本发明涉及生物医药技术领域，特别是涉及一种西兰花提取物及其制备方法和应用。
背景技术：
蔬菜作为人体维生素和微量元素的重要来源，其还含有具有抗癌作用的物质，对于含胡萝卜素的蔬菜，如：胡萝卜、西兰花、椰菜、菠菜等，尤其富含抗癌物质。西兰花，又名绿菜花、青花菜等，属十字花科芸薹属甘蓝种的一个变种，为一、二年生草本植物。实验证明，西兰花含有丰富的抗癌物质，能够降低肿瘤的形成，阻止致癌物质的活动。
乳腺癌是发生在乳腺，原位乳腺癌并不致命，但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性，细胞之间连接松散，容易脱落，癌细胞一旦脱落，可随血液或淋巴液传播至全身，危及生命。目前，乳腺癌的治疗方法有放疗、化疗等方法，放疗、化疗在消灭癌细胞的同时，均会对人体产生副作用。
如何提供一种可治疗乳腺癌的纯天然物质，是乳腺癌治疗领域亟待解决的问题之一。
技术实现要素：
本发明的目的在于解决上述至少一个问题，提供一种西兰花提取物及其制备方法和应用。
为解决上述技术问题，本发明提供一种西兰花提取物的制备方法，包括以下步骤：将干燥的西兰花粉碎至25-35目，获得西兰花干粉；取干粉，加入石油醚，利用高速匀浆机混合均匀，脱脂后过滤，获得过滤物；在过滤物中加入49-51mmol/l、ph值4.6-4.9的tris-hcl缓冲液和黑芥子硫酸苷酶，26-30℃，酶解5-8h，西兰花干粉与黑芥子硫酸苷酶的质量比为8.6-20:1，西兰花干粉与tris-hcl缓冲液的料液比为1:3-4；酶解完成后，加入2-4倍体积的乙酸乙酯进行萃取；将萃取液于35-40℃下进行真空浓缩，以获得西兰花提取物粗品；将西兰花提取物粗品进行硅胶柱层析，利用氯仿和甲醇的混合液进行洗脱，收集西兰花提取物洗脱液，35-40℃下真空浓缩，以获得西兰花提取物。
其中，西兰花粉碎至28目，酶解温度为28℃、时间为7h，西兰花干粉与黑芥子硫酸苷酶的质量比为12:1，西兰花干粉与tris-hcl缓冲液的料液比为1:3.7，乙酸乙酯的加入量为3倍体积的酶解液。
其中，石油醚的脱脂次数为2次或2次以上。
其中，氯仿与甲醇的体积比为8:2。
为解决上述技术问题，本发明提供一种上述制备方法制备得到的西兰花提取物。
为解决上述技术问题，本发明提供一种西兰花提取物作为抗癌药物或保健品的应用。具体地，在乳腺癌治疗方面的应用。具体地，西兰花提取物作为抗癌药物或保健品的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂或散剂。
本发明的有益效果是：区别于现有技术的情况，本发明的西兰花提取物的制备方法包括以下步骤：将干燥的西兰花粉碎至25-35目，获得西兰花干粉；取干粉，加入石油醚，利用高速匀浆机混合均匀，脱脂后过滤，获得过滤物；在过滤物中加入49-51mmol/l、ph值4.6-4.9的tris-hcl缓冲液和黑芥子硫酸苷酶，26-30℃，酶解5-8h，西兰花干粉与黑芥子硫酸苷酶的质量比为8.6-20:1，西兰花干粉与tris-hcl缓冲液的料液比为1:3-4；酶解完成后，加入2-4倍体积的乙酸乙酯进行萃取；将萃取液于35-40℃下进行真空浓缩，以获得西兰花提取物粗品；将西兰花提取物粗品进行硅胶柱层析，利用氯仿和甲醇的混合液进行洗脱，收集西兰花提取物洗脱液，35-40℃下真空浓缩，以获得西兰花提取物。上述方法制备的西兰花提取物可用于治疗乳腺癌，且西兰花提取物为纯天然物质，在治疗过程中，对人体无副作用。
具体实施方式
实施例1
西兰花提取物的制备方法包括以下步骤：将干燥的西兰花粉碎至28目，获得西兰花干粉；取干粉，加入石油醚，利用高速匀浆机混合均匀，脱脂后过滤，获得过滤物；在过滤物中加入50mmol/l、ph值4.7的tris-hcl缓冲液和黑芥子硫酸苷酶，28℃，酶解7h，其中，西兰花干粉与黑芥子硫酸苷酶的质量比为12:1，具体为g:g，西兰花干粉与tris-hcl缓冲液的料液比为1:3.7，具体为g/ml；酶解完成后，加入3倍体积的乙酸乙酯进行萃取；将萃取液于37℃下进行真空浓缩，以获得西兰花提取物粗品；将西兰花提取物粗品进行硅胶柱层析，利用氯仿和甲醇的混合液进行洗脱，收集西兰花提取物洗脱液，37℃下真空浓缩，以获得西兰花提取物。其中，粉碎的西兰花为花球部分，花球的长度为15cm左右。
在本实施例中，石油醚的脱脂次数为3次，氯仿与甲醇的体积比为8:2。
本实施例的西兰花提取物可用于乳腺癌治疗，且无副作用。
实施例2
西兰花提取物的制备方法包括以下步骤：将干燥的西兰花粉碎至26目，获得西兰花干粉；取干粉，加入石油醚，利用高速匀浆机混合均匀，脱脂后过滤，获得过滤物；在过滤物中加入50mmol/l、ph值4.8的tris-hcl缓冲液和黑芥子硫酸苷酶，27℃，酶解6h，其中，西兰花干粉与黑芥子硫酸苷酶的质量比为12:1，具体为g:g，西兰花干粉与tris-hcl缓冲液的料液比为1:3.8，具体为g/ml；酶解完成后，加入3倍体积的乙酸乙酯进行萃取；将萃取液于37℃下进行真空浓缩，以获得西兰花提取物粗品；将西兰花提取物粗品进行硅胶柱层析，利用氯仿和甲醇的混合液进行洗脱，收集西兰花提取物洗脱液，37℃下真空浓缩，以获得西兰花提取物。其中，粉碎的西兰花为花球部分，花球的长度为15cm左右。
在本实施例中，石油醚的脱脂次数为3次，氯仿与甲醇的体积比为8:2。
本实施例的西兰花提取物可用于乳腺癌治疗，且无副作用。
实施例3
西兰花提取物片剂的制备：将实施例1或实施例2制备的西兰花提取物用单冲压片机打成直径为7mm，重量为350mg的片，即得西兰花提取物片剂。
实施例4
西兰花提取物胶囊剂的制备：将实施例1或实施例2制备的西兰花提取物以350mg填充入1号肠溶胶囊，即得西兰花提取物胶囊剂。
实施例5
西兰花提取物颗粒剂的制备：将实施例1或实施例2制备的西兰花提取物加水制成软材，过15目筛进行造粒，干燥后即得西兰花提取物颗粒剂。
实施例6
西兰花提取物散剂的制备：将实施例1或实施例2制备的西兰花提取物过250目筛，即得西兰花提取物散剂。
利用本发明西兰花提取物治疗乳腺癌的临床数据如下。
临床数据一：选取原发性乳腺癌患者100例，年龄25-55岁，患者均经细胞学和病理学切片确诊，采用实施例1或实施例2制备的西兰花提取物内服与外敷，早晚各一次，进行为期6个月的治疗。
疗效评定标准：全消（cr），所有可查见的癌灶完全消失，溶骨性病变在x线上全部钙化；部分消失（pr），可测量病变缩小50%（2个最大垂直轴径的乘积），同时无新病灶出现，但不要求所有病灶都属pr；稳定无变（s），肿瘤缩小<50%，或增大<25%；恶化（pd），有些病灶缩小<50%，同时有些病灶增加>25%，或所有病灶增大，或有新病灶出现。
治疗结果：pr，5例，无副作用；s，70例，无副作用；pd，25例，无副作用。根据治疗结果，可以看出，西兰花提取物可用于治疗乳腺癌，且无副作用。
临床数据二：对雌性裸鼠皮下移植3×106个人乳腺癌细胞株（mcf-7），在肿瘤容量达到100mm3以上后，每天1次口服实施例1或实施例2制备的西兰花提取物，连续服用3个月，在最终给药的次日摘出肿瘤，测定肿瘤重量。作为比较，以未给药且移植人乳腺癌细胞株的雌性裸鼠作为对照组，同样测定肿瘤重量。基于上述给药组和对照组的肿瘤重量测定抑制率。
测定结果：实施例1或实施例2制备的西兰花提取物对乳腺癌细胞的抑制率为68.02%。根据测定结果，说明实施例1或实施例2制备的西兰花提取物具有肿瘤抑制作用。
临床数据三：选取原发性乳腺癌患者200例，随机分为两组，各100人，第一组采用实施例1或实施例2制备的西兰花提取物内服与外敷，早晚各一次，第二组采用纯化的萝卜硫素内服与外敷，早晚各一次，两组均进行为期6个月的治疗。
疗效评定标准：全消（cr），所有可查见的癌灶完全消失，溶骨性病变在x线上全部钙化；部分消失（pr），可测量病变缩小50%（2个最大垂直轴径的乘积），同时无新病灶出现，但不要求所有病灶都属pr；稳定无变（s），肿瘤缩小<50%，或增大<25%；恶化（pd），有些病灶缩小<50%，同时有些病灶增加>25%，或所有病灶增大，或有新病灶出现。
治疗结果：第一组，pr（4例），s（69例），pd（27例）；第二组，pr（0例），s（25例），pd（75例）。
根据治疗结果，可以看出实施例1或实施例2制备的西兰花提取物较纯化的萝卜硫素具有更好的乳腺癌治疗效果。
综上所述，本发明具有以下特点：西兰花提取物可用于治疗乳腺癌，且西兰花提取物为纯天然物质，在治疗过程中，对人体无副作用。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。