使用flavagline和2‑脱氧葡萄糖的组合疗法的制作方法

本发明涉及包含2-脱氧葡萄糖和flavagline的组合制剂以及所述组合制剂作为药物和/或在癌症的治疗中的用途。此外，本发明涉及用于包括2-脱氧葡萄糖的给药的针对癌症的组合疗法的flavagline；以及用于包括flavagline的给药的针对癌症的组合疗法的2-脱氧葡萄糖。另外，本发明涉及用于治疗癌症的方法以及用于制备根据本发明的组合制剂的方法。

癌症构成西方国家的第四大死因。随着西方人口的平均年龄稳定升高，癌症相关的死亡也稳定升高，这表明癌症将是21世纪最常见的死因之一。侵袭性癌细胞表型是导致细胞内信号传导通路失调的多种遗传和外遗传改变的结果。癌细胞通常不能进行所谓的“程序化细胞死亡”或“细胞凋亡”，其为在防止细胞组织异常生长中起关键作用的信号传导过程。

通常可用三种模式的癌症疗法。治疗手术尝试完全移除肿瘤。这仅在不存在转移瘤的情况下是可能的。有时，如果仅存在少量转移瘤或者它们是容易地可及的，则手术可以作为用于治疗转移瘤的一种选择。放射疗法使用电离辐射，典型地是γ-辐射，以破坏肿瘤。放射疗法基于以下原理：具有其较高代谢率的肿瘤细胞尤其易受到辐射诱导的细胞损伤的影响。放射疗法的抗肿瘤效果不得不相对于对周围健康组织的损伤进行权衡。因此，由于担心的对健康组织的损伤，在一些情况下可能的组织损伤可以排除该选择。此外，放射疗法限于原发肿瘤尚未扩散或仅存在少量转移瘤的情况。

最常用的—并且在许多情形下唯一可用的—癌症的全身治疗是化学疗法。因此，对于患有白血病或患有实体瘤的转移瘤的患者，化学疗法是唯一的治疗选择。化学治疗剂对于所有快速分裂的细胞都是细胞毒性的。由于癌细胞通常比体内的其他细胞分裂得更快，它们优先被这些试剂杀死。常用的化学治疗剂的组是通过干扰有丝分裂纺锤体形成抑制细胞分裂的物质，或例如通过使碱基烷基化破坏dna的试剂。因为化学治疗剂以所有快速分裂的细胞为靶标，所以它们的副作用通常是严重的。取决于所使用的物质，它们包括器官毒性(例如心或肾)、免疫抑制、神经毒性和贫血。一些化学治疗剂的组(例如烷化剂)甚至具有致癌的可能。由于这些副作用，有时不得不降低剂量，或者化学疗法不得不完全中止。此外，化学疗法的副作用通常禁止对处于差的总体状况的患者的治疗。除了所有这些问题之外，还存在化学疗法通常有限的功效的问题。在一些情况下，化学疗法从最开始就失败。在其他情况下，肿瘤细胞在治疗过程期间变得有抗药性。为了防止抗药性肿瘤细胞的出现以及限制化学疗法的副作用，使用具有不同作用模式的不同化合物的组合。尽管如此，化学疗法的成功一直受到限制，尤其是在实体瘤的治疗中。

最近，已经可利用其作用模式不基于针对快速分裂细胞的毒性的药物。与常规化学治疗剂相比，这些化合物显示出对癌细胞的较高特异性以及因此较低的副作用。伊马替尼(imatinib)用于慢性髓细胞性白血病的特异性治疗。该化合物尤其抑制作为bcr和abl的融合基因的产物的异常酪氨酸激酶。因为该激酶在良性细胞中不存在，所以利用伊马替尼的治疗仅具有轻微的副作用。然而，伊马替尼不用于除髓细胞性白血病之外的血液学癌症的治疗。利妥昔单抗(rituximab)是针对在b细胞上普遍表达的分化簇20(cd20)的单克隆抗体。其与常规化学疗法结合用于b细胞淋巴瘤的治疗。

2-脱氧葡萄糖(2-dg)是葡萄糖的结构类似物，其中2-oh基团被氢原子替代。2-dg经由葡萄糖转运系统被大部分细胞吸收，并且通过己糖激酶被磷酸化成2-脱氧葡萄糖-6-磷酸酯，其进而抑制磷酸葡萄糖异构酶；因此，抑制糖酵解。与正常非肿瘤细胞相比，癌细胞对2-dg特别敏感，因为它们消耗大量的葡萄糖用于能量生成。由于癌细胞(特别是在实体瘤中具有降低的氧张力的区域中生长的那些)强烈依赖于糖酵解用于能量生成，因此提出2-dg作为肿瘤治疗剂。然而，由于有效治疗所需的高剂量造成的严重副作用，2-dg在人恶性肿瘤的治疗中的应用受到限制。这些副作用包括血糖水平的失调、伴有嗜睡的进展性体重减轻、低血糖的行为症状、躁动、一般神经学症状、过多呕吐和心脏副作用(singh等，strahlentheronkol.2005；181(8):507-14；marsh等，nutrmetab(lond).2008；5:33.)。

flavagline属于1h-环戊二烯并[b]苯并呋喃的组。洛克米仔兰酰胺(rocaglamide)(一种flavagline)和洛克米仔兰酰胺衍生物可以由米仔兰物种(aglaiaspecies)中分离。已经证明它们具有抗增殖活性(参见例如us4,539,414；dhar等，1973indianjexpvol.11，43-54页；king等，1982jchemsocchemcomm20卷，1150-1151页；lee等，1998chembiolinteract115卷，215-228页；bohnenstengel等，1999，z.naturforsch[c].54卷，55-60页；bohnenstaengel等，1999znaturforsch[c]54卷，1075-1083页；kim等，2006anticanceragentsmedchem6卷；319-345页)。洛克米仔兰酰胺衍生物已经显示出在体外以及体内对鼠类白血病细胞系(p-388)、人乳腺癌细胞系(bc1)、人骨髓性白血病细胞系(m091)和具有braf(v600)-突变的黑素瘤细胞系的生长具有抑制性效果(hwang等，2014，j.org.chem.69:3350-3358；lee等，1998，chem.biol.interact115:215-228；santagata等，2013，science341:1238303；boussemart等，nature.2014，513:105-109)。flavagline还显示为选择性地靶向非整倍体癌细胞和具有癌症相关的遗传畸变的未转化细胞(santagata等，2013，science341:1238303)。此外，flavagline甚至可以在特定情况下对正常细胞具有细胞保护活性，如选择的良性细胞的保护，因为已经报道人外周血t细胞、b细胞、nk细胞、中性粒细胞、心肌细胞以及鼠类造血干细胞和祖细胞在flavagline暴露后可以对化学疗法引起的细胞死亡较不敏感。flavagline在特定情况下还可以减轻神经元组织中的炎症或药物引起的损伤(fahrig等，molpharmacol2005，67:1544–55；bernard等，plosone2011，6:e25302；ribeiro等，jmedchem2012，55:10064–73；becker等，celldeathdis2014；5:e1000)。已经报道flavagline在特定情况下特异性地阻断由诱导细胞凋亡的化学治疗药物诱导的p53表达。重要地，flavagline未表现为保护p53缺损或p53突变的癌细胞(becker等，celldeathdis2014；5:e1000)。

考虑到上述内容，本领域存在对改善的癌症疗法，特别是使用抗代谢物2-脱氧葡萄糖的癌症疗法的需求，其优选地避免或很大程度上避免副作用。

可以认为本发明的技术问题为提供符合上述需求的手段和方法。所述技术问题通过在权利要求和下文中描述的实施方案来解决。

因此，本发明涉及包含2-脱氧葡萄糖和flavagline的组合制剂。

如以下使用的，术语“具有”、“包括”或“包含”或其任意语法变形以非排他方式使用。因此，这些术语既可以指其中除了通过这些术语介绍的特征之外在本文描述的实体中不存在另外的特征的情形，也可以指其中存在一个或多个另外的特征的情形。作为实例，表述“a具有b”、“a包括b”和“a包含b”既可以指其中除了b之外a中不存在其他要素的情形(即其中a唯一地且排他地由b组成的情形)，也可以指其中除了b之外实体a中还存在一个或多个另外的要素，如要素c、要素c和d或甚至其他要素的情形。

另外，如以下使用的，术语“优选地”、“更优选地”、“最优选地”、“特别地”、“更特别地”、“具体地”、“更具体地”或类似术语与任选的特征结合使用，而不限制备选可能性。因此，通过这些术语介绍的特征是任选的特征并且不旨在以任何方式限制权利要求的范围。如技术人员将理解的，本发明可以通过使用备选特征实施。类似地，通过“在本发明的一个实施方案中”或类似表示介绍的特征旨在作为任选的特征，而没有关于本发明的备选实施方案的任何限制，没有关于本发明的范围的任何限制，并且没有关于将以该方式介绍的特征与本发明的其他任选或非任选的特征组合的可能性的任何限制。此外，如果没有另外说明，则术语“约”涉及所指示的值±20％。

如本申请中所述的，术语“组合制剂”涉及在一个制剂中包含本发明的药物活性化合物的制剂。优选地，组合制剂被包含在容器中，即优选地，所述容器包含本发明的所有药物活性化合物。优选地，所述容器包含作为单独的制剂(即优选地，2-脱氧葡萄糖的一个制剂和flavagline的一个制剂)的本发明的药物活性化合物；更优选地，所述容器包含在单个制剂(例如优选地，作为两层片剂等)中的本发明的药物活性化合物。最优选地，组合制剂是混合制剂，即优选地，组合制剂包含本发明的化合物的混合物。如技术人员将理解的，术语“制剂”涉及(优选药用的)化合物的混合物，其包含本发明的至少一种药物活性化合物或由其组成。优选地，组合制剂包含在单个制剂(例如片剂)中的flavagline和2-脱氧葡萄糖；更优选地，组合制剂包含flavagline和2-脱氧葡萄糖的混合物。

优选地，组合制剂用于单独给药或用于组合给药。如本文使用的，“单独给药”涉及其中本发明的至少两种药物活性化合物经由不同途径给药的给药。例如，一种化合物可以通过肠内给药(例如口服)来给药，而第二化合物通过肠胃外给药(例如静脉内)来给药。优选地，用于单独给药的组合制剂包含至少两种物理分离的用于单独给药的制剂，其中每种制剂含有至少一种药物活性化合物；所述备选是优选的，例如在组合制剂的药物活性化合物由于其化学或生理学性质不得不通过不同途径(例如肠胃外和口服)给药的情况下。相反地，“组合给药”涉及其中本发明的药物活性化合物经由相同途径(例如口服或静脉内)给药的给药。

还优选地，组合制剂用于同时给药或顺序给药。如本文使用的，“同时给药”涉及其中本发明的药物活性化合物在相同时刻给药的给药，即优选地，药物活性化合物的给药在小于15分钟的时间间隔内、更优选地在小于5分钟用的时间间隔内开始。最优选地，药物活性化合物的给药在相同时刻开始，例如通过吞咽包含药物活性化合物的片剂，或通过施用包含药物活性化合物的溶液的静脉内注射。相反地，如本文使用的，“顺序给药”涉及在受试者中产生实现本发明的协同效果的药物活性化合物的血药浓度但是优选地不是如上文所说明的同时给药的给药。优选地，相顺序给药是其中药物活性化合物(优选所有药物活性化合物)的给药在1或2天的时间间隔内、更优选在12小时的时间间隔内、仍更优选在4小时的时间间隔内、甚至更优选在一小时的时间间隔内、最优选在5分钟的时间间隔内开始。

优选地，组合制剂是药学相容的组合制剂。如本文使用的，术语“药学相容的制剂”和“药物组合物”涉及包含本发明的化合物和任选地一种或多种药用载体的组合物。本发明的化合物可以作为药用盐配制。优选的可接受盐是乙酸盐、甲酯、hcl盐、硫酸盐、氯化物等。药物组合物优选地局部给药或更优选地全身给药。常用于药物给药的合适给药途径是口服、静脉内或肠胃外给药以及吸入。然而，取决于化合物的性质和作用模式，药物组合物也可以通过其他途径给药。此外，化合物可以以共同的药物组合物或作为如本文其他部分说明的单独的药物组合物与其他药物组合给药，其中所述单独的药物组合物可以以多个部分的试剂盒的形式提供。

化合物优选地以根据常规程序通过将药物与标准药物载体组合制备的常规剂型给药。这些程序可以涉及酌情将成分混合、制粒和压制、或者溶解用于所需制剂。应将理解，药用载体或稀释剂的形式和特性由将要组合的活性成分的量、给药途径和其他已知变量决定。

一种或多种载体从与制剂的其他成分相容以及对其接受者无害的意义上来说必须是可接受的。所采用的药物载体可以例如是固体、凝胶或液体。示例性的固体载体是乳糖、石膏粉、蔗糖、滑石、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯树胶、硬脂酸镁、硬脂酸等。示例性的液体载体是磷酸盐缓冲溶液、糖浆、油如花生油和橄榄油、水、乳液、多种类型的润湿剂、无菌溶液等。类似地，载体或稀释剂可以包括本领域众所周知的延时材料，如单独的或与蜡一起的单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。所述合适的载体包括上述那些载体和本领域众所周知的其他载体，参见例如remington′spharmaceuticalsciences，mackpublishingcompany，伊斯顿，宾夕法尼亚。

一种或多种稀释剂选择为不影响一种或多种化合物的生物活性。这类稀释剂的实例是蒸馏水、生理盐水、林格氏溶液(ringer′ssolution)、右旋糖溶液和汉克氏溶液(hank′ssolution)。另外，药物组合物或制剂还可以包含其他载体，辅料，或无毒、非治疗性、非免疫原性的稳定剂等。

治疗有效剂量是指在本发明的药物组合物中使用的化合物的量，其预防、减轻或治疗伴随本说明书中所述的疾病或病症的症状。这类化合物的治疗性功效和毒性可以通过在细胞培养物或实验动物中的标准药学程序，例如，ed50(在50％的群体中治疗有效的剂量)和ld50(对50％的群体致死的剂量)，来确定。治疗性和毒性效果之间的剂量比为治疗指数，并且其可以表示为比例ld50/ed50。

给药方案将由主治医师和其他临床因素决定；优选地根据上述方法中的任一种。如医学领域中众所周知的，对任一患者的给药取决于许多因素，包括患者的尺寸、体表面积、年龄、待给药的特定化合物、性别、给药的时间和途径、总体健康状况、和同时正在给药的其他药物。进展可以通过周期性评价进行监测。典型的剂量可以例如在1至1000μg的范围内；然而，设想低于或高于该示例性范围的剂量，尤其是考虑上述因素。通常，作为药物组合物的定期给药的方案应在每天1μg至10mg单位的范围内。如果方案是连续输注，其还应分别在每分钟每千克体重1μg至10mg单位的范围内。进展可以通过周期性评价进行监测。本发明的化合物的优选的剂量和浓度在本文中其他部分说明。

本文中所述的药物组合物和制剂优选地给药至少一次以治疗或减轻或预防本说明书中所记载的疾病或病症。然而，所述药物组合物可以给药多于一次，例如每天直到不限制数量的天数从一次到四次。

具体的药物组合物以药物领域众所周知的方式制备，并且包含上文在混合物中所述的或与药用载体或稀释剂相关的至少一种活性化合物。为了制备那些具体的药物组合物，一种或多种活性化合物通常将与载体或稀释剂混合，或者包封或封装在胶囊、小袋、扁囊剂、纸或其他合适的容器或赋形剂中。所得制剂将针对给药模式采用，即以片剂、胶囊剂、栓剂、溶液、混悬剂等形式。剂量建议将在处方或使用者说明中指明以根据所考虑的接受者预期剂量调整。

如在本发明的化学化合物的情况下使用的，术语“衍生物”涉及具有与本发明的所述化学化合物相关的结构的化学分子。优选地，衍生物仍具有已知的侧链以介导本发明的效果；例如，2-脱氧葡萄糖的衍生物优选地仍包括具有2-脱氧-部分以及优选地6-oh部分的葡萄糖结构。优选地，衍生物可以由本发明的化学化合物通过最多三个、更优选最多两个、最优选最多一个化学衍生化反应制备。优选地，衍生物是在哺乳动物(优选人)体内代谢成本发明的化学化合物的化合物。还优选地，衍生物是可以由其通过水解获得本发明的化学化合物的化合物。

技术人员理解术语“2-脱氧葡萄糖”，并且其包括以该名称已知的化学化合物的衍生物，其中术语衍生物涉及如下文说明的化学衍生物。优选的衍生物是例如2-脱氧葡萄糖-6-磷酸酯。优选地，2-脱氧葡萄糖是2-脱氧-d-葡萄糖(cas登记号：154-17-6，(4r,5s,6r)-6-(羟甲基)四氢吡喃(oxane)-2,4,5-三醇)。

如本文使用的，术语“flavagline”涉及包括环戊二烯并[b]苯并呋喃骨架的化学化合物，优选环戊二烯并[b]四羟基-苯并呋喃。更优选地，该术语涉及通过来自米仔兰属(楝科(meliaceae))的植物制备或可由其萃取的环戊二烯并[b]四羟基-苯并呋喃。如本说明书中使用的，所述术语包括如上文和下文描述的所述化合物的衍生物和盐。

优选地，术语flavagline涉及式(i)的化合物或其衍生物：

其中

r¹选自-h、卤素和烷基；

r²选自烷氧基、卤素和烷基；

r³选自-h、卤素和烷基；

或r²和r³一起形成–o(ch2)no-单元，其中n＝1或2；

r⁴选自烷氧基、卤素和烷基；

r⁵选自羟基、酰氧基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基和–nr12-chr13-coor14，其中

r¹²选自-h和烷基，

r¹³选自苯基和苄基，所述苯基和苄基两者都可以携带来自羟基、吲哚基和咪唑基甲基的组的取代基，以及烷基，所述烷基可以被选自-oh、-sh、烷氧基、硫代烷氧基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、羧基、羧基烷基、羧酰胺和胍基基团的基团取代；

或r¹²和r¹³一起形成–(ch2)3-或–(ch2)4-基团；

r¹⁴选自烷基和苄基；在该情况下r⁶是氢，

r⁶选自-h、卤素和烷基；

或r⁵和r⁶一起形成氧代或羟基亚氨基基团；

r⁷是-h；

r⁸选自-conr¹⁶r¹⁷、-h和–coor¹⁵，其中

r¹⁵和r¹⁶独立地选自甲基和-h，以及

r¹⁷选自甲基、-h、4-羟基丁基和2-四氢呋喃基；

r⁹选自任选地被取代的苯基和任选地被取代的杂芳基；

r¹⁰选自烷氧基、-h、卤素和烷基，以及

r¹¹选自-h、羟基、卤素、烷氧基和烷基；

或r¹⁰和r¹¹位于彼此的邻位并且一起形成–o(ch2)no-单元，其中n＝1或2。

如本文使用的，术语“烷基”在每种情况下都是指独立选择的取代或未取代的、直链或支链的、非环或环状的烷基基团，优选未取代的直链或支链的非环烷基基团。更优选地，术语“烷基”是指c1-至c4-烷基基团，即甲基、乙基、异丙基、正丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。当“烷基”在“烷基氨基”和“二氨基氨基”以及包含术语“烷基”的其他术语中使用时，上文也适用。

如本文使用的，术语“烷氧基”在每种情况下都是指独立选择的取代或未取代的直链或支链的、非环或环状的烷氧基基团，优选未取代的直链或支链的非环烷氧基基团。更优选地，术语“烷氧基”是指c1-至c4-烷氧基，即甲氧基、乙氧基、异丙氧基、正丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基。当“烷氧基”在“硫代烷氧基”以及包含术语“烷氧基”的其他术语中使用时，上文也适用。

如本文使用的，术语“酰氧基”在每种情况下都是指独立选择的取代或未取代的直链或支链的、非环或环状的酰氧基基团，优选未取代的直链或支链的非环酰氧基基团。更优选地，如取代基r1至r17的以上定义中提到的，术语“酰氧基”在每种情况下都优选地是指c1-至c4-酰氧基，即甲酰氧基、乙酰氧基、异丙氧基、正丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基。

如在以上定义中使用的术语“杂芳基”是指5-、6-或7-元碳环的饱和或不饱和的、芳族或非芳族的环，其可以在环中携带来自组o、s、p、n的一个或多个杂原子。

术语“卤素”是技术人员已知的，并且优选地包括拟卤素(pseudhalogen)；更优选地，该术语涉及-f、-cl、-br、-i、-cn或-scn。最优选地，该术语涉及-cl或-br。

在一个优选实施方案中，flavagline是式(ia)的化学化合物或其衍生物，取代基的定义如上文所说明：

技术人员理解式(i)包括其中r⁶在视图平面上方取向并且于是r⁵在视图平面下方取向的化合物，反之亦然。对于式(i)中的r⁷和r⁸同样如此，而在式(ia)中，r⁵和r⁸在视图平面的下方取向并且r⁶和r⁷在视图平面的上方取向。

在本发明的一个优选实施方案中，flavagline是结构(i)、优选结构(ia)的化学化合物或其衍生物，其具有以下取代基：

r¹和r³各自是氢；

r²和r⁴各自独立地选自任选地被取代的甲氧基；

r⁵选自羟基、甲酰氧基和乙酰氧基、烷基氨基、–nr¹²-chr¹³-coor¹⁴，其中

r¹²选自氢和烷基，

r¹³选自：烷基，所述烷基可以被选自oh、sh、烷氧基、硫代烷氧基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、羧基、羧基烷基、羧酰胺和胍基基团的基团取代；以及苯基和苄基，所述苯基和苄基两者都可以携带来自羟基、吲哚基和咪唑基甲基的组的取代基；

r¹⁴选自烷基和苄基；

r⁶是氢；

r⁷是氢；

r⁸选自氢、–cooch3和con(ch3)2；

r⁹是任选地取代的苯基；

r¹⁰是甲氧基；

r¹¹选自氢和羟基，或

r¹⁰和r¹¹位于彼此的邻位并且一起形成–och2o-单元。

在本发明的一个更优选的实施方案中，flavagline是结构(i)、优选结构(ia)的化学化合物或其衍生物，其中

r¹和r³各自是氢，

r²和r⁴各自是任选地取代的甲氧基，

r⁵是羟基或-nr¹²-chr¹³-coor¹⁴，其中

r¹²选自氢和烷基，

r¹³选自：烷基，所述烷基可以被选自oh、sh、烷氧基、硫代烷氧基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、羧基、羧基烷基、羧酰胺和胍基基团的基团取代；以及苯基和苄基，所述苯基和苄基两者都可以携带来自羟基、吲哚基和咪唑基甲基的组的取代基；

r¹⁴选自烷基和苄基；

r⁶和r⁷各自是氢，

r⁸是–con(ch3)2，

r⁹是任选地取代的苯基，

r¹⁰是甲氧基，以及

r¹¹是氢；

或其中

r¹和r³各自是氢，

r²和r⁴各自是任选地取代的甲氧基，

r⁵是乙酰氧基或-nr¹²-chr¹³-coor¹⁴，其中

r¹²选自氢和烷基，

r¹³选自：烷基，所述烷基可以被选自oh、sh、烷氧基、硫代烷氧基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、羧基、羧基烷基、羧酰胺和胍基基团的基团取代；以及苯基和苄基，所述苯基和苄基两者都可以携带来自羟基、吲哚基和咪唑基甲基的组的取代基；

r¹⁴选自烷基和苄基；

r⁶和r⁷各自是氢，

r⁸是–con(ch3)2，

r⁹是任选地取代的苯基，

r¹⁰是甲氧基，以及

r¹¹是氢；

或其中

r¹和r³各自是氢，

r²和r⁴各自是任选地取代的甲氧基，

r⁵是甲酰氧基或-nr¹²-chr¹³-coor¹⁴，其中

r¹²选自氢和烷基，

r¹³选自：烷基，所述烷基可以被选自oh、sh、烷氧基、硫代烷氧基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、羧基、羧基烷基、羧酰胺和胍基基团的基团取代；以及苯基和苄基，所述苯基和苄基两者都可以携带来自羟基、吲哚基和咪唑基甲基的组的取代基；

r¹⁴选自烷基和苄基；

r⁶和r⁷各自是氢，

r⁸是氢或–cooch3，

r⁹是任选地取代的苯基，以及

r¹⁰和r¹¹位于彼此的邻位并且一起形成–och2o-单元。

在本发明的另一实施方案中，r⁸是下式的基团

在本发明的再一实施方案中，r⁵和r⁸一起形成下式的基团

在一个优选实施方案中，flavagline是结构(ia)的化学化合物或其衍生物，

-其中r¹和r³是-h，并且r²和r⁴是-o-ch3，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中r⁵是羟基或酰氧基，或r⁵和r⁶一起形成氧代基团，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中r⁷是-h并且r⁸是-cor¹⁵，其中r¹⁵是-n(ch3)2或-och3，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中r⁹是苯基，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；或

-其中r¹⁰是-h并且r¹¹是烷氧基或卤素，或r¹⁰和r¹¹一起形成-o-ch2-o-单元，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

在一个更优选的实施方案中，flavagline是结构(ia)的化学化合物或其衍生物，

-其中(i)r¹和r³是-h，r²和r⁴是-o-ch3，以及(ii)r⁵是羟基或酰氧基，或r⁵和r⁶一起形成氧代基团，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r¹和r³是-h，r²和r⁴是-o-ch3，以及(ii)r⁷是-h并且r⁸是-cor¹⁵，其中r¹⁵是-n(ch3)2或-och3，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r¹和r³是-h，r²和r⁴是-o-ch3，以及(ii)r⁹是苯基，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r¹和r³是-h，r²和r⁴是-o-ch3，以及(ii)r¹⁰是-h并且r¹¹是烷氧基或卤素，或r¹⁰和r¹¹一起形成-o-ch2-o-单元，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r⁵是羟基或酰氧基，或r⁵和r⁶一起形成氧代基团，以及(ii)r⁷是-h并且r⁸是-cor¹⁵，其中r¹⁵是-n(ch3)2或-och3，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r⁵是羟基或酰氧基，或r⁵和r⁶一起形成氧代基团，以及(ii)r⁹是苯基，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r⁵是羟基或酰氧基，或r⁵和r⁶一起形成氧代基团，以及(ii)r¹⁰是-h并且r¹¹是烷氧基或卤素，或r¹⁰和r¹¹一起形成-o-ch2-o-单元，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r⁷是-h并且r⁸是-cor¹⁵，其中r¹⁵是-n(ch3)2或-och3，以及(ii)r⁹是苯基，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r⁷是-h和r⁸是-cor¹⁵，其中r¹⁵是-n(ch3)2或-och3，以及(ii)r¹⁰是-h并且r¹¹是烷氧基或卤素，或r¹⁰和r¹¹一起形成-o-ch2-o-单元，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

或

-其中(i)r⁹是苯基，以及(ii)r¹⁰是-h并且r¹¹是烷氧基或卤素，或r¹⁰和r¹¹一起形成-o-ch2-o-单元，其他取代基的定义如对于式(i)所说明。

在一个甚至更优选的实施方案中，flavagline是结构(ia)的化学化合物或其衍生物，

-其中(i)r¹和r³是-h，r²和r⁴是-o-ch3，(ii)r⁵是羟基或酰氧基，或r⁵和r⁶一起形成氧代基团，以及(iii)r⁷是-h并且r⁸是-cor¹⁵，其中r¹⁵是-n(ch3)2或-och3，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r¹和r³是-h，r²和r⁴是-o-ch3，(ii)r⁵是羟基或酰氧基，或r⁵和r⁶一起形成氧代基团，以及(iii)r⁹是苯基，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r¹和r³是-h，r²和r⁴是-o-ch3，(ii)r⁵是羟基或酰氧基，或r⁵和r⁶一起形成氧代基团，以及(iii)r¹⁰是-h并且r¹¹是烷氧基或卤素，或r¹⁰和r¹¹一起形成-o-ch2-o-单元，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r¹和r³是-h，r²和r⁴是-o-ch3，(ii)r⁷是-h并且r⁸是-cor¹⁵，其中r¹⁵是-n(ch3)2或-och3，以及(iii)r⁹是苯基，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r¹和r³是-h，r²和r⁴是-o-ch3，(ii)r⁷是-h并且r⁸是-cor¹⁵，其中r¹⁵是-n(ch3)2或-och3，以及(iii)r¹⁰是-h并且r¹¹是烷氧基或卤素，或r¹⁰和r¹¹一起形成-o-ch2-o-单元，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r¹和r³是-h，r²和r⁴是-o-ch3，(ii)r⁹是苯基，以及(iii)r¹⁰是-h并且r¹¹是烷氧基或卤素，或r¹⁰和r¹¹一起形成-o-ch2-o-单元，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r⁵是羟基或酰氧基，或r⁵和r⁶一起形成氧代基团，(ii)r⁷是-h并且r⁸是-cor¹⁵，其中r¹⁵是-n(ch3)2或-och3，以及(iii)r⁹是苯基，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r⁵是羟基或酰氧基，或r⁵和r⁶一起形成氧代基团，以及(ii)r⁷是-h并且r⁸是-cor¹⁵，其中r¹⁵是-n(ch3)2或-och3，以及(iii)r¹⁰是-h并且r¹¹是烷氧基或卤素，或r¹⁰和r¹¹一起形成-o-ch2-o-单元，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r⁵是羟基或酰氧基，或r⁵和r⁶一起形成氧代基团，(ii)r⁹是苯基，以及(iii)r¹⁰是-h并且r¹¹是烷氧基或卤素，或r¹⁰和r¹¹一起形成-o-ch2-o-单元，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

或

-其中(i)r⁷是-h和r⁸是-cor¹⁵，其中r¹⁵是-n(ch3)2或-och3，(ii)r⁹是苯基，以及(iii)r¹⁰是-h并且r¹¹是烷氧基或卤素，或r¹⁰和r¹¹一起形成-o-ch2-o-单元，其他取代基的定义如对于式(i)所说明。

在一个仍更优选的实施方案中，flavagline是结构(ia)的化学化合物或其衍生物，

-其中(i)r¹和r³是-h，r²和r⁴是-o-ch3，(ii)r⁵是羟基或酰氧基，或r⁵和r⁶一起形成氧代基团，(iii)r⁷是-h并且r⁸是-cor¹⁵，其中r¹⁵是-n(ch3)2或-och3，以及(iv)r⁹是苯基，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r¹和r³是-h，r²和r⁴是-o-ch3，(ii)r⁵是羟基或酰氧基，或r⁵和r⁶一起形成氧代基团，(iii)r⁷是-h并且r⁸是-cor¹⁵，其中r¹⁵是-n(ch3)2或-och3，以及(iv)r¹⁰是-h并且r¹¹是烷氧基或卤素，或r¹⁰和r¹¹一起形成-o-ch2-o-单元，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r¹和r³是-h，r²和r⁴是-o-ch3，(ii)r⁵是羟基或酰氧基，或r⁵和r⁶一起形成氧代基团，(iii)r⁹是苯基，以及(iv)r¹⁰是-h并且r¹¹是烷氧基或卤素，或r¹⁰和r¹¹一起形成-o-ch2-o-单元，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

-其中(i)r¹和r³是-h，r²和r⁴是-o-ch3，(ii)r⁷是-h并且r⁸是-cor¹⁵，其中r¹⁵是-n(ch3)2或-och3，(iii)r⁹是苯基，以及(iv)r¹⁰是-h并且r¹¹是烷氧基或卤素，或r¹⁰和r¹¹一起形成-o-ch2-o-单元，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

或

-其中(i)r⁵是羟基或酰氧基，或r⁵和r⁶一起形成氧代基团，(ii)r⁷是-h并且r⁸是-cor¹⁵，其中r¹⁵是-n(ch3)2或-och3，(iii)r⁹是苯基，以及(iv)r¹⁰是-h并且r¹¹是烷氧基或卤素，或r¹⁰和r¹¹一起形成-o-ch2-o-单元，其他取代基的定义如对于式(i)所说明；

在一个最优选的实施方案中，flavagline是结构(ia)的化学化合物或其衍生物，

-其中(i)r¹和r³是-h，r²和r⁴是-o-ch3，(ii)r⁵是羟基或酰氧基，或r⁵和r⁶一起形成氧代基团，(iii)r⁷是-h并且r⁸是-cor¹⁵，其中r¹⁵是-n(ch3)2或-och3，(iv)r⁹是苯基，以及(v)r¹⁰是-h并且r¹¹是烷氧基或卤素，或r¹⁰和r¹¹一起形成-o-ch2-o-单元。

优选地，术语flavagline涉及选自由以下组成的组的化合物：洛克米仔兰酰胺、aglaroxinc、环洛克米仔兰酰胺(cyclorocaglamide)、洛克米仔兰醇(rocaglaol)、洛克米仔兰酸甲酯(aglafolin)、去甲基洛克米仔兰酰胺(desmethylrocaglamide)、pannellin以及近期分离的二烷基氧基改性的衍生物silvestrol和episilvestrol(hwang等，2004，j.org.chem.69卷：3350-3358页)。技术人员理解术语“洛克米仔兰酰胺”是式(ii)的化合物(在实施例部分命名为洛克米仔兰酰胺a或roc-a)、式(iii)的化合物、式(iv)的化合物、式(v)的化合物(在实施例部分命名为洛克米仔兰酰胺q或roc-q)、式(vi)的化合物(在本申请中称作洛克米仔兰酰胺ar或roc-ar)、式(vii)的化合物(称作洛克米仔兰酰胺u或roc-u)和式(viii)的化合物(称作洛克米仔兰酰胺w或roc-w)的通用术语。更优选地，flavagline是洛克米仔兰酰胺q或洛克米仔兰酰胺ar；最优选地，flavagline是洛克米仔兰酰胺a，即((1r,2r,3s,3ar,8bs)-1,8b-二羟基-6,8-二甲氧基-3a-(4-甲氧基苯基)-n,n-二甲基-3-苯基-2,3-二氢-1h-环戊二烯并[b][1]苯并呋喃-2-甲酰胺)。优选地，flavagline是式(ix)的化合物，称作fl3，即(1r,3s,3ar,8bs)-3a-(4-溴苯基)-6,8-二甲氧基-3-苯基-2,3,3a,8b-四氢-1h-环戊二烯并[b]苯并呋喃-1,8b-二醇)，或其衍生物。

最优选地，flavagline是洛克米仔兰酰胺a或fl3，如上文所说明。

有利地，在本发明的工作期间发现，在利用flavagline和2-脱氧葡萄糖对癌症的组合治疗中，癌细胞对2-脱氧葡萄糖敏化。因此，在flavagline的存在下可以以较低浓度使用2-脱氧葡萄糖，同时仍具有对癌细胞的相同效果。该敏化达到这样的程度：在癌症治疗中可以使用已经显示为对人不造成不良反应或至少造成较不严重的不良反应的2-脱氧葡萄糖浓度。类似地，癌细胞对flavagline的敏感性在2-脱氧葡萄糖的存在下增加。重要地，发现通过2-脱氧葡萄糖的存在保护正常细胞免受flavagline的影响。

以上作出的定义加以必要修正后适用于下文。以下进一步作出的另外的定义和解释加以必要修正后也适用于本说明书中描述的所有实施方案。

本发明还涉及根据本发明的组合制剂，其用作药物。此外，本发明涉及根据本发明的组合制剂，其用于治疗癌症。

在根据本发明的医学用途中，2-脱氧葡萄糖优选地以造成最可忍受的不良药物反应的浓度给药。术语“可忍受的不良药物反应”优选地涉及最多等级3，更优选最多等级2，其为根据美国卫生与人类服务部(u.s.departmentofhealthandhumanservices)在2009年5月28日公布的不良事件的通用术语标准v4.0(commonterminologycriteriaforadverseeventsv4.0)(ctcae)的不良事件。更优选地，该术语涉及在最多25％的接受治疗的患者中、甚至更优选在最多10％的接受治疗的患者中的胃肠出血，和/或在最多50％的接受治疗的患者中、优选在最多25％的接受治疗的患者中的在心脏电循环(qtc延长)的q波开始和t波结束之间的间隔的可逆等级3延长。优选地，2-脱氧葡萄糖以0.01mm至20mm、更优选0.1mm至4mm、仍更优选约0.25至约1mm、甚至更优选0.5mm至1mm、最优选约1mm的浓度给药。优选地，2-脱氧葡萄糖以10mg/kg至150mg/kg、更优选25至125mg/kg、甚至更优选50mg/kg至100mg/kg、仍更优选70mg/kg至90mg/kg、最优选75mg/kg至80mg/kg的日剂量给药；优选地，以这些剂量观察到最多等级3的不良事件。还优选地，2-脱氧葡萄糖以10mg/kg至100mg/kg、更优选25至90mg/kg、甚至更优选30mg/kg至85mg/kg、仍更优选35mg/kg至65mg/kg、最优选40mg/kg至55mg/kg的日剂量给药；优选地，以这些剂量观察到最多等级2的不良事件。还优选地，2-脱氧葡萄糖以50mg/kg至1000mg/kg、更优选75至750mg/kg、甚至更优选100mg/kg至600mg/kg、仍更优选125mg/kg至500mg/kg、最优选150mg/kg至250mg/kg的每周三次剂量或优选地每周一次剂量给药。还优选地，2-脱氧葡萄糖以200mg/kg至2000mg/kg、更优选400至1500mg/kg、甚至更优选425mg/kg至1250mg/kg、仍更优选450mg/kg至1000mg/kg、最优选475mg/kg至700mg/kg的每月一次剂量给药。技术人员理解2dg的上述给药可以包括无治疗间隔以允许患者恢复，例如使用日剂量的两周，然后是没有2dg的给药的一周。

此外，在根据本发明的医学用途中，一种或多种flavagline优选地以0.02μm至1mm、更优选0.02μm至250μm、仍更优选0.02μm至25μm、最优选0.025μm至0.1μm的浓度给药。优选地，一种或多种flavagline以优选0.01mg/kg至500mg/kg、更优选0.01mg/kg至125mg/kg、仍更优选0.01mg/kg至12.5mg/kg、最优选约0.0125mg/kg至0.05mg/kg的日剂量给药。优选地，如果给药多于一种flavagline，则前述浓度或剂量是所给药的多种flavagline的浓度的总和。

优选地，组合制剂用于治疗癌症。如本文使用的，术语“癌症”是指以一组体细胞(“癌细胞”)的不受控生长为特征的动物(优选人)的疾病。该不受控生长可以通过侵入到周围组织中和破坏周围组织以及可能地癌细胞到体内其他位置的扩散来完成。

优选地，癌症选自由以下组成的列表：急性成淋巴细胞性白血病、急性骨髓性白血病、肾上腺皮质癌、艾滋病相关淋巴瘤、肛门癌、阑尾癌、星形细胞瘤、非典型畸样瘤(atypicalteratoid)、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、脑干神经胶质瘤、乳腺癌、伯基特(burkitt)淋巴瘤、类癌瘤、小脑星形细胞瘤、宫颈癌、脊索瘤、慢性淋巴细胞性白血病、慢性骨髓性白血病、结肠癌、结肠直肠癌、颅咽管瘤、子宫内膜癌、成室管膜细胞瘤、室管膜瘤、食管癌、颅外生殖细胞瘤、性腺外生殖细胞瘤、肝外胆管癌、胆囊癌、胃癌、胃肠道间质瘤、妊娠滋养细胞瘤、毛细胞性白血病、头颈癌、肝细胞癌、霍奇金(hodgkin)淋巴瘤、下咽癌、下丘脑和视觉通路神经胶质瘤、眼内黑素瘤、卡波西(kaposi)肉瘤、喉癌、成神经管细胞瘤、髓质上皮瘤、黑素瘤、梅克尔(merkel)细胞癌、间皮瘤、口癌、多发性内分泌瘤综合征、多发性骨髓瘤、蕈样肉芽肿病、鼻腔和鼻旁窦癌、鼻咽癌、成神经细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌、口腔癌、口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、卵巢上皮癌、卵巢生殖细胞瘤、卵巢低度恶性潜能肿瘤、胰腺癌、乳头状瘤病、鼻旁窦和鼻腔癌、甲状旁腺癌、阴茎癌、咽喉癌、嗜铬细胞瘤、垂体瘤、胸膜肺母细胞瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、前列腺癌、肾癌、肾细胞癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、塞扎里(sézary)综合征、小细胞肺癌、小肠癌、软组织肉瘤、鳞状细胞癌、鳞状颈癌、睾丸癌、喉癌、胸腺癌、胸腺瘤、甲状腺癌、尿道癌、子宫肉瘤、阴道癌、外阴癌、巨球蛋白血症、和wilms肿瘤。

更优选地，癌症是白血病、淋巴瘤、hpv相关的癌症、结肠直肠癌、胃癌、胰腺癌、肺癌、脑癌、或乳腺癌。优选的hpv相关的癌症是宫颈癌。优选的结肠直肠癌是结肠癌。优选的肺癌是小细胞肺癌和非小细胞肺癌。优选的脑癌是神经胶质瘤、星形细胞瘤和胶质母细胞瘤。

本发明还涉及flavagline，其用于包括2-脱氧葡萄糖的给药的针对癌症的组合疗法。此外，本发明涉及2-脱氧葡萄糖，其用于包括flavagline的给药的针对癌症的组合疗法。

技术人员理解术语“组合疗法”，并且优选地，其涉及受试者的治疗，包括至少两种治疗模式和/或至少两种药物活性化合物的给药，其中“治疗模式”涉及治疗(例如手术、放射疗法和药物活性化合物的给药)的科学原理。因此，根据本说明书的组合疗法优选地包括flavagline和2-脱氧葡萄糖的给药。应理解组合疗法可以优选地包括另外的步骤，包括另外的治疗模式和/或另外的药物活性化合物(例如化学治疗剂)的给药。

如本文使用的，术语“受试者”涵盖动物，优选哺乳动物，更优选人。优选地，受试者患有、疑似患有如本文其他部分说明的癌症，或者处于患有所述癌症的风险中。患有一种或多种所述疾病的受试者可以通过对于该一种或多种疾病已知的伴随症状来识别。这些症状是本领域已知的，并且例如在医学教科书中描述。疑似患有一种或多种上述疾病的受试者可以是任何表面上健康的受试者，例如通过常规临床筛查研究的受试者，或者可以是正处于发展上述疾病的风险中的受试者。

此外，本发明涉及治疗受癌症折磨的受试者的癌症的方法，其包括向所述受试者给药flavagline和2-脱氧葡萄糖，由此治疗所述癌症。

本发明的方法优选地是体内方法。此外，其可以包括除以上明确提到的那些步骤之外的步骤。例如，另外的步骤可以涉及例如在所述药物活性化合物的给药之前或之后手术移除肿瘤组织，或调查所述受试者的心脏功能。此外，所述步骤中的一个或多个可以通过自动化设备进行。优选地，在根据本说明书的治疗癌症的方法中，所述flavagline和所述2-脱氧葡萄糖同时给药。

此外，本发明涉及2-脱氧葡萄糖和flavagline用于制备治疗癌症的药物组合物的用途。

优选地，该药物组合物是如本文其他部分说明的组合制剂。优选地，该药物组合物是包含所述2-脱氧葡萄糖和所述flavagline的混合物的组合物，即优选地，该药物组合物是如本文其他部分说明的混合制剂。

本发明还涉及包含2-脱氧葡萄糖和flavagline的用于组合或单独和/或用于同时或相继使用的组合制剂用于治疗癌症的用途。

另外，本发明涉及用于制备组合制剂的方法，其中所述组合制剂是包含flavagline和2-脱氧葡萄糖的混合物的制剂，所述方法包括混合flavagline和2-脱氧葡萄糖。因此，优选地，该方法是用于制备flavagline和2-脱氧葡萄糖的混合制剂的方法。

本发明的方法优选地可以包括除以上明确提到的那些步骤之外的步骤。例如，另外的步骤可以涉及例如提供药用形式的flavagline和/或2-脱氧葡萄糖或将获得的混合物配制为药物组合物。

考虑到以上内容，以下实施方案是优选的：

实施方案1：一种组合制剂，所述组合制剂包含2-脱氧葡萄糖和flavagline。

实施方案2：根据实施方案1所述的组合制剂，其中所述flavagline是式(i)的化合物，

或者，优选地，式(ia)的化合物

其中

r¹选自-h、卤素和烷基；

r²选自烷氧基、卤素和烷基；

r³选自-h、卤素和烷基；

或r²和r³一起形成–o(ch2)no-单元，其中n＝1或2；

r⁴选自烷氧基、卤素和烷基；

r⁵选自羟基、酰氧基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基和–nr12-chr13-coor14，其中

r¹²选自-h和烷基，

r¹³选自苯基和苄基，所述苯基和苄基两者都可以携带来自羟基、吲哚基和咪唑基甲基的组的取代基，以及烷基，所述烷基可以被选自-oh、-sh、烷氧基、硫代烷氧基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、羧基、羧基烷基、羧酰胺和胍基基团的基团取代；

或r¹²和r¹³一起形成–(ch2)3-或–(ch2)4-基团；

r¹⁴选自烷基和苄基；在该情况下r⁶是氢，

r⁶选自-h、卤素和烷基；

或r⁵和r⁶一起形成氧代或羟基亚氨基；

r⁷是-h；

r⁸选自-conr¹⁶r¹⁷、-h和–coor¹⁵，其中

r¹⁵和r¹⁶独立地选自甲基和-h，以及

r¹⁷选自甲基、-h、4-羟基丁基和2-四氢呋喃基；

r⁹选自任选地被取代的苯基和任选地被取代的杂芳基；

r¹⁰选自烷氧基、-h、卤素和烷基，以及

r¹¹选自-h、羟基、卤素、烷氧基和烷基；

或r¹⁰和r¹¹位于彼此的邻位并且一起形成–o(ch2)no-单元，其中n＝1或2，

或者其衍生物或盐。

实施方案3：根据实施方案1或2所述的组合制剂，其中所述flavagline是包含选自由式(ii)至(ix)组成的列表的结构的化合物：

实施方案4：根据实施方案1至3中任一项所述的组合制剂，其中所述flavagline是(1r,2r,3s,3ar,8bs)-1,8b-二羟基-6,8-二甲氧基-3a-(4-甲氧基苯基)-n,n-二甲基-3-苯基-2,3-二氢-1h-环戊二烯并[b][1]苯并呋喃-2-甲酰胺(洛克米仔兰酰胺a)或其衍生物；或(1r,3s,3ar,8bs)-3a-(4-溴苯基)-6,8-二甲氧基-3-苯基-2,3,3a,8b-四氢-1h-环戊二烯并[b]苯并呋喃-1,8b-二醇(fl3)或其衍生物。

实施方案5：根据实施方案1至4中任一项所述的组合制剂，其中所述2-脱氧葡萄糖是2-脱氧-d-葡萄糖((4r,5s,6r)-6-(羟甲基)四氢吡喃-2,4,5-三醇)。

实施方案6：根据实施方案1至5中任一项所述的组合制剂，其中所述组合制剂是包含所述flavagline和所述2-脱氧葡萄糖的混合物的制剂。

实施方案7：根据实施方案1至6中任一项所述的组合制剂，其中所述组合制剂用于组合或单独使用和/或用于同时或顺序使用。

实施方案8：根据实施方案1至7中任一项所述的组合制剂，其中所述组合制剂是药学相容的制剂。

实施方案9：根据实施方案1至8中任一项所述的组合制剂，其用作药物。

实施方案10：根据实施方案1至8中任一项所述的组合制剂，其用于治疗癌症。

实施方案11：根据实施方案10所述的用于使用的组合制剂，其中所述癌症是白血病、淋巴瘤、hpv相关的癌症、结肠直肠癌、胃癌、胰腺癌、肺癌、脑癌或乳腺癌，优选地，其中所述癌症是宫颈癌、结肠癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、神经胶质瘤、星形细胞瘤或胶质母细胞瘤。

实施方案12：根据实施方案10或11所述的用于使用的组合制剂，其中所述2-脱氧葡萄糖以造成最大可忍受的不良药物反应的浓度给药。

实施方案13：根据实施方案10至12中任一项所述的用于使用的组合制剂，其中所述2-脱氧葡萄糖以0.01mm至20mm、优选0.1mm至4mm、更优选约1mm的浓度给药。

实施方案14：一种flavagline，其用于包括2-脱氧葡萄糖的给药的针对癌症的组合疗法。

实施方案15：根据实施方案14所述的用于使用的flavagline，其中所述癌症是白血病、淋巴瘤、hpv相关的癌症、结肠直肠癌、胃癌、胰腺癌、肺癌、脑癌或乳腺癌，优选地，其中所述癌症是宫颈癌、结肠癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、神经胶质瘤、星形细胞瘤或胶质母细胞瘤。

实施方案16：2-脱氧葡萄糖，其用于包括flavagline的给药的针对癌症的组合疗法。

实施方案17：根据实施方案16所述的用于使用的2-脱氧葡萄糖，其中所述癌症是白血病、淋巴瘤、hpv相关的癌症、结肠直肠癌、胃癌、胰腺癌、肺癌、脑癌或乳腺癌，优选地，其中所述癌症是宫颈癌、结肠癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、神经胶质瘤、星形细胞瘤或胶质母细胞瘤。

实施方案18：一种治疗受癌症折磨的受试者的癌症的方法，所述方法包括向所述受试者给药flavagline和2-脱氧葡萄糖，由此治疗所述癌症。

实施方案19：根据实施方案18所述的治疗癌症的方法，其中所述flavagline和所述2-脱氧葡萄糖同时给药。

实施方案20：2-脱氧葡萄糖和flavagline用于制备治疗癌症的药物组合物的用途。

实施方案21：根据实施方案20所述的用途，其中所述药物组合物是包含所述2-脱氧葡萄糖和所述flavagline的混合物的组合物。

实施方案22：包含2-脱氧葡萄糖和flavagline的用于组合或单独施用和/或用于同时或顺序使用的组合制剂用于治疗癌症的用途。

实施方案23：一种用于制备根据实施方案6所述的组合制剂的方法，所述方法包括混合flavagline和2-脱氧葡萄糖的步骤。

实施方案24：根据实施方案23所述的方法，所述方法还包括将flavagline和2-脱氧葡萄糖的混合物配制为药物组合物的步骤。

本说明书中引用的所有文献在其完整公开内容和本说明书中具体提到的公开内容方面通过引用并入本文。

附图说明

图1：洛克米仔兰酰胺和fl3的ic50的确定。治疗方案通过在每幅图右侧解释的不同线条样式说明。具有方形的实线表示使用洛克米仔兰酰胺的治疗，具有圆形的虚线表示组合使用洛克米仔兰酰胺和2dg的治疗，具有三角形的虚线表示使用fl3的治疗，并且具有菱形的虚线表示组合使用fl3和2dg的治疗。x轴表示flavagline(洛克米仔兰酰胺或fl3)的治疗剂量，y轴表示以％计的相对细胞活力(通过mtt分析确定)；未用flavagline处理的细胞用作对照(对应于100％活力)。a.hct116细胞。b.ht29细胞。c:正常的人pbmc。

图2：用hct116细胞(10⁷个细胞)注射并通过腹膜内注射每天用药物治疗的小鼠的肿瘤体积。a.在肿瘤尺寸达到约15-40mm³后，用200mg/kg2-dg、或用0.5mg/kg洛克米仔兰酰胺、或用所述化合物的组合治疗小鼠10天。显示表示在实验结束时的肿瘤体积的数据，每个三角形表示一只小鼠的肿瘤体积。b.呈现为柱状图的来自(a)的数据。

图3：单独地或与洛克米仔兰酰胺(0.1μm，0.025μm，0.01μm)组合地用2dg(1mm或4mm)处理的u136mg细胞以及用2dg(1mm)处理的pbmc的细胞活力。结果证明，相比于未经处理的对照，4mm2dg导致u136mg细胞活力降低达46％。与洛克米仔兰酰胺的组合允许至1mm剂量的2dg的明显剂量减少：与0.1μm洛克米仔兰酰胺组合，1mm2dg导致显著高于单独的4mm2dg的肿瘤细胞活力降低(与1mm2dg+0.1μm洛克米仔兰酰胺为37％细胞活力相比，4mm2dg为46％细胞活力，p＝0.013)。与0.025μm洛克米仔兰酰胺组合，1mm2dg导致显著高于单独的4mm2dg的肿瘤细胞活力降低(与1mm2dg+0.025μm洛克米仔兰酰胺为38％细胞活力相比，4mm2dg为46％细胞活力，p＝0.014)。与此相比，在1mm2dg处理后，pbmc的细胞活力降低至未处理对照细胞的81.7％，并且仅观察到额外的洛克米仔兰酰胺处理的轻微影响。

以下实施例应仅举例说明本发明。无论如何，它们不应该被解释为限制本发明的范围。

实施例1：体外使用洛克米仔兰酰胺的肿瘤细胞针对2-dg的敏化

方法：

mtt(甲基噻唑四唑盐)测定用于确定细胞活力。mtt测定是用于测量将四唑盐染料mtt还原成其不溶甲(得到紫色)的细胞酶的活性的比色法。该方法在本实验中用于反映存在的活细胞的数量以及用于测量细胞毒性(活细胞的减少)。

将细胞以10,000的细胞数以每孔100μl培养基铺在平底96孔板中。补充有胎牛血清(10％)和青霉素/链霉素(1％)培养基的rpmi1640(roswellparkmemorialinstitute，gibco，城市，州)用于细胞培养和铺板。在铺板后，在处理开始之前将细胞在37℃下在培养器中以5％co2浓度温育24小时。之后，当细胞变得贴壁时，移除培养基并且将2-dg和洛克米仔兰酰胺分别以1mm和0.1μm的浓度加入到细胞中。在48小时的温育后，将20μl的mtt试剂加入到每个孔中。在比色评价前将细胞在37℃下温育1小时。

为了确定处理后的活细胞的量，在elisa酶标仪装置(tecangenios，奥地利)的帮助下在485nm的波长测量吸收。所有测量进行四次。在背景扣除后由所测量的值计算平均值和标准差。作为背景，在仅包含培养基的孔中测量吸收。

结果：

1mm浓度的2-dg处理在所分析的15个细胞系中的9个中引起明显的响应(活力降低至低于未处理细胞的80％)。通过洛克米仔兰酰胺的伴随添加的敏化显著地增强所观察到的响应，因为13个细胞系中的所有13个都在2-dg+洛克米仔兰酰胺处理后显示出明显的响应。此外，所观察到的响应在利用洛克米仔兰酰胺的敏化后明显更显著(表1)。

表1：在用2-脱氧葡萄糖或/和洛克米仔兰酰胺处理肿瘤细胞系后的细胞活力。显示2-dg单独处理(1mm，“2dg”)、洛克米仔兰酰胺单独处理(0.1μm，“洛克米仔兰酰胺”)、2-dg+洛克米仔兰酰胺(分别为1mm，0.1μm，“2dg+roc”)的结果。

实施例2：通过与2dg进行组合的flavagline的ic50的改变

方法：

mtt(甲基噻唑四唑盐)测定与实施例1中的相同。将结肠直肠癌细胞(hct116和ht29)以及正常的人pbmc分别以10,000和100,000的细胞数以每孔100μl的培养基铺在平底96孔板中。补充有10％胎牛血清和1％青霉素/链霉素(gibco，ny，usa)培养基的dmem(roswellparkmemorialinstitute，gibco，paisley，uk)用于肿瘤细胞的细胞培养和铺板。由补充有10％人ab血清、1％l-谷氨酰胺(glutamin)和0,05％庆大霉素的iscove的改性dmem(imdm)组成的用于pbmc的培养基用于pbmc铺板。在铺板后，以五个递增浓度(10、25、50、75和100nm)作为单一物质以及与1mm2dg组合地施用洛克米仔兰酰胺和fl3。然后将细胞在co2室中以5％co2浓度(memmertincubator，büchenbach，德国)与药物温育48小时。然后，将20μl的mtt试剂(promega，madison，wi，usa)加入到每个孔中。如上将细胞在37℃下温育1小时。为了确定处理后的活细胞的量，在elisa酶标仪装置(tecangenios，萨尔茨堡，奥地利)中在485nm的波长测量吸收。所有测量进行四次。在背景扣除后由所测量的值计算平均值和标准差。作为背景，在仅包含培养基的孔中测量吸收。

结果：

将与2dg组合的洛克米仔兰酰胺或fl3施用于肿瘤细胞大幅降低两种药物的ic50(图1a和b)。与此相比，两种药物对正常细胞的ic50在2dg的存在下升高(图1c)。该实施例证明与洛克米仔兰酰胺或fl3组合的2dg的施用大幅增加肿瘤细胞对这些药物的敏感性并且同时显著降低其对正常细胞的细胞活力的影响。

实施例3：通过2-dg和洛克米仔兰酰胺对小鼠中肿瘤生长的抑制

将hct116细胞(2x10⁶)皮下注射到免疫缺陷小鼠中。使用单独的2-dg(200mg/kg体重)、单独的洛克米仔兰酰胺(0.5mg/kg)、或2-dg和洛克米仔兰酰胺的组合的治疗在肿瘤注射后的第6天开始。组合疗法导致肿瘤生长的显著减少，并且与单独疗法或模拟物注射的对照组相比，组合疗法组的小鼠显示出最低的肿瘤体积。动物实验的结果在图2中示出。

实施例4：在利用洛克米仔兰酰胺的组合疗法中的2dg剂量的减少

为了评价洛克米仔兰酰胺在保持2dg的抗肿瘤效果的同时减少其剂量的潜力，在u138mg细胞(小鼠神经胶质瘤)中评价不同剂量的2dg与洛克米仔兰酰胺的组合。然后将洛克米仔兰酰胺和2dg的组合的细胞杀伤效果与单独的2dg的效果进行比较。结果证明1mm2dg与低剂量(0.025μm)的洛克米仔兰酰胺的组合允许实现与使用单独的4mm2dg观察到的杀伤效果类似的杀伤效果(图3a)，即在与洛克米仔兰酰胺的组合疗法中，至少四倍的剂量降低是可行的。如图3b中所示，结果证明4mm2dg导致与未处理对照相比54％的细胞活力降低。与洛克米仔兰酰胺的组合允许至1mm剂量的2dg的明显剂量减少。与0.1μm洛克米仔兰酰胺组合，1mm2dg导致显著高于单独的4mm2dg的肿瘤细胞活力降低(与1mm2dg&0.1μm洛克米仔兰酰胺为63％细胞活力相比，4mm2dg为54％细胞活力降低，p＝0.013)。与0.025μm洛克米仔兰酰胺组合，1mm2dg导致显著高于单独的4mm2dg的肿瘤细胞活力降低(与1mm2dg&0.025μm洛克米仔兰酰胺为62％细胞活力降低相比，4mm2dg为54％细胞活力降低，p＝0.014)。