沉香粉中药泡服饮片的制作方法

本发明涉及一种沉香粉中药泡服饮片，属于医药技术领域。

背景技术：

中药沉香为瑞香科植物白木香aquilariasinensis(lour.)gilg含有树脂的木材。全年均可采收，割取含树脂的木材，除去不含树脂的部分，阴干而得。沉香，辛、苦，微温。归脾、胃、肾经，是《中国药典》2015年版一部收载的重要常用中药之一，具有行气止痛，温中止呕，纳气平喘。用于胸腹胀闷疼痛，胃寒呕吐呃逆，肾虛气逆喘急。用法与用量为后下。

沉香挥发油含苄基丙酮、对甲氧基苄基丙酮等，残渣中有氢化桂皮酸、对甲氧基氢化桂皮酸、沉香呋喃类白木香醇(baimuxinol)和去氢木香醇(dehydrobaimuxinol)等。同时，沉香含沉香螺醇(agaro-spirol)、沉香醇(agarol)、沉香四醇(agarotetrol)、沉香呋喃(agarofuran)、二氢沉香呋喃、4-羟基二氢沉香呋喃、3,4-二羟基二氢沉香呋喃、去甲沉香呋喃酮(nor-ketoaga-rofuran)、芹子烷(selinane)等。此外还含有色酮类及倍半萜类化合物。沉香对人体型结核杆菌有完全抑制作用；对伤寒杆菌及福氏杆菌，亦有强烈的抗菌效能；麻醉、止痛、肌松作用；镇静、止喘、抗组胺作用；肠平滑肌解痉作用；降压作用等等。

《中国药典》2015版一部沉香项下【炮制】方法为除去枯废白木，劈成小块。用时捣碎或研成细粉。本发明只涉及沉香细粉。由于其传统饮片的服用方法是水煎服用，沉香的传统服用方法给患者带来不便；中药沉香往往在其生长过程中易被霉菌污染，从而给其用药安全带来风险。

“泡服饮片”名称的出现是在《中国药典》2015版四部对泡服饮片列有微生物限度标准上，至今没有国家统一的该类饮片的质量执行标准，沉香粉产品也不例外。此外，由于每味中药所含有的化学成分非常复杂，加之产地不同，品质不一样，其含量质量要求往往是以其指标成分或有效成分的含量达到某一值以上(毒性成分除外)，加上有效成分大都储存其细胞中，如此种种原因，中药饮片沉香(粉)作为药品，至今仍未有科学的“有效期”。

技术实现要素：

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种沉香粉中药泡服饮片。

本发明的沉香粉中药泡服饮片，其制备工艺如下：

1)将沉香原药材净制、水洗、干燥后粉碎，得到中间体；

2)检验中间体，包装后进行电子束辐照灭菌；

3)进行标准检验，包装后得到成品；

所述的步骤1)中，粉碎条件如下：在d级洁净区，应用吸尘式低温粉碎技术，将沉香原药材粉碎成80-120目；

所述的步骤2)中，电子束辐照灭菌的照射剂量为3-10kgy。

优选地，

所述的步骤1)中，粉碎条件如下：在d级洁净区，应用吸尘式低温粉碎技术，将沉香原药材粉碎成120目；

所述的步骤2)中，电子束辐照灭菌的照射剂量为3kgy。

本发明是通过现代天然药物分析手段和中药制药工艺，将传统中药饮片沉香制成符合现行国家相关药品法规、《中国药典》2015年版一部及四部标准、可用热开水泡服的『沉香(粉)』中药泡服饮片。本发明的『沉香(粉)』中药泡服饮片gmp生产工艺及其泡服饮片质量执行标准，可使『沉香(粉)』产品的热水(80-90℃)浸泡浸出物总量及其浸出物中沉香四醇的溶出总量较传统中药饮片沉香水煎(后下)提高20～30％，产品微生物限度检验结果则能完全符合相关泡服饮片。适合具有相关药品gmp资质的生产企业生产，同时，产品长期稳定，有效期可达10年。

附图说明

图1为沉香粉(1克)不同细度水煎与热水浸泡(80-90℃)；

图2为沉香粉(1克)不同细度水煎与热水浸泡(80-90℃)沉香四醇(毫克)比较；

图3为沉香粉经电子束辐照灭菌(3kgy)工艺处理前后hplc特征图谱；6个特征峰，峰1：沉香四醇；峰3：8-氯-2-(2-苯乙基)-5，6，7-三羟基-5，6，7，8-四氢色酮；峰5：6，4’-二羟基-3’-甲氧基-2(2-苯乙基)色酮。

图4为沉香粉经电子束辐照灭菌(3kgy)工艺处理后提取物hplc特征图谱；

图5为沉香的加速稳定性考察。

图6为沉香的对照特征图谱。6个特征峰中，峰1：沉香四醇；峰3：8-氯-2-(2-苯乙基)-5，6，7-三羟基-5，6，7，8-四氢色酮；峰5：6，4’-二羟基-3’-甲氧基-2(2-苯乙基)色酮。

表1为沉香粉(80目，1克)水煎(100℃)浸出物重量(毫克)；

表2为沉香粉(100目，1克)水煎(100℃)浸出物重量(毫克)；

表3为沉香粉(120目，1克)水煎(100℃)浸出物重量(毫克)；

表4为沉香粉(80目，1克)热水浸泡(80-90℃)浸出物重量(毫克)；

表5为沉香粉(100目，1克)热水浸泡(80-90℃)浸出物重量(毫克)；

表6为沉香粉(120目，1克)热水浸泡(80-90℃)浸出物重量(毫克)；

表7为沉香粉(80目，1克)水煎(100℃)浸出物沉香四醇含量(毫克)；

表8为沉香粉(100目，1克)水煎(100℃)浸出物沉香四醇含量(毫克)；

表9为沉香粉(120目，1克)水煎(100℃)浸出物沉香四醇含量(毫克)；

表10为沉香粉(80目，1克)热水浸泡(80-90℃)浸出物沉香四醇含量(毫克)；

表11为沉香粉(100目，1克)热水浸泡(80-90℃)浸出物沉香四醇含量(毫克)；

表12为沉香粉(120目，1克)热水浸泡(80-90℃)浸出物沉香四醇含量(毫克)；

表13为电子束照射剂量对不同细度(筛目)的沉香粉粉的灭菌效果；

表14为沉香粉微生物限度稳定性检查；

表15为沉香粉灭菌后沉香四醇含量(％)；

表16为沉香粉灭菌前沉香四醇含量(％)。

具体实施方式

本发明中，沉香chenxiang说明如下：

【来源】本品为瑞香科植物白木香aquilariasinensis(lour.)gilg含有树脂的木材。

【炮制】本品按沉香【炮制】项下沉香经净制、碰碎、干燥(离地)、粉碎、干燥、包装制成的小包装沉香(粉)。

【成品性状】本品为黄白色至褐色粉末。气芳香，味苦。

【装量差异】±8％[参照《中国药典》2015年版四部通则0115]。

【鉴别】(1)横切面：本品为粉末成品，其检验规定见药材检验结果。

(2)取〔浸出物〕项下醇溶性浸出物,进行微量升华,得黄褐色油状物,香气浓郁；于油状物上加盐酸1滴与香草醛少量,再滴加乙醇1-2滴,渐显樱红色,放置后颜色加深。

(3)取本品粉末0.5g,加乙醚30ml,超声处理60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加三氯甲烷2ml使溶解,作为供试品溶液。另取沉香对照药材0.5g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述两种溶液各10μl分别点于同一硅胶g薄层板上,以三氯甲烷-乙醚(10:1)为展开剂.展开.取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。

【检查】水分不得过9.0％(《中国药典》2015年版四部通则0832第二法)。

二氧化硫残留量照二氧化硫残留量测定法(《中国药典》2015年版四部通则2331)测定，不得过150mg/kg。

【特征图谱】照高效液相色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0512)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(柱长为25cm,内径为4.6mm,粒径为5μm,diamonsilcl8或phenomenexlunac18色谱柱)；以乙腈为流动相a，以0.1％甲酸溶液为流动相b，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速为每分钟0.7ml；柱温为30℃；检测波长为252nm。理论板数按沉香四醇峰计算应不低于6000。

参照物溶液的制备取沉香对照药材约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人乙醇10ml，称定重量，超声处理(功率250w，频率40khz)1小时，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液。另取〔含量测定〕项下的对照品溶液，作为对照品参照物溶液。

供试品溶液的制备取〔含量测定〕项下的供试品溶液，即得。

测定法分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

供试品特征图谱中应呈现6个特征峰，并应与对照葯材参照物色谱峰中的6个特征峰相对应，其中峰1应与对照品参照物峰保留时间相一致。结果如图6所示。

【浸出物】照醇溶性浸出物测定法(《中国药典》2015年版四部通则2201)项下的热浸法测定,用乙醇作溶剂,不得少于10.0％。

【含量测定】照高效液相色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0512)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相a，0.1％甲酸溶液为流动相b，按下表中的规定进行梯度洗脱；柱温为30℃；检测波长为252nm。理论板数按沉香四醇峰计算应不低于6000。

对照品溶液的制备取沉香四醇对照品适量，精密称定，加乙醇制成每lml含60μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品粉末(过三号筛)约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人乙醇10ml，称定重量，浸泡0.5小时，超声处理(功率250w，频率40khz)1小时，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇勻，静置，取上清液滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品按干燥品计算，含沉香四醇(c7h18o6)不得少于0.10％。

微生物限度检查需氧菌总数可接受的最大菌数为10³cfu；霉菌和酵母菌总数可接受的最大菌数为10²cfu；不得检出沙门菌(10g)；耐胆盐革兰阴性菌应小于10⁴cfu(1g)。

【性味与归经】辛、苦，微温。归脾、胃、肾经。

【功能与主治】行气止痛,温中止呕，纳气平喘。用于胸腹胀闷疼痛，胃寒呕吐呃逆,肾虚气逆喘急。

【规格】每袋1克，或2克，或3克，或4克，或5克。

【用法与用量】l～5g，沸水泡服。

【注意】孕妇慎用。

【贮藏】密闭，置阴凉干燥处。

【有效期】五年。

编制依据：《中国药典》2015年版一部沉香项下标准；

装量差异依据《中国药典》2015年版四部通则0115散剂项下标准，本品规格为每袋1克，依据据散剂项下标示装量：0.5g以上至1.5g，装量差异限度应为±8％。微生物限度检查依据《中国药典》2015年版四部通则1107非无菌药品微生物限度标准，非无菌药品的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数照“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法(通则1105)”检査；非无菌药品的控制菌照“非无菌产品微生物限度检査：控制菌检查法(通则1106)”检查。

实施例1

沉香原药材100公斤，分3个实验批次(每批次33.3公斤)，按药品gmp规范，分别经净制、水洗、干燥、粉碎(d级洁净区，应用吸尘式低温粉碎技术，分别粉碎成80、100、120目)、中间体(检验)、定量包装(1克/袋，d级洁净区)、电子束辐照灭菌(每批次剩下定量包装的30％不进行灭菌工序)，所得到的产品(供试品)供本发明的沉香粉gmp生产工艺及其质量标准实验研究用。

(1)最佳细度(筛目数)生产工艺：

沉香为木质类(含树脂)中药，其木质细胞直经大都到百微米，处于《中国药典》相应的100筛目(细粉)标准上下。《中国药典》2015版一部沉香项下【炮制】方法为除去枯废白木，劈成小块。用时捣碎或研成细粉。本发明包含沉香中粉(80目)、细粉(100目)，以及极细粉(120目)。

本发明的产品是基于对不同细度(目数)的沉香粉进行水煎(100℃)与热水(80-90℃)水浸比较实验，以水浸出物总量及其浸出物中沉香四醇的溶出总量为指标，确定『沉香(粉)』的最佳粉碎细度(筛目数)的粉碎工艺为120目。

通过上述实验研究(见表1-12，图1-2)，本发明的结果显示：

极细粉(120目)的热水水浸的浸出物总量及其浸出物中沉香四醇的溶出总量最高；

相同细度的沉香粉热水(80-90℃)水浸的浸出物总量及其浸出物中沉香四醇的溶出总量较水煎(100℃)高出20％以上。这一结果表明，沉香粉(1克)热水(80-90℃)浸泡(100毫升水)比水煎(100℃)(50毫升水)的效果要好，即沉香(粉)作为泡服饮片的水溶出物量比其传统饮片的水煎大为提高，但二者的高效液相色谱的特征图谱一致(见图3)，说明其成分组成是一致的。

因此，本发明服用方便的沉香(粉)泡服饮片完全能替代传统的水煎沉香粉饮片，同时也避免了传统的沉香水煎有效成分挥发或破坏的弊端。

(2)电子束辐照灭菌工艺：

电子束辐照灭菌技术已非常成熟，用电子加速器产生的高能电子束照射可使一些物质产生物理、化学和生物学效应，并能有效地杀灭病菌、病毒和害虫。这一技术已被广泛应用于工业生产中的材料改性、新材料制作、环境保护、加工生产、医疗卫生用品灭菌消毒和食品灭菌保鲜等。它同钴源辐照一样，具有常温、无损伤、无残毒、环保、低能耗、运行操作简便、自动化程度高、适宜于大规模工业化生产等特点。与钴源相比，其最大优点是辐照束流集中定向，能源利用充分，辐照效率高，不产生放射性废物。电子加速器辐照装置具有明显的价格和经济优势。为指导和规范辐照技术在中药灭菌中的正确应用，保证中药药品的安全、有效、质量稳定，国家食品药品监督管理总局于2015年11月制定了《中药辐照灭菌技术指导原则》，对中药辐照灭菌应进行中药个体的和针对性的辐照前后的对比研究，包括所含成分种类或含量的变化情况、指纹或特征图谱的对比研究等等。基于上述指导原则，本发明对沉香粉电子束辐照灭菌的照射剂量、灭菌效果，以及灭菌前后指纹或特征图谱、水浸出物重量、沉香四醇含量的变化进行了详细的考察研究。

①电子束辐照灭菌的照射剂量及灭菌效果:

分别使用3、5、10kgy的照射剂量对不同目数(80、100、120目)的沉香粉(1克/袋包装)进行照射，并进行照射前后灭菌效果考察(见表13)。结果表明，应用本发明3、5、10kgy的电子束照射剂量完全能达到《中国药典》2015版四部对泡服饮片的微生物限度标准。为减少辐照对沉香粉所含成分种类及含量变化可能造成的影响，本发明确定沉香粉的电子束辐照灭菌的最佳照射剂量为3kgy。

②电子束辐照灭菌对沉香粉所含成分的影响：

电子束辐照灭菌对沉香粉所含有的主要成分的影响实验研究结果见图3、4。本发明的研究结果表明，即沉香粉电子束辐照灭菌前后对所含有的主要成分沉香(粉)的没有变化，二者的高效液相色谱的特征图谱一致，说明其成分组成是完全相同。

③电子束辐照灭菌对沉香粉的长期的影响：

为考察电子束辐照灭菌对沉香粉所含成分种类或含量的变化、质量的长期稳定性等与产品的有效期有关因素的影响，本发明应用新药的加速稳定性的研究方法，在40±2℃温度及65％相对湿度的环境中存放9个月，每个月按质量标准中的含量测定方法，测定沉香粉中的沉香四醇含量，同时，选择不同月份，依泡服饮片微生物限度检查方法对沉香粉微生物限度进行检验，测定结果说明(见表14-16，图5)，电子束辐照灭菌工艺对『沉香(粉)』产品的长期稳定性没有影响。经按新药加速稳定性试验的计算方法，应用本发明gmp生产工艺的生产的『沉香(粉)』泡服饮片产品的有效期可达10年。

2﹑『沉香(粉)』中药泡服饮片质量标准：

本发明旨在建立高于《中国药典》2015版一部沉香项下、《中国药典》2015版四部相关泡服饮片标准、新置入有效期等的『沉香(粉)』中药泡服饮片质量执行标准，以确保『沉香(粉』)泡服饮片质量。

在《中国药典》2015版一部沉香项下的质量执行标准为普通饮片标准，依照该项下标准、《中国药典》2015版四部泡服饮片微生物限度检查标准以及相关标准，制定了完全符合现行国家有关泡服饮片药品标准的『沉香(粉)』中药泡服饮片的质量执行标准。

表1、沉香(粉)(80目，1克)水煎(100℃)浸出物重量(毫克)

表2、沉香(粉)(100目，1克)水煎100℃)浸出物重量(毫克)

表3、沉香(粉)(120目，1克)水煎(100℃)浸出物重量(毫克)

表4、沉香(粉)(80目，1克)热水浸泡(80-90℃)浸出物重量(毫克)

表5、沉香(粉)(100目，1克)热水浸泡(80-90℃)浸出物重量(毫克)

表6、沉香(粉)(120目，1克)热水浸泡(80-90℃)浸出物重量(毫克)

表7、沉香(粉)(80目，1克)水煎(100℃)浸出物沉香四醇含量(毫克)

表8、沉香(粉)(100目，1克)水煎(100℃)浸出物沉香四醇含量(毫克)

表9、沉香(粉)(120目，1克)水煎(100℃)浸出物沉香四醇含量(毫克)

表10、沉香(粉)(80目，1克)热水浸泡(100℃)浸出物沉香四醇含量(毫克)

表11、沉香(粉)(100目，1克)热水浸泡(80-90℃)浸出物沉香四醇含量(毫克)

表12、沉香(粉)(120目，1克)热水浸泡(80-90℃)浸出物沉香四醇含量(毫克)

表15、沉香(粉)灭菌后沉香四醇含量(％)

表16、沉香(粉)灭菌前沉香四醇含量(％)