一种血液滤过置换液的制作方法

本发明涉及一种肾脏患者使用的血液滤过置换液，属于医学药物试剂药物
技术领域：
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背景技术：
：连续性肾脏替代治疗(crrt)最初主要用于治疗急性肾功能衰竭(arf)，经过研究探索，随着crrt作用机制的认识不断加深，其应用范围也得到逐渐拓展。例如crrt技术在多种危重病的救治中具有不断地清除毒素，有效控制水、盐代谢，稳定血流动力学，保障营养支持和静脉药物治疗等作用；为危重患者的治疗提供良好的内环境平衡，从而达到促进病情恢复，提高救治成功率。临床进行crrt治疗时，必须补充血液滤过置换液，以达到患者体内液体平衡的目的。目前市售的血液滤过置换液主要以乳酸盐型为主。采用乳酸盐作为缓冲液进行crrt治疗，其纠正代谢性酸中毒的作用与碳酸氢盐相似。但许多危重病人常伴有乳酸酸中毒、肝功能损害、低氧血症及代谢紊乱，机体代谢乳酸的能力降低，不能耐受大量乳酸盐血液滤过置换液的输入，甚至导致或加重酸中毒。相比之下，国际上常用碳酸氢盐型血液滤过置换液，在不增加肝脏负担的情况下实现纠正代谢性酸中毒；同时还可以减少治疗时的并发症和副作用。例如barenbrock等报道，在crrt中应用碳酸氢盐和乳酸盐缓冲液病人的病死率无显著差异，但碳酸氢盐组心血管事件风险明显减低，更适合crrt。碳酸氢盐型血液滤过置换液最大的制剂难点在于，碳酸氢盐易与钙、镁等无机盐离子发生反应生成不溶性沉淀物，从而影响制剂的稳定性。这也是限制国内制药企业开发本品的主要因素。使用抗凝剂对crrt的治疗是必不可少的。目前临床上常用的抗凝剂主要有肝素及其衍生物、枸橼酸钠和新型抗凝剂水蛭素等。然而当患者存在活动性出血，或肝素相关的血小板减少情况，采用肝素抗凝方法是禁止的。枸橼酸三钠(trisodiumcitrate，枸橼酸钠)具有局部抗凝的优点。近年来，在血液净化治疗时，尤其在肝素或其它抗凝剂禁忌的患者中已有应用。枸橼酸钠通过络合钙离子，降低血清离子钙浓度，进而阻断了血液凝固过程。而这种作用是可逆的，只要再加入足量的钙离子，凝血功能则能立即恢复正常。枸橼酸钠进入体内后，主要在肝脏和肌肉组织及肾皮质参加三羧酸循环，很快被代谢为碳酸氢钠(每分子枸橼酸钠可代谢为三分子碳酸氢钠)，也可高效地纠正重症患者的代谢性酸中毒。与肝素相比，枸橼酸钠能局部抗凝，而且生物相容性好，无肝素相关的白细胞、血小板降低；降低钙离子后，同时具有纠正酸中毒的作用，因此是一种非常理想的抗凝剂。crrt治疗时常会导致患者体液磷元素丢失。由于crrt对磷酸盐的清除效率高，而市售的血液滤过置换液常常不含磷，因此患者低磷血症的发生率比较高，有统计认为低磷血症的发生率可达17.6％～65.1％。故在进行crrt治疗时需酌情补充磷。技术实现要素：本发明旨在提供一种可实现局部抗凝、具良好的纠正代谢性酸中毒和补充crrt治疗丢失的磷酸盐等作用的血液滤过置换液。为了解决上述技术问题，主要是通过以下技术方案加以实现。一种血液滤过置换液包括以下组分：具体地，本发明的电解质是钠盐、钾盐、钙盐、镁盐或含氯离子盐中一种或几种。优选地，电解质组分为氯化钠、氯化钾或氯化镁中的一种或几种。具体地，上述枸橼酸盐为枸橼酸钠或枸橼酸钾。优选的，枸橼酸盐的加入量为0.5～1.5mmol/l。具体地，碳酸氢钠的优选范围为24～32mmol/l。具体地，上述磷酸盐为磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸钾、磷酸氢二钾或磷酸二氢钾中的任意一种或几种。优选的，磷酸盐添加范围为1.0～1.5mmol/l。具体地，上述无水葡萄糖的优选范围是0.5～1.2mmol/l。具体地，上述缓冲剂是碳酸氢盐、柠檬酸盐、异柠檬酸盐、磷酸盐、乳酸盐、丙酮酸盐、琥珀酸盐、延胡索酸盐、苹果酸盐或草酰乙酸盐；优选的，缓冲剂为柠檬酸盐、磷酸盐或碳酸氢盐。具体地，本发明的血液滤过置换还含治疗性药物如血管扩张剂、利尿剂、激素、维生素、抗氧化剂等。本发明还提供了血液滤过置换液的包装方法，其采用双室袋的包装形式。具体地，血液滤过置换液的包装袋分为a、b两室，其中a室包含电解质和葡萄糖，b室包含电解质、磷酸盐、缓冲剂、枸橼酸盐。a、b室混合后，可实现接近生理ph的血液滤过置换液。通过将制剂包装袋设置为双室袋可以实现碳酸氢盐与钙、镁盐的有效隔离，增强制剂的配伍稳定性；由于磷酸盐、缓冲剂、枸橼酸盐同属于强碱弱酸盐，具有潜在的不稳定性，故将三者置于同一室，调节ph值至碱性以增强其稳定性。具体地，血液滤过置换液的a、b液混合后的ph值为6.0～8.0。优选血液滤过置换液的a、b液混合后的ph值为6.4～7.0。本发明的血液滤过置换液中加入枸橼酸盐，以实现crrt治疗时的体外局部抗凝，特别适合有出血倾向的患者。同时枸橼酸钠经机体代谢后产生碳酸氢盐，从而进一步发挥纠正代谢性酸中毒的作用。在处方中将碳酸氢盐替代常用的乳酸盐，可发挥良好的纠正酸中毒，同时减少高乳酸相关的不良反应。此外，新加入了磷酸盐，尤其是磷酸氢二钠能有效弥补crrt治疗时造成的磷丢失，减少低磷血症的发生率。在药效实现方面，将枸橼酸钠加入血液滤过置换液中，以前稀释的方式参与血液滤过治疗，可有效实现体外局部抗凝血作用，同时进入机体后可代谢为碳酸氢盐而发挥纠正代谢性酸中毒的作用。本发明血液滤过置换液的包装袋采用聚丙烯、聚乙烯、聚氯乙烯、聚酯、乙烯/醋酸乙烯酯共聚物、苯乙烯-乙烯-丁烯(seb聚合物)或尼龙中一种或几种成分制备而成。有益效果本发明血液置换液组分中以碳酸氢盐代替乳酸盐作为缓冲体系，可避免乳酸大量输入带来的副作用，同时更好地纠正酸中毒。此外，加入了磷酸盐，可有效补充患者在crrt治疗时造成的磷丢失，减少低磷血症的发生。故通过以上的制剂和配方设计思路，最终配制出具有更好的药效作用的血液滤过置换液。本发明的新型血液滤过置换液中加入枸橼酸钠，以实现crrt治疗时的体外局部抗凝，特别适合有出血倾向的患者。而且枸橼酸钠经机体代谢后产生碳酸氢盐，可进一步发挥纠正代谢性酸中毒的作用。本发明通过血液滤过置换液的包装时，采用双室结构，避免沉淀产生，增强配伍稳定性，同时最后得到的滤过液ph接近生理值，降低安全隐患。本发明血液滤过置换液包装袋采用非pvc材料、增强临床使用安全。附图说明图1本发明各实例的平均生存时间结果图。图2本发明各实例的超滤量结果。图3本发明各实例的血磷结果。具体实施方式以下通过具有实施例对本发明的技术方案作进一步阐述，其中所涉及的具体值、参数条件不作为对本发明的限定。本领域技术人员在理解技术方案的基础上，所做的任何改进和变化都属于本发明的保护范围。具体的实施例则根据含枸橼酸钠的新型碳酸氢盐血液滤过置换液成分组成范围，设计了6个实施例，具体处方如表1所示。表1各实施例处方组成(a、b液混合后的终浓度)表2各实施例a、b室制备体积及其ph值实施例a室体积(ml)b室体积(ml)a室ph值b室ph值实例160014002.89.0实例272012803.08.5实例380012003.28.2实例4100010003.58.0实例512807203.87.5实例614006004.07.0制备方法：首先制备三层输液用共挤膜双室袋备用。取适量的注射用水，投入原料药如氯化镁、氯化钙和葡萄糖，充分溶解，定容，调节ph值，微孔滤膜精滤后置入a室中。取适量的注射用水，投入原料药如氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、碳酸氢钠、枸橼酸钠充分溶解，定容，调节ph值，微孔滤膜精滤，然后置于b室。灌封后进行灭菌(湿热灭菌，灭菌温度121℃，灭菌时间15min)，即得到成品。以上各实例的投样依照表1、表2的处方组成进行，使得a、b两室混合均匀后，各成分的终浓度符合表1的描述。各实例药效学实验(一)对急性肝功能衰竭的治疗作用1、犬急性肝衰竭模型建立健康成年雄性比格犬35只，体重在12～15kg，随机分为对照治疗组(n＝5)和各实施例治疗组(每个实施例n＝5，共计30只)。第一次静脉注射30％对乙酰氨基酚(0.5ml/kg)，同时腹部皮下注射40％四氯化碳(0.5ml/kg)。第12小时后重复给药，给药方法同上，但剂量减半。由此建立了犬急性肝衰竭模型。各组动物在给药后24小时予以血液滤过治疗。2、血液滤过治疗所有动物采用股动脉和股静脉留置单腔静脉导管。采用bm25小儿专用滤过血路管道，使用美国百特bm25床边滤过机，血泵维持血流量为50ml/min。采用德国freseniusav400聚砜膜血液滤过器(膜面积为0.7m2，膜内径220μm，超滤系数250ml/h)。共分为7个试验组(每组n＝5)，其中对照治疗组给予市售的乳酸盐血液滤过置换液治疗(成分组成：每升含有氯化钠5.92g、氯化钾0.149g、二水氯化钙0.276g、乳酸钠3.78g、六水氯化镁0.152g和一水葡萄糖1.5g，其中不含碳酸氢盐、枸橼酸盐和磷酸盐)，其余每个实例各对应一组实施例治疗组，每组5只犬。将各组置换液按照前稀释法，以500ml/h的速度输入，出超滤量根据犬的循环情况进行调整。其中，对照组采用肝素法抗凝，即使用低分子肝素(20u/kg·h)持续泵入。各实施例组以其置换液中含有的枸橼酸钠实现体外局部抗凝。3、实验结果(1)生存时间比较各实施例的平均生存时间明显高于使用传统乳酸盐血液滤过置换液的对照组(结果见图1所示)。(2)对肝功能指标的改善作用分别收集各组犬只在造模前、成模后、以及成模治疗后的血清，检测其肝功能指标alt和ast。各组数值如表3所示。(表3位于横向纸张上)各组比格犬建模前肝功能均处于正常值范围，造模24小时后alt和ast急剧上升，提示发生急性肝功能衰竭。对照组血液滤过治疗后，alt和ast均有明显下降，说明对肝衰竭具有良好的治疗作用。实例1-6治疗组治疗后，alt和ast与治疗前相比显著下降，而且其数值低于对照组。说明制备的各实例对肝衰竭的疗效优于对照组。(3)对高乳酸血症的治疗作用机体清除血液中乳酸的主要器官是肝脏，其次是肾脏和骨骼肌、心肌。当发生急性肝功能衰竭时，往往出现高乳酸血症。例如在本试验中，药物诱导急性肝功能衰竭后血清乳酸的浓度明显升高。此时，使用含有乳酸的传统血液滤过置换液进行血液滤过治疗后，由于过多的乳酸进入犬的血液循环中，导致血中乳酸急剧增加，发生了高乳酸血症。当使用不含乳酸的实例1-6后，其各组乳酸浓度有所下降。详细结果见表3。以上结果说明各实例更加适用于存在肝功能障碍的机体，并且具有一定的纠正乳酸酸中毒的作用。(4)对凝血功能的影响由于抗凝血酶类物质主要由肝脏合成，当发生急性肝功能损伤时，常伴有凝血功能障碍。例如，本试验中各组比格犬在药物诱导急性肝损伤后，国际标准化凝血酶原时间比值(inr)明显增高，提示凝血时间可能延长。当使用传统乳酸盐血液滤过液时，采用了肝素的抗凝方法，结果发现治疗后其inr数值发生进一步增大，提示具有出血的倾向。而采用枸橼酸盐体外抗凝的实例1-6各组，治疗后其inr没有发生增高，反而具有下降的趋势。说明对于出现凝血障碍的情形，各实例采用枸橼酸盐体外抗凝更加安全。以上各试验研究证实：本发明的血液滤过置换液，由于不含乳酸，且采用枸橼酸盐体外抗凝，相比传统的乳酸盐血液滤过置换液，更加适用于肝功能受损、具出血倾向的情形。(二)对急性肾功能衰竭的治疗作用1、急性肾功能衰竭动物模型制备健康雄性比格犬35只，体重10～15kg。麻醉：术前夜开始禁食。3％戊巴比妥(30～45)mg/kg腹腔注射麻醉。在无菌操作下(包括清洗动物、备皮、常规消毒、铺巾)，取中、下腹正中切口6～10cm，打开腹腔，用4号丝线结扎双侧输尿管。逐层关闭腹腔。最后在股动脉、静脉留置导管，用作检测平均动脉压、抽取标本、血液滤过治疗等。从手术结束至试验结束动物均禁食，予以静脉输液维持。所有动物每天按每公斤体重给予5％葡萄糖200ml、10％氯化钠5.0ml、10％氯化钾2.5ml和维生素c0.25g。结扎双侧输尿管后12h，重新麻醉，麻醉后上呼吸机(美国pb-1001型)，采用辅助通气(a/c)模式，潮气量200ml，机控频率为12次/min，吸氧浓度(fio2)为21％。2、血液滤过治疗所有动物采用股动脉和股静脉留置单腔静脉导管。采用bm25小儿专用滤过血路管道，使用美国百特bm25床边滤过机，血泵维持血流量为50ml/min。采用德国freseniusav400聚砜膜血液滤过器(膜面积为0.7m2，膜内径220μm，超滤系数250ml/h)。共分为7个试验组，其中以市售的乳酸盐血液滤过置换液为对照组(成分组成：每升含有氯化钠5.92g、氯化钾0.149g、二水氯化钙0.276g、乳酸钠3.78g、六水氯化镁0.152g和一水葡萄糖1.5g，其中不含碳酸氢盐、枸橼酸盐和磷酸盐)，其余每个实例各对应一组，每组5只犬。将各组置换液按照前稀释法，以500ml/h的速度输入，出超滤量根据犬的循环情况进行调整。其中，对照组采用肝素法抗凝，即使用低分子肝素(20u/kg·h)持续泵入。各实施例组以其置换液中含有的枸橼酸钠实现体外局部抗凝。3、实验结果(1)抗凝效果观察经观察，所有实验动物在治疗整个过程中情况稳定，无死亡事件发生。血液滤过器械在治疗结束时均未出现凝血。治疗结束后，所有动物也未出现出血事件。此结果说明本发明所制备的血液滤过置换液具有良好的体外局部抗凝效果。(2)超滤量及小分子溶质清除结果超滤结果如图2所示，各实例进行血液滤过治疗时，均能实现良好的超滤作用。各实例间的超滤量差别并不明显，与对照组相比均无显著性差异。维持良好的超滤作用同时，对小分子的清除如血肌酐、血尿素氮也十分明显，如表4所示。(表4位于下页横向纸张上)各实例参与的血液滤过试验与对照组一致，均能够显著实现对肌酐和尿素氮的清除作用。(3)酸碱平衡变化各实例经过血滤治疗后，均能有效逆转急性肾功能衰竭所致的代谢性酸中毒。其中，各实例组的纠正效果优于对照组，说明各实例能够高效地纠正代谢性酸中毒。结果如表4所示。(4)磷酸盐补充作用各组在血滤治疗结束时，收集血液，检测血磷指标。结果如图3所示，对照组治疗后，发生低磷血症(平均值为0.68mmol/l)。各实例组中，实例2组由于配方中不含磷酸盐，其血磷值与对照组相似。其余各实例组血磷值明显高于对照组，处于正常血磷的范围。以上结果提示，传统乳酸盐血液滤过置换液在血液滤过治疗时可导致磷酸的丢失，造成低磷血症。本发明在配方中增加磷酸盐，治疗时具磷酸盐的补充作用，有效避免低磷血症的发生。以上试验说明：本发明的血液滤过置换液用于治疗急性肾功能衰竭，不仅具有良好的体外抗凝、超滤和小分子溶质的清除作用。而且相比传统产品具有更好的纠正酸中毒和补充磷酸盐的疗效。表3各组血清生化及对inr的影响结果(数值以表示)续上表表4.各实例对小分子清除及酸碱平衡试验结果(数值以表示，单位：mmol/l)续上表当前第1页12