一种预防和治疗脑卒中的药物的制作方法

本发明涉及一种预防和治疗脑卒中特别是缺血性脑卒中的药物，属于药物领域。

背景技术：

“脑卒中”(cerebralstroke)又称“中风”、“脑血管意外”(cerebralvascularaccident，cva)。是一种急性脑血管疾病，是由于脑部血管突然破裂或因血管阻塞导致血液不能流入大脑而引起脑组织损伤的一组疾病，包括缺血性和出血性卒中。缺血性卒中的发病率高于出血性卒中，占脑卒中总数的60％～70％。颈内动脉和椎动脉闭塞和狭窄可引起缺血性脑卒中，年龄多在40岁以上，男性较女性多，严重者可引起死亡。出血性卒中的死亡率较高。调查显示，城乡合计脑卒中已成为我国第一位死亡原因，也是中国成年人残疾的首要原因，脑卒中具有发病率高、死亡率高和致残率高的特点。不同类型的脑卒中，其治疗方式不同。由于一直缺乏有效的治疗手段，目前认为预防是最好的措施，其中高血压是导致脑卒中的重要可控危险因素。

目前临床治疗脑卒中的方法主要是服用阿司匹林、氯比格雷、脑活素片、弥可保等，都是疗效比较可靠，有治疗针对性的用药，其中阿司匹林是防治脑卒中的基础用药，对防止脑卒中复发有一定疗效，虽然以上治疗方法效果明显，但是可产生多种副作用对人体造成损伤。但临床应用阿司匹林显示有47％的患者存在用药抵抗，即使是阿司匹林肠溶片，也会对胃肠造成负担和影响。人参皂苷rb1是五加科植物人参的干燥根提取得到的一种活性物质，属于四环三萜皂苷，主要存在于西洋参和三七中。人参皂苷rb1具有中枢神经抑制和安定作用，对血管内皮细胞分泌功能、心血管系统具有保护作用，另外研究表明具有抗衰老作用。因此，考察人参皂苷rb1用于防治脑卒中的可行性与可能性，促进人参皂苷rb1的二次开发，作为一种防治脑卒中药物。

技术实现要素：

有鉴于此，本发明的目的在于一种预防和治疗脑卒中特别是缺血性脑卒中的药物，所属药物为人参皂苷rb1。

本发明的另一目的在于提供一种所述防治脑卒中的药物在防治脑卒中特别是缺血性脑卒中的应用。

在人参皂苷rb1对脑卒中的治疗作用的药理活性研究过程中，建立脑缺血再灌注造成的大鼠脑损伤的体内模型，分成对照组、模型组、治疗组(50mg/kg)，造模前预给药5天及造模当天再灌注2h给药，造模24h后比较不同组神经行为变化情况，取脑切5片，ttc染液染色，评价各组脑梗死情况。取病灶脑侧组织，通过酶联免疫法检测不同浓度地榆皂苷对肿瘤坏死因子-α(tnf-α)，白细胞介素-6(il-6)及白细胞介素-1β(il-1β)的影响。结果发现，人参皂苷rb1明显减轻脑缺血再灌注诱导的大鼠神经功能缺失性行为；模型组脑病灶侧出现大面积梗死，而人参皂苷rb1可显著减小脑梗死面积(p＜0.01)；造模后大鼠病灶脑侧tnf-α表达升高，与对照组相比有显著性差异(p＜0.05)，人参皂苷rb1治疗组的tnf-α表达有一定下调的趋势(p＝0.0532)；造模后大鼠病灶脑侧il-1β表达升高(p＜0.05)，与模型组相比，人参皂苷rb1可显著下调由血清中il-1β的表达(p＜0.05)；造模后大鼠病灶脑侧il-6表达升高(p＜0.05)，与模型组相比，人参皂苷rb1可显著下调由病灶脑侧il-6的表达(p＜0.05)。

通过以上研究，系统地考察人参皂苷rb1用于预防和治疗脑卒中特别是缺血性脑卒中的可行性与可能性，促进人参皂苷rb1的二次开发，作为一种防治脑卒中药物。

附图说明：

图1：人参皂苷rb1对造模大鼠神经功能的改善。

图2：人参皂苷rb1对造模大鼠脑梗死情况的改善(a)脑切片染色(b)脑梗死面积。

图3：人参皂苷rb1对造模大鼠病灶脑侧炎症因子表达的影响(a)tnf-α(b)il-1β(c)il-6。

具体实施方式

下面结合附图和实施例，对本发明进行进一步的说明。

实施例1人参皂苷rb1在预防和治疗脑卒中的应用研究

步骤一：线栓法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型(mcao)：以10％水合氯醛0.3ml/kg腹腔麻醉。颈正中切口，暴露颈总动脉(cca)、颈外动脉(eca)及翼腭动脉。将0.26mm单丝尼龙鱼线头端0.5cm用石蜡包被，并于20mm长处标记，全部大鼠均通过右侧cca切口处插入。栓线长度自cca分叉处约18～20mm，根据动物体重而定，栓塞右侧大脑中动脉。然后缝合皮肤，栓线尾端部分固定于皮肤上。缺血达到2h后小心抽出栓线，即形成再灌注。

步骤二：给药方案：治疗组按50mg/kg.d人参皂苷rb1灌胃给药，造模前5天开始给药，造模手术完成再灌注后给药。对照组和模型组给予生理盐水。

步骤三：人参皂苷rb1对神经功能的改善：参考longa及bederson的5分制法在动物麻醉清醒后24h进行神经功能评分。0分：正常，无神经功能缺损；1分：左侧前爪不能完全伸展，轻度神经功能缺损；2分：行走时，大鼠向左侧(瘫痪侧)转圈，中度神经功能缺损；3分：行走时，大鼠身体向左侧(瘫痪侧)倾倒。重度神经功能缺损；4分：不能自发行走，有意识丧失。分值越高说明动物行为障碍越严重。

结果表明，mcao造模明显造成大鼠神经功能缺失(p＜0.001)。而与mcao组相比，治疗组大鼠的神经功能得到改善(p＜0.01)，偏瘫症状得到缓解，见图1。

步骤四：人参皂苷rb1对脑梗死情况的改善：麻醉后直接取脑，-20度冰箱中速冻20分钟左右切片，切成5片，每隔2mm切一片。第一刀在脑前极与视交叉连线中点处；第二刀在视交叉部位；第三刀在漏斗柄部位；第四刀在漏斗柄与后叶尾极之间。将切片置于含1％ttc的0.2m磷酸缓冲液(ph7.4)中。避光放入37℃温孵箱15～30min，不时翻动脑片，使均匀接触到染色液。染色后白色部分为梗死部分。

结果表明：mcao造模明显造成大鼠脑部大面积梗死。而与mcao组相比，治疗组大鼠脑梗死面积明显减小(p＜0.01)，梗死症状症状减轻，见图2。

步骤五：mcao模型大鼠病灶脑侧的tnf-α(p＜0.05)、il-6(p＜0.05)和il-1β(p＜0.05)的表达显著上调。与mcao模型组相比，人参皂苷rb1显著下调了由造模引起的tnf-a(p＝0.0532)，il-1β(p＜0.05)和il-6(p＜0.05)的表达升高，见图3。

技术特征：

技术总结
本发明公开了一种预防和治疗脑卒中特别是缺血性脑卒中的药物及其应用，所述防治脑卒中的药物为人参皂苷Rb1。本发明涉及一种预防和治疗脑卒中特别是缺血性脑卒中的药物，属于药学领域。本发明提供了脑缺血再灌注引起的大鼠脑损伤模型中，人参皂昔Rb1具有良好的治疗活性；并通过实验证明，人参皂苷Rb1可以明显缓解脑缺血再灌注诱导大鼠发生的神经功能缺失，明显减少脑缺血再灌注形成的脑梗死面积。脑缺血再灌注造成大鼠脑内的炎症反应，使病灶脑侧的TNF‑α、IL‑1β、IL‑6促炎因子表达升高，人参皂苷Rb1可以逆转大鼠病灶脑侧炎症因子升高的现象。人参皂苷Rb1可用于脑卒中特别是缺血性脑卒中的预防和治疗。

技术研发人员：梁艳;王广基;陈慧敏
受保护的技术使用者：中国药科大学
技术研发日：2017.09.11
技术公布日：2018.01.12