本发明属于中药复方制剂
技术领域：
，具体涉及一种抗疲劳、提高免疫力的复方中药口服液及其制备方法。
背景技术：
：免疫力是指机体抵抗外来病毒侵袭、维持机体内环境稳定性的能力。现代医学科学证明，提高机体免疫力，有利于预防疾病，减缓衰老，提高记忆力，增强体力，改善机体亚健康状态。而近年来，随着人们生活质量的提高和中药草本的开发，人们越来越意识到增强体质、缓解疲劳、提高免疫力和适应力对健康的重要性，抗疲劳、提高机体免疫力的药品也因此受到了更多广泛的关注。目前，市场上销售的抗疲劳、提高机体免疫力的药品种类繁多，药物作用效果参差不齐。因此亟待研发纯天然无毒、具有独特功效及协同作用的药品。为了有效提高机体免疫力，从根本上改善人体脏器内部环境，本发明利用草本中药的天然活性及药物之间的科学配伍，效果显著，且无毒副作用，对体倦无力、阴虚血少、神衰气虚、阴阳失调、肝肾亏损、气滞湿阻、头晕目眩、元气不足等症状均有治疗功效。技术实现要素：本发明的目的是提供一种抗疲劳、提高免疫力的复方中药口服液，利用中药草本的天然活性及药物之间的科学配伍，标本共治，效果显著，无毒副作用，有效的解决当前抗疲劳、提高免疫力药品的不足。本发明进一步提供了一种抗疲劳、提高免疫力的复方中药口服液的制备方法，利用超声波辅助萃取及酶法制备方法，实现有效物质的最优化提取，制备方法合理，成品质量稳定，口感适宜。通过动物实验及临床实验，进一步证实本发明安全高效，无副作用，应用范围广。适用于体倦无力、阴虚血少、神衰气虚、阴阳失调、肝肾亏损、气滞湿阻、头晕目眩、元气不足等症状，标本兼治，效果显著。本发明所述的一种抗疲劳、提高免疫力的复方中药口服液，其特征在于，是由以下药物按重量份数制备而成：玛咖20～30g，迷迭香5～10g，何首乌10～30g，龟甲10～30g，猴头菇5～10g，女贞子5～15g，五味子10～30g，三七15～35g，金钱草20～30g，山药5～15g，秋葵20～30g，萝藦叶15～35g。本发明所述的一种抗疲劳、提高免疫力的复方中药口服液，其优选配方为：玛咖25g，迷迭香8g，何首乌20g，龟甲20g，猴头菇8g，女贞子10g，五味子20g，三七20g，金钱草25g，山药10g，秋葵25g，萝藦叶20g。本发明所述的一种抗疲劳、提高免疫力的复方中药口服液的制备方法，其步骤如下：(1)取20～30g玛咖、5～10g迷迭香、5～15g女贞子分别粉碎成100～300目粗粉后混合，置于反应容器中，加入粗粉3～8倍质量的质量分数40～60％的乙醇水溶液浸泡35～45分钟，加热回流提取，每次回流提取时间为1～2小时，再将反应容器于50～70℃、250W条件下超声提取20～40分钟后过滤，滤渣回收并依次经浸泡、回流提取、超声提取、过滤2～4次后弃去，最终滤液合并后减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.02～1.10清膏，作为提取液A；(2)取10～30g五味子、15～35g萝藦叶、15～35g三七分别粉碎成100～300目粗粉后混合，置于反应容器中，加入粗粉3～8倍质量的质量分数50～70％的乙醇水溶液浸泡35～45分钟，加热回流提取，每次回流提取时间为1～2小时，将反应容器于50～70℃、250W条件下超声提取20～40分钟后过滤，滤渣回收并依次经浸泡、回流提取、超声提取、过滤2～4次后弃去，最终滤液合并后减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.02～1.10清膏，作为提取液B；(3)取20～30g秋葵鲜果洗净、干燥、粉碎成100～300目粗粉，与5～10g、100～300目猴头菇子实体干粉混合，置于反应容器中，加入混合物3～8倍质量的水浸泡30～50分钟，再加入1.8IU/g纤维素酶和4IU/g果胶酶，在50～70℃水浴、pH＝5.0的条件下酶解1～2小时，然后温度升至80～85℃灭酶，并继续保温浸提1～2小时，过滤；将滤渣加水浸泡、酶解、灭酶、浸提共1～2次后弃去，合并过滤液，室温下静置24～48h后取上清液作为提取液C；(4)取10～30g何首乌、10～30g龟甲、20～30g金钱草、5～15g山药分别粉碎成100～300目粗粉后混合，置于反应容器中，加入粗粉3～8倍质量的水浸泡50～70分钟，加热微沸煎煮提取1～2小时，过滤；将滤渣加水浸泡、煎煮提取共2～4次后弃去，合并过滤液，室温下静置24～48h后取上清液作为提取液D；(5)将提取液A～D混合，加水稀释，搅拌至溶解，于室温静置24～48小时，过滤3～5次，滤液加入矫味剂(100～120g蜂蜜)和防腐剂(8～12g质量比为1：1的羟苯甲酯和羟苯丙酯)，搅拌溶解混合均匀后于高压蒸汽锅中灭菌，分装后得到本发明所述的口服液。选项应符合《2010版中国药典》液体制剂项下。【规格】：每支装10mL【用法用量】：口服。一次10mL(1支)，一日三次。【适应症】：适用于体倦无力、阴虚血少、神衰气虚、阴阳失调、肝肾亏损、气滞湿阻、头晕目眩、元气不足等症状，标本兼治，效果显著。本发明的药理药性如下：玛咖，具有提高体力、免疫力、记忆力、抗病毒能力，抵抗运动性疲劳，舒解压力，增强肌肉耐力，改善贫血、睡眠之功效；迷迭香，主治心悸乏力，神经衰弱，疲惫倦怠，头昏晕眩，具有安神定志，理气活血，舒缓紧张，缓解疲劳之功效；何首乌，祛风散淤，益气养血，补肾滋阴，延缓衰老，舒肝解毒，改善血液微循环；龟甲，滋肾潜阳，养血补心，抗肿瘤，用于头晕目眩，阳虚胃寒，骨蒸劳热，心虚、吐血，衄血，失眠，健忘等：猴头菇，增强机体免疫力、耐缺氧能力，改善消化系统，促进胃肠吸收、血液循环，抗衰老，抗肿瘤；女贞子，滋补肝肾，补气舒肝，通经和血，用于腰膝酸软、神经衰弱、肝肾阴虚、眩晕耳鸣、抗疲劳；五味子，滋补五脏，延缓衰老，宁心安神，益气强阴，止渴生津，增强人体免疫力、疾病抵抗力、肌肉活动力；三七，强心壮骨，舒筋通络，散瘀定痛，行气活血，增强体力，抗疲劳，抗缺氧；金钱草，清利湿热，利尿退肿，消风散气，抗癌消炎及较广泛的抗菌作用；山药，健身强体，健脾补虚，滋阴补阳，益志安神，填精固肾，补中益气；秋葵，强肾补虚，和气健胃，养肝护脏，增强机体耐力，抗癌，抗疲劳，降血糖，促进血液循环；萝藦叶，补虚助阳，强筋壮骨，补气活血，化毒解疔，主治筋骨血脉久为劳力疲惫者。本发明的积极效果在于：本发明利用草本中药的天然活性及药物之间的科学配伍，效果显著，无毒副作用，具有延缓老化、调经益血、滋补五脏、温补肾阳、速解疲劳、恢复体力，抗寒冷、抗病毒、增加机体免疫力等功效，适用于体倦无力、阴虚血少、神衰气虚、阴阳失调、肝肾亏损、气滞湿阻、头晕目眩、元气不足等症状，标本兼治，效果显著。此外，本发明利用超声波辅助萃取及酶法制备方法，实现有效物质的最优化提取，制备方法合理，成品质量稳定，口感适宜。具体实施方式为使本发明更加容易理解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例只用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。实施例1：处方：玛咖20g，迷迭香5g，何首乌10g，龟甲10g，猴头菇5g，女贞子5g，五味子10g，三七15g，金钱草20g，山药5g，秋葵20g，萝藦叶15g。取玛咖20g、迷迭香5g、女贞子5g于药用粉碎机中分别粉碎成200目粗粉后混合共30g，置于反应器中，加入粗粉5倍质量的质量分数50％乙醇水溶液浸泡40分钟，加热回流提取，每次提取2小时，将反应容器于60℃、250W超声仪中提取30分钟后过滤，滤渣回收并依次浸泡、回流提取、超声提取、过滤共3次后弃去，最终滤液合并后减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.05清膏，作为提取液A；取五味子10g、萝藦叶15g、三七15g于药用粉碎机中分别粉碎成200目粗粉后混合共40g，置于反应器中，加入粗粉5倍质量的质量分数70％乙醇水溶液浸泡40分钟，加热回流提取，每次提取2小时，将反应容器于60℃、250W超声仪中提取30分钟后过滤，滤渣回收并依次浸泡、回流提取、超声提取，过滤共3次后弃去，最终滤液合并后减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.05清膏，作为提取液B；取秋葵20g鲜果洗净、干燥、粉碎成200目粗粉，与5g、200目猴头菇子实体干粉混合共25g，加入粗粉5倍质量的水浸泡40分钟，加入1.8IU/g纤维素酶和4IU/g果胶酶(45IU的纤维素酶和100IU的果胶酶)，在50℃水浴、PH＝5.0的条件下酶解2小时，然后温度升至80℃灭酶，并继续保温浸提2小时，过滤；将滤渣加水浸泡、酶解、灭酶、提取共2次后弃去，合并过滤液，室温下静置24h后，取上清液，作为提取液C；取何首乌10g、龟甲10g、金钱草20g、山药5g于药用粉碎机分别粉碎成200目粗粉后混合共45g，加入5倍质量水浸泡60分钟，加热微沸煎煮2小时，过滤；将滤渣加水浸泡、煎煮提取共3次后弃去，合并过滤液，室温下静置24h后，取上清液，作为提取液D。所有提取液(A-D)混合，加水稀释至2000mL，搅拌至溶解，于室温静置24小时后，过滤3次，滤液加入矫味剂(110g蜂蜜)，防腐剂(10g质量比为1：1的羟苯甲酯和羟苯丙酯)，搅拌溶解混合均匀后，于高压蒸汽锅中灭菌，最后分装入口服液瓶中(10mL/支)。此后口服液试剂作为实验组进行动物实验，以评价该复方中药口服液的抗疲劳、提高免疫力作用。实施例2：处方：玛咖25g，迷迭香8g，何首乌20g，龟甲20g，猴头菇8g，女贞子10g，五味子20g，三七20g，金钱草25g，山药10g，秋葵25g，萝藦叶20g取玛咖25g、迷迭香8g、女贞子10g于药用粉碎机中分别粉碎成200目粗粉后混合共43g，置于反应器中，加入粗粉5倍质量的质量分数50％乙醇水溶液浸泡40分钟，加热回流提取，每次提取2小时，将反应容器于60℃、250W超声仪中提取30分钟后过滤，滤渣回收并依次浸泡、回流提取、超声提取、过滤共3次后弃去，最终滤液合并后减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.05清膏，作为提取液A；取五味子20g、萝藦叶20g、三七20g于药用粉碎机中分别粉碎成200目粗粉后混合共60g，置于反应器中，加入粗粉5倍质量的质量分数70％乙醇水溶液浸泡40分钟，加热回流提取，每次提取2小时，将反应容器于60℃、250W超声仪中提取30分钟后过滤，滤渣回收并依次浸泡、回流提取、超声提取，过滤共3次后弃去，最终滤液合并后减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.05清膏，作为提取液B；取秋葵25g鲜果洗净、干燥、粉碎成200目粗粉，与8g、200目猴头菇子实体干粉混合共33g，加入粗粉5倍质量的水浸泡40分钟，加入1.8IU/g纤维素酶和4IU/g果胶酶(59.4IU的纤维素酶和132IU的果胶酶)，在50℃水浴、PH＝5.0的条件下酶解2小时，然后温度升至80℃灭酶，并继续保温浸提2小时，过滤；将滤渣加水浸泡、酶解、灭酶、提取共2次后弃去，合并过滤液，室温下静置24h后，取上清液，作为提取液C；取何首乌20g、龟甲20g、金钱草25g、山药10g于药用粉碎机分别粉碎成200目粗粉后混合共75g，加入5倍质量水浸泡60分钟，加热微沸煎煮2小时，过滤；将滤渣加水浸泡、煎煮提取共3次后弃去，合并过滤液，室温下静置24h后，取上清液，作为提取液D。所有提取液(A-D)混合，加水稀释至2000mL，搅拌至溶解，于室温静置24小时后，过滤3次，滤液加入矫味剂(110g蜂蜜)，防腐剂(10g质量比为1：1的羟苯甲酯和羟苯丙酯)，搅拌溶解混合均匀后，于高压蒸汽锅中灭菌，最后分装入口服液瓶中(10mL/支)。此后口服液试剂作为实验组进行动物实验，以评价该复方中药口服液的抗疲劳、提高免疫力作用。实施例3：处方：玛咖30g，迷迭香10g，何首乌30g，龟甲30g，猴头菇10g，女贞子15g，五味子30g，三七35g，金钱草30g，山药15g，秋葵30g，萝藦叶35g取玛咖30g、迷迭香10g、女贞子15g于药用粉碎机中分别粉碎成200目粗粉后混合共55g，置于反应器中，加入粗粉5倍质量的质量分数50％乙醇水溶液浸泡40分钟，加热回流提取，每次提取2小时，将反应容器于60℃、250W超声仪中提取30分钟后过滤，滤渣回收并依次浸泡、回流提取、超声提取、过滤共3次后弃去，最终滤液合并后减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.05清膏，作为提取液A；取五味子30g、萝藦叶35g、三七35g于药用粉碎机中分别粉碎成200目粗粉后混合共100g，置于反应器中，加入粗粉5倍质量的质量分数70％乙醇水溶液浸泡40分钟，加热回流提取，每次提取2小时，将反应容器于60℃、250W超声仪中提取30分钟后过滤，滤渣回收并依次浸泡、回流提取、超声提取，过滤共3次后弃去，最终滤液合并后减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.05清膏，作为提取液B；取秋葵30g鲜果洗净、干燥、粉碎成200目粗粉，与10g、200目猴头菇子实体干粉混合共40g，加入粗粉5倍质量的水浸泡40分钟，加入1.8IU/g纤维素酶和4IU/g果胶酶(72IU的纤维素酶和160IU的果胶酶)，在50℃水浴、PH＝5.0的条件下酶解2小时，然后温度升至80℃灭酶，并继续保温浸提2小时，过滤；将滤渣加水浸泡、酶解、灭酶、提取共2次后弃去，合并过滤液，室温下静置24h后，取上清液，作为提取液C；取何首乌30g、龟甲30g、金钱草30g、山药15g于药用粉碎机分别粉碎成200目粗粉后混合共105g，加入5倍质量水浸泡60分钟，加热微沸煎煮2小时，过滤；将滤渣加水浸泡、煎煮提取共3次后弃去，合并过滤液，室温下静置24h后，取上清液，作为提取液D。所有提取液(A-D)混合，加水稀释至2000mL，搅拌至溶解，于室温静置24小时后，过滤3次，滤液加入矫味剂(110g蜂蜜)，防腐剂(10g质量比为1：1的羟苯甲酯和羟苯丙酯)，搅拌溶解混合均匀后，于高压蒸汽锅中灭菌，最后分装入口服液瓶中(10mL/支)。此后口服液试剂作为实验组进行动物实验，以评价该复方中药口服液的抗疲劳、提高免疫力作用。实验例：1.以下为本发明对小鼠免疫功能进行试验：1.1实验准备实验动物由吉林大学实验中心提供的健康昆明种雌性小鼠共160只，体重18-22g，待小鼠适应环境后随机分为四组，每组40只。对照组给予生理盐水10mL/kg，实验组给予不同实验例药物25mL/kg，用药灌胃给予药物，1d/2次，共30天后进行实验。1.2实验方法1.2.1负重游泳时间测定：对照组给予生理盐水，实验组给予不同实验例药物。每组随机选取10只小鼠，小鼠给药30天，末次给药结束后，小鼠尾部负重相当于体重5％的铅片后，置于游泳箱中，水温(27±3)℃，水深35cm，记录小鼠开始游泳至死亡时的时间作为小鼠游泳时间，结果如表1所示。表1：负重游泳时间测定结果本实验结果说明，比对照组相比，本处方实验例均可以显著提高负重小鼠在水中的游泳时间，且P<0.05，说明本处方口服液具有显著的抗疲劳，提升体力的功效。1.2.2肝糖原含量测定；对照组给予生理盐水，实验组给予不同实验例药物。每组随机选取10只小鼠，小鼠给药30天，末次给药结束后，将小鼠放入水温(27±3)℃的游泳箱中游泳90分钟后，立即拔眼球取血，取肝脏用蒽酮法测定肝糖原含量，结果如表2所示。表2：肝糖原含量测定结果本实验结果说明，比对照组相比，本处方实验例均可以显著提高小鼠肝糖原含量，说明本处方口服液具有增加小鼠糖原储备或减少糖原储备的作用。1.2.3小鼠免疫器官重量测定：对照组给予生理盐水，实验组给予不同实验例药物。每组随机选取10只小鼠，小鼠给药30天，末次给药结束后，取小鼠器官，称重，结果如表3所示。表3：小鼠免疫器官重量测定结果本实验结果说明，比对照组相比，本处方实验例均显著提升小鼠免疫器官重量，且P<0.05，说明本处方口服液均能显著提高免疫力，肠道消化吸收系统的功效。1.2.4ConA诱导小鼠淋巴细胞转化实验：对照组给予生理盐水，实验组给予不同实验例药物。每组随机选取10只小鼠，小鼠给药30天，末次给药结束后，取小鼠脾脏，制成单细胞悬液，将所得细胞悬液以3*106个/孔(1mL)的密度加入到24孔板上，每一组设置2孔，其中一孔中加入75μLConA液(刀豆蛋白A)，另一孔加入同等量的生理盐水，于37℃，CO2培养箱中培养。24小时后更换新鲜RPMI1640培养基，并加入50μLMTT/孔，继续培养4小时。培养结束后，加入1mL异丙醇，待结晶溶解完全后，分装到96孔板上，每孔设置3个对照，于酶标仪上570nm测定光密度，实验结果如表4所示。表4：ConA诱导小鼠淋巴细胞转化实验结果本实验结果说明，本处方三种实验例的吸光度值均与对照值存在显著性差异(P<0.01)，而实验例之间吸光度值均不存在显著性差异，说明本处方口服液具有显著的抗病毒，提高免疫力的功效。1.2.5血乳酸含量测定：对照组给予生理盐水，实验组给予不同实验例药物。每组随机选取10只小鼠，小鼠给药30天，末次给药结束后30分钟，对小鼠进行眼眶采血20μL，加入到5mL离心管中(事先用生理盐水配置1％肝素钠的潤洗)，再加入1.5mL蛋白沉淀剂混匀，于4℃冰箱静止15分钟，取出后离心1000rpm/分钟，5分钟，取上清液，使用全血乳酸(LD)测试试剂盒测定乳酸含量。动物采血后不负重，将小鼠放入水温(27±3)℃的游泳箱中游泳15分钟后，立即采血20μL，休息30分钟后，再采血20μL，使用上述方法测定乳酸含量，结果如表5所示。表5：血乳酸含量测定结果本实验结果说明，比对照组相比，本处方实验例小鼠在游泳后乳酸积累量显著降低，同时在休息后，小鼠的乳酸快速代谢，说明本处方口服液具有显著提高体力，抗疲劳的功效。以下为本发明对临床试验的进一步说明：使用本发明药物治疗易疲劳、免疫力低下者共150例，其中男性88例，女性62例，涉及年龄段为25-66岁。根据病情，每次服用口服液1瓶，每日三次，早、中、晚口服，一个月为一个疗程，连续服用一到两个疗程，并观察治疗效果。在服药期间不服用与其功效相同的药物。评定标准：全部缓解：脸色红润，精力旺盛，四肢有力，体力、免疫力提升，抗病毒能力增强，头疼、疲惫、健忘等症状消失。部分缓解：精神和脸色都所有好转，四肢渐渐有力，体力、免疫力也有所恢复，头疼、疲惫、健忘等症状逐渐消失。不缓解：症状无任何改善疗效评价：表6：临床观察结果例数全部缓解部分缓解不缓解治愈率％实施例1503310786实施例250396587.5实施例350348884经动物试验和临床验证，该抗疲劳、提高人体免疫力复方中药口服制剂，具有延缓老化、调经益血、滋补五脏、温补肾阳、速解疲劳、恢复体力，抗寒冷、抗病毒、增加机体免疫力等功效，适用于体倦无力、阴虚血少、神衰气虚、阴阳失调、肝肾亏损、气滞湿阻、头晕目眩、元气不足等症状，标本兼治，效果显著。此外，本发明利用超声波辅助萃取及酶法制备方法，实现有效物质的最优化提取，制备方法合理，成品质量稳定，口感适宜。当前第1页1 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