，均使用各种的避光剂和稳定剂。
技术实现要素：
因盐酸法舒地尔注射液制剂容易受光照而产生分解物，且随PH的升高而增加。为解决上述技术问题，在制备盐酸法舒地尔注射液试验中，发现用一定份数的依地酸二钠、磷酸氢二钠和甲硫氨酸的合理配制，再通过盐酸的PH调节而制备出的盐酸法舒地尔注射液，在高温、光照并在加速6个月和长期24个月试验后各实施例的PH、含量、有关物质结果仍然合格，说明整个产品的质量稳定。此外，本发明所述的盐酸法舒地尔注射液的制备工艺简单、所用辅料已经过长期应用，安全性得以保证且成本较低、便于工业化生产。
本发明的目的是提供一种盐酸法舒地尔注射液及其制备方法。
本发明所述的一种盐酸法舒地尔注射液，按质量份计算，所述盐酸法舒地尔注射液的原料由30份的盐酸法舒地尔、盐酸溶液(1mol/L调节pH4.0-5.0)、0.1-0.4份的依地酸二钠、0.1-0.3份的磷酸氢二钠、0.15-0.25份甲硫氨酸、针用活性炭适量和1500-2500份的注射用水组成。
本发明所述的一种盐酸法舒地尔注射液的制备方法，所述制备方法的具体步骤为：1)量取全量80％的注射用水，投入处方量的盐酸法舒地尔、依地酸二钠、磷酸氢二钠、甲硫氨酸，搅拌使之全溶解；2)加入适量的针用活性炭，搅拌吸附20分钟，脱炭过滤；3)补充注射用水至全量，用1mol/L盐酸调节pH至4.0-5.0；搅拌10-15分钟，混匀后用0.22μm的滤器精滤；4)将滤液灌装于2ml安瓿中并封口；5)将封口安瓿置122℃下灭菌15分钟，将灭菌后的安瓿灯检包装。
本发明的有益效果为：因盐酸法舒地尔注射液制剂容易受光照而产生分解物，且随PH的升高而增加。为解决上述技术问题，在制备盐酸法舒地尔注射液试验中，发现用一定份数的依地酸二钠、磷酸氢二钠和甲硫氨酸的合理配制，再通过盐酸的PH调节而制备出的盐酸法舒地尔注射液，在高温、光照并在加速6个月和长期24个月试验后各实施例的PH、含量、有关物质结果仍然合格，说明整个产品的质量稳定。此外，本发明所述的盐酸法舒地尔注射液的制备工艺简单、所用辅料已经过长期应用，安全性得以保证且成本较低、便于工业化生产。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本发明所述的盐酸法舒地尔注射液的制备方法做进一步说明，但是本发明的保护范围并不限于此。
实施例1
原辅料：盐酸法舒地尔30g、盐酸溶液(1mol/L)适量、依地酸二钠0.1g、磷酸氢二钠0.3g、0.15g甲硫氨酸,针用活性炭2g、注射用水至2000ml，制成1000支。
制备方法：1)量取全量80％的注射用水，投入处方量的盐酸法舒地尔、依地酸二钠、磷酸氢二钠、甲硫氨酸，搅拌使之全溶解；2)加入处方量的针用活性炭，搅拌吸附20分钟，脱炭过滤；3)补充注射用水至全量，用1mol/L盐酸溶液调节pH至4.5搅拌10分钟，混匀后用0.22μm的滤器精滤；4)将滤液灌装于2ml安瓿中并封口；5)将封口安瓿置121℃下灭菌15分钟，将灭菌后的安瓿灯检，包装。
依据《中国药典》2015年版二部标准检验结果如下表1：
检验结果符合药典标准。
实施例2
原辅料：盐酸法舒地尔30g、盐酸溶液(1mol/L)适量、依地酸二钠0.4g、磷酸氢二钠0.2g、0.2g甲硫氨酸、针用活性炭2g、注射用水至2000ml，制成1000支。
制备方法：1)量取全量80％的注射用水，投入处方量的盐酸法舒地尔、依地酸二钠、磷酸氢二钠、甲硫氨酸，搅拌使之全溶解；2)加入处方量的针用活性炭，搅拌吸附20分钟，脱炭过滤；3)补充注射用水至全量，用1mol/L盐酸溶液调节pH至4.5；搅拌10分钟，混匀后用0.22μm的滤器精滤；4)将滤液灌装于2ml安瓿中并封口；5)将封口安瓿置121℃下灭菌15分钟，将灭菌后的安瓿灯检，包装。
依据《中国药典》2015年版二部标准检验结果如下表2：
检验结果符合药典标准。
实施例3
原辅料：盐酸法舒地尔30g、盐酸溶液(1mol/L)适量、依地酸二钠0.3g、磷酸氢二钠0.1g、0.25g甲硫氨酸、针用活性炭2g、注射用水至2000ml，制成1000支。
制备方法：1)量取全量80％的注射用水，投入处方量的盐酸法舒地尔、依地酸二钠、磷酸氢二钠、甲硫氨酸，搅拌使之全溶解；2)加入处方量的针用活性炭，搅拌吸附20分钟，脱炭过滤；3)补充注射用水至全量，用1mol/L盐酸溶液调节pH至4.5搅拌10分钟，混匀后用0.22μm的滤器精滤；4)将滤液灌装于2ml安瓿中并封口；5)将封口安瓿置121℃下灭菌15分钟，将灭菌后的安瓿灯检，包装。
依据《中国药典》2015年版二部标准检验结果如下表3：
检验结果符合药典标准。
稳定性研究
为了说明本发明盐酸法舒地尔注射液组合物的稳定性，申请人按市售现行的配方：盐酸法舒地尔30g、盐酸溶液(1mol/L)适量、针用活性炭2g、注射用水至2000ml，同上述方法制成1000支。批号：2013Z0004。
依据《中国药典》2015年版二部标准检验结果如下表4：
检验结果符合药典标准。
为解决稳定性问题申请人先期以市售生产配方，分别添加依地酸二钠、磷酸氢二钠、甲硫氨酸进行对比试验(添加量都在注射剂允许的范围内)。
盐酸法舒地尔注射液添加依地酸二钠的对比试验配方原料由30份的盐酸法舒地尔、盐酸溶液(1mol/L调节pH4.0-5.0)、0.1-0.4份的依地酸二钠、0.15-0.25份的甲硫氨酸、针用活性炭适量和1500-2500份的注射用水组成。
对比试验1
原辅料：盐酸法舒地尔30g、盐酸溶液(1mol/L)适量、依地酸二钠0.4g、甲硫氨酸0.2g、针用活性炭2g、注射用水至2000ml，制成1000支。同上述方法制成1000支。
依据《中国药典》2015年版二部标准检验结果如下表5：
检验结果符合药典标准。
盐酸法舒地尔注射液添加磷酸氢二钠的对比试验配方原料由30份的盐酸法舒地尔、盐酸溶液(1mol/L调节pH4.0-5.0)、0.1-0.3份的磷酸氢二钠、0.15-0.25份甲硫氨酸、针用活性炭适量和1500-2500份的注射用水组成。
对比试验2
原辅料：盐酸法舒地尔30g、盐酸溶液(1mol/L)适量、磷酸氢二钠0.3g、甲硫氨酸0.2g、针用活性炭2g、注射用水至2000ml，制成1000支。同上述方法制成1000支。
依据《中国药典》2015年版二部标准检验结果如下表6：
检验结果符合药典标准。
盐酸法舒地尔注射液添加甲硫氨酸的对比试验配方原料由30份的盐酸法舒地尔、盐酸溶液(1mol/L调节pH4.0-5.0)、0.15-0.25份的甲硫氨酸、针用活性炭适量和1500-2500份的注射用水组成。
对比试验3
原辅料：盐酸法舒地尔30g、盐酸溶液(1mol/L)适量、甲硫氨酸0.2g、针用活性炭2g、注射用水至2000ml，制成1000支。同上述方法制成1000支。
依据《中国药典》2015年版二部标准检验结果如下表7：
检验结果符合药典标准。
盐酸法舒地尔注射液添加依地酸二钠、磷酸氢二钠、甲硫氨酸的对比试验配方原料由30份的盐酸法舒地尔、盐酸溶液(1mol/L调节pH4.0-5.0)、0.1-0.4份依地酸二钠、0.1-0.3份磷酸氢二钠、大于0.25份的甲硫氨酸、针用活性炭适量和1500-2500份的注射用水组成。
对比试验4
原辅料：盐酸法舒地尔30g、盐酸溶液(1mol/L)适量、依地酸二钠0.3g、磷酸氢二钠0.25g、甲硫氨酸0.3g、针用活性炭2g、注射用水至2000ml，制成1000支。同上述方法制成1000支。
依据《中国药典》2015年版二部标准检验结果如下表8：
1.考察项目及测定方法
1.1.外观性状
采用目测法对外观、色泽进行考察。
1.2.pH值
取本品，照pH值测定法(中国药典2005版二部附录ⅥH)，pH值应为4.0～5.0。
1.3可见异物
照可见异物检查法(中国药典2005版二部附录ⅨH)。取本品样品，在黑色和白色背景下，手持供试品颈部轻轻旋转和翻转安瓿,目视检查。
1.4有关物质
取本品，加流动相稀释制成每1ml中含有0.3mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照高效液相色谱法(中国药典2005版二部附录ⅤD)测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L磷酸二氢铵溶液-乙腈(65：10)为流动相，检测波长为275nm，理论板数按盐酸法舒地尔峰计算不得低于3000；盐酸法舒地尔峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。量取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测器的灵敏度，使主成份的峰高为满量程的10％～20％，再精密量取供试品溶液和对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的3倍，供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质的峰面积不得大于对照溶液主峰面积的2/10(0.2％)，各杂质峰面积的和不得过对照溶液的主峰面积(1.0％)。
1.5含量测定
采用紫外-可见分光光度法(中国药典2005版二部附录ⅣA)测定。取本品，加水制成每1ml中约含盐酸法舒地尔30μg的溶液，照紫外-可见分光光度法(中国药典2005版二部附录ⅣA)，在275nm处测定吸收度；另取盐酸法舒地尔对照品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含盐酸法舒地尔30μg的溶液，同法测定，计算，即得。
1.6.试药与仪器
LC-2010HT高效液相色谱仪(日本岛津公司生产)，UV-2102PC型紫外可见分光光度计(上海尤尼可公司生产)，pHS-25数显PH计(上海雷磁仪器厂)，GR-202电子分析天平(日本AD公司生产)，澄明度检查仪(天津天发有限公司)，C18色谱柱，ID4.6×250mm(迪马公司)，鼓风恒温干燥箱(上海一恒)。
2.稳定性试验
2.1影响因素试验
样品：实施例1、2、3与批号：2013Z0004
2.1.1高温试验取上述样品，放置于(60℃±5℃)恒温干燥箱中，于第0、第5和第10天取样，检测稳定性项重点检查项目，与0天比较，结果见表9。
表9高温试验结果
结果表明，上述样品在高温条件下放置10天，外观性状、pH值、可见异物、含量，基本无变化；在有关物质上对比试验4却有明显变化，表明甲硫氨酸的多加量对高温的不稳定性。
2.1.2.强光照射试验
取上述样品，在光照(4500LX±500LX)条件下放置，于第5和第10天取样检测，与0天比较，结果见表10。
表10光照试验结果
结果表明，批号2013Z0004样品和对比试验1、对比试验2、对比试验3在强光照射条件下10天，与0天比较，除pH值、可见异物外，在强光照射下外观发生变化，有关物质明显增加，而且含量略有下降，说明在强光条件下是不稳定的；而本发明的实施例1、2、3和对比试验4在强光照射条件下10天，与0天比较有关物质没有明显增加，含量下降不明显，稳定性较好。
2.2结论
影响因素试验表明：上述样品除对比试验4对高温不稳定外，其他基本稳定。光照对批号2013Z0004样品对比试验1、对比试验2、对比试验2不稳定，对本发明的实施例1、2、3和对比试验4较稳定。
2.3.加速试验
取上市包装的本品，在温度控制40±2℃、相对湿度75±5％的环境条件放置6个月，分别于0、1、2、3、6个月取样检测重点考察项目；6个月的加速试验结果见表11。
表11盐酸法舒地尔注射液加速试验结果
结果表明，加速试验，各项指标与0月比较基本无变化，考察指标符合标准规定，说明上述样品比较稳定。
2.4.长期试验
取上述样品，在温度控制25±2℃、相对湿度60±10％条件下放置36个月，在试验的3、6、9、12、18、24、36个月取样检测重点考察项目；24个月的长期试验结果见表12。
表12盐酸法舒地尔注射液长期试验结果
结果表明：上述样品长期试验24个月，各项考察指标与0月数据比较基本无变化，说明本品在稳定性长期试验条件下24个月内是稳定的，后续试验考察还在继续进行，以确定上述样品的实际有效期。
2.5.将上述样品长期试验24个月四批样品，按盐酸法舒地尔注射液质量标准草案中细菌内毒素、无菌检测方法进行检测，结果均符合规定。
2.6.稳定性考核结论
按照“药物稳定性试验指导原则”对本品的稳定性进行了考察。影响因素试验表明：实施例1、2、3与市售现行配方的样品2013Z0004、对比试验1、对比试验2、对比试验3对高温基本稳定；市售现行配方的样品2013Z0004、对比试验1、对比试验2、对比试验3光照不稳定；对实施例1、2、3与市售现行配方的样品2013Z0004的加速试验和长期试验结果表明，加速试验6个月，各项考察指标无明显变化，均符合标准规定。长期试验24个月，各项考察指标无明显变化，均符合标准规定，且24个月的细菌内毒素、无菌检测结果也均符合规定，说明本品在稳定性长期试验条件下24个月内是稳定的，本品长期稳定试验仍在继续进行。
本发明的安全性考察
按本发明的配方的盐酸法舒地尔注射液组合物，进行药理毒理相关试验包括急性毒性试验、长期毒性试验、特殊毒性试验包括生殖及发育毒性试验、血管刺激性、过敏性及溶血性试验等。
1急性毒性试验
用本发明配方的盐酸法舒地尔注射液组合物采用静脉滴注给药，雄性和雌性小鼠的LD50分别是68mg/kg和73mg/kg；雄性和雌性大鼠的LD50分别是60mg/kg和64mg/kg。猴静脉内给药的LD50约为20～28mg/kg。采用口服给药，雄性和雌性小鼠的LD50分别是274mg/kg和277mg/kg；雄性和雌性大鼠的LD50分别是335mg/kg和348mg/kg。
2长期毒性试验
用本发明配方的盐酸法舒地尔注射液组合物在给小鼠和猴的6个月长期毒性试验中，未发现严重的副作用。用大鼠和猴静脉内给药试验，探讨了亚急性及慢性毒性。两种动物均在给大剂量(大鼠)25mg/kg、猴>6.25mg/kg)时，见到自主运动减少、伏卧位、蹲位等症状。对大鼠和猴进行的临床及病理学检查，发现药物毒性作用的靶位脏器为肾脏。两者均未见性别差异。所出现的临床症状及病理学变化均于停药后恢复。
3特殊毒性试验
生殖及发育毒性试验：用大鼠及家兔进行妊娠前及妊娠初期给药试验，发现大剂量给用本发明配方的盐酸法舒地尔注射液组合物会引起排卵数轻度减少。胎仔器官形成期给药试验以及围产期和哺乳期给药试验，见到轻度抑制子代体重增加等。但未见致畸性。另外，对其它生殖能力及子代进行观察也未见影响。
血管刺激性试验：家兔耳缘静脉推注本发明配方的盐酸法舒地尔注射液组合物，与距注射点近心端3.0cm处取材，病理组织学检查结果表明，耳部正常结构存在，轻度水肿，耳静脉管壁完整，未见坏死，管腔内血液充盈，未见血栓，血管内皮细胞完好无脱失。说明没有显著血管刺激性反应。
溶血性试验：取本发明配方的盐酸法舒地尔注射液组合物0.2ml加入到2％的兔红细胞悬液中，连续观察4小时，试管中兔红细胞悬液未出现溶血，表明本发明配方的盐酸法舒地尔注射液组合物无溶血反应。
过敏性试验：本发明配方的盐酸法舒地尔注射液组合物经豚鼠致敏给药，耳缘静脉两次激发给药后，均未观察到咳嗽、蜷缩、竖毛、呼吸困难、死亡等过敏现象。表明本发明配方的盐酸法舒地尔注射液组合物对受试豚鼠无致敏作用。
上述结果表明本发明配方的盐酸法舒地尔注射液组合物通过急性毒性试验、长期毒性试验的用量安全性和特殊毒性试验未见有明显的不良反应。
本发明配方的盐酸法舒地尔注射液组合物通过上述的各种试验，质量均达到了国家标准，主要在光照的稳定性上好于市售的产品，为产品的质量提供了很大的保证。
通过上述的实施例可以进一步了解本发明，但应该理解以上实施例仅用于对本发明进行举例说明，而并非用以限定本发明的保护范围。