技术领域：
本发明公开一种属于药物提取领域，尤其涉及一种利用极大螺旋藻提高红薯茎叶黄酮提取率的方法。
背景技术：
：红薯茎叶中含有大量纤维素类物质和黄酮，黄酮的功效是多方面的，它是一种很强的抗氧剂，可有效清除体内的氧自由基，如花青素可以抑制油脂性过氧化物的全阶段溢出，这种阻止氧化的能力是维生素E的十倍以上，这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老，也可阻止癌症的发生。黄酮可以改善血液循环，可以降低胆固醇，向天果中的黄酮还含有一种PAF抗凝因子，这些作用大大降低了心脑血管疾病的发病率，也可改善心脑血管疾病的症状。被称为花色苷酸的黄酮化合物在动物实验中被证明可以降低26%的血糖和39%的三元脂肪酸丙酯，这种降低血糖的功效是很神奇的，但更重要的是它对稳定胶原质的作用，因此它对糖尿病引起的视网膜病及毛细血管脆化有很好的作用。黄酮可以抑制炎性生物酶的渗出，可以增进伤口愈合和止痛，栎素由于具有强抗组织胺性，可以用于各类敏感症。但是其中的纤维类物质会妨碍黄酮的溶出，使得黄酮的提取率不高。申请号为CN201510105210.1的中国专利申请公开了一种菊花茎叶黄酮提取物固体分散剂的制备方法。它是将质量比为1:1-1:10的菊花茎叶黄酮提取物与固体分散剂载体聚乙烯吡咯烷酮-K30、聚乙二醇、乳糖或甘露醇采用相应的方法混合；其中，分散剂载体为聚乙烯吡咯烷酮-K30采用溶剂法混合，分散剂载体为聚乙二醇采用熔融法混合，分散剂载体为聚乙烯吡咯烷酮-K30采用溶剂法混合，分散剂载体为聚乙二醇采用熔融法混合，分散剂载体为乳糖或甘露醇时采用研磨法混合，制备成固体分散体后，干燥，即得。技术实现要素：本发明是为了解决红薯茎叶中纤维阻碍黄酮溶出的问题，提供了一种利用极大螺旋藻提高红薯茎叶黄酮提取率的方法，利用极大螺旋藻和蒸汽爆破处理，减少纤维的阻碍作用，提高黄酮得率。为了解决上述技术问题，技术方案是：一种利用极大螺旋藻提高红薯茎叶黄酮提取率的方法，包括以下步骤：第一步，采摘新鲜的红薯茎叶，放入烘箱，杀青20～30min；第二步，将极大螺旋藻和红薯茎叶于40～50℃条件下烘12～15h，粉碎，备用；所述极大螺旋藻的质量含量占总重的0.3～0.5%；第三步，用乙醇回流提取，合并浸取液，静置，过滤，滤液浓缩得乙醇提取物浸膏；第四步，控制温度60～80℃，用水对乙醇提取物浸膏反复提取，至提取液无黄酮显色反应，合并提取液，静置，过滤，浓缩得浓缩液；第五步，加入硫酸钠，使硫酸钠的含量为6％～7％；第六步，上述样品以大孔树脂吸附法，将提取液经上柱、洗脱、收集洗脱液、浓缩和干燥，即可。作为优选，第一步，杀青温度为80～90℃。作为优选，第一步，杀青后在0.3～0.5MPa条件下蒸汽爆破处理2～3min。作为优选，第三步，乙醇的质量分数为40％～45％。作为优选，第六步，柱层析淋洗速度为8mL/cm2·min。作为优选，第六步，柱层析分离层析次数为5～7次。作为优选，第六步，大孔吸附树脂是D101、D140或AB-8。有益效果：极大螺旋藻的加入相互促进黄酮的溶出，从而提高最终的黄酮得率。此外，本发明经过蒸汽爆破处理，破坏了红薯茎叶内的固体物料结构，消弱其纤维组织对黄酮的溶出阻碍作用，提高了黄酮的提取率。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步详细介绍。实施例1一种利用极大螺旋藻提高红薯茎叶黄酮提取率的方法，包括以下步骤：第一步，采摘新鲜的红薯茎叶，放入烘箱，85℃杀青25min，在0.4MPa条件下蒸汽爆破处理2.5min；第二步，将极大螺旋藻和红薯茎叶于45℃条件下烘13h，粉碎，备用；所述极大螺旋藻的质量含量占总重的0.4%；第三步，用质量分数为42.5％的乙醇5升、4升、4升分三次回流提取，首次回流3小时，二次、三次分别回流2.5小时，合并浸取液，静置，过滤，滤液浓缩得乙醇提取物浸膏；第四步，控制温度70℃，用水对乙醇提取物浸膏反复提取，至提取液无黄酮显色反应，合并提取液，静置，过滤，浓缩得浓缩液；第五步，加入硫酸钠，使硫酸钠的含量为6.5％；第六步，上述样品以大孔树脂吸附法，将提取液经上柱（柱高为60cm，柱径为4.0cm，柱填料为D101、D140或AB-大孔吸附树脂）、洗脱、收集洗脱液、浓缩和干燥，即可；所述的柱层析淋洗速度为8mL/cm2·min，柱层析分离层析次数为6次。以芦丁为对照品，利用差示分光光度法测定总黄酮的含量。实施例2一种利用极大螺旋藻提高红薯茎叶黄酮提取率的方法，包括以下步骤：第一步，采摘新鲜的红薯茎叶，放入烘箱，80℃杀青20min，在0.3MPa条件下蒸汽爆破处理2min；第二步，将极大螺旋藻和红薯茎叶于40℃条件下烘12h，粉碎，备用；所述极大螺旋藻的质量含量占总重的0.3%；第三步，用质量分数为40％的乙醇5升、4升、4升分三次回流提取，首次回流2.5小时，二次、三次分别回流2小时，合并浸取液，静置，过滤，滤液浓缩得乙醇提取物浸膏；第四步，控制温度60℃，用水对乙醇提取物浸膏反复提取，至提取液无黄酮显色反应，合并提取液，静置，过滤，浓缩得浓缩液；第五步，加入硫酸钠，使硫酸钠的含量为6％；第六步，上述样品以大孔树脂吸附法，将提取液经上柱（柱高为60cm，柱径为4.0cm，柱填料为D101、D140或AB-大孔吸附树脂）、洗脱、收集洗脱液、浓缩和干燥，即可；所述的柱层析淋洗速度为8mL/cm2·min，柱层析分离层析次数为5次。以芦丁为对照品，利用差示分光光度法测定总黄酮的含量。实施例3一种利用极大螺旋藻提高红薯茎叶黄酮提取率的方法，包括以下步骤：第一步，采摘新鲜的红薯茎叶，放入烘箱，90℃杀青30min，在0.5MPa条件下蒸汽爆破处理3min；第二步，将极大螺旋藻和红薯茎叶于50℃条件下烘15h，粉碎，备用；所述极大螺旋藻的质量含量占总重的0.5%；第三步，用质量分数为45％的乙醇5升、4升、4升分三次回流提取，首次回流4小时，二次、三次分别回流3小时，合并浸取液，静置，过滤，滤液浓缩得乙醇提取物浸膏；第四步，控制温度80℃，用水对乙醇提取物浸膏反复提取，至提取液无黄酮显色反应，合并提取液，静置，过滤，浓缩得浓缩液；第五步，加入硫酸钠，使硫酸钠的含量为7％；第六步，上述样品以大孔树脂吸附法，将提取液经上柱（柱高为60cm，柱径为4.0cm，柱填料为D101、D140或AB-大孔吸附树脂）、洗脱、收集洗脱液、浓缩和干燥，即可；所述的柱层析淋洗速度为8mL/cm2·min，柱层析分离层析次数为7次。以芦丁为对照品，利用差示分光光度法测定总黄酮的含量。实施例4一种利用极大螺旋藻提高红薯茎叶黄酮提取率的方法，包括以下步骤：第一步，采摘新鲜的红薯茎叶，放入烘箱，87℃杀青28min，在0.5MPa条件下蒸汽爆破处理2min；第二步，将极大螺旋藻和红薯茎叶于43℃条件下烘14h，粉碎，备用；所述极大螺旋藻的质量含量占总重的0.3%；第三步，用质量分数为42％的乙醇5升、4升、4升分三次回流提取，首次回流3.5小时，二次、三次分别回流3小时，合并浸取液，静置，过滤，滤液浓缩得乙醇提取物浸膏；第四步，控制温度64℃，用水对乙醇提取物浸膏反复提取，至提取液无黄酮显色反应，合并提取液，静置，过滤，浓缩得浓缩液；第五步，加入硫酸钠，使硫酸钠的含量为6.8％；第六步，上述样品以大孔树脂吸附法，将提取液经上柱（柱高为60cm，柱径为4.0cm，柱填料为D101、D140或AB-大孔吸附树脂）、洗脱、收集洗脱液、浓缩和干燥，即可；所述的柱层析淋洗速度为8mL/cm2·min，柱层析分离层析次数为5次。以芦丁为对照品，利用差示分光光度法测定总黄酮的含量。对照例1与实施例4的区别在于：不加极大螺旋藻。一种提高红薯茎叶黄酮提取率的方法，包括以下步骤：第一步，采摘新鲜的红薯茎叶，放入烘箱，87℃杀青28min，在0.5MPa条件下蒸汽爆破处理2min；第二步，将红薯茎叶于43℃条件下烘14h，粉碎，备用；第三步，用质量分数为42％的乙醇5升、4升、4升分三次回流提取，首次回流3.5小时，二次、三次分别回流3小时，合并浸取液，静置，过滤，滤液浓缩得乙醇提取物浸膏；第四步，控制温度64℃，用水对乙醇提取物浸膏反复提取，至提取液无黄酮显色反应，合并提取液，静置，过滤，浓缩得浓缩液；第五步，加入硫酸钠，使硫酸钠的含量为6.8％；第六步，上述样品以大孔树脂吸附法，将提取液经上柱（柱高为60cm，柱径为4.0cm，柱填料为D101、D140或AB-大孔吸附树脂）、洗脱、收集洗脱液、浓缩和干燥，即可；所述的柱层析淋洗速度为8mL/cm2·min，柱层析分离层析次数为5次。以芦丁为对照品，利用差示分光光度法测定总黄酮的含量。对照例2与实施例3的区别在于：杀青后不进行蒸汽爆破处理。一种利用极大螺旋藻提高红薯茎叶黄酮提取率的方法，包括以下步骤：第一步，采摘新鲜的红薯茎叶，放入烘箱，90℃杀青30min，；第二步，将极大螺旋藻和红薯茎叶于50℃条件下烘15h，粉碎，备用；所述极大螺旋藻的质量含量占总重的0.5%；第三步，用质量分数为45％的乙醇5升、4升、4升分三次回流提取，首次回流4小时，二次、三次分别回流3小时，合并浸取液，静置，过滤，滤液浓缩得乙醇提取物浸膏；第四步，控制温度80℃，用水对乙醇提取物浸膏反复提取，至提取液无黄酮显色反应，合并提取液，静置，过滤，浓缩得浓缩液；第五步，加入硫酸钠，使硫酸钠的含量为7％；第六步，上述样品以大孔树脂吸附法，将提取液经上柱（柱高为60cm，柱径为4.0cm，柱填料为D101、D140或AB-大孔吸附树脂）、洗脱、收集洗脱液、浓缩和干燥，即可；所述的柱层析淋洗速度为8mL/cm2·min，柱层析分离层析次数为7次。以芦丁为对照品，利用差示分光光度法测定总黄酮的含量。性能测试：黄酮提取率%实施例153实施例250实施例355实施例452对照例133对照例227从表中可以看出，极大螺旋藻的加入相互促进黄酮的溶出，从而提高最终的黄酮得率。此外，本发明经过蒸汽爆破处理，破坏了红薯茎叶内的固体物料结构，消弱其纤维组织对黄酮的溶出阻碍作用，提高了黄酮的提取率。当前第1页1 2 3