与靶向notch途径以治疗癌症的γ分泌酶抑制剂相关的最严重的毒性是胃肠道毒性，例如腹泻，包括粘液性肠病或粘液性胃肠病。在施用γ分泌酶抑制剂后，祖细胞快速分化成肠隐窝中的分泌杯状细胞。需要notch信号传导来维持肠上皮的正常结构。已经使用体内模型来评估通过利用间歇给药和共同施用皮质类固醇的γ分泌酶抑制剂的施用来改善胃肠道毒性的方法，bender等人，cancerres.，2013,73(8)supplement，abstract1131。虽然取得了一些成功，但对具有可接受的胃肠道毒性的实体瘤癌症的合适的效力仍然是难以捉摸的。(takebe等人,pharmacology&therapeutics,2014,141:140-149)。本领域技术人员将理解，药物的“负荷剂量”是在治疗过程开始时给予的药物的初始较高剂量，然后降至较低的“维持剂量”。负荷剂量通常可用于相对缓慢地达到其治疗阈值水平的药物。与仅以较低固定剂量施用相比，施用药物的一个或多个初始负荷剂量以更迅速地达到适当的治疗水平。本发明平衡了对治疗剂给药方案的需求，该方案在治疗实体瘤癌症时表现出活性(效力)，同时减轻胃肠道毒性。还需要一种给药方案，其中4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物在实体瘤癌症患者中显示出治疗效力和持久响应而没有不利地影响效力，或引起剂量限制性或给药方案限制性胃肠道毒性。本发明的一个方面提供治疗实体瘤癌症患者的方法，其包括向需要治疗的患者施用4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物，其中a)在28天的周期中，以75-150mg/剂每周两次或三次施用至少一剂且最多12剂的负荷剂量；然后b)每周三次施用50mg/剂的维持剂量；以及任选地c)在负荷剂量的施用期间施用1-50mg/天的皮质类固醇。本发明的另一个方面提供化合物4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物，其用于治疗实体瘤癌症，其中如下施用所述化合物或其药学上可接受的盐或水合物：a)在28天的周期中，以75-150mg/剂每周两次或三次施用至少一剂且最多12剂的负荷剂量；然后b)每周三次施用50mg/剂的维持剂量；以及任选地c)在负荷剂量的施用期间施用1-50mg/天的皮质类固醇。本发明的另一方面提供4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物用于制备用于治疗实体瘤癌症的药物的用途，其中如下施用所述药物：a)在28天的周期中，以75-150mg/剂每周两次或三次施用至少一剂且最多12剂的负荷剂量；然后b)每周三次施用50mg/剂的维持剂量；以及任选地c)在负荷剂量的施用期间施用1-50mg/天的皮质类固醇。本发明的另一方面提供治疗实体瘤癌症的方法，其包括向需要治疗的患者施用4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物，a)在28天的周期中，以75-150mg/剂每周两次或三次施用至少一剂且最多12剂的负荷剂量；然后b)每周三次施用50mg/剂的维持剂量；以及任选地c)在负荷剂量的施用期间施用1-50mg/天的皮质类固醇；其中所述实体瘤癌症选自三阴性乳腺癌、乳腺癌、卵巢癌、黑素瘤、肺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤、结肠直肠癌、头颈癌、宫颈癌、前列腺癌、肝癌、口腔鳞状细胞癌、皮肤癌、成神经管细胞瘤、肝细胞癌、肝内和肝外胆管上皮癌、硬纤维瘤、软组织肉瘤、平滑肌肉瘤和腺样囊性癌。本发明的另一方面提供化合物4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物，其用于治疗实体瘤癌症，其中如下施用所述化合物或其药学上可接受的盐或水合物：a)在28天的周期中，以75-150mg/剂每周两次或三次施用至少一剂且最多12剂的负荷剂量；然后b)每周三次施用50mg/剂的维持剂量；以及任选地c)在负荷剂量的施用期间施用1-50mg/天的皮质类固醇；其中所述实体瘤癌症选自三阴性乳腺癌、乳腺癌、卵巢癌、黑素瘤、肺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤、结肠直肠癌、头颈癌、宫颈癌、前列腺癌、肝癌、口腔鳞状细胞癌、皮肤癌、成神经管细胞瘤、肝细胞癌、肝内和肝外胆管上皮癌、硬纤维瘤、软组织肉瘤、平滑肌肉瘤和腺样囊性癌。本发明的另一方面提供4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物用于制备用于治疗实体瘤癌症的药物的用途，其中如下施用所述药物：a)在28天的周期中，以75-150mg/剂每周两次或三次施用至少一剂且最多12剂的负荷剂量；然后b)每周三次施用50mg/剂的维持剂量；以及任选地c)在负荷剂量的施用期间施用1-50mg/天的皮质类固醇；和其中所述实体瘤癌症选自三阴性乳腺癌、乳腺癌、卵巢癌、黑素瘤、肺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤、结肠直肠癌、头颈癌、宫颈癌、前列腺癌、肝癌、口腔鳞状细胞癌、皮肤癌、成神经管细胞瘤、肝细胞癌、肝内和肝外胆管上皮癌、硬纤维瘤、软组织肉瘤、平滑肌肉瘤和腺样囊性癌。本发明的另一方面提供治疗实体瘤癌症的方法，其包括向需要治疗的患者施用4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物，其中a)在28天的周期中，以75-150mg/剂每周两次或三次施用至少一剂且最多6剂的负荷剂量；然后b)每周三次施用50mg/剂的维持剂量；以及任选地c)在负荷剂量的施用期间施用1-50mg/天的皮质类固醇；其中所述实体瘤癌症选自三阴性乳腺癌、乳腺癌、卵巢癌、黑素瘤、肺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤、结肠直肠癌、头颈癌、宫颈癌、前列腺癌、肝癌、口腔鳞状细胞癌、皮肤癌、成神经管细胞瘤、肝细胞癌、肝内和肝外胆管上皮癌、硬纤维瘤、软组织肉瘤、平滑肌肉瘤和腺样囊性癌。本发明的另一方面提供化合物4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物，其用于治疗实体瘤癌症，其中如下施用所述化合物或其药学上可接受的盐或水合物：a)在28天的周期中，以75-150mg/剂每周两次或三次施用至少一剂且最多6剂的负荷剂量；然后b)每周三次施用50mg/剂的维持剂量；以及任选地c)在负荷剂量的施用期间施用1-50mg/天的皮质类固醇；其中所述实体瘤癌症选自三阴性乳腺癌、乳腺癌、卵巢癌、黑素瘤、肺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤、结肠直肠癌、头颈癌、宫颈癌、前列腺癌、肝癌、口腔鳞状细胞癌、皮肤癌、成神经管细胞瘤、肝细胞癌、肝内和肝外胆管上皮癌、硬纤维瘤、软组织肉瘤、平滑肌肉瘤和腺样囊性癌。本发明的另一方面提供4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物用于制备用于治疗实体瘤癌症的药物的用途；其中如下施用所述药物：a)在28天的周期中，以75-150mg/剂每周两次或三次施用至少一剂且最多6剂的负荷剂量；然后b)每周三次施用50mg/剂的维持剂量；以及任选地c)在负荷剂量的施用期间施用1-50mg/天的皮质类固醇；其中所述实体瘤癌症选自三阴性乳腺癌、乳腺癌、卵巢癌、黑素瘤、肺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤、结肠直肠癌、头颈癌、宫颈癌、前列腺癌、肝癌、口腔鳞状细胞癌、皮肤癌、成神经管细胞瘤、肝细胞癌、肝内和肝外胆管上皮癌、硬纤维瘤、软组织肉瘤、平滑肌肉瘤和腺样囊性癌。本发明的另一方面提供治疗实体瘤癌症的方法，其包括向需要治疗的患者施用4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物，a)在28天的周期中，以75-150mg/剂每周两次或三次施用至少一剂且最多3剂的负荷剂量；然后b)每周三次施用50mg/剂的维持剂量；以及任选地c)在负荷剂量的施用期间施用1-50mg/天的皮质类固醇；其中所述实体瘤癌症选自三阴性乳腺癌、乳腺癌、卵巢癌、黑素瘤、肺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤、结肠直肠癌、头颈癌、宫颈癌、前列腺癌、肝癌、口腔鳞状细胞癌、皮肤癌、成神经管细胞瘤、肝细胞癌、肝内和肝外胆管上皮癌、硬纤维瘤、软组织肉瘤、平滑肌肉瘤和腺样囊性癌。本发明的另一方面提供化合物4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物，其用于治疗实体瘤癌症，其中如下施用所述化合物或其药学上可接受的盐或水合物：a)在28天的周期中，以75-150mg/剂每周两次或三次施用至少一剂且最多3剂的负荷剂量；然后b)每周三次施用50mg/剂的维持剂量；以及任选地c)在负荷剂量的施用期间施用1-50mg/天的皮质类固醇；其中所述实体瘤癌症选自三阴性乳腺癌、乳腺癌、卵巢癌、黑素瘤、肺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤、结肠直肠癌、头颈癌、宫颈癌、前列腺癌、肝癌、口腔鳞状细胞癌、皮肤癌、成神经管细胞瘤、肝细胞癌、肝内和肝外胆管上皮癌、硬纤维瘤、软组织肉瘤、平滑肌肉瘤和腺样囊性癌。本发明的另一方面提供4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物用于制备用于治疗实体瘤癌症的药物的用途，其中如下施用所述药物：a)在28天的周期中，以75-150mg/剂每周两次或三次施用至少一剂且最多3剂的负荷剂量；然后b)每周三次施用50mg/剂的维持剂量；以及任选地c)在负荷剂量的施用期间施用1-50mg/天的皮质类固醇；其中所述实体瘤癌症选自三阴性乳腺癌、乳腺癌、卵巢癌、黑素瘤、肺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤、结肠直肠癌、头颈癌、宫颈癌、前列腺癌、肝癌、口腔鳞状细胞癌、皮肤癌、成神经管细胞瘤、肝细胞癌、肝内和肝外胆管上皮癌、硬纤维瘤、软组织肉瘤、平滑肌肉瘤和腺样囊性癌。本发明的再一方面提供治疗平滑肌肉瘤的方法，其包括向需要治疗的患者施用4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物，a)在28天的周期中，以75-150mg/剂每周两次或三次施用至少一剂且最多3剂的负荷剂量；然后b)每周三次施用50mg/剂的维持剂量；以及任选地c)在负荷剂量的施用期间施用1-50mg/天的皮质类固醇。本发明的另一方面提供化合物4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物，其用于治疗平滑肌肉瘤，其中如下施用所述化合物或其药学上可接受的盐或水合物：a)在28天的周期中，以75-150mg/剂每周两次或三次施用至少一剂且最多3剂的负荷剂量；然后b)每周三次施用50mg/剂的维持剂量；以及任选地c)在负荷剂量的施用期间施用1-50mg/天的皮质类固醇。本发明的另一方面提供4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物用于制备用于治疗平滑肌肉瘤的药物的用途，其中如下施用所述药物：a)以75-150mg/剂每周两次或三次施用至少一剂且最多3剂的负荷剂量；然后b)每周三次施用50mg/剂的维持剂量；以及任选地c)在负荷剂量的施用期间施用1-50mg/天的皮质类固醇。化合物4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺(“化合物1”)或其药学上可接受的盐或水合物在wo2013/016081中被教导为notch抑制剂。“有效量”是指抑制实体瘤癌症患者中的notch信号传导和破坏靶标癌细胞或减慢或阻止患者的癌症进展所必需的化合物1或其药学上可接受的盐或水合物或含有该化合物或其药学上可接受的盐或水合物的药物组合物的剂量。有效量涵盖抑制实体瘤癌症患者中的notch信号传导和破坏靶标癌细胞或减慢或阻止患者的癌症进展所必需的化合物1或其药学上可接受的盐或水合物或含有该化合物或其药学上可接受的盐或水合物的药物组合物的负荷或第一剂量和维持或第二剂量。化合物1或其药学上可接受的盐或水合物在成人患者中的负荷剂量为75至150mg/剂，在一个七天的周内施用两次(两天)或在一个七天的周内施用三次(三天)(tiw)。施用至少一个负荷剂量，并在一个28天周期内施用最多12个负荷剂量。优选地，在28天周期的14天内施用1至6个负荷剂量。还优选地，在28天周期的7天内施用至少一个负荷剂量和最多3个负荷剂量。应当理解，负荷剂量的数量取决于施用方案是每周两次还是每周三次。在一个或多个负荷剂量后tiw施用每剂50mg的维持剂量或第二剂量。优选地，维持剂量在第一个28天周期的任何剩余天数至一个或多个额外的28天周期内施用。任选地，在施用负荷剂量期间，施用1-50mg/天的皮质类固醇。术语“治疗(treatment，treat，treating)”意图包括对实体瘤癌症的全方位介入，例如施用活性化合物以减轻、减慢或逆转一种或多种症状，以及延迟癌症的发展，即使实际上没有根除癌症。本发明给药方案(负荷剂量施用，随后维持剂量施用和任选的皮质类固醇施用)的“胃肠道毒性”可以改善或减轻，包括腹泻、恶心、呕吐、粘液性肠病和/或结肠炎。更高的剂量、更频繁的给药、以及更多的治疗周或周期往往会导致患者的更高等级的胃肠道毒性。减轻或改善这些毒性可以促进患者为了他们的癌症而接受额外剂量和/或治疗周或周期。“皮质类固醇”是指氢化可的松、醋酸氢化可的松、醋酸可的松、新戊酸替可的松、泼尼松龙、甲泼尼龙和泼尼松，优选泼尼松。尽管考虑了1-50mg/天的剂量，但可以将剂量增加至最多80mg/天。如本文所用，术语“患者”是指哺乳动物；“哺乳动物”是指高等脊椎动物的哺乳动物类；且术语“哺乳动物”包括但不限于人。预设给药方案对其有效、同时减轻胃肠道毒性的实体瘤癌症包括三阴性乳腺癌、乳腺癌、卵巢癌、黑素瘤、肺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤、结肠直肠癌、头颈癌、宫颈癌、前列腺癌、肝癌、口腔鳞状细胞癌、皮肤癌、成神经管细胞瘤、肝细胞癌、肝内和肝外胆管上皮癌、硬纤维瘤、软组织肉瘤、平滑肌肉瘤和腺样囊性癌。在本发明中，使用在28天的周期内在一个7天的周内两次(两天)或在一个7天的周内三次(三天)(tiw)的至少一剂至最多12剂的75至150mg/剂的负荷剂量(第一剂量)施用。可以调整患者接受的剂数以向患者提供更优的治疗益处和/或减轻或改善观察到的与肿瘤溶解综合征相关的毒性或症状。对于第一个28天周期的剩余天数(如果有的话)，优选50mg/剂tiw的维持剂量(第二剂量)施用，并且可以延长至一个或多个额外的28天周期。由医生决定通过一个或多个部分或全部28天周期施用维持剂量或第二剂量。任选地，并且优选地，考虑在化合物1的负荷剂量施用期间，施用(化合物1或其药学上可接受的盐或水合物施用前、同时或施用后)皮质类固醇，且最优选泼尼松，以减轻或改善胃肠道毒性。技术人员将理解，提供本发明的给药方案以提供更优的治疗效力，同时改善或减轻胃肠道毒性。该方案与伴随剂量或施用调整的固定剂量施用不同，所述调整由医生进行和决定并且已知和常规用于例如患有肾或肝损伤的患者或用于基于个体患者的变异性和对活性药剂的反应来减轻毒性。优选地，使用药学上可接受的载体将本发明的化合物配制为药物组合物并通过多种途径施用。优选地，这类组合物用于口服施用。这类药物组合物和制备它们的方法是本领域公知的。(参见，例如，remington：thescienceandpracticeofpharmacy,l.v.allen,编辑，第22版，pharmaceuticalpress，2012)。在一个特定实施方案中，该药物组合物包含4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺或其药学上可接受的盐或水合物和药学上可接受的载体。本发明的化合物能够与许多无机和有机酸反应以形成药学上可接受的酸加成盐。此类药学上可接受的盐和它们的常用制备方法是本领域中公知的。参见，例如，p.stahl等人，handbookofpharmaceuticalsalts：properties,selectionanduse,(vcha/wiley-vch,2002);s.m.berge等人，“pharmaceuticalsalts”，journalofpharmaceuticalsciences，第66卷，第1期，1977年1月。可通过本领域已知的多种程序以及wo2013/016081中描述的那些制备化合物1或其药学上可接受的盐或水合物。可以以不同方式组合具体合成步骤以制备化合物1或其药学上可接受的盐或水合物。化合物1命名为4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺；并且也可以命名为：n-[(1s)-2-[[(7s)-6,7-二氢-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-5h-吡啶并[3,2-a][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代乙基]-4,4,4-三氟丁酰胺；其它名称可用于明确识别化合物1。化合物1被命名为单一立体异构体。存在两个手性中心，产生四种立体异构体。如本文所用，提到化合物1还意在包括包含化合物1的立体异构体混合物。本文中，(r)-和(s)-的cahn-ingold-prelog指定用于指代具体的异构体。具体的立体异构体可以使用对映体纯的或富集的起始原料通过立体有择合成来制备。起始原料、中间体或包括化合物1的外消旋混合物的具体立体异构体可通过本领域公知的技术拆分，例如可见于stereochemistryoforganiccompounds,e.i.eliel和s.h.wilen(wiley1994)和enantiomers,racemates,andresolutions,j.,jacques,a.collet和s.h.wilen(wiley1991)中的那些，包括为此目的形成的非对映异构体（例如非对映异构体盐）的在手性固定相上的色谱、酶促拆分、或分级结晶或色谱。尽管在本发明内设想含有本发明的化合物的所有混合物，优选实施方案是化合物1。还已经发现，化合物1作为阻转异构体或特定构象异构体存在。在水溶液中，在环境温度下在24小时后通过1hnmr和lc-ms检测到与阻转异构体1(主要阻转异构体)平衡的8-9%的阻转异构体2(次要阻转异构体)。在有机溶剂中，在环境温度下在24小时后，通过1hnmr和lc-ms检测到与阻转异构体1平衡的大约1-2%的阻转异构体2。尽管可通过1hnmr和lc-ms分析检测，但阻转异构体2不可分离。用作本发明化合物的合成中的初始起始原料的化合物是公知的并且在不可购得的情况下，容易使用所提供的特定参考文献通过本领域普通技术人员常用的或可见于普通参考文本中的标准程序合成。已知程序和方法的实例包括一般参考文本中描述的那些，例如comprehensiveorganictransformations,vchpublishersinc,1989;compendiumoforganicsyntheticmethods,第1-10卷,1974-2002,wileyinterscience;advancedorganicchemistry,reactionsmechanisms,andstructure,第5版,michaelb.smith和jerrymarch,wileyinterscience,2001;advancedorganicchemistry,第4版,部分b,reactionsandsynthesis,francisa.carey和richardj.sundberg,kluweracademic/plenumpublishers,2000等，以及其中引用的参考文献。癌症越来越多地被认为是疾病的异质性累积，它的起始和发展是由一或多种在细胞和组织微环境中调节dna修复、基因组稳定性、细胞增殖、细胞死亡、粘附、血管生成、侵入和转移的基因的功能异常引起的。“癌症”基因的变体或异常的功能可以起因于天然存在的dna多态性、基因组拷贝数的变化(通过扩增、删除、染色体丧失或复制)、基因和染色体结构的变化(通过染色体易位、反转或导致基因表达失调的其它重排)和点突变。癌性肿瘤可由一种异常基因功能引起，并且被相同的异常基因功能所维持，或被其它异常基因功能维持和加剧发展。除上文提到的基因染色体畸变外，各癌症还可能包括基因组的表观遗传修饰，包括dna甲基化、基因组印记和通过乙酰化、甲基化或磷酸化的组蛋白修饰。表观遗传修饰可能在恶性肿瘤的诱发和/或维持中起作用。已知和通常使用活检、免疫分型及其它试验来诊断癌性恶性肿瘤。除了高分辨染色体显带和先进的染色体成像技术之外，可以通过细胞遗传学分析来确定所怀疑的癌症病例中的染色体畸变，例如，原位杂交荧光(fish)、核型分析、光谱核型分析(sky)、复合fish(m-fish)、对比基因组杂交(cgh)、单核苷酸多态性阵列(snpchips)及本领域技术人员已知和使用的其它诊断和分析试验。使用联合正电子发射断层成像(pet)和x-射线计算机断层成像(ct)扫描仪的癌症pet/ct成像已成为肿瘤学中的诊断和分期的标准组成部分。放射性标记的示踪剂2-脱氧-2-[18f]氟-d-葡萄糖(fdg)用于所有pet/ct成像程序中的大部分。pet/ct成像的优点之一是其在治疗过程中的极早期检测葡萄糖代谢的显著变化或甚至肿瘤细胞代谢的完全停止的能力以替代肿瘤化学敏感性评估。除癌症检测和分期外，pet/ct成像作为个体对治疗的响应的定量监测和新药疗法的评估工具变得越来越重要。fdg积聚的变化已表明可用作评估治疗响应的成像标记物。recist标准(其中传统上通过测量ct图像中的肿瘤尺寸/维度的变化评估肿瘤对治疗的响应)可能无法证明对治疗的早期响应。归因于治疗的肿瘤尺寸变化可能需要长时间显现出来。最广泛使用的参数是标准化摄取值(suv)，其被定义为在相关区域中的最大suv值(suvmax)并且suvmax的降低通常被视为代谢活性停止的最可靠指标。异常的组成型notch信号传导与许多实体瘤恶性肿瘤(癌症)有关，包括乳腺癌、卵巢癌(park等人cancerresearch,2006(66):6312-6318)、黑素瘤(gast等人genes,chromosomes&cancer,2010(49):733-745)、肺癌、非小细胞肺癌(westhoff等人pnas,2009(106):22293-22298)、胰腺癌、胶质母细胞瘤、结肠直肠癌、头颈癌、宫颈癌、前列腺癌、肝癌、鳞状细胞癌(口腔)、皮肤癌和成神经管细胞瘤(ranganathan等人,naturereviewcancer,2011(11):338-351和补充信息s1(表))。异常notch信号传导可以在特定软组织肉瘤中活化(guijarro等人amjpathol,2013(182(6)):2015-2027)。临床前评估进行了一项研究以评估4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺在每日一次给予0、1.3或4.3mg/kg的口服灌胃剂量持续2周或每周3次给予1、3、10或30mg/kg的口服灌胃剂量持续2周的大鼠中的毒性和毒代动力学。4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺与在纯化水中包含1％羧甲基纤维素钠、0.25％聚山梨酯80和0.05％dowcorning®antifoam1510-us的媒介物合并。spraguedawleycd®/igs大鼠(crl:cd(sd))，internationalgeneticstandardization(igs)7-9周龄大鼠，3只/性别/组，charlesriverlaboratories，inc用于该研究。动物随意喂食，以12小时光照、12小时黑暗循环保持在通风的不锈钢架中，环境温度为22.2+/-8℃且相对湿度为30％至70％。根据表1给予测试化合物。测试化合物经口服灌胃以10ml/kg体重的体积施用。所有组的研究持续时间为14天。表1.给药方案频率剂量(mg/kg)动物组每日001每日1.306&12每日4.307&13每周3次102&08每周3次303&09每周3次1004&10每周3次3005&11对于第01、06和07组，至少每天在给药前、给药后大约一(1)小时和下午记录观察结果，除了在周末没有记录下午的观察结果。从第3天开始记录第02、03、04和05组的观察结果。至少，在给药日如所述的那样记录观察结果。在非给药日，对于接受每日剂量的组而言，在大约相同时间记录观察结果。在第1、3、6、10和14天对动物进行称重。在预定的尸检时收集最终体重。食物消耗量在第1、3、6、10和14天记录。对另外的动物组——3只/性别/组(第08、09和12组)和3只雌性/组(第10、11和13组)给药以用于毒代动力学评估。对于第08、09和10组，相对于第3天和第14天的给药，在以下时间从每只动物收集血液：0(给药前；仅限第14天)，给药后0.5、1、2、4、8、24、30和48小时。对于第11组，相对于第3天的给药在以下时间从每只动物收集血液：给药后0.5、1、2、4、8、24、30和48小时。对于第12组，相对于第1天和第14天的给药，在以下时间从每只动物收集血液：0(给药前；仅限第14天)，给药后0.5、1、2、4、8和24小时。对于第13组，相对于第1天的给药，在以下时间从每只动物收集血液：给药后0.5、1、2、4、8和24小时。第08至13组用于毒代动力学评估。在其他评估中，血液样品用于吸收、分布、代谢和排泄的药代动力学参数分析。单剂量和多剂量后，暴露(auc0-24hr)以大致线性和与剂量成比例的方式增加。未发现性别之间的累积或主要差异。由于发病率和/或死亡率，多个剂量后的暴露数据仅对在1.3mg/kg每日和10mg/kg每周3次给予的剂量水平下的有限数量的动物是可获得的，并且在4.3mg/kg每日或30mg/kg每周3次给予的剂量水平下是不可获得的。在每天施用的1.3和4.3mg/kg的剂量水平下以及每周3次施用的10和30mg/kg的剂量水平下观察到体重和食物消耗参数的变化。在每日给予的4.3mg/kg或每周3次给予的30mg/kg的剂量水平下观察到显著的体重减轻。在每日给予的1.3mg/kg或每周3次给予的10mg/kg的剂量水平下，平均体重通常与治疗前相似或更大，但相对于对照组略微或中度降低。还注意到食物消耗的最小至严重降低并且与降低的体重增加和/或体重减轻相关。由于状况不佳，在第10天对所有30mg/kg每周3次给予的非毒代动力学的动物实施安乐死。由于状况不佳，10mg/kg每周3次给予的三只毒代动力学(tk)动物中的两只在第10天被安乐死，并且在第16天的48小时tk时间点之前发现剩余的tk动物死亡。在第7天、第8天或第10天发现给予每日剂量4.3mg/kg的tk动物死亡，并且由于状况不佳，在第10天对给予每日剂量4.3mg/kg的动物实施安乐死。此外，由于状况不佳，在第10天对给予每日剂量1.3mg/kg的3只雌性tk动物中的2只实施安乐死。给予每日剂量1.3mg/kg的所有非tk动物、雄性tk动物和3只雌性tk动物中的1只存活至预定的研究终止。给予≤10mg/kg的所有非tk动物和每周3次给予≤3mg/kg的tk动物存活至预定的研究终止。需要安乐死的不佳状况归因于胃肠道毒性，尽管也观察到炎症、食物消耗减少、应激和脱水。化合物相关毒性见于给予10mg/kg，每周施用3次的两种性别的非tk动物、每周3次给予3mg/kg的雌性动物，并限于涉及多个肠道水平的粘液性肠病，并且对于每周3次10mg/kg给予的雄性动物可见到最小至轻微的肾小管变性。与本研究中的每周三次给药相比，接受相同的总每周剂量(每日1.3mg/kg或每周3次3mg/kg；和每日4.3mg/kg或每周3次10mg/kg)的大鼠每日给药具有更严重的胃肠道毒性。进行一项研究以评估4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺在每日1次给予0或1.3mg/kg的口服灌胃剂量持续6天或每隔1天给予0.3或3mg/kg的口服灌胃剂量总共3剂的狗中的毒性和毒代动力学。4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺与在纯化水中包含1％羧甲基纤维素钠、0.25％聚山梨酯80和0.05％dowcorning®antifoam1510-us的媒介物合并。每日喂食(给药后不久)狗(比格犬)，covanceresearchproducts，1只动物/性别/组，并在预定的化学血液收集和尸检前禁食过夜。测试化合物经口服灌胃以2ml/kg体重的体积施用。所有组的研究持续时间为6天。表2给药方案频率剂量(mg/kg)动物组每日001每日1.304每周3次；第2、4和6天0.302每周3次第2、4和6天3.003研究参数毒代动力学样品采集：第01和04组，相对于第1天给药，在以下时间收集血液：给药后0.5、1、2、4、8和24小时。第02和04组：相对于第2天和第6天的给药，在以下时间收集血液：0(给药前；仅限第6天)，给药后0.5、1、2、4、8、24、30和48小时。代谢物分析样品采集：在第6天给药后2小时，在第03组中从一只动物/性别收集血液。观察结果第01和04组：至少每天在给药前、给药后约1小时和下午记录观察结果，但有以下例外情况：周末不记录下午的临床观察结果。第02和03组：至少在第2天和第6天的给药前、给药后约1小时和下午；在第4天的给药前和给药后约1小时；以及在第3、5和7天与第01和/或04组大致相同的时间记录观察结果。体重：在第1天和第7天称重动物。食物消耗：通过目视估计剩余食物量(以25％的增量记录)，每日对食物消耗进行定性评估。病理学：样品采集：第01和04组：在第1天和第7天给药之前收集血液样品(第7天未给药)。第02和03组：在第1天和第6天给药之前收集血液样品。在预定的尸检时通过膀胱穿刺从所有动物收集尿液样品。由于状况不佳，给予1.3mg/kg的动物在6个每日剂量后被安乐死。每周3次(第2、4和6天)给予0.3或3mg/kg的动物存活直至预定终止。化合物相关体征限于给予6个1.3mg/kg的每日剂量的动物，包括第7天雌性动物的侧卧和呼吸困难，第6天和第7天两种动物的活动减少，以及第7天两种动物的脱水(皮肤弹性降低)。此剂量水平的其他症状包括红色、黑色(仅限雌性)、粘液样和水样(仅限雌性)的粪便。每周3次给予3mg/kg的动物的化合物相关体征包括红色(仅限雄性)、粘液样和水样(仅限雄性)粪便。在每周3次给予0.3mg/kg的动物中，体征仅限于雌性且包括粘液样和水样粪便。在所有化合物治疗组中发生体重减轻，并且对于每周3次给予3mg/kg或每日给予1.3mg/kg持续6天的动物被认为是不利的。在所有化合物治疗组中也发生食物消耗减少。在每周3次给予3mg/kg和每日给予1.3mg/kg的动物中发生不良胃肠(gi)变化，并且导致给予1.3mg/kg的两种动物的早期安乐死。每周3次给予0.3mg/kg的雄性动物在大肠中具有不利的炎性变化和可能与化合物相关的全身性炎症的迹象，但缺乏更特征性的粘液性肠病迹象。在所有水平的gi道中出现胃肠道改变并包括粘液样上皮变化(粘液性肠病)、糜烂、溃疡和炎症（累及粘膜下层和肠壁较深层）。肠道变化在每日给予1.3mg/kg的动物中最显著，并且包括明显的具有红色流体状肠道内容物、糜烂、溃疡的粘液性肠病，且多为嗜中性粒细胞混合炎症。粘液性肠病的特征是在所有水平的粘膜上的数量增加的杯状细胞，并且当更明显时，与解体、隐窝扩张以及由与脱落的肠细胞和细胞碎片混合的粘液和大量嗜中性粒细胞组成的管腔内容物相关。表30.3或3mg/kg的单次口服剂量或多个tiw口服剂量(3剂/周)后比格犬(一只雄性，一只雌性，n=2)的平均tk参数。单次口服剂量多个口服剂量(3剂/周)表4.1.3mg/kg的单次口服剂量后比格犬(一只雄性，一只雌性，n=2)的平均tk参数。6剂后，接受1.3mg/kg每日剂量的比格犬被安乐死。每周3次接受0.3或3mg/kg的比格犬存活至预定的尸检。在本研究中，与每周三次给药(其中每日给药的犬和每周三次的犬接受相同的总每周剂量)相比，接受每日给药的犬具有更严重的胃肠道毒性。临床前大鼠和狗的数据显示，对于相同的总每周剂量，每日一次施用是不能耐受的。在两种方案中，24小时药物浓度是最小的，但是在tiw给药时，在剂量之间存在24-48小时，其中在系统中没有药物。这些数据表明，需要一段停药时间来使毒性最小化。体内效力和靶标抑制研究-动物研究为评估4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺对notch处理药效学(pd)的抑制的体内效力和效果，使用几种细胞系来源和患者来源的异种移植模型。a2780是人卵巢细胞系(sigma-aldrich，no.93112519);sw480是人结肠直肠细胞系(atccno.ccl-228);hct116是人结肠直肠细胞系(atccno.ccl-247);u-87mg是人胶质母细胞瘤细胞系(atccno.htb-14);a375是人恶性黑素瘤细胞系(atccno.crl-1619);k-562是人慢性骨髓性白血病(cml)细胞系，其特征在于存在由bcr和abl1基因组成的融合转录物(atccno.ccl-243)；jurkat；hel92.1.7是人红白血病细胞系(atccno.tib-180)。除了以所述目录号从sigma-aldrich获得的a2780细胞系外，每种细胞系均以所述atcc编号自美国典型培养物保藏中心(atcc)获得。细胞在其各自的推荐培养基中于37℃、5％co2和大气湿度下生长。将在1:1基质胶混合物(0.2ml体积)中的a2780(2x106)、sw480(6x106)、hct116(6x106)、u-87mg(6x106)和a-375(10x106)细胞通过皮下注射在6-8周龄无胸腺裸雌性小鼠(harlanlaboratories)的后腿中植入。将在1:1基质胶混合物(0.2ml体积)中的k-562(6×106)细胞通过皮下注射在6-8周龄的cd1nµ/nµ雌性小鼠(charlesriverlaboratories)的后腿中植入。将在1:1基质胶混合物(0.2ml体积)中的hel92.1.7(7x106)通过皮下注射在6-8周龄的cb17严重合并免疫缺陷雌性小鼠(taconicfarms)的后腿中植入。将源自患者的肿瘤切碎成1-2mm的块并与0.2ml体积的基质胶(1：1)混合，并通过皮下注射在6-8周龄无胸腺裸雌性小鼠(harlanlaboratories)的后腿中植入。患者来源的肿瘤模型包括：人结肠癌(el2144)、人三阴性侵袭性导管乳腺癌(el1997)、人结肠癌(el1989、el1986)和人胶质母细胞瘤(el2056)，样品在患者同意和医院准许后从iuhealth，methodisthospital，indianapolis，indiana，usa46206获得。各组使用总计7-10只小鼠。就在植入a2780、sw480、hel92.1.7、a-375、k-562和源自患者的肿瘤模型之前，照射动物(450全身照射)。小鼠随意饲喂正常饮食。当肿瘤大小达到150±50mm3时，通过以0.2毫升体积口服施用(灌胃)化合物或媒介物(在0.25%tween®-80中的1%na-cmc)开始治疗。在治疗后的指定时间点，通过co2窒息和颈脱位法处死动物。移除肿瘤并用于pd响应分析。随时间监测肿瘤生长和体重以评估效力和毒性迹象。肿瘤的二维测量每周进行两次，肿瘤体积基于以下公式计算：(肿瘤体积)=[(l)×(w2)×(π/6)]，其中l是中轴长度，w是中轴宽度。将肿瘤体积数据转变为对数标度以平衡时间和治疗组间的方差。使用sas™软件(8.2版)中的mixed™程序用对时间和治疗的方差的双因子重复测量分析来分析对数体积数据。用于重复测量的相关模型是空间幂次(spatialpower)。在每个时间点将治疗组与对照组进行比较。对于每个治疗组还分别使用mixed™程序以计算每个时间点的调整平均值和标准误差。两种分析均考虑到了每只动物中的自相关以及当具有大肿瘤的动物在研究早期被移除时所发生的数据丢失。针对每个治疗组相对于时间绘制经调整的平均值和标准误差。抗肿瘤活性表示为肿瘤生长抑制百分比(tgi％)，并通过比较治疗组与媒介物治疗组中的肿瘤体积来计算。4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺的肿瘤生长抑制百分比(％tgi)和统计学显著性值(p值)基本上如上所述测量并总结于表5中。n1icd分析为了评估肿瘤中的n1icd水平，从冷冻肿瘤切下约75mg并在均质化之前切碎(记录实际质量)。将冷冻的肿瘤样品转移至lysingmatrix-d™管并以75mg/ml缓冲液的质量:体积比重新悬浮在包含1xcomplete片(rochecomplete™no.11697498001)和1x蛋白酶抑制剂混合物(sigma-aldrichp8340)的冰冷xy裂解缓冲液(25mmtrisph7.5、10µg/ml胰蛋白酶/糜蛋白酶抑制剂、10µg/ml抑肽酶、60mmβ-甘油磷酸酯、1%triton®x-100、10mmnaf、2.5mm焦磷酸盐、150mmnacl、15mm乙二胺四乙酸(edta)ph8.0、5mm乙二醇-双(2-氨基乙基醚)-n,n,n',n'-四乙酸(egta)ph8.0、1mm钒酸钠、10µg/ml亮抑肽酶、1mm二硫苏糖醇、1µm微囊藻素lr、10µg/mln-对甲苯磺酰基-l-苯基丙氨酸氯甲基酮(tpck)、2mmnα-对甲苯磺酰基-l-精氨酸甲酯盐酸盐(tame)、15mm4-硝基苯基磷酸二(三)盐(pnpp)、0.1mm4-(2-氨基乙基)苯磺酰基氟盐酸盐(aebsf)、5mm苄脒、1µm冈田酸)中。将组织在4℃下以6.0的速度在fastprepfp120均质器(thermoscientific,rockford,il)中均质化30秒，然后在冰上孵育15分钟。将其重复总共2-3个循环直至均质化完成。将裂解物在4℃eppendorf离心机中以30,000rpm旋转15分钟以去除碎片。取出400µl的上清液并转移至新的eppendorf管并使其进行冷冻/解冻循环。将样品在4℃eppendorf离心机中以30,000rpm再旋转30分钟并收集120µl的上清液用于分析。使用piercebcaproteinassaykittm(thermoscientific，rockford，il)，使用thermomaxtm读板仪(moleculardevices，sunnyvale，ca)测定总蛋白质浓度。使用定制n1icdelisa测定n1icd水平。使用裂解的notch1(val1744)-特异性定制兔单克隆抗体捕获分析物并使用c-端notch1sulfo-tagtm(mesoscalediscovery,gaithersburg,maryland)多克隆绵羊抗体(r&dsystems,minneapolis,mn)检测。在包含1xcomplete片(rochecompletetmminino.11836153001)和1x蛋白酶抑制剂混合物(sigma-aldrichp8340)的冰冷elisatris裂解缓冲液(r6otx)(mesoscalediscovery,gaithersburg,maryland)中将裂解物稀释至2µg/µl，并将25µl加入至elisa板。在室温下孵育50μg蛋白质裂解物各1小时以捕获分析物和检测抗体。在sectorimager6000tm(mesoscalediscovery，gaithersburg，maryland)上读板。将背景扣除的n1icd标准化为总蛋白质，并表示为相对于媒介物处理组的％抑制。基本上如上所述分析在4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺的最后一剂后4小时收获的肿瘤中通过dunett方法测定的n1icd%抑制和统计学显著性(p值)并总结在表5中。表5.*未测定。表5中的数据显示4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺在各种人肿瘤的异种移植模型中的肿瘤生长抑制和对n1icd裂解的抑制。表5中的数据还显示了备选给药方案对4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺的肿瘤生长抑制的影响。数据还显示更频繁的给药提供更大的效力。使用来自第1阶段剂量递增研究中的患者的临床前数据和药代动力学/药效学数据，开发pk/pd模型以模拟患者中的各种给药方案，目标是基于患者平均响应使基因表达抑制超过50％的时间和停药时间最大化。临床评估4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物在晚期或转移性实体瘤癌症患者中的研究。研究设计此研究是口服给药的4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物在晚期或转移性实体瘤癌症的门诊患者中的多中心、非随机化、开放标签、剂量递增的研究（之后队列扩展）。研究目的此研究的主要目的是测定可根据2个备选给药方案（与泼尼松共同施用）安全施用至患者的4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物的推荐2期剂量和记录抗肿瘤活性。该研究的次要目的是如通过nationalcancerinstitute's(nci)commonterminologycriteriaforadverseevents(ctcae)v4.0评价来表征4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物的安全性和毒性特征；估计4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物的药代动力学(pk)参数；和记录采用4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物观察到的任何抗肿瘤活性。探索性目标是探索4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物在血浆和尿液中的肾清除率和pk代谢物；探索与4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物相关的预测性生物标志物；探索4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物对指示notch活性的生物标志物(notch细胞内结构域：通过免疫组织化学或替代的验证方法)，包括细胞角蛋白18或rulesbasedmedicine的药效学(pd)效应；探索正电子发射断层成像(pet)扫描或pet/ct评估4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物的治疗效果的效用；探索动态对比增强磁共振成像(dce-mri)评估4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物的治疗效果的效用；和探索动态对比增强超声检查dce-us的效用。试验药物4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物，作为胶囊口服给予，对于28天周期每周3次，或对于28天周期，每周2次持续14天，然后在周期1的第3周和第4周tiw给药，且在周期2和之后tiw。4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物作为用于口服的在瓶中的25和50mg胶囊供应。这些胶囊应储存在标签上注明的温度范围内的室温下。泼尼松在适当和需要时提供或在当地获得，并且在第1天至第14天以20mg的剂量每日施用，并且可以延长至第1周期的第28天。计划治疗持续时间患者将接受1个周期(28天)的4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物，除非满足一个或多个停药标准。只有在下列情况下，患者才能接受超过1个周期的治疗：1)尚未满足任一停药标准，和2)研究人员确定患者正体验到治疗的临床益处。计划的持续时间不固定；患者将继续研究，直到他们满足研究停止的标准之一(1)。停药后随访期在患者和研究者同意患者不再继续研究治疗后的那天开始，并由以下期间定义：短期随访期在停止研究治疗后第1天开始，并持续约30天。长期随访期在短期随访期结束后第1天开始并一直持续到死亡或研究结束，以收集生存数据。停药后，将进行肿瘤测量和其它研究程序。本研究自最后一名患者登记之日起约12个月被视为结束。即使在研究结束并且在持续访问期间发生最终数据库锁定之后，受益于治疗的患者也可以继续长期接受研究药物。给药按照以下方案之一（由研究者的判断来决定）口服施用4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物：按照这些方案之一（由研究者的判断来决定）tiw口服施用4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物：对于28-天周期，每周周一、周三、周五对于28-天周期，每周周二、周四、周六对于28-天周期，每周周三、周五、周日对于28-天周期，每周周四、周六、周一。按照这些方案之一（由研究者的判断来决定），在周期1中每周两次口服施用4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物持续2周，随后tiw给药：对于周期1:周一和周五（对于第1和2周），随后是周一、周三、周五（对于第3和4周）。对于周期2和以后：对于28-天周期，每周周一、周三和周五。对于周期1:周二和周六（对于第1和2周），随后是周二、周四、周六（对于第3和4周）。对于周期2和以后：对于28-天周期，每周周二、周四、周六。对于周期1:周三和周日（对于第1和2周），随后是周三、周五、周日（对于第3和4周）。对于周期2和以后：对于28-天周期，每周周三、周五、周日。对于周期1:周四和周一（对于第1和2周），随后是周四、周六、周一（对于第3和4周）。对于周期2和以后：对于28-天周期，每周周四、周六、周一。泼尼松将在周期1的第1天至第14天以20mg的剂量每日施用。剂量递增阶段使用3+3方法安全驱动剂量递增。表6建议的剂量-递增方案剂量水平负荷剂量(mg)175210031254150作为剂量递增研究的性质，将持续评估数据直至确定最大耐受剂量(mtd)。如果在最高预先指定的剂量水平尚未达到mtd，基于安全性和可获得的pk数据，在与研究者讨论后，可以研究额外的剂量水平。一旦定义了mtd，将开启队列扩展阶段。本研究将探索2个备选给药方案，并且一旦为这些备选方案中的每一个定义了mtd，将针对每个给药方案开启在大约15个平滑肌肉瘤患者中的队列扩展，所述患者具有不可切除或转移性平滑肌肉瘤（具有预筛选的免疫组织化学(ihc)）的组织学证据、notch途径的改变如与notch途径相关的突变、扩增或基因表达。评估标准安全性:ncictcae，版本4.0，不良事件(ae)和剂量限制性毒性(dlt)；收集血液和尿液样品用于标准实验室测试，包括化学、血液学、凝结和尿液分析。生物分析(包括pk和pd):4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物的血浆浓度。效力；使用实体瘤的响应评估标准(recist)v1.1评估对实体瘤的效力。每位患者通过以下肿瘤测量的放射学测试中的一项或多项进行评估：x射线计算机断层成像(ct)扫描；磁共振成像(mri)；胸部x-射线；正电子发射断层成像(pet)扫描；动态对比增强-磁共振成像(dce-mri)；pet/ct成像标准化摄取值(suvmax)；动态对比增强超声检查(dce-us)。每位患者的完整疾病程度也将通过以下方式进行评估：recist1.1适用的肿瘤测量(eisenhauer等人，eurjcancer.2009,45(2):228-247)；和choi等人,jclinoncol.2007,25(13):1753-1759；和ecog,oken等人,amjclinoncol.1982,5:649-655的性能状态评估。为了确认客观响应，应对所有病变进行放射学评估，并且应在客观响应的初始观察后使用基线时使用的样品方法将用于初始响应测定的相同放射学方法重复至少4周。pet扫描的部分代谢响应定义为治疗一周期后肿瘤[18f]-fdgsuv的至少15±25％，以及在超过一个治疗周期后大于25％，且应在至少4周后确认（根据europeanorganizationforresearchandtreatmentofcancer的pet响应标准（young等人,eurjcancer,1999,dec,35(13):1773-82））。统计方法安全性:使用3+3方法安全驱动剂量递增。将结合了先前对剂量-毒性曲线的预期的基于模型的分析拟合至每个队列结束时的数据，这将由研究者和礼来临床研究医生使用来确定下一剂量水平。最大耐受剂量定义为在周期1期间具有小于33％的引起dlt的可能性的最高测试剂量。效力：肿瘤响应数据将由研究部分制表和汇总。药代动力学：4,4,4-三氟-n-[(1s)-2-[[(7s)-5-(2-羟基乙基)-6-氧代-7h-吡啶并[2,3-d][3]苯并氮杂䓬-7-基]氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]丁酰胺水合物的pk参数将会通过标准非隔室分析方法来分析。药效学：将评估所有pd数据。可以进行探索性pk/pd分析以鉴定暴露-生物标志物响应关系。探索性样品：在治疗前后收集血液样品用于循环淀粉样β(aβ)肽的探索性分析。先前在登记之日起两年内获得强制性肿瘤组织样品和皮肤穿刺样品，或者如果找不到用于测量各种生物标志物（可能包括基因表达谱以及其它探索性生物标志物）的档案样品，则可获得新鲜样品。还将收集给药前和给药后的肿瘤和皮肤活体组织切片用于分析。当前第1页12