本发明属于脂质载体技术领域，更具体地，涉及一种甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液及其制备方法和应用。
背景技术
纳米结构脂质载体(nanostructuredlipidcarrier，nlc)是本世纪初在固体脂质纳米粒(solidlipidnanoparticles，sln)基础上改良出现的第二代脂质纳米载体，相较于sln具有更高的载药量、更好的稳定性以及更小的粒径等诸多优点，是未来脂质载药的发展趋势。
制备nlc常用的固体脂质材料与制备sln时并无太多区别，主要还是甘油三酯、甘油单酯、脂肪酸等；而选用的液体脂质常见的有辛酸癸酸三甘油酯、棕榈酸异丙酯、肉豆蔻酸异丙酯、液体石蜡、大豆油等。这些传统的脂质材料，富含饱和脂肪酸，人体摄入容易引起肥胖以及其他心血管疾病；且同酸甘油三酯的固体脂质在结晶时形成的晶格缺陷更少，也会导致其载药量低。因此选择结构多样、对人体健康的脂肪酸的健康脂质制备nlc具有非常重要的应用价值和研究意义。
技术实现要素：
本发明的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种新型健康纳米结构脂质载体-甘油二酯基纳米结构脂质载体。
为了实现上述目的，本发明的第一方面提供一种甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液，以所述甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液的总重量计，该纳米结构脂质载体分散液包括：甘油二酯1-4wt％；液态油1-4wt％；离子型表面活性剂7-10wt％，非离子型表面活性剂10-13wt％，余量为水。
本发明的第二方面提供一种上述甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液的制备方法，该制备方法包括：
(1)将甘油二酯和液态油混合加热至完全融化，得到油相；
(2)将离子型表面活性剂、非离子型表面活性剂和部分水加热混合均匀，得到水相；
(3)将所述油相和水相混合均匀，得到粗乳液；
(4)将所述粗乳液与2-10℃的剩余水混合均匀，得到所述甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液。
本发明的第三方面提供一种上述甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液作为药物或食品活性分子的载体的应用。
本发明的技术方案具有如下有益效果：
(1)本发明的甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液具有更高的载药量及包封稳定性；
(2)本发明的甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液具有缓释效应，能显著提高负载生物活性物质的持效期。
(3)由于甘油二酯是一种功能性结构脂质，具有优异的生物活性，因此，本发明的甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液用于生物活性物质的包埋与释放具有一定的功能性协同作用。
(4)本发明的甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液的制备工艺简单、重现性好、对设备和能耗要求低、可实现工业化生产。
本发明的其它特征和优点将在随后具体实施方式部分予以详细说明。
具体实施方式
下面将更详细地描述本发明的优选实施方式。虽然以下描述了本发明的优选实施方式，然而应该理解，可以以各种形式实现本发明而不应被这里阐述的实施方式所限制。相反，提供这些实施方式是为了使本发明更加透彻和完整，并且能够将本发明的范围完整地传达给本领域的技术人员。
本发明的第一方面提供一种甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液，以所述甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液的总重量计，该纳米结构脂质载体分散液包括：甘油二酯1-4wt％；液态油1-4wt％；离子型表面活性剂7-10wt％，非离子型表面活性剂10-13wt％，余量为水。
根据本发明，优选地，所述甘油二酯为1,3-甘油二酯，优选为1-月桂酸-3-棕榈酸甘油二酯。
甘油二酯(diacylglycerol,dag)，是由两分子脂肪酸与一分子甘油酯化后得到的一种结构脂质，根据脂肪酸与甘油羟基结合的位置不同，分为1，3-甘油二酯(1，3-dag)、1，2-甘油二酯(1，2-dag)两种异构体，其中1，3-dag要比1，2-dag稳定，且在酸碱或是加热的条件下1，2-dag会向1，3-dag转化。dag是油脂中天然成分，含量一般在2～10％。其在外观、风味和营养价值方面与甘油三酯差异不大，但由于dag在结构上的差异，使得导致dag在人体内的代谢方式与一般油脂存在明显不同，研究表明dag具有降血脂、防止内脏脂肪堆积、缓解糖尿病及其并发症等众多生理功能，是非常优异的功能性脂质。同时，由于甘油二酯可以含有不同脂肪酸的结构，这种甘油二酯结构的多样性更有利于在制备nlc时形成更多的晶格缺陷，更有利于载药。
根据本发明，优选地，所述液态油为植物油，优选为葵花籽油。
葵花籽油(sunflowerseedoil)，气味清香，是一种重要的食用油脂，它含有大量的亚油酸等人体必需的不饱和脂肪酸，可以促进人体细胞的再生和成长，保护皮肤健康，并能减少胆固醇在血液中的淤积。其熔点低，非常容易被人体吸收，是一种非常受欢迎的健康油脂。
本发明中，葵花籽油与甘油二酯(dag)具有非常好的相容性，二者非常适合混合使用。
根据本发明，优选地，所述离子型表面活性剂为大豆卵磷脂和/或十二烷基硫酸钠(sds)；优选为大豆卵磷脂；所述非离子型表面活性剂为吐温20、吐温40、吐温60和吐温80中的至少一种；优选为吐温80。
本发明中，大豆卵磷脂和吐温80均为生物毒性小、可用于食品添加的表面活性剂。
本发明的第二方面提供一种上述甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液的制备方法，该制备方法包括：
(1)将甘油二酯和液态油混合加热至完全融化，得到油相；
(2)将离子型表面活性剂、非离子型表面活性剂和部分水加热混合均匀，得到水相；
(3)将所述油相和水相混合均匀，得到粗乳液；
(4)将所述粗乳液与2-10℃的剩余水混合均匀，得到所述甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液。
根据本发明，优选地，步骤(1)和步骤(2)中的加热温度为高于所述甘油二酯的熔点5-10℃。
根据本发明，优选地，步骤(3)中，混合温度为高于所述甘油二酯的熔点5-10℃；混合时间为5-15min。作为一种优选的实施方式，将所述油相和水相在0.5-2min内迅速混合均匀，得到粗乳液；进一优选为在0.5-1min内迅速混合均匀。
根据本发明，优选地，步骤(4)中，将温度为高于所述甘油二酯的熔点5-10℃的粗乳液与2-10℃的剩余水混合均匀，得到所述甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液；进一优选为将温度为高于所述甘油二酯的熔点5-10℃的粗乳液与2-10℃的剩余水在0.5-2min内迅速混合均匀，得到所述甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液；更优选为在0.5-1min内迅速混合均匀。
根据本发明，优选地，步骤(4)中，所述粗乳液与2-10℃的剩余水的体积比为1:5-25。
本发明的第三方面提供一种上述甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液作为药物或食品活性分子的载体的应用。
以下通过实施例进一步说明本发明：
实施例1
本实施例提供一种甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液的制备方法，具体制备方法为：称取0.64g1-月桂酸-3-棕榈酸甘油二酯、0.16g葵花籽油，混合加热至70℃，直至完全熔融得到液态油相；另外称取1.6g大豆卵磷脂、1.6g吐温-80和2.0g蒸馏水搅拌加热至70℃得到水相；在70℃温度下将油水两相在0.5min内迅速混合，搅拌10分钟形成粗乳液，将粗乳液在0.5min内迅速分散至10ml的2-10℃冷水中，并持续搅拌30分钟得到甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液。
实施例2
本实施例提供一种甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液的制备方法，具体制备方法为：称取0.4g1-月桂酸-3-棕榈酸甘油二酯、0.4g葵花籽油，混合加热至70℃，直至完全熔融得到液态油相；另外称取1.12g大豆卵磷脂、2.08g吐温-80和2.0g蒸馏水搅拌加热至70℃得到水相；在70℃温度下将油水两相在0.5min内迅速混合，搅拌10分钟形成粗乳液，将粗乳液在0.5min内迅速分散至10ml的2-10℃冷水中，并持续搅拌30分钟得到甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液。
实施例3
本实施例提供一种甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液的制备方法，具体制备方法为：称取0.16g1-月桂酸-3-棕榈酸甘油二酯、0.64g葵花籽油，混合加热至70℃，直至完全熔融得到液态油相；另外称取1.6g大豆卵磷脂、1.6g吐温-80和2.0g蒸馏水搅拌加热至70℃得到水相；在70℃温度下将油水两相在0.5min内迅速混合，搅拌10分钟形成粗乳液，将粗乳液在0.5min内迅速分散至10ml的2-10℃冷水中，并持续搅拌30分钟得到甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液。
测试例1
分别测试实施例1-3制备的甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液的粒径、聚合物分散指数(pdi)和zeta电位，具体测试结果见表1。
其中，本发明中测试所有样品的粒径、分散性指数(pdi)和zeta电位均使用马尔文纳米粒度分析仪进行测试。其测量方法为：取100微升甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液用蒸馏水稀释80倍后的样品放于比色皿中，将比色皿放置于马尔文纳米粒度分析仪中，设定条件为室温25℃、水为分散相、准备时间60s，此条件下重复测量样品的粒径、pdi和zeta电位三次，其测量结果之间的相对标准偏差＜10％，说明了样品测量结果的重复性较好。最后将三组数据的平均数作为测量样品的粒径、pdi和zeta电位；其中，所述的稀释80倍指甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液与蒸馏水的体积比为1：80。
表1
通过测试可知，本发明的纳米乳液平均粒径能够达到纳米级，形成的甘油二酯基纳米结构脂质载体分散液的稳定性良好。
以上已经描述了本发明的各实施例，上述说明是示例性的，并非穷尽性的，并且也不限于所披露的各实施例。在不偏离所说明的各实施例的范围和精神的情况下，对于本技术领域的普通技术人员来说许多修改和变更都是显而易见的。