本发明涉及化妆品领域。具体而言，涉及一种促进胶原蛋白生成的美容霜添加剂、使用其制备的美容霜和应用。
背景技术：
：人的衰老不可逆转，面部皮肤皱纹特别是眼角鱼尾纹的出现往往是衰老的第一外在标记；许多环境因素比如太阳光紫外线会显著恶化皮肤皱纹的密度和深度。现代美容手段致力于降低衰老的种种表现尺度，特别是减少面部皮肤皱纹，其最终目标是通过调控皮肤真皮层的成纤维细胞产生新的胶原蛋白。胶原蛋白是皮肤内最主要的结构蛋白，占真皮层干重的75％以上。现代分子皮肤学研究证明皮肤的皱纹，弹性，质地，光泽等在很大程度上决定于胶原蛋白水平的高低；随着年龄的增长或者皮肤的老化，人们皮肤内胶原蛋白的含量逐渐减少。因此，促进胶原蛋白生成的多寡成为衡量众多美容手段的有效性的最重要的指标。当前这些美容手段大体可归类为生物激活和物理治疗两种。其中，将含有生物活性的霜剂直接敷于皮肤表面的化学方法占据了主流大众市场，这些生物活性物质主要包括维生素a，c，e以及它们的衍生物，软骨多糖，a-和b-羟酸和其它抗氧化剂；而物理手段则常用于专业美容院或诊所里，主要包括机械磨皮，硅胶去皮以及日益普及的激光手术除皱。另外，直接往皱纹密集的皮肤内注射纯化的胶原蛋白或者肉毒素(botox)则是两个极端的除皱手段，然而这些注射法经常会伴随头痛，晕眩，眼沉以及可能的心血管后遗症。激光作为具有独特的相干性和单色性的高能光源，其用于皮肤除皱的原理是：激光发出高能量的光子，造成皮肤深层细胞的热损伤或者直接在表皮层引进创伤，从而激活皮肤内在的伤口修复功能，导致产生包括胶原蛋白在内的许多伤口修复所必需的结构和调控蛋白。虽然产生的胶原蛋白能够改善皮肤的皱纹状况，但是高能激光同时也会破坏许多正常细胞组织，并释放相当的有害皮肤健康的副产物。近来,一种以长波(>550nm)为主的高强度脉冲光(intensepulselight，ipl)被用来替代激光治疗面部皱纹。尽管高强度脉冲光对皮肤的伤害远不及激光严重，但它的工作能量太低，难以激活成纤维细胞生成修复皱纹的胶原蛋白。所以，高强度脉冲光作为替代激光的光学疗法并不成功，它在皮肤除皱领域仍有很大争议(dermatologicalsurgery20:p835-843，2000；lasersinsurgeryandmedicine26:p196-200，2000；lasersinsurgeryandmedicine30:82-85，2002；lasersinsurgeryandmedicine30:298-325，2002)。激光用于除皱的局限性是显而易见的：激光装置极其昂贵，运作需要大量能量，而且必须由专业医务人员来操作；激光束一次能照射的皮肤非常有限，给大规模皮肤均匀除皱带来困难；治疗会对皮肤组织造成伤害，病人会感到严重不适或疼痛，并需要很长时间恢复；创伤性的激光手术还可能引发伤口感染，愈后留下疤痕，不仅达不到美容的预期目的，相反还可能在皮肤上遗留下永久破坏。除皱的效果优劣很大程度上取决于接受治疗者的个体差异，所以对于每个人来讲，接受激光治疗皱纹需要承担相当的风险。如同激光，发光二极管发出的也是狭窄波长范围内的单色光。尽管发光二极管早已被广泛应用于各种电子元件的发光装置以及日用和商用灯具上，它们在医疗领域的用途直到最近几年才开始逐渐被人们认识。这些用途主要包括促进伤口愈合，减轻疼痛，以及和光激活化学药物同步使用来治疗癌症。美国nasa的航天项目研究小组发现用发光二极管发出的近红外的单色光(主要波长包括680nm,730nm,880nm)直接照射局部缺血性伤口，能够大大缩短伤口愈合所需的时间(journalofclinicallasermedicine&surgery19:p305-314，2001)。他们将几十个单色的发光二极管排成平面序列，持续照射伤口，使得每平方厘米皮肤在0。5-1小时内接受4-8焦耳的能量。这些发光二极管与高压氧气同步使用效果尤佳。几家美国公司正在积极开发红光和红外光二极管在止痛上的应用，它们已经获得美国食品和药品管理局的首肯，很快将有用来治疗手，腕，和其它肌肉疼痛的发光二极管装置推向市场。在所谓的光动力疗法中(photodynamictherapy)，发光二极管甚至可以成为定点消除肿瘤细胞的工具。比如由罗氏(roche)公司开发的porphyrin可以被发光二极管发出的680nm红光激活，然后将获得的能量传递给血液里的氧气分子，从而生成有害的单氧基团和游离基。这些单氧基团和游离基会破坏周围细胞内的蛋白质，脂类，核酸等重要组分。用发光二极管激活聚集在肿瘤部位的porphyrin，就可以非常特异性的杀死肿瘤细胞，达到治疗的目的。这种porphyrin光动力疗法在许多国家已被用来治疗膀胱癌,食道癌和肺癌，在美国正在临床iii期试验中。发光二极管之所以能够成功地用于人体治疗，主要因为科学研究发现二极管发出的非相干性的单色光可以有效地穿透皮肤表皮到达真皮层和更深层的体内组织。一项报道宣称630-800nm范围内的光子可以进入人体皮肤内部达23厘米(p.552spacetechnologyandapplicationsinternationalforum200，editedbym.s.el-genk，2001)。进入体内的二极管的光能够刺激细胞内部的能量工厂线粒体，产生大量能量，从而加速各种修复机制，提高细胞活性和代谢，加快血液循环，其结果是体内的有害物质和代谢副产物从受伤或衰老的组织内被清除掉，同时促进生成的活性物质使组织得到更新。细胞内接受光能的具体分子并不清楚，但科学家发现一些发色基团(chromophores)和细胞色素系统(cytochromesystems)对红光和红外光有反应。在二极管的单色光穿透皮肤的过程中，光能逐渐被各种细胞组织吸收和损耗。大部份的被有效吸收的光子作用于真皮层的成纤维细胞。成纤维细胞是皮肤的动力机器，生产各种皮肤调节成份和主要结构蛋白比如胶原蛋白。从原理角度讲，发光二极管的单色光不仅仅可以促进成纤维细胞产生大量能量物质atp，而且更重要的是能够起动胶原蛋白的生物合成。因此，用发光二极管的单色光替代激光来促进皮肤生成胶原蛋白而修补皱纹是一个创新又极富挑战性的工作。和激光手术除皱相比，发光二极管除皱的优越性很多：它工作能量低，通过激发成纤维细胞的潜能达到美容目的，对皮肤内外均无伤害；它使用方便安全，光源寿命远长于激光，并且价钱合理，易于家庭普及；更重要的是，通过选择恰当波长，具有生物调节功效的输出强度和频率，发光二极管能够达到传统激光美容除皱的效果。波长，强度和频率的选择和正确组合是决定发光二极管除皱装置有效性的关键。首先，只有特定波长的发光二极管光波能够穿透表皮层而最大限度地被成纤维细胞吸收，并转化成能量，刺激细胞生成胶原蛋白，而其它波长的光波即使能到达这些细胞也不会有效激活细胞内的光敏蛋白。其次，只有狭窄范围内的输出强度具有生物调节的功效：强度低于生物激活阈值的光波不能提供足够的能量启动成纤维细胞的修复机制；而过高强度的光波则会在皮肤内主要转化成热能，并激发成纤维细胞的保护机制，最终导致胶原蛋白合成的抑制。最后，发光二极管的电磁光波在皮肤内的频率只有与成纤维细胞的内在生物频率发生共振时，才能特异性地将光能传送到成纤维细胞，并且最大限度地降低其它细胞组织的激活所生成的无用甚至有害的副产品。胶原蛋白被称为“骨中之骨，肤中之肤，肉中之肉”，可以说是真皮层强有力的后盾，其对皮肤的作用不言而喻。皮肤成分中有70％是由胶原蛋白组成，皮肤有如一个大套子紧紧包住身体各处，表面积相当大，人体四肢活动时，皮肤中胶原蛋白发挥功能，使皮肤具有保护功能，又有适当弹性及坚硬度。胶原蛋白的含量处于较高的水平能够使得皮肤更加具有弹性，皱纹更少，这是每个女性所追寻的目标。但随着年龄的增长，体内尤其是皮肤中的胶原蛋白极具降低。经过研究发现，包括紫外线、空气污染、饮食、辐射等在内的诸多外来因素可影响胶原蛋白的含量，这些因素可能通过激活胶原酶来破坏胶原蛋白致使胶原蛋白的含量有所降低，进而增加皱纹的数量。为了维持胶原蛋白在较高的水平，达到美容除皱的目的，必须抑制外来因素对胶原酶的激活作用。通过使用胶原蛋白酶的特异性抑制剂，可以特异性抑制皮肤中的胶原酶的活性，维持体内尤其是皮肤中的胶原蛋白的高水平，从而实现美容除皱。cn1618480a中已经公开了一种结合光物理和生物化学的皮肤美容方法。该方法利用特定波长的低能量光波，按照特定的程序释放时，能穿透面部皮肤表皮层，激活真皮层的纤维细胞产生胶原蛋白，并促进代谢残余物质的清除。同时，被破坏的代谢平衡诱发皮肤内的自然修复机制，使光活化的结果不能保持。为此，cn1618480a还包含一类以脂溶性的胶原酶抑制物为核心的外敷用品，它与上述光学仪器同步使用，可使皮肤内的胶原蛋白维持在高水平，从而达到面部皮肤去皱纹，增强弹性和消除眼袋和黑眼圈的长期效果。具体而言，所述胶原酶抑制剂是具有以下结构的ol－1肽：benzoyl-pro-d-leu-d-ala-nhoh。现有技术cn102076706a也公开了一种类似的肽：x.sup.1-x.sup.2-x.sup.3-nhoh；其中x.sup.1是选自以下l型或d型氨基酸组成的组的氨基酸的残基：脯氨酸、羟基脯氨酸、硫代脯氨酸和丙氨酸；x.sup.2是选自以下l型或d型氨基酸组成的组的氨基酸的残基：谷氨酰胺、谷氨酸、亮氨酸、异亮氨酸和苯丙氨酸；和x.sup.3是选自以下l型或d型氨基酸组成的组的氨基酸的残基：甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和肌氨酸；其中α-氨基酸x.sup.1的羧基与α-氨基酸x.sup.2的氨基形成肽键，α-氨基酸x.sup.2的羧基与α-氨基酸x.sup.3的氨基形成肽键，且α-氨基酸x.sup.3的羧基与-nhoh形成酰胺基；所述α-氨基酸x.sup.1的氨基的氢原子可被选自以下基团组成的组的取代基取代：乙酰基、苯甲酰基、苄氧基、t-丁氧基羰基、苄氧基羰基、p-氨基苯甲酰基、p-氨基-苄基和p-羟基苯甲酰基；或其药学可接受的盐。并进一步公开了一种具体的肽：苯甲酰基-脯氨酸-d-亮氨酸-d-丙氨酸-nhoh。cn105213230a公开了一种基于不可见光和酶抑制物来促进胶原蛋白再生的方法，包括如下步骤：s1、用温水清洗眼睛周围的皮肤，擦干后均匀涂抹一层抗皱精华液，该抗皱精华液由以下重量份的原料制备而成：泛醇3～9份、熊果苷5～11份、甘油聚丙烯酸酯3～6份、乙酰基六肽～36～14份、肉豆蔻醚丙酸3～5份、苯氧乙醇1～6份、羟苯甲酯2～8份、牛血清白蛋白3～5份、羟苯异丁酯1～4份、小麦胚芽甘油酯3～5份、自由活化星状细胞、活化星状细胞分解物、mmp14、经mmp14处理的胶原和活化星状细胞分泌物构成的组分5～10份、蒸馏水50～65份、脂溶性的胶原酶抑制剂5-10份；s2、调整眼罩内部的护眼膜，然后带上眼罩，开启眼罩并选择护理时间；该眼罩内由252个660纳米波长的发光二极管组成，以特定的程序和特定的强度发出总能量输出低于每平方厘米10毫瓦的不可见光；s3、按下5分钟、10分钟、20分钟的任一键后，对应的蓝灯亮起进入倒计时工作状态；s4、计时完毕，关闭眼罩，停止工作。上述现有技术均使用光与胶原酶抑制剂的组合，尽管所述光对人皮肤总体无害，但在实际使用过程中，发现长期使用光照射仍然会产生一定的副作用，如皮肤发干、略显紧绷等，并且使用频率也不宜太高，会加剧上述副作用。因此，发明人在另一项研究中发现了一种肽，其无须使用光照即可达到消除皱纹和黑眼圈的作用。所述肽的结构如下：x.sup.1-x.sup.2-x.sup.3-x.sup.4-x.sup.5-nhoh。x.sup.4为极性氨基酸的残基、x.sup.5为非极性氨基酸的残基，能够获得最佳的美容效果。但皮肤本身的胶原蛋白较低，为了进一步提高包含所述肽的美容霜的效果，需要一种美容霜添加剂，其能够使得皮肤内的胶原蛋白保持在更高的水平，获得更好的美容效果。牛油果，又名油梨、鳄梨、酪梨、奶油果、樟梨，属于被子植物门的樟科、鳄梨属常绿乔木。牛油果果实是一种著名的热带水果，以营养丰富、健康著称。现代研究表明，牛油果果实富含多种维生素、丰富的脂肪酸和高含量的钠、钾、镁、钙等元素。牛油果果实的美容价值很高，能够深度保湿、去除角质、滋养头发、美白抗衰老。截至目前，已经公开了在化妆品中使用的多种牛油果果实提取物。例如，cn1949985a公开了将鳄梨的果实与水溶液和酶加热结合，以提供经消化的植物混合物。cn103347528a公开了富含多酚的鳄梨果肉和/或果皮提取物及含有它的美容用、皮肤病用和营养品组合物。另外已知的是，牛油果果实包含d-甘露庚酮糖，它是一种己糖激酶的抑制剂，可通过竞争性地与己糖激酶结合来阻断葡萄糖的磷酸化，结果是葡萄糖的降解被抑制。此外，d-甘露庚酮糖还能够促进表皮胶原蛋白(internationaljournalofcosmeticscience，2007：29，220)。也公开了多种包含d-甘露庚酮糖的提取物及其提取方法和d-甘露庚酮糖的应用(cn1968708a，cn1968707a，cn101711158a，cn105209046a，cn105439814a，cn105246351a等)。但现有技术并未公开采用特定方法提取牛油果果实能够最佳地使得皮肤内的胶原蛋白保持在更高的水平，获得更好的美容效果。技术实现要素：为了使得皮肤内的胶原蛋白保持在更高的水平，获得更好的美容效果，发明人发现采用特定提取方法获得的牛油果果实提取物可以最佳地解决该问题。申请人经过对牛油果果实的提取溶剂进行多项筛选发现本申请的牛油果果实提取物能够获得预料不到的上述美容效果，由此获得本发明。本申请的牛油果果实提取物及其用途与现有技术公开的牛油果果实提取物及其用途存在以下不同：第一，本申请采用了混合溶剂提取牛油果果实，而现有技术并未公开本申请使用的混合溶剂。众所周知，中药成分在溶剂中的溶解度与溶剂性质直接相关，采用不同的溶剂提取获得的中药成分不同，采用溶剂提取法的关键即在于选择适当的溶剂，溶剂选择适当就可以较为顺利地将所需成分提取出来。在实践中，往往会根据所要提取的成分的极性，比如属于水溶性成分还是脂溶性成分，来选择亲水性溶剂或是亲脂性溶剂。第二，尽管对于牛油果果实而言，其含有的d-甘露庚酮糖能够促进表皮胶原蛋白是已知的，但经过申请人的试验证实，本申请的牛油果果实提取物并非仅通过d-甘露庚酮糖起作用，而是通过多个成分复合起作用的。所述牛油果果实提取物的制备方法如下：将牛油果果实烘干，粉碎，加入到丙酮-乙醇-正丁烷的复合溶剂中，加热提取，过滤，重复上述提取和过滤步骤两次，收集滤液，真空浓缩得到浸膏，以水作为洗脱剂，用大孔树脂进行吸附分离，获得洗脱液，减压浓缩，获得最终的提取物。进一步地，牛油果果实与复合溶剂的质量体积比为1:5-100，优选1:10-50，更优选1:30。进一步地，丙酮、乙醇、正丁烷三者的体积比为1-10:1-10:1-10，优选1-5:1-5:1-5，更优选4:3:1。进一步地，每次提取的时间为1-2小时，优选1.5小时。进一步地，在加热提取前增加浸泡步骤。进一步地，浸泡的时间为1-8小时，优选2-6小时，更优选4小时。进一步地，大孔树脂选自d392、d301和d382，优选d392。具体实施方式通过以下实施例来具体地说明本发明，其不被解释为将本申请的范围或精神限制于本文所述的具体方法。应当理解，提供了这些实施例以说明某些实施方案，并非意图限制本申请的范围。一、验证采用不同溶剂获得的提取物的美容效果的差异实施例1：将牛油果果实烘干，粉碎，加入到丙酮-乙醇-正丁烷的复合溶剂中，其中丙酮、乙醇、正丁烷三者的体积比为4:3:1。加热提取1.5小时，过滤，重复上述提取和过滤步骤两次，收集滤液，真空浓缩得到浸膏，以水作为洗脱剂，用大孔树脂d392进行吸附分离，获得洗脱液，减压浓缩，获得实施例1。对比例1：将牛油果果实烘干，粉碎，加入到丙酮-乙醇-正丁烷的复合溶剂中，其中丙酮、乙醇、正丁烷三者的体积比为1:1:1。加热提取1.5小时，过滤，重复上述提取和过滤步骤两次，收集滤液，真空浓缩得到浸膏，以水作为洗脱剂，用大孔树脂d392进行吸附分离，获得洗脱液，减压浓缩，获得对比例1。对比例2：将牛油果果实烘干，粉碎，加入到丙酮-乙醇-正丁烷的复合溶剂中，其中丙酮、乙醇、正丁烷三者的体积比为1:2:3。加热提取1.5小时，过滤，重复上述提取和过滤步骤两次，收集滤液，真空浓缩得到浸膏，以水作为洗脱剂，用大孔树脂d392进行吸附分离，获得洗脱液，减压浓缩，获得对比例2。对比例3：将牛油果果实烘干，粉碎，加入到丙酮中。加热提取1.5小时，过滤，重复上述提取和过滤步骤两次，收集滤液，真空浓缩得到浸膏，以水作为洗脱剂，用大孔树脂d392进行吸附分离，获得洗脱液，减压浓缩，获得对比例3。对比例4：将牛油果果实烘干，粉碎，加入到乙醇中。加热提取1.5小时，过滤，重复上述提取和过滤步骤两次，收集滤液，真空浓缩得到浸膏，以水作为洗脱剂，用大孔树脂d392进行吸附分离，获得洗脱液，减压浓缩，获得对比例4。对比例5：将牛油果果实烘干，粉碎，加入到正丁烷中。加热提取1.5小时，过滤，重复上述提取和过滤步骤两次，收集滤液，真空浓缩得到浸膏，以水作为洗脱剂，用大孔树脂d392进行吸附分离，获得洗脱液，减压浓缩，获得对比例5。对比例6：将牛油果果实烘干，粉碎，加入到80％乙醇溶液中。加热提取1.5小时，过滤，重复上述提取和过滤步骤两次，收集滤液，真空浓缩得到浸膏，以水作为洗脱剂，用大孔树脂d392进行吸附分离，获得洗脱液，减压浓缩，获得对比例6。对比例7：将牛油果果实烘干，粉碎，加入到正己烷中。加热提取1.5小时，过滤，重复上述提取和过滤步骤两次，收集滤液，真空浓缩得到浸膏，以水作为洗脱剂，用大孔树脂d392进行吸附分离，获得洗脱液，减压浓缩，获得对比例7。对比例8：将牛油果果实烘干，粉碎，加入到乙酸乙酯中。加热提取1.5小时，过滤，重复上述提取和过滤步骤两次，收集滤液，真空浓缩得到浸膏，以水作为洗脱剂，用大孔树脂d392进行吸附分离，获得洗脱液，减压浓缩，获得对比例8。对比例9：将牛油果果实烘干，粉碎，加入到石油醚中。加热提取1.5小时，过滤，重复上述提取和过滤步骤两次，收集滤液，真空浓缩得到浸膏，以水作为洗脱剂，用大孔树脂d392进行吸附分离，获得洗脱液，减压浓缩，获得对比例9。对比例10：d-甘露庚酮糖，其作为促进胶原蛋白生成的活性成分。每组选择5名受试者，每组受试者在连续使用包含作为胶原酶抑制剂的上文提及的肽和实施例1/对比例1-10以及相同的常规化妆品添加剂制备的美容霜12周后，由专业人员对美容效果进行测评，评估结果如下：表1用不同溶剂获得的提取物的美容效果的差异实施例/对比例效果打分a实施例110对比例18.5对比例28对比例37.5对比例46.5对比例56.5对比例64.5对比例75.5对比例84对比例94对比例10b8a总分为10分，分数越高，表明美容效果越好。b将对比例10的美容霜中d-甘露庚酮糖的含量配制成与实施例1的美容霜中d-甘露庚酮糖的含量相同。从表1可以看出，尽管某些单一溶剂能够取得较为优异的美容效果，但复合溶剂作为提取溶剂的美容效果明显优于其它溶剂，同时复合溶剂作为提取溶剂的美容效果也总体上优于d-甘露庚酮糖，表明本申请的提取物除了包含d-甘露庚酮糖作为促进胶原蛋白生成的活性成分外，还含有能够促进胶原蛋白生成的其它活性成分，并且这些活性成分可以通过复合溶剂作为提取溶剂最佳地提取出来。另外，受试者使用实施例1的美容霜后皮肤更具弹性、更加细腻，皮肤质地和毛孔得到最大改善，皱纹明显较其它组少且浅，黑眼圈明显变少。二、验证单独使用本申请的提取物的效果招募5位20-55岁眼角有皱纹或眼部皮肤状况需要改进(包括眼袋、黑眼圈等)的女士，使用由实施例1的提取物和常规化妆品添加剂制备的美容霜1个月后，发现相比于使用前，5位女士的皮肤更具弹性、更加细腻，皮肤质地和毛孔得到改善，皱纹和黑眼圈数量减少。可见，单独使用本申请的牛油果果实提取物也可以取得优异的美容效果。三、验证使用本申请的提取物的长期效果及是否产生副作用上述实施例1的受试者继续使用该提取物12周，经专业人员确定，未产生副作用。可见，本申请的牛油果果实提取物能够长期使用，安全无副作用。上述实施例意图仅仅是示例性的，并且本领域技术人员将认识到或将能够使用不超过常规实验来确定多种等同物。所有这些等同物被认为在所要求保护的主题的范围内，并且被所附权利要求所涵盖。因为修改对于本领域技术人员将是显而易见的，所以意图要求保护的主题仅由所附权利要求的范围限制。当前第1页12