多西他赛-油酸前药及其纳米结构脂质载体和应用
【技术领域】
[0001]本发明属于药物制剂新辅料和新剂型领域，包括多西他赛-油酸前药(DTX-OA)及 基于core-match机理包载的纳米结构脂质载体(NLC)，以及其在口服给药中的应用。
【背景技术】
[0002 ]多西他赛(DTX)是临床应用广泛的抗癌药。但极低的水溶性导致市售制剂中含有 大量的吐温80和乙醇作为增溶剂，易产生毒副作用，进而限制了其临床应用。同时，注射给 药不可避免的面临诸多弊端，例如易发生感染，患者依从性低，副作用大等。与注射给药相 比，口服给药具有方便，经济，患者有较高的顺应性等特点。但由于多西他赛水溶性极低，渗 透性差，且本身为P-gp底物，导致多西他赛口服生物利用度很低。
[0003] 纳米载体由于能够提高抗癌药物的疗效并且减少药物副作用而被广泛用于靶向 药物传递系统。其中，纳米结构脂质载体作为新一代的脂质纳米粒在口服药物传递中备受 瞩目，因其具有很好的生物相容性和稳定的缓控释效果。但包载多西他赛的纳米结构脂质 载体存在载药量低的问题(5%，w/w)，限制了其临床应用。根据core-match理论，当经过化 学修饰的药物与纳米载体含有相同的成分时，修饰后的药物与载体之间会产生极高的亲和 力，可以显著提高纳米载体的载药量。因此，设计合成了多西他赛-油酸前药，将其包载于含 有油酸(OA)作为液态脂质的纳米结构脂质载体中（DTX-OA-NLC)，通过core-match机制提高 药物的载药量，并进一步提高多西他赛的口服生物利用度。
【发明内容】
[0004] 本发明的第一个目的旨在提供多西他赛-油酸前药。
[0005] 本发明的第二个目的旨在提供基于core-match机理包载多西他赛-油酸前药的纳 米结构脂质载体的制备方法。
[0006] 本发明的第三个目的旨在提供基于core-match机理包载多西他赛-油酸前药的纳 米结构脂质载体在口服给药中的应用。
[0007] 本发明通过以下技术方案实现上述目的：
[0008] 该多西他赛-油酸前药以多西他赛为母药，以酯键链接一分子油酸而形成前药，是 一种稳定性好、功能性强的脂肪酸前药。
[0009] 所述的多西他赛-油酸前药的结构式如下：
[0010]
[0011]所述的多西他赛-油酸前药，其特征在于，油酸与多西他赛侧链2'位相连。其制备 过程如下：油酸（OA)溶于少量二氯甲烷中，在双环己基碳酰亚胺(DCC)和4-二甲氨基吡啶 (DMAP)催化作用下，N 2保护下冰浴2-3h，然后与多西他赛在25-30°CN2保护下反应24-36h，经 分离纯化得到白色粉末状前药。反应式如下：
[0013] 所述的基于core-match机理的纳米结构脂质载体可采用乳化超声法制备，以单硬 脂酸甘油酯为固体脂质，以油酸为液体脂质，以多西他赛-油酸前药为主药，以泊洛沙姆188 (F 68)为表面活性剂，以赖氨酸桥连的聚乙二醇2000二维生素 E琥珀酸酯(PLV2qqq)为表面修 饰材料，其中，各组分间的重量百分组成为：1:〇.3~0.5:0.5~1.0:0.3~0.5:0.8~1.2(单 硬脂酸甘油酯：油酸:F 68: PLV2k : DTX-0A)，优选为：7:3:5:3:8。表面活性剂可以脱氧胆酸钠 替代，表面修饰材料可以赖氨酸桥连的聚乙二醇5000二维生素 E琥珀酸酯(PLV5qqq)替代。
[0014] 制备工艺如下：将一定量的单硬脂酸甘油酯，油酸，多西他赛-油酸前药，PLV2000 , 溶于适量乙醇中，加热至70_80°C，磁力搅拌下使其溶解均匀。将F68溶于一定量水中，加热至 70-80°C，磁力搅拌下使其溶解均匀。将上述乙醇溶液快速加入到水溶液中，70-80°C水浴下 保持磁力搅拌5-10min。将上述溶液超声处理(200-400W，5-10min)，迅速冰浴冷却，得到淡 蓝色乳光液体制剂。
[0015] 本发明具有以下有益效果:制备的多西他赛-油酸前药稳定性好，在大鼠血浆中相 对于多西他赛有更高的稳定性。制备的基于core-match机理的纳米结构脂质载体粒径较小 且均一(90nm)，载药量高(23%，w/w)，物理稳定性好，体外肠灌流试验和体内药动学试验证 实基于core-match机理包载多西他赛-油酸前药的纳米结构脂质载体能显著提高多西他赛 的口服生物利用度。
【附图说明】
[0016] 图1为本发明实施例1的多西他赛-油酸前药的1HNMR谱图。
[0017] 图2为本发明实施例1的多西他赛-油酸前药的高分辨质谱谱图。
[0018]图3为本发明实施例1的多西他赛-油酸前药的FT-IR谱图。
[0019 ]图4为本发明实施例1的多西他赛-油酸前药与多西他赛在大鼠血浆中的稳定性对 比图。
[0020] 图5为本发明实施例3的纳米结构脂质载体的透射电子显微镜图。A:多西他赛-油 酸纳米结构脂质载体;B:多西他赛纳米结构脂质载体。
[0021] 图6为本发明实施例3的纳米结构脂质载体在不同模拟介质中的胶体稳定性。A:多 西他赛-油酸纳米结构脂质载体;B:多西他赛纳米结构脂质载体。
[0022]图7为本发明实施例3的纳米结构脂质载体在不同模拟介质中的体外释放实验。 [0023]图8为本发明实施例3的纳米结构脂质载体的原位单向肠灌流的吸收速率常数 (Ka)图。
[0024]图9为本发明实施例3的纳米结构脂质载体的原位单向肠灌流的表观吸收系数 (Papip)图。
[0025] 图10为本发明实施例3的包载香豆素 -6的纳米结构脂质载体的大鼠肠道吸收分布 图。
[0026] 图11为本发明实施例3的包载DiR的纳米结构脂质载体的小鼠肠道吸收分布图。
[0027] 图12为本发明实施例3的包载多西他赛-油酸前药的纳米结构脂质载体大鼠肠道 摄取机制图。
[0028] 图13为本发明实施例3包载香豆素 -6的纳米结构脂质载体的MDCK细胞摄取图。 [0029]图14为本发明实施例3的纳米结构脂质载体口服给药药时曲线图。
【具体实施方式】
[0030] 下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将发明限制在所述的实施 例范围之中。
[0031] 实施例1
[0032]多西他赛-油酸前药的合成。
[0033] 油酸（OA)溶于少量二氯甲烷中，在双环己基碳酰亚胺（DCC)和4-二甲氨基吡啶 (DMAP)催化作用下，N2保护下冰浴2h，然后与多西他赛在25°CN2保护下反应24h，经分离纯化 得到白色粉末状前药。反应式如下：
[0034]
[0035] 采用核磁共振测定1H-NMR氢谱来确定实施例1中前药的结构，选用的溶剂为CDCl3, 结果如图 1。1 · 158ppm，1 · 783ppm，5 · 229ppm，8 · 13Ippm为多西他赛H7, -9,，，H2q，H25,29的特征 峰。0·886ppm，1·271ppm，1·290ppm，1·334ppm，1·657ppm，2·041ppm，2·372ppm，5·368ppm为 油酸-CH 3，CH3-(CH2)5-CH2-，CH 3-(CH2)5_CH2-，-CH2-(CH2) 3-CH2-，-CH2-CH2CH2CO-，-CH 2CH2CO-，-CH2CH=CHCH2-，-CH 2CO-和-CH=CH-的特征峰。
[0036] 采用FT-IR图谱来确定实施例1中前药相对于母药在化学基团上的变化，结果如图 2。2978 · 00cm-1 和2939 · 43cm-1 为多西他赛结构中-CH3