一种具有治疗敏感性皮肤作用的药物组合物的澄清工艺和质量控制方法与流程

本发明采用天然澄清剂的澄清工艺和现代分析检测仪器检测中药制剂技术领域，涉及一种具有治疗敏感性皮肤作用的药物组合物的澄清工艺和质量控制方法。

背景技术：

敏感性肌肤作为常见的困扰肌肤状态普遍存在，虽然敏感性皮肤的确切定义尚未达成一致，但对其皮肤临床症状和体征的描述逐渐一致，即不适，多数患者的不适几乎都表现在面部，包括主观的感觉症状，如灼热、刺痛、瘙痒、发麻，这些症状可伴有或不伴有红斑。(proksche，weidingers.newinsightsintothepathogenesisofsensitiveskin.hautarzt，2011，62(12)：900-5)敏感性皮肤虽然不是皮肤疾病，但它引起的皮肤不适直接影响着人们的生活质量。随着社会的进步，人们对美的追求，越来越多的人关注自己的皮肤健康和生活质量，敏感性皮肤这一问题也日益突出，特别是在上海这样的一线城市。(余玲玲、王学明.上海地区敏感性皮肤的流行病学调查.临床皮肤科杂志，2011，40(7)：403-406)中国的最新的一项流行病学研究表明，北京、上海、广州三大城市敏感肌肤的平均发病率为13％，北京的平均发病率为17.12％，上海的平均发病率为9.10％，而广州的平均发病率是最高的22.39％，其中男性敏感肌肤的发病率为8.62％，女性敏感肌肤的发病率为15.93％。(xuf，yans，wum，etal.self-declaredsensitiveskininchina：acommunity-basedstudyinthreetopmetropolises.jeuracaddermatolvenereol，2012，epubaheadofprint)因此研究新的治疗敏感性皮肤方法和手段，已经成为目前皮肤科学界和化妆品企业的研究热点。(bornkessela，flachm，arens-corellm，etal.functionalassessmentofawashingemulsionforsensitiveskin：mildimpairmentofstratumcorneumhydration，ph，barrierfunction，lipidcontent，integrityandcohesioninacontrolledwashingtest.skinrestechnol，2005，11(1)：53-60)如专利申请号200510079622.9，该申请中公开了一种用于预防和/或治疗敏感和/或干性皮肤的美容处理办法，具体包括口服施用至少有效量的至少一种微生物，特别是益生微生物，并且联合有效量的至少一种二价无机阳离子。如专利申请号200680028396.4，该申请中公开了一种用于预防和/或治疗敏感和/或干性皮肤的化妆用和/或皮肤学组合物，具体包含有效量的至少一种特别益生菌微生物和/或其片段或代谢物，其与有效量的至少一种多不饱和脂肪酸和/或多不饱和脂肪酸酯和/或其盐或衍生物在生理学上可接受的载体中相结合。如专利申请号200810147597.7，该申请中公开了一种用于处理敏感皮肤的双歧杆菌属(bifidobacterium)种裂解物的用途，具体包括有效量的双歧杆菌属(bifidobacterium)种的至少一种微生物的至少一种裂解物，和/或部分用于预防和/或处理敏感皮肤情况下皮肤障碍的美容用途。中药提取物对敏感皮肤亦有良好的治疗作用，如专利申请号02826321.9，该申请中公开了筛选通过抑制干细胞因子的生成和/或释放而改善瘙痒、皮肤粗糙或皮肤敏感或发挥增白效果的活性成分的方法，以及含有这些活性成分、用于改善皮肤粗糙或皮肤敏感和/或增白的药物。一些临床试验报道采用含温泉水的医学护肤品可以减轻敏感性皮肤的症状和体征。(潘炜华、廖万清.雅漾舒护活泉水对1050例敏感性皮肤和炎症性皮肤病辅助治疗作用的初步观察.临床皮肤科杂志，2005，34(7)：473-474；王珊珊、梁虹、胡英姿等.功能性化妆品对敏感性皮肤的防护作用.中国美容医学，2009，18(10)：1486-1489)有学者发现含马齿笕及甘草提取物护肤品对敏感性皮肤有辅助治疗作用(何黎、温海、徐丽敏等.含马齿笕及甘草提取物护肤品对敏感性皮肤辅助治疗作用的临床观察，临床皮肤科杂志，2009，38(6)：364-366)

敏感性皮肤的概念提出迄今不过短短20余年，人们还缺乏治疗敏感性皮肤的有效手段。中医药是一个伟大的宝库，它为国人几千年的生息繁衍做出了巨大的贡献，对这一宝库进行深入研究，探索新的治疗敏感性皮肤有效方法十分必要。

中药复方制剂的制备经常包括提取过程，而得到的中药提取物是一个复杂的混合体系，包括活性成分和杂质，其中含有大量的微细粒子、淀粉、鞣质、蛋白质、多糖等物质(偶有药材残渣，泥沙等杂质)，共同形成1-100knm是胶体分散体系，属于动力学及热力学不稳定体系，具有自发沉降的趋势。为保留活性成分，除去这些杂质，使固液迅速而完全地分离，就要设法破坏混合体系的稳定性。中药复方制剂多采用水提醇沉工艺，该工艺具有澄清药液、减少服用量等优点。但该工艺在澄清药液同时将中药中的一些醇不溶性的大分子如蛋白质及部分多糖作为杂质除去，而这些成分具有广泛的生理活性和药用价值。絮凝澄清法是在混悬的中药提取液中加入一种澄清剂以吸附架桥和电中和方式除去溶液中的粗粒子，以达到分离纯化目的的一种高效技术，ztc1+1天然澄清剂是一种从食品中提取，以天然多糖等为原料制成的天然高分子物质，由a、b2种组分组成，其澄清原理是采用“1+1”澄清技术，其中1组分起主絮凝作用，另1组分起辅助絮凝作用，具有较好的澄清效果。

随着科学的发展，分析仪器的普及应用，使中药复方检测分析和质量控制不断提高和完善。薄层色谱法(tlc)，系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，根据比移值(rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(rf)作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法，是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，也用于跟踪反应进程。高效液相色谱检测分析技术在中药质量控制中发挥越来越重要的作用。它是通过光谱色谱等分析手段对中药或复方进行成分检测，利用不同成分特有的化学图谱，反映中药或复方所含的内在化学成分的种类和含量。

治疗敏感性皮肤的药物组合物由赤芍、肿节风、土茯苓等7味药材组成，其活性成分较多，依据2015版中国药典，各组分药材的色谱条件与系统适用性试验方法各不相同，只有逐一测定药物组合物中各药材的目标成分含量，不利于评价和控制复方中药的质量，且保证其药效成分的稳定性和数量。

本发明根据中药理论，从大量的天然药物中，选用了苦参、荆芥、青天葵、鱼腥草和金银花为原料，制备并澄清获得了所述的具有治疗敏感性皮肤作用的组合物，本发明的具有治疗敏感性皮肤作用的药物组合物，具有多重作用，能够用于制备敏感性肌肤皮肤保养的化妆品和皮肤的治疗性药物，其中，所述的苦参选用豆科植物sophoraflavescensait.的根；荆芥选用裂叶荆芥属植物裂叶荆芥schizonepetatenuifolia(l.)briq.的全草；青天葵选用兰科植物芋兰属中的nerviliafordii(hance)schltr.的全草；金银花选用忍冬lonicerajaponicathunb.的干燥花蕾或带初开的花；鱼腥草选用三白草科植物蕺菜houttuyniacordatathunb.的新鲜全草或干燥地上部分。

根据《中国药典》和文献记载：

苦参为豆科植物sophoraflavescensait.的根，苦参是我国传统中药之一，具清热燥湿、杀虫、利尿等功效，用于治疗热痢，便血，黄疸尿闭，赤白带下，阴肿阴痒，湿疹，湿疮，皮肤瘙痒，疥癣麻风；外治滴虫性阴道炎等各种疾病。苦参含有多种化学成分并分别具有不同的化学活性，其主要的有效成分是生物碱类和黄酮类化合物。现代研究表明，苦参有抗肿瘤、抗病毒、抗肝损伤、抗心律失常、抗肝纤维化、中枢抑制、抗生育、平喘等广泛药理作用。

荆芥为裂叶荆芥属植物裂叶荆芥schizonepetatenuifolia(l.)briq.的全草，荆芥是临床常用中药，性温、味辛，生品具有祛风解表、宣毒透疹、散瘀止血之功效，主治风寒感冒、咽喉肿痛及多种皮肤病，为中医临床常用药物。荆芥炒炭后专功止血，可用于吐血、衄血、便血、崩漏、产后血晕等。

青天葵为兰科植物芋兰属中的nerviliafordii(hance)schltr.的全草，又名独叶莲、珍珠草、独脚莲、珍珠叶、坠千斤、铁帽子、山米子、天葵、入地珍珠、假天麻、独脚天葵、猪乸草、磨地沙、半边伞、小胖药、提心吊胆等，主要分布在广西、广东、云南、四川等地，在香港、泰国也有分布。青天葵主要生长在海拔400～600米的石山疏林下，石山山脚或密林阴湿处，田边或肥沃的地方，其味甘凉、性寒、无毒，可清热润肺、解毒消肿，主治肺痨咯血、肺热咳嗽、口疮、咽喉肿痛、瘰疠、疮疡肿痛、跌打损伤。在我国两广地区和东南亚地区，青天葵为民间习用的凉茶，是我国传统出口的名贵药材。

鱼腥草为三白草科植物蕺菜houttuyniacordatathunb.的新鲜全草或干燥地上部分。鱼腥草又称蕺菜，属多年生草本植物。它广泛生长于我国南方各省区，西北、华北部分地区也有分布。因其有一种特有的鱼腥气味，故称鱼腥草。鱼腥草是三白草科蕺属植物。蕺属植物在我国只有1种即鱼腥草。其干品、鲜品茎叶均可入药，是常用中草药之一。它具有清热解毒、利尿消肿等功效，主要应用于痰喘咳、痈肿疮毒等病症。鱼腥草的精油对过敏性哮喘有明显保护作用。鱼腥草精油还有增强免疫活性。另外，鱼腥草有镇痛止咳，止血，抑制浆液分泌，促进组织再生等活性。因鱼腥草的挥发性物质具有显著的药效，制药行业用鱼腥草水蒸汽蒸馏得到的精油饱和水溶液制成鱼腥草注射液，广泛应用于上呼吸道炎症等。

金银花为忍冬lonicerajaponicathunb.的干燥花蕾或带初开的花。金银花是我国常用的传统珍贵药材，同时也是制作清凉饮料的重要原料，具有“清热解毒、凉散风热”之功效，主治痈肿疗疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症。

综上所述，目前敏感性皮肤缺乏有效的治疗手段，本发明的有益效果在于根据敏感性皮肤的病因和病理机制，大量筛选了一千多种中草药，终于筛选出能够有效治疗敏感性皮肤的药物组合物。目前，国内外尚未见将苦参、荆芥、青天葵、鱼腥草和金银花提取物的组合物用于治疗敏感性皮肤的相关报道。本发明的药物组合物经临床试验证实效果显著，安全性好。所涉及的成分具有效果明确、安全性好、无任何副作用和在化妆品配方中稳定的特点；与现有同类产品相比，具有效果显著的特点，是一种新型治疗敏感性皮肤的有效天然药物提取物的组合物。

技术实现要素：

本发明目的在于根据现代技术，提供一种具有治疗敏感性皮肤作用的药物组合物的快速澄清、高效质量控制方法，从整体上评价和控制药物组合物质量，保证治疗敏感性皮肤的药物组合物的疗效更加稳定、可靠。

本发明是通过以下技术方案实现：

一种具有治疗敏感性皮肤作用的药物组合物的澄清工艺，取治疗敏感性皮肤作用的中药制剂常规乙醇浸泡提取，浸泡液减压浓缩，浓缩液用大孔树脂吸附，5％-95％的乙醇洗脱，洗脱液浓缩，即为所述的治疗敏感性皮肤作用的药物组合物，置于60℃水浴，先加入4％洗脱液体积的ii型ztc1+1天然澄清剂b组分，1h后加入2％体积的ii型ztc1+1天然澄清剂a组分，期间每半小时搅拌1分钟令杂质成分凝聚沉淀，然后在离心机中以4000r/min离心10min，取上清液；所述的ii型ztc1+1天然澄清剂：它是一种以天然多糖为原料制成的天然高分子物质，由a、b两个组分组成，a组分为黄褐色可溶性固体粉末或浅褐色液体，主要含淀粉酶，配成1％的水溶液使用；b组分为浅黄色可溶性固体粉末或浅褐色液体，主要含淀粉酶的复合酶，用1％醋酸配成1％浓度的溶液使用。

a组分，精密量取1.0gii型ztc1+1天然澄清剂加入少量在蒸馏水，搅拌成糊状，再加入蒸馏水配制至100ml的粘胶液，溶胀24h，用双层纱布过滤；

b组分，精密量取1.0gii型ztc1+1天然澄清剂加入少量体积分数为1％的醋酸溶液，搅拌成糊状，再加体积分数为1％的醋酸溶液配制成100ml的粘胶液，溶胀24h，用双层纱布过滤。

一种具有治疗敏感性皮肤作用的药物组合物的澄清工艺和质量控制方法，其特征在于，该质量控制方法包括以下步骤：

(1)用薄层色谱法鉴别该药物中药材荆芥，包括：

a.供试样品的制备：取本品口服液10ml，放入分液漏斗，加石油醚(60-90℃)20ml，振摇提取2次，放置过夜，滤过，合并提取液，滤液挥干至1ml，作为供试品溶液；

b.对照药材溶液的制备：取荆芥对照药材1g，加石油醚(60-90℃)20ml，振摇提取2次，放置过夜，滤过，合并提取液，滤液挥干至1ml，作为对照药材溶液，

c.荆芥薄层色谱鉴别：依照薄层色谱法试验，分别吸取荆芥对照药材溶液，供试品溶液各2μl，分别点于同一硅胶h薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(17∶3)作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛的5％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置白光下检视；

(2)用薄层色谱法鉴别该提取物中药材青天葵，包括：

a.供试样品的制备：取药物提取物10ml，放入100ml具塞三角烧瓶中，加甲醇20ml，超声提取20min，过滤，滤液浓缩至干，残渣加90％甲醇溶解，转移到5ml容量瓶中，摇匀后作为供试品溶液；

b.对照品溶液的制备：取青天葵甲素，青天葵乙素对照品10mg，加甲醇5ml，超声提取30min，转移到5ml容量瓶中，摇匀后作为对照品溶液；

c.青天葵薄层色谱鉴别：依照薄层色谱法试验，分别吸取供试样品和对照品溶液各2μl，分别点于同一高效预制硅胶g薄层板上，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸的质量比例为4.5∶1.5∶2.5∶0.4作为展开剂，在温度15-18℃，相对湿度在60％-70％之间展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液显色，在105℃加热至斑点显色清晰，置366nm紫外光灯下检视；

(3)用薄层色谱法鉴别该药物中药材鱼腥草，包括：

a.供试样品的制备：取药物提取物10ml，放入分液漏斗，加乙酸乙酯20ml，振摇提取2次，滤过，合并提取液，滤液挥干至1ml，作为供试品溶液；

b.对照品溶液的制备：取甲基正壬酮对照品5mg，加乙酸乙酯1ml溶解，作为对照品溶液，

c.鱼腥草薄层色谱鉴别：依照薄层色谱法试验，分别吸取鱼腥草对照品溶液，供试品溶液各2μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(9∶1)作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼溶液，置白光下检视；

(4)用高效液相色谱法测定药物中苦参碱和绿原酸的含量，包括：

a.高效液相色谱条件：inertsilods3色谱柱，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇a-甲酸水，梯度洗脱为0～10min30％a→35％a、10～45min35％a→45％a、45～60min45％a→75％a，平衡时间15min，流速0.8ml/min，进样量10μl，柱温24℃，pda检测器采集范围：190～400nm；检测波长210nm；

b.供试品溶液的配制：取治疗敏感性皮肤作用的中药制剂，常规乙醇浸泡提取24小时，用纱布过滤，减压浓缩为原重量的2％-5％，浓缩液上大孔树脂吸附，5％-95％乙醇洗脱，浓缩洗脱液，加甲醇定容至即每毫升药液含1g原药，用甲醇稀释5、10、15倍备用；

c.对照品溶液的制备：精密称取苦参碱，绿原酸2mg，分别加甲醇配制不同倍数质量浓度的对照品溶液；

d.线性关系考察：分别精密吸取上述不同浓度的对照品溶液，高效液相色谱仪进样10μl，以测得的响应信号和浓度进行线性回归，得到标准品的回归方程；

e.测定法：分别精密吸取对照品和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定。

作为优选的，具有治疗敏感性皮肤作用的药物组合物的澄清工艺和质量控制方法的供试品溶液为醇提液，具体方法为：取治疗敏感性皮肤作用的中药制剂，常规乙醇浸泡提取24小时，用纱布过滤，减压浓缩为原重量的2％-5％，浓缩液上大孔树脂吸附，5％-95％乙醇洗脱，浓缩洗脱液，加甲醇定容至即每毫升药液含1g原药，用甲醇稀释5、10、15倍。

优选的，所述的具有治疗敏感性皮肤作用的药物组合物的澄清工艺和质量控制方法，其特征在于：用于提取方法相同的药物组合物组成含有苦参，荆芥，青天葵，鱼腥草，金银花的复方。

优选的，在具有治疗敏感性皮肤作用的药物组合物的澄清工艺和质量控制方法中：供试品稀释5倍，过0.22μm滤膜，10μl进液相色谱仪、苦参碱的含量为：8.76μg/ml，绿原酸的含量为：10.53μg/ml。

优选的，所述的薄层色谱法鉴别荆芥，青天葵和鱼腥草中，荆芥以正己烷-乙酸乙酯(17∶3)作为展开剂，喷以5％香草醛的5％硫酸乙醇溶液显色，青天葵以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸的质量比例为4.5∶1.5∶2.5∶0.4作为展开剂，喷以10％硫酸乙醇溶液显色，鱼腥草以环己烷-乙酸乙酯(9∶1)作为展开剂，喷以二硝基苯肼溶液显色。

本发明以金银花药材的鉴定成分绿原酸为指标，该方法避免了药物组成药材中药物成分在同一色谱条件下响应(峰)的重叠，以活性成分的含量测定为控制标准，更加合理、真实地反映一种治治疗敏感性皮肤的药物组合物的质量。

说明书附图

图1是荆芥对照药材图。

图2是青天葵对照药材图。

图3是鱼腥草对照药材图。

图4是210nm波长下苦参碱和绿原酸对照品的色谱图。

图5是药物组合物在210nm波长下hplc色谱图。

图6是对照空白溶液在210nm波长下hplc色谱图。

具体实施方式

本发明一种具有治疗敏感性皮肤作用的药物组合物的澄清工艺和质量控制方法，该澄清工艺按如下步骤进行：

澄清工艺及各成分含量

(1)澄清剂的配制：ii型ztc1+1天然澄清剂由a，b两组分组成。a组分：精密量取1.0ga组分中加入少量在蒸馏水，搅拌成糊状，再加入蒸馏水配制至100ml的粘胶液，溶胀24h，用双层纱布过滤即得。b组分：精密量取1.0gb组分中加入少量体积分数为1％的醋酸溶液，搅拌成糊状，再加体积分数为1％的醋酸溶液配制成100ml的粘胶液，溶胀24h，用双层纱布过滤，即得。

(2)澄清剂a、b加入顺序：根据说明书，ztc天然澄清剂主要是根据溶液的性质选择不同的添加顺序，一般中药复方相对于蛋白质等电点(ph＝4.8)为酸性环境，添加顺序为先b后a组分，b组分用量为a组分2倍。

(3)评价指标：分别选取苦参碱含量保留率(x1)，绿原酸含量保留率(x2)、固形物去除率(x3)作为评价指标进行综合评分，将化合物保留率权重定为0.7，固形物去除率x3权重定为0.3，即od％＝(0.7x1+0.7x2)+0.3x3。计算公式如下：

化合物保留率＝澄清后提取液化合物的含量/提取液中化合物的含量×100％

固形物去除率＝(澄清前固形物含量-澄清后固形物含量)/澄清前固形物含量×100％

(4)工艺考察：以澄清剂加入量，料液比，温度，时间为考察因素，各选取最佳的3水平，以l9(3⁴)正交表进行试验，以化合物保留率和固形物去除率计算综合评分，进行方差分析，结果见表2。由正交试验的方差分析可以看出，澄清剂加入量及提取液料液比对综合评分有显著影响，温度和时间对提取液的澄清效果无统计学意义。试验中发现，澄清剂b组分为4％时药物组合物的澄清效果好，确定ii型ztc1+1天然澄清剂澄清的最佳工艺条件为药物组合物醇提液中澄清剂加入量b组分4％，b组分为2％料液比为1∶5，温度为60℃，反应时间1h。

表2l9(3⁴)正交试验结果

(5)各成分含量：以ii型ztc1+1天然澄清剂澄清药物组合物的最佳工艺条件：澄清剂加入量b组分4％，b组分为2％料液比为1∶5，温度为60℃，反应时间1h，制备样品。高效液相色谱条件：inertsilods-3色谱柱，流动相梯度见表1，平衡时间15min，流速0.8ml/min，柱温24℃，pda检测器采集范围：190～400nm；检测波长210nm，进样10μl。选择210nm波长分别测定绿原酸含量。样品连续进针3次，取平均值。按本发明质量控制方法测得每克生药，苦参碱的含量为：8.76μg/ml，绿原酸的含量为：10.53μg/ml。

本发明一种具有治疗敏感性皮肤作用的药物组合物的澄清工艺和质量控制方法，该方法按如下步骤进行：

(1)供试品溶液的配制：取治疗敏感性皮肤作用的中药制剂，常规乙醇浸泡提取24小时，用纱布过滤，减压浓缩为原重量的2％-5％，浓缩液上大孔树脂吸附，5％-95％乙醇洗脱，浓缩洗脱液，加甲醇定容至即每毫升药液含1g原药，用甲醇稀释5、10、15倍备用。

(2)对照品溶液的制备精密称取绿原酸2mg，加甲醇配制不同倍数质量浓度对照品溶液。

(3)线性关系考察：分别精密吸取上述不同浓度的对照品溶液，高效液相色谱仪进样10μl，以测得的响应信号(峰面积)和浓度进行线性回归，得到标准品的回归方程，苦参碱y＝22253x+6524.8(r²＝0.9996)，浓度在1.56～73.2μg/ml范围线性良好。绿原酸y＝24921x+6697.6(r²＝0.9998)，浓度在1.89～85μg/ml范围线性良好。

(4)测定方法：照高效液相色谱条件测定，色谱条件和系统适用性和inertsilods-3色谱柱，流动相见表1，平衡时间15min，流速0.8ml/min，进样10μl，柱温24℃，pda检测器采集范围：190～400nm；检测波长210nm。

表1流动相梯度洗脱表

(5)对上述确定的测定方法进行有效性评价，其中包括精密度、重复性、稳定性等。

2.敏感性皮肤的药物组合物中荆芥，青天葵，鱼腥草用薄层色谱法鉴别：

(1)荆芥薄层色谱法鉴别

供试样品的制备：取本品口服液10ml，放入分液漏斗，加石油醚(60-90℃)20ml，振摇提取2次，放置过夜，滤过，合并提取液，滤液挥干至1ml，作为供试品溶液；

对照药材溶液的制备：取荆芥对照药材1g，加石油醚(60-90℃)20ml，振摇提取2次，放置过夜，滤过，合并提取液，滤液挥干至1ml，作为对照药材溶液，

荆芥薄层色谱鉴别：依照薄层色谱法试验，分别吸取荆芥对照药材溶液，供试品溶液各2μl，分别点于同一硅胶h薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(17∶3)作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛的5％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置白光下检视；

(2)青天葵薄层色谱法鉴别

供试样品的制备：取药物提取物10ml，放入100ml具塞三角烧瓶中，加甲醇20ml，超声提取20min，过滤，滤液浓缩至干，残渣加90％甲醇溶解，转移到5ml容量瓶中，摇匀后作为供试品溶液；

对照品溶液的制备：取青天葵甲素，青天葵乙素对照品10mg，加甲醇5ml，超声提取30min，转移到5ml容量瓶中，摇匀后作为对照品溶液；

青天葵薄层色谱鉴别：依照薄层色谱法试验，分别吸取供试样品和对照品溶液各2μl，分别点于同一高效预制硅胶g薄层板上，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸的质量比例为4.5∶1.5∶2.5∶0.4作为展开剂，在温度15-18℃，相对湿度在60％-70％之间展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液显色，在105℃加热至斑点显色清晰，置366nm紫外光灯下检视；

(3)鱼腥草薄层色谱法鉴别

供试样品的制备：取药物提取物10ml，放入分液漏斗，加乙酸乙酯20ml，振摇提取2次，滤过，合并提取液，滤液挥干至1ml，作为供试品溶液；

对照品溶液的制备：取甲基正壬酮对照品5mg，加乙酸乙酯1ml溶解，作为对照品溶液，

鱼腥草薄层色谱鉴别：依照薄层色谱法试验，分别吸取鱼腥草对照品溶液，供试品溶液各2μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(9∶1)作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼溶液，置白光下检视；

本发明一种具有治疗敏感性皮肤作用的药物组合物的澄清工艺和质量控制方法，优选的供试品溶液的制备：该方法公示品溶液的制备：取治疗敏感性皮肤作用的中药制剂，常规乙醇浸泡提取24小时，用纱布过滤，减压浓缩为原重量的2％-5％，浓缩液上大孔树脂吸附，5％-95％乙醇洗脱，浓缩洗脱液，加甲醇定容至即每毫升药液含1g原药。

本发明一种具有治疗敏感性皮肤作用的药物组合物的澄清工艺和质量控制方法中，优选的测定方法：高效液相色谱条件测定，色谱条件和系统适用性试验：inertsilods-3色谱柱，流动相梯度见表1，平衡时间15min，流速0.8ml/min，柱温24℃，pda检测器采集范围：190～400nm；检测波长210nm，进样10μl。

本发明所述的质量控制方法，由于苦参碱最大吸收波长为210nm，绿原酸在210nm有较大吸收波长，故选择210nm波长分别测定苦参碱和绿原酸含量。

本申请发明人经考察获知，当采用乙腈-水，乙腈-甲酸水，甲醇-水体系作为流动相梯度洗脱时，药物成分分离不理想，运用甲醇-甲酸水体系洗脱，药物各成分没有重叠，且峰形优异。本实验方案通过对药物活性成分含量的质量控制，从整体上评价和控制药物组合物质量，更加合理、真实地反映一种治疗敏感性皮肤的药物组合物的质量。