本发明涉及化妆品技术领域，特别涉及石斛干细胞提取物抗衰老组合物及含有该组合物的化妆品。
背景技术：
皱纹是皮肤老化的结果，是皮肤缺乏水分、表面脂肪减少、弹性下降的结果。出现皱纹是人体功能开始衰退的标志，一般来说，如不注意保养，女性在28岁以后开始皱纹增多，年龄越大，皱纹越多。如果营养不良或心理负担过重，皱纹也会提前出现。皱纹直接影响面部的容貌。却不知不觉地爬上眉梢。皱纹是美容的大敌，尤其是眼角的鱼尾纹最能表现一个人的衰老。
对于脸部不同程度的皱纹，现今的解决脸部除皱方式主要有注射式脸部除皱和进行手术脸部除皱两种方式。这些美容方法均是牺牲人的整体健康来换取局部的短暂美容效果，这种方法并不能长期保持一个人的美丽容颜，而且会使人产生依赖性，且费用较高，无法满足多数普通女同胞们的需求。
目前市面上祛皱的产品很多，大部分是经过化学合成制得的，虽然在短时间内能够带来效果，但是并没有根本解决问题，且过多的化学产品会导致皮肤过敏等现象，使得皮肤问题更严重。
石斛是我国名贵中药材，被列入世界濒危保护植物，我国已知76个品种，全世界约有1500个品种。《神农本草经》等记载，石斛具有除痹、下气，补五脏虚劳，逐皮肤邪热，强阴等功效，经研究发现石斛能显著提高超氧化物歧化酶(sod)水平，降低过氧化脂质(lpo)，调节脑单胺类神经介质水平，抑制类似单胺氧化酶(mao)，起到延缓衰老的作用。近些年备受关注的石斛兰多糖也具有显著的免疫增强活性和抗衰老、抗辐射等多种功效，如铁皮枫斗晶、石斛散、清咽宁、益肠汤、石斛露、石斛精、养阴口服液及石斛片等。以铁皮石斛加工的“枫斗”或“耳环石斛”，被称为“金耳石斛兰”、“石斛兰环”、“金枫斗”，畅销于东南亚及欧美。
植物干细胞(plantstemcell)是未分化的细胞，具有很强的自我更新和持续分裂能力。研究表明，含有干细胞的护肤品可以刺激细胞更新，促进胶原蛋白分泌，使用干细胞的效果比一般的护肤品更快速有效。中国专利cn102670438b公开了一种抗衰老美容护肤品，含有植物干细胞活性物0.001～3wt％，dragosine肌肽0.01～3wt％，所述的植物干细胞活性物为phytocelltectmmalusdomestica苹果干细胞、phytocelltectmsolarvitis葡萄干细胞、phytocelltectmalprose玫瑰叶干细胞、phytocelltectmargan坚果干细胞、regenistemriceap红米干细胞中的至少一种。该美容护肤品具有改善肤质，提高皮肤弹性的作用。
目前，关于石斛干细胞用于护肤品中，未见有相关报道，因此，本发明选用石斛干细胞与其他植物提取物复配，研究出抗衰老的组合物。
技术实现要素：
本发明的目的在于，提供一种含有石斛干细胞提取物的抗衰老组合物以及用途，该抗衰老组合物较好的抗衰老祛皱功能。
为实现上述目的，本发明所采取的技术方案：一种抗衰老组合物，包含石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物；其中石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为(0.5～2.5):(10～20):(10～20):(5～10)。
现有技术中一般是采用单个提取物进行抗衰老，然而其效果不尽理想，本申请发明人经过大量研究发现，将石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物一定质量比例进行复配，其抗衰老效果显著优于单独提取物；且现有技术中未发现使用石斛干细胞提取物应用于抗衰老护肤品中，石斛干细胞具有强大的抗氧化性和抗衰老活性，可以增加人体血浆中的sod的浓度，增强抵抗氧自由基的能力，而且还可以增强胶原蛋白的浓度，从根本上预防面部衰老的问题。
优选地，石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为(1～2.5):(15～20):(10～15):(5～10)。
本发明组合物中，组分的配比会影响组合物的效果，研究发现，在所述优选的配比范围内，本发明组合物的抗氧化效果更佳。
优选地，石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为1:15:15:8。
申请人在大量实验中意外发现，在该特定的质量配比下，本发明组合物的抗氧化效果达到最佳。
优选地，石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物，的质量比为1.5:17:10:5。
申请人在大量实验中意外发现，在该特定的重量配比下，本发明组合物具有不错的抗氧化效果。
优选地，所述白术提取物与蓝果忍冬果汁的质量比为1:1。
申请人在大量实验中意外发现，在该特定的重量配比下，本发明组合物的抗氧化效果达到最佳。
所述抗衰老组合物在制备化妆品中的应用。
一种含有抗衰老组合物的化妆品。
优选地，所述抗衰老组合物在所述化妆品中的质量百分比为5～10％。
优选地，所述抗衰老组合物在所述化妆品中的质量百分比为6％。
优选地，还包括下述质量百分比的组分：增稠剂0.1～0.25％、保湿剂5～15％、乳化剂1～4％、防腐剂0.1～0.5％、油脂1.5～3.5％，余量为去离子水。
本发明所用抗氧化组合物主要成分以及功效如下：
石斛：经研究发现石斛能显著提高超氧化物歧化酶(sod)水平，降低过氧化脂质(lpo)，调节脑单胺类神经介质水平，抑制类似单胺氧化酶(mao)，起到延缓衰老的作用。近些年备受关注的石斛兰多糖也具有显著的免疫增强活性和抗衰老、抗辐射等多种功效，如铁皮枫斗晶、石斛散、清咽宁、益肠汤、石斛露、石斛精、养阴口服液及石斛片等。以铁皮石斛加工的“枫斗”或“耳环石斛”，被称为“金耳石斛兰”、“石斛兰环”、“金枫斗”，畅销于东南亚及欧美。
本发明选用石斛的干细胞为原料，植物干细胞包含有关于植物发育和生长的所有程式，拥有永恒生命力的细胞，是植物生命力的根源(origin)。植物干细胞存在于被称为分生组织的特殊构造内，具有非常惊人的再生能力。这些使得植物可以在数百年间不断生长，并生成全新的器官。植物干细胞是皮肤干细胞新陈代谢的主要原料和源泉，能快速激活休眠干细胞，促进干细胞自我修复更新，还原表皮干细胞初生活力，使皮肤细胞源源新生，从而达到提升、紧致皮肤、淡化皱纹的抗衰老效果，同时能够更容易被皮肤吸收植物的营养成分；加快人体新陈代谢。
白术：白术气清香、味苦、甘、性温、入脾、胃经，可抗氧化、延缓衰老。白术具有抗氧化作用，能有效抑制脂质过氧化，降低组织脂质过氧化物的含量，避免有害物质对组织细胞结构和功能的破坏，可对抗小鼠及人红细胞的自氧化溶血；白术能提高12个月龄以上小鼠红细胞sod(超氧化物歧化酶)活性，增强清除氧自由基的作用，减少氧自由基对机体的损害，并抑制小鼠脑单胺氧化酶b的活性；老龄小鼠灌胃白术水煎4周，可显著提高全血gsh-px(谷胱甘肽氧化物酶)的活力，明显降低红细胞中mda(丙二醛)含量；白术有延缓老年小鼠肾脏衰老的作用，可使老龄小鼠的肾脏结构有明显改善；此外，白术还可调整胃肠运动功能、保肝、增强机体免疫功能、利尿。
蓝果忍冬：具有清热解毒功能，具有抗炎和抗病毒能力，能防止毛细血管破裂、降低血压、改善肝脏的解毒功能，且具有抗肿瘤功效，可缓解放疗后的不适症状，可减缓化疗后白细胞数量降低的作用。蓝果忍冬中含有大量花色苷，具有抗氧化和清除射线，且申请人发现，蓝果忍冬果汁与本发明其他提取物复配具有意料不到的抗衰老祛皱的功效。
姜黄：主要成分为姜黄素，姜黄酮类等，具有清除羟自由基、超氧阴离子自由基的能力，能够保护胶原蛋白及弹性蛋白，保护真皮纤维不受损伤，肌肤充满紧实活力，能够有效抑制络氨酸酶的活性，起到美白肌肤的功效。
本发明的有益效果在于：石斛干细胞具有强大的抗氧化性和抗衰老活性，可以增加人体血浆中的sod的浓度，增强抵抗氧自由基的能力，而且还可以增强胶原蛋白的浓度，从根本上预防面部衰老的问题，同时添加具有美白、活肤、可以减少氧自由基蓝果忍冬果汁、白术提取物、姜黄提取物，与石斛干细胞提取物发生复配，起到祛皱的增效协同作用，在多种提取物协同作用下，产品可以明显改善肤质，提高皮肤弹性，提高皮肤的增生能力降低皮肤的衰老化进程，效果明显高于单独添加其中一种或两种提取物，并且安全无刺激。
具体实施方式
以下实施例所涉及各原料如无特别说明，均为市售通用产品。
本发明所述石斛干细胞提取物的制备方法为：1)选取优质的石斛叶，并进行清洁消毒，并切成末状，制造愈伤组织；2)将愈伤组织接种于固体培养基进行诱导培养，切取愈伤组织的再生部位以进行继代培养，培养后的产物进行转移至液体培养基中进行扩大培养，再转移至生物反应器进行大规模培养，直至获得饱和的石斛干细胞悬浮液；3)将2)中获得石斛干细胞悬液，用1μm过滤器过滤，去掉培养基，收获截留的细胞；并将细胞放入-80℃的超低温冷冻2小时，然后取出解冻30分钟，重复上述操作5次，最后一次室温解冻后，用超声波破碎仪破碎细胞，过滤器过滤后，搜集滤液，于旋转式真空蒸发器内浓缩，即可获得石斛干细胞提取物。
上述的愈伤组织的制作以及培养方法、以及采用的继代培养、扩大培养、大规模培养的方式，以获得饱和的干细胞，均采用本领域公知的方法，在此不做详细描述。
一种抗衰老组合物，包含石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物；所述石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为(0.5～2.5):(10～20):(10～20):(5～10)。
本发明的抗衰老组合物可通过将石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁和姜黄提取物按所述质量比混合得到。
本发明还提供了上述抗衰老组合物用于化妆品中，化妆品包括以下质量百分比的组分，抗衰老组合物5～10％、增稠剂0.1～0.25％、保湿剂5～15％、乳化剂1～4％、防腐剂0.1～0.5％、油脂1.5～3.5％，余量为去离子水；
所述增稠剂为卡波姆、黄原胶、丙烯酸(酯)类/c10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物中的至少一种。
所述保湿剂为水解透明质酸钠、海藻糖、葡聚糖中的至少一种。
所述乳化剂为甘油硬脂酸酯、硬脂醇聚醚-2和硬脂醇聚醚-21组合、鲸蜡醇磷酸酯钾中的至少一种。
所述防腐剂选用山梨酸钾、苯氧乙醇中的至少一种。
所述油脂为葡萄籽油、牛油果树果脂、霍霍巴籽油、聚二甲基硅氧烷、角鲨烷中的中的至少一种。
上述化妆品的制备方法，包括以下步骤：
1)将保湿剂、去离子水加入水相锅中，加热升温至85～90℃，搅拌溶解，为水相；
2)将所述油脂、乳化剂等油性物料加入油相锅，搅拌加热至80-85℃，分散完全后抽入乳化锅，为油相；
3)把水相锅中的物料经过滤网缓慢抽入乳化锅内进行乳化，乳化3-6分钟后停止均质，开循环水降温，保持搅拌和抽真空消泡；
4)降温至45℃，加入抗衰老组合物和防腐剂，搅拌均匀，继续降温至36℃时，出料，即得成品。
实施例1
一种抗衰老组合物，包含石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物；所述的石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为1:15:15:8。
该组合物的制备方法如上所述。
该抗衰老组合物用于化妆品中，化妆品包括以下质量百分比的成分：抗衰老组合物5％、卡波姆0.1％、水解透明质酸钠1％、甘油10％、海藻糖2％、甘油硬脂酸酯3％、山梨酸钾0.3％、霍霍巴籽油1.5％，余量为去离子水。该化妆品的制备方法如上所述。
实施例2
一种抗衰老组合物，包含石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物；所述的石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为1.5:17:10:5。
该抗衰老组合物用于化妆品中，化妆品包括以下质量百分比的成分：抗衰老组合物6％、黄原胶0.2％、海藻糖15％、鲸蜡醇磷酸酯钾1％、苯氧乙醇0.3％、牛油果树果脂2％，余量为去离子水。
实施例3
一种抗衰老组合物，包含石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物；所述的石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为2:16:10:8。
上述抗衰老组合物用于化妆品中，化妆品包括以下质量百分比的成分：抗衰老组合物8％、丙烯酸(酯)类/c10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物0.15％、葡聚糖10％、2％硬脂醇聚醚-2和2％硬脂醇聚醚-21组合、山梨酸钾0.2％、聚二甲基硅氧烷1.5％，余量为去离子水。
实施例4
一种抗衰老组合物，包含石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物；所述的石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为0.5:10:20:10。
上述组合物用于化妆品中，化妆品包括以下质量百分比的成分：抗衰老组合物10％、卡波姆0.15％、葡聚糖5％、海藻糖10％、鲸蜡醇磷酸酯钾3％、山梨酸钾0.1％、葡萄籽油1.5％、聚二甲基硅氧烷1％、角鲨烷1％，余量为去离子水。
实施例5
一种抗衰老组合物，包含石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物；所述的石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为2.5:20:12:10。
上述组合物用于化妆品中，化妆品包括以下质量百分比的成分：抗衰老组合物8％、黄原胶0.15％、卡波姆0.1％、葡聚糖5％、鲸蜡醇磷酸酯钾1％、甘油硬脂酸酯1％、苯氧乙醇0.3％、山梨酸钾0.2％、聚二甲基硅氧烷3.5％，余量为去离子水。
实施例6
一种抗衰老组合物，包含石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物；所述的石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为2.5:10:10:5。
上述组合物用于化妆品中，化妆品包括以下质量百分比的成分：抗衰老组合物8％、黄原胶0.2％、葡聚糖10％、鲸蜡醇磷酸酯钾2％、甘油硬脂酸酯1％、苯氧乙醇0.3％、山梨酸钾0.2％、聚二甲基硅氧烷3.5％，余量为去离子水。
实施例7
一种抗衰老组合物，包含石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物；所述的石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为0.5:20:20:10。
上述组合物用于化妆品中，化妆品包括以下质量百分比的成分：抗衰老组合物6％、卡波姆0.2％、海藻糖10％、鲸蜡醇磷酸酯钾3％、苯氧乙醇0.4％、聚二甲基硅氧烷3.5％，余量为去离子水。
对比例1
本对比例1的抗衰老组合物配方为：包含白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物，所述白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为15:15:8。
对比例2
本对比例2的抗衰老组合物的配方为：包含石斛干细胞提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物，所述石斛干细胞提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为1:15:8。
对比例3
本对比例3的抗衰老组合物的配方为：包含石斛干细胞提取物、白术提取物、姜黄提取物，所述石斛干细胞提取物、白术提取物、姜黄提取物的质量比为1:15:8。
对比例4
本对比例4的抗衰老组合物的配方为：包含石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁，所述石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁的质量比为1:15:15。
对比例5
本对比例5的抗衰老组合物的配方为：包含蓝果忍冬果汁、姜黄提取物，所述蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为15:8。
对比例6
本对比例6的抗衰老组合物的配方为：包含石斛干细胞提取物、白术提取物，所述石斛干细胞提取物、白术提取物的质量比为1:15。
对比例7
本对比例7的抗衰老组合物的配方为：包含石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物，所述石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为0.25:15:15:8。
对比例8
本对比例8的抗衰老组合物的配方为：包含石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物，所述石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为1:6:8:8。
对比例1～8的组合物制备方法为将各个成分按所述质量比混合得到。
效果例1
本发明实施例1～7抗衰老功效评价试验
方法：
以0.2mol/lph＝6.8的磷酸缓冲液(pbs)分别配制：
试样溶液1：实施例1组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液2：实施例2组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液3：实施例3组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液4：实施例4组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液5：实施例5组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液6：实施例6组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液7：实施例7组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液8：对比例1组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液9：对比例2组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液10：对比例3组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液11：对比例4组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液12：对比例5组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液13：对比例6组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液14：对比例7组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
试样溶液15：对比例8组合物浓度为0.2mg/ml的溶液；
在0.9ml的试样溶液中，加入1mll-酪氨酸(0.3mol)和1mlph＝6.8的磷酸缓冲液(pbs),在37℃恒温水槽中预热10分钟，再加入0.1ml酪氨酸酶水溶液(1.0mg/ml，mcllvains缓冲液)，充分搅拌，在37℃反应15分钟后，测定475nm吸光度(d1)。另外，用上述磷酸缓冲液代替式样溶液进行同样的反应，测得吸光度(d2)。为了对照，在不加试样溶液和酪氨酸酶的条件下，测得吸光度(d3)。用下式计算出酪氨酸酶活性抑制率。
酪氨酸酶活性抑制率(％)＝(d2-d1)/(d2-d3)×100
上述待测液为实施例1～7以及对比例1～8的组合物。得到表1；
表1
从表1中可看出，石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物四者均具有抗衰老功效，其中石斛干细胞提取物、白术提取物两者复配比蓝果忍冬果汁、姜黄提取物复配效果好，而四者复配其抗衰老功效最好。
对比例7、8中石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比不在本发明范围之内，可看出，其效果不如本发明，可见石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物四种提取物按本发明所述重量比组合在一起，使本发明化妆品的抗氧化效果更好，并且，由表1可知，当石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为1:15:15:8时，本发明化妆品的抗氧化效果最好，这是申请人意外发现的。
效果例2
改善皮肤皱纹效果评价
本发明的组合物具有良好抗氧化的效果。本效果例考察了白术提取物与蓝果忍冬果汁的质量比对本发明组合物抗衰老效果的影响。为了考察该影响，我们按照实施例1的方法制备了不同的组合物。各实验组组合物包含石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物，所述石斛干细胞提取物、白术提取物、蓝果忍冬果汁、姜黄提取物的质量比为(0.5～2.5):(10～20):(10～20):(5～10)；其中白术提取物与蓝果忍冬果汁的质量比如下表2所示。
表2
试验方法：
实验对象：选取有干纹、细纹、鱼尾纹、表情纹、颈部纹等皱纹困扰的健康志愿者20名，
男、女各10名，年龄38-41岁，无严重系统疾病、无免疫缺陷或自身免疫性疾病、无活动性过敏性疾病，对护肤类化妆品无严重过敏史、近1个月内未曾使用激素类药物或免疫抑制剂、未参加其他临床试验，未涂抹任何化妆品等外用制剂。随机分为4组，每组5人。
各组志愿者用温水清洁皮肤后，在面部、眼周、颈部、手背(同一位置)均匀涂抹相应的化妆品，每天早晚各1次，连续使用8周后，使用皮肤水分测量仪corneometercm825测量手背皮肤角质层中的含水量(％)，使用表皮水分散失测定仪tm300测量手背皮肤水分散失量[teml，g/(h·m2)]。
使用皮肤皱纹测试仪sv600进行祛皱功效评价，先用硅模复制所测定部位的皮肤皱纹模型，计算机根据皮肤皱纹深度进行等级分类与统计处理。计算样品使用前、使用后的皮肤平均粗糙度r3(即对5个相同长度、不同节段所测得的r1值取算数平均数，其中r1表示在一定长度内峰值与最低值之间的距离，μm)。结果用δr3(即：使用样品前与使用样品后的皮肤平均粗糙度的差值)表示，数值越高，代表皱纹改善效果越好。
使用皮肤弹性测试仪mpa580测试面部皮肤弹性(测试过程中负压恒定为450mpa)，结果用回弹量ur(即取消负压0.1秒后皮肤的恢复值)与皮肤的最大拉伸量uf的比值表示，数值越接近1，说明皮肤弹性越好。
结果得到表3：
表3
由表3可看出，白术提取物与蓝果忍冬果汁的质量比为1:1，其抗衰老效果最佳。改善皮肤水合度、减少水分散失量、改善皮肤弹性和皱纹等效果最佳。
豚鼠皮肤刺激实验
各取0.5g实施例1～7抗衰老组合物，采用去离子水稀释至100g配置成受试样品。受试样品采用皮肤刺激性试验方法(《化妆品卫生规范》2007版毒理学试验方法)进行测试。
实验动物：豚鼠体重250g～300g。
实验结果：经14天皮肤刺激试验，未见刺激反应。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。