本发明涉及一种治疗猪源病原菌的中药制剂及其制备方法、治疗猪源病原菌的中药组合物，属于中兽医学技术领域。
背景技术：
大肠杆菌一直是人们认为肠道菌群的重要组成部分，一直认为非致病菌就是大肠杆菌。后来经过不断的研究、探索证明，大肠杆菌的血清型较多并且复杂，许多研究者，把能够引起人类和动物肠道内组织感染的一类人兽共患病的大肠杆菌病又叫致病性大肠杆菌，可致使发生呼吸道感染、泌尿道感染、脑膜炎等不同的临床症状，引起全世界的广泛重视。猪源性大肠杆菌由大肠杆菌病引起的一种急性、高度致病性的一种疾病，根据大肠杆菌的流行病学、临床症状和病理变化可分仔猪黄痢、仔猪白痢、仔猪水肿病等3种多发病、常见病。
大肠杆菌的血清型较多，变异较大。但抗生素广泛使用对大肠杆菌的预防与控制取得了很好的效果，但在养殖生产中不合理用药使大肠杆菌耐药性迅速产生，从而给该病的防治带了很大的困难。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种治疗猪源病原菌的中药制剂，对猪源大肠杆菌、猪源金黄色葡萄球菌和猪沙门氏菌均具有良好的抑制作用，并能够延缓猪源大肠杆菌耐药性的产生。
本发明还提供了一种上述中药制剂的制备方法和一种治疗猪源病原菌的中药组合物。
为了实现以上目的，本发明的治疗猪源病原菌的中药制剂所采用的技术方案是：
一种治疗猪源病原菌的中药制剂，主要由以下重量份数的药材原料制成：金银花100～400份、黄芩100～400份、穿心莲100～400份。
本发明的治疗猪源病原菌的中药原料的特性如下：
金银花又名忍冬，为忍冬科多年生半常绿缠绕木质藤本植物。金银花，具有清热解毒、通经活络、有益的保健功效。金银花具有抗病原微生物作用，对多种致病菌如金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌等均有一定抑制作用；对肺炎球菌、脑膜炎双球菌、绿脓杆菌、结核杆菌、志贺氏痢疾杆菌、变形链球菌等有抑菌和杀菌作用；金银花具有抗炎解毒作用，对痈肿疔疮、肠痈、肺痈有较强的散痈消肿，清热解毒、消炎作用；金银花有清热解毒、疏利咽喉、消暑除烦、疏散风热的作用，可治疗暑热症、泻痢、流感等病。
黄芩别名山茶根、土金茶根。有清热燥湿，凉血安胎，解毒功效。主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症。黄芩的临床应用抗菌非常好，而且不产生抗药性。黄芩对痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎双球菌等有较强的抗菌作用；对多种皮肤真菌(如腹股沟表皮癣菌)有不同程度的抑制作用。此外，黄芩能使血糖上升，并有利胆、抑制肠管运动和抗过敏的作用。
穿心莲具有清热解毒，凉血消肿的功效。传统应用于热毒侵袭所致咽喉肿痛，口干舌燥，顿咳劳嗽，泄泻痢疾，热淋涩痛，痈肿疮疡等的治疗。药理研究证明穿心莲的药理作用主要有：解毒作用，穿心莲能抑制内毒素所致家兔及化学致热剂所致大鼠发热，对伤寒副伤寒杆菌所致发热亦有作用；抗病原体，穿心莲对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、钩端螺旋体及白色念珠菌的生长具有抑制作用。抗炎，穿心莲能抑制多种炎症早期增高的毛细血管通透性、渗出和水肿有抑制作用。抗血小板聚集和促进纤溶作用，穿心莲抗血小板聚集作用强烈、迅速、可靠。抗肿瘤，穿心莲对肿瘤细胞的生长皆有抑制作用，且随剂量增加，作用增强，作用效果稳定。
本发明的治疗猪源病原菌的中药制剂，以中兽医理论为基础，针对发病机理与治疗原则进行合理配伍，选取具有清热解毒、燥湿利尿、抗菌消炎等功效的金银花、黄芩和穿心莲作为药材原料进行组方，价格低廉、安全方便、针对性强，具有清热解毒、抗菌消炎、宣肺燥湿至功效，且能调节基体免疫功能、调整肠道微生态环境、延缓细菌耐药性的产生、不会在体内产生药物残留，对猪源大肠杆菌以及猪源金黄色葡萄球菌和猪沙门氏菌均具有较强的抑制作用。
优选的，所述金银花、黄芩和穿心莲的质量比为1:1:1。采用等量的金银花、黄芩和穿心莲制得的中药制剂具有更好的清热解毒、燥湿利尿、抗菌消炎等功效。
本发明的中药制剂可以是采用中药制剂的常规制备方法制成任何常规的内服制剂。优选的，所述中药制剂的剂型为粉剂或颗粒剂。剂型为粉剂的中药制剂给药方便，更适合全群给药并且更容易被基体吸收。
本发明的治疗猪源病原菌的中药制剂的制备方法所采用的技术方案为：
一种上述中药制剂的制备方法，包括以下步骤：采用极性溶剂对金银花、黄芩和穿心莲进行提取，将所得提取液进行浓缩、干燥，得粉体，即得。
本发明的治疗猪源病原菌的中药制剂的制备方法，可采用常规的中药提取方法对各药材原料进行提取，最终制成各种剂型，工艺简单、药材原料用量明确，针对性强且易于被机体吸收。
所述极性溶剂为水、乙醇中的至少一种。以水和/或乙醇作为溶剂进行提取，提取效果好、无毒无害，并且能够降低生产成本。
采用极性溶剂对金银花、黄芩和穿心莲进行提取时，既可以将三种药材混合后进行提取，也可以分别进行提取。对金银花、黄芩和穿心莲分别进行提取时，可以将所得金银花提取液、黄芩提取液和穿心莲提取液混合后，进行浓缩、干燥，制得粉体，也可以分别将金银花提取液、黄芩提取液和穿心莲提取液进行浓缩、干燥，制成金银花提取物、黄芩提取物和穿心莲提取物，然后将所得的三种药材原料的提取物混合，制得粉体。
优选的，采用极性溶剂对金银花、黄芩和穿心莲进行提取是分别将金银花、黄芩和穿心莲用水浸泡、煎煮，然后固液分离，制得提取液。
所述浸泡的时间为20～40min，所述煎煮的时间为30～60min。
煎煮的次数为至少2次；每次煎煮后，将固液分离后的药渣再次进行煎煮，合并多次固液分离所得液体作为提取液。优选的，煎煮的次数为3次。
所述浓缩是分别将金银花提取液、黄芩提取液、穿心莲提取液浓缩至浓缩液的密度为1.00～1.10g/ml。
将金银花提取液、黄芩提取液、穿心莲提取液进行浓缩的过程中，控制浓缩液的温度为45～50℃。
上述中药制剂的制备方法，还包括在浓缩所得的浓缩液中加入乙醇至乙醇的体积分数为80～90％，固液分离，然后取固液分离所得液体进行干燥。
加入乙醇、固液分离后，在滤渣中加水溶解，然后加入乙醇至乙醇体积分数为80～90％，再次进行固液分离，合并多次固液分离所得液体进行干燥。
加入乙醇至乙醇的体积分数为80～90％后，先静置，然后再进行固液分离。所述静置的时间为12～36h。
对固液分离所得液体回收乙醇，然后浓缩至相对密度为1.15～1.20，再进行干燥。相对密度是指相对于水的密度。为了避免高温进行干燥时，可能对有效成分造成的破坏，可以采用喷雾干燥的方法进行干燥。
上述中药制剂的制备方法，还包括在所得粉体中加入辅料制成相应的剂型。如可加入常用辅料：粘合剂、乳糖、葡萄糖、可溶性淀粉和/或碳酸氢钠等。优选的，上述中药制剂的制备方法，还包括将在所得粉体中加入碳酸氢钠、葡萄糖混匀。优选的，在粉体中加入适量碳酸氢钠、葡萄糖混匀后进行干燥处理；所述干燥处理的温度为40～50℃。碳酸氢钠和葡萄糖加入粉体后，可以避免粉体、碳酸氢钠和葡萄糖出现软化、吸湿、结块等现象。
在粉体中加入碳酸氢钠和葡萄糖得到的是粉剂，也可被称为金黄可溶性粉。在粉体中混入碳酸氢钠、葡萄糖的作用是提供能量，提高猪群的饲料消化率、利用率，加速对营养物质的吸收、利用及有害物质的排泄等作用。
本发明的治疗猪源病原菌的中药组合物所采用的技术方案为：
一种治疗猪源病原菌的中药组合物，由以下质量百分比的组分组成：金银花100～400份、黄芩100～400份、穿心莲100～400份。
本发明的治疗猪源病原菌的中药组合物，针对发病机理与治疗原则进行合理配伍，选取具有清热解毒、燥湿利尿、抗菌消炎等功效的金银花、黄芩和穿心莲作为药材原料进行组方，价格低廉、安全方便、针对性强，具有清热解毒、抗菌消炎、宣肺燥湿至功效，且能调节基体免疫功能、调整肠道微生态环境、延缓细菌耐药性的产生、不会在体内产生药物残留，对猪源大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌和猪沙门氏菌均具有较强的抑制作用。
具体实施方式
以下结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步的说明。
具体实施例中所采用的金银花、黄芩和穿心莲需要经过以下前处理：分别将金银花、黄芩和穿心莲洗净晒干，并分别切断至长度为1cm左右，备用。
实施例1
本实施例的治疗猪源病原菌的中药组合物，由以下重量份数的组分组成：金银花400份、黄芩400份、穿心莲400份。
本实施例的治疗猪源病原菌的中药制剂，主要由以下重量份数的药材原料制成：金银花400份、黄芩400份、穿心莲400份。
本实施例的治疗猪源病原菌的中药制剂的制备方法，包括以下步骤：
1)在配方量的金银花中加入适量的蒸馏水使金银花刚好被淹没，浸泡20min，然后煎煮60min，冷却、过滤得到煎出液和药渣，在药渣中加入蒸馏水煎煮、冷却、过滤，再次在药渣中加入蒸馏水煎煮、冷却、过滤，合并3次过滤所得煎出液，得到提取液；
将所得提取液减压浓缩至密度为1.00～1.10g/ml，然后在浓缩液中加入乙醇至乙醇的体积分数为85％，静置24h，过滤得到滤液和滤渣，在滤渣中加蒸馏水溶解，然后再次加入乙醇至乙醇的体积分数为85％，静置24h，过滤，合并两次过滤所得的滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1.15～1.20，喷雾干燥，得到金银花提取物；
2)分别取配方量的黄芩、穿心莲，按照步骤1)中制备金银花提取物的方法分别制备黄芩提取物和穿心莲提取物，然后将金银花提取物、黄芩提取物和穿心莲提取物进行混合，得到粉体；
3)然后在所得粉体中加入碳酸氢钠、葡萄糖适量，混匀，在50℃进行干燥，得到粉剂。
实施例2
本实施例的治疗猪源病原菌的中药制剂，主要由以下重量份数的药材原料制成：金银花400份、黄芩400份、穿心莲400份。
本实施例的治疗猪源病原菌的中药制剂的制备方法，包括以下步骤：
1)在配方量的金银花中加入适量的蒸馏水使金银花刚好被淹没，浸泡40min，然后煎煮30min，冷却、过滤得到煎出液和药渣，在药渣中加入蒸馏水煎煮、冷却、过滤，再次在药渣中加入蒸馏水煎煮、冷却、过滤，合并3次过滤所得煎出液，得到提取液；
将所得提取液减压浓缩至密度为1.00～1.10g/ml，然后在浓缩液中加入乙醇至乙醇的体积分数为85％，静置24h，过滤得到滤液和滤渣，在滤渣中加蒸馏水溶解，然后再次加入乙醇至乙醇的体积分数为85％，静置24h，过滤，合并两次过滤所得的滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1.15～1.20，喷雾干燥，得到金银花提取物；
2)分别取配方量的黄芩、穿心莲，按照步骤1)中制备金银花提取物的方法分别制备黄芩提取物和穿心莲提取物，然后将金银花提取物、黄芩提取物和穿心莲提取物进行混合，得到粉体；
3)然后在所得粉体中加入碳酸氢钠、葡萄糖适量，混匀，在50℃进行干燥，得到粉剂。
实施例3
本实施例的治疗猪源病原菌的中药组合物，由以下重量份数的组分组成：金银花400份、黄芩250份、穿心莲100份。
本实施例的治疗猪源病原菌的中药制剂，主要由以下重量份数的药材原料制成：金银花400份、黄芩250份、穿心莲100份。
本实施例的治疗猪源病原菌的中药制剂的制备方法，包括以下步骤：
1)在配方量的金银花中加入适量的蒸馏水使金银花刚好被淹没，浸泡30min，然后煎煮45min，冷却、过滤得到煎出液和药渣，在药渣中加入蒸馏水煎煮、冷却、过滤，再次在药渣中加入蒸馏水煎煮、冷却、过滤，合并3次过滤所得煎出液，得到提取液；
将所得提取液减压浓缩至密度为1.00～1.10g/ml，然后在浓缩液中加入乙醇至乙醇的体积分数为85％，静置24h，过滤得到滤液和滤渣，在滤渣中加蒸馏水溶解，然后再次加入乙醇至乙醇的体积分数为85％，静置24h，过滤，合并两次过滤所得的滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1.15～1.20，喷雾干燥，得到金银花提取物；
2)分别取配方量的黄芩、穿心莲，按照步骤1)中制备金银花提取物的方法分别制备黄芩提取物和穿心莲提取物，然后将金银花提取物、黄芩提取物和穿心莲提取物进行混合，得到粉体；
3)然后在所得粉体中加入碳酸氢钠、葡萄糖适量，混匀，在40℃进行干燥，得到粉剂。
实施例4
本实施例的治疗猪源病原菌的中药组合物，由以下重量份数的组分组成：金银花250份、黄芩100份、穿心莲400份。
本实施例的治疗猪源病原菌的中药制剂，主要由以下重量份数的药材原料制成：金银花250份、黄芩100份、穿心莲400份。
本实施例的治疗猪源病原菌的中药制剂的制备方法，除金银花、黄芩和穿心莲的用量不同外，其余同实施例1。
实施例5
本实施例的治疗猪源病原菌的中药组合物，由以下重量份数的组分组成：金银花100份、黄芩400份、穿心莲250份。
本实施例的治疗猪源病原菌的中药制剂，主要由以下重量份数的药材原料制成：金银花100份、黄芩400份、穿心莲250份。
本实施例的治疗猪源病原菌的中药制剂的制备方法，除金银花、黄芩和穿心莲的用量不同外，其余同实施例1。
对比例1
对比例的中药制剂的制备方法包括以下步骤：将实施例1中制得的金银花提取物与碳酸氢钠、葡萄糖混匀，然后在45℃进行干燥，即得；金银花提取物、碳酸氢钠和葡萄糖的质量比与实施例1中的粉体、碳酸氢钠和葡萄糖的质量比相同。
对比例2
对比例2的中药制剂的制备方法包括下步骤：将实施例1中制得的黄芩提取物与碳酸氢钠、葡萄糖混匀，然后在45℃进行干燥，即得；穿黄芩提取物、碳酸氢钠和葡萄糖的质量比与实施例1中的粉体、碳酸氢钠和葡萄糖的质量比相同。
对比例3
对比例3的中药制剂的制备方法包括以下步骤：将实施例1中制得的穿心莲提取物与碳酸氢钠、葡萄糖混匀，然后在45℃进行干燥，即得；穿心莲提取物、碳酸氢钠和葡萄糖的质量比与实施例1中的粉体、碳酸氢钠和葡萄糖的质量比相同。
实验例1
取实施例1的中药制剂，取蒸馏水配制成不同浓度的中药制剂溶液；用灭菌棉拭子蘸取菌液涂布于平板表面，然后不断旋转平板，使菌液均匀分布于平板上，最后在平板周围涂抹；用制备好的药敏纸片蘸取配制好的不同浓度的中药制剂溶液后，紧贴在平板上，对不同的药敏纸片进行标记，放入37℃恒温箱中培养20h，观察结果，测量抑菌圈直径，结果见表1。
表1实施例1的中药制剂对猪源大肠杆菌的抑制作用
由表1中数据可知，实施例1的中药制剂对猪源大肠杆菌具有明显的抑制作用，且随着中药制剂溶液中中药制剂含量的升高抑制作用增强。
实验例2
分别取实施例1～5以及对比例1～3的中药制剂，用蒸馏水配制成浓度为1g/ml的中药制剂溶液；然后用灭菌棉拭子分别蘸取不同菌液涂布于平板表面，然后不断旋转平板，使菌液均匀分布于平板上，最后在平板周围涂抹；用制备好的药敏纸片蘸取配制好的不同浓度的中药制剂溶液后，紧贴在平板上，对不同的药敏纸片进行标记，放入37℃恒温箱中培养20h，观察结果，测量抑菌圈直径，结果见表2。
表2实施例1～5以及对比例1～3的中药制剂对
猪源大肠杆菌、猪源金黄色葡萄球菌和猪沙门氏菌的抑制作用
由表1中数据可知，实施例1～5的中药制剂对猪源大肠杆菌、猪源金黄色葡萄球菌和猪沙门氏菌的抑制作用均强于对比例1～3，这是由于单味中药金银花具有解毒、消炎的作用；黄芩具有抗菌、燥湿利尿的作用；穿心莲具有清热解毒，凉血消肿的作用。将金银花、黄芩和穿心莲进行复配制成的中药制剂，具有清热解毒、燥湿利尿、抗菌消炎等功效，且能调整肠道微生态环境、延缓细菌耐药性的产生、减少药物残留等作用。
实验例3
随机选择发病的断奶猪仔、保育猪、育肥猪各50头，然后分别将选择的断奶猪、保育猪和养肥猪随机分成实验组和对照组；按照每50kg饲料中加入250g中药制剂的比例，将实施例1的中药制剂加入饲料中，给断奶组实验组、保育猪实验组、育肥猪连用7天；断奶猪仔对照组用磺胺嘧啶，按照0.4g/头/天，分2次喂服，连用7天；保育猪对照组用磺胺嘧啶，按照0.6g/头/天，分2次喂服，连用7天；育肥猪对照组磺胺嘧啶，按照0.8g/头/天，分2次喂服，连用7天。统计治疗结束后，各组中治愈、有效和无效的实验动物头数，计算总有效率，结果见表3。
随机选择的发病断奶仔猪表现为突然腹泻，排出白色或黄色粥状有特殊腥臭黏腻的粪便，此外还表现出逐渐消瘦，发育迟缓，拱背，行动迟缓，共济失调，卧地不起，皮毛粗糙无光等症状；发病的保育猪表现为精神沉郁，有扎堆现象，抽搐，表现紧张，部分病猪嘶叫，口吐白沫，便秘，共济失调，四肢划水呈游泳状；发病育肥猪表现为精神沉郁，食欲减退，持续腹泻3-5天，部分病猪出现呕吐，不食等症状。
表3实施例1的中药制剂
注：表3中的治愈是指体温正常，精神正常，活泼好动，皮毛光滑，食欲增加，呼吸正常，临床症状消失；有效是指病情好转，精神较好，食欲增加，皮毛不是很好，活动量较少，呼吸有点困难，临床症状逐渐消失；无效是指病情没有好转，甚至有的临床症状逐渐严重。
由表3中数据可知，通过在饲料中添加实施例1的中药制剂进行治疗后，试验动物的临床症状和生命体征都得到了较好的改善，所发生的细菌病得到良好的控制。采用实施例1的中药制剂对猪大肠杆菌病猪治疗后，观察病猪的有效率均在93％以上，对于断奶仔猪可达到100％，而对照组的有效率均较低。由此可知，相较于对照组采用的药物，本发明的中药制剂对猪大肠杆菌病具有明显的治疗效果。
实验例4
针对猪源大肠杆菌病对洛阳市某规模化猪场采集的病料做体外抑菌试验，通过结果分析，实施例1中制备的中药中药制剂对猪源大肠杆菌均有不同程度的抑菌作用，并能延缓细菌耐药性的产生。