一种护肝降脂的组合物及其制备方法与流程

本发明涉及中药
技术领域：
，具体为一种疗效明显的护肝降脂的组合物及其制备方法。
背景技术：
：肝脏病变包括非酒精性与酒精性脂肪肝，慢性肝炎，肝硬化和肝癌。肝脏病变是人类的主要疾病之一，全世界有三亿多人患有不同程度的肝病。在美国大约有1600万人受不同程度的肝病折磨，约20％的成年人有脂肪肝。中国拥有历史悠久的酒文化，饮酒虽然可以交流感情，但是长期大量饮酒会影响肝脏脂肪代谢，可引起脂肪肝以及更严重的肝脏疾病。在如白领人士、出租车司机、职业经理人、个体业主、政府官员、高级知识分子等职业人群中，脂肪肝的平均发病率为25％；肥胖人群与ii型糖尿病患者中脂肪肝的发病率为50％；嗜酒和酗酒者脂肪肝的发病率为58％；在经常失眠、疲劳、不思茶饭、胃肠功能失调的亚健康人群中脂肪肝的发病率约为60％。而且脂肪肝人群的年龄也不断下降，平均年龄只有40岁，30岁左右的病人也越来越多。45岁以下男性脂肪肝明显多于女性，严重影响人类的健康水平。然而目前对付酒精肝、脂肪肝没有很好的特效药，由酒精肝或者脂肪肝等肝病导致肝癌的发病率居高不下。技术实现要素：针对上述现有技术存在的不足，提供一种具有优良护肝效果，降低脂肪肝发生概率的护肝降脂的组合物及其制备方法。本发明的另一目的是提供提供一种护肝降脂的组合物的制备方法。为达到上述目的，本发明是通过如下技术方案实现的：一种护肝降脂的组合物，由包括以下重量份数组分制成：枸杞子6-15、泽泻11-25、茵陈5-10、山楂10-35、人参1-5、绞股兰15-20、决明子15-25、葛根12-25、虎杖12-20、肉豆蔻5-15、橘皮1-5、水飞蓟1-5、丹参5-20、田七5-10、灵芝5-10、姜黄10-25。优选的，所述护肝降脂的组合物，由包括以下重量份数组分制成：枸杞子12、泽泻15、茵陈9、山楂25、人参3、绞股兰18、决明子18、葛根20、虎杖15、肉豆蔻10、橘皮3、水飞蓟3、丹参15、田七8、灵芝8、姜黄15。一种护肝降脂的组合物的制备方法，其包括的步骤如下：(1)原料预处理：分别将枸杞子、泽泻、茵陈、山楂、人参、绞股兰、决明子、葛根、虎杖、肉豆蔻、橘皮、水飞蓟、丹参、田七、灵芝、姜黄中药材组分挑捡，去除杂质，然后粉碎过30～80目筛获得粉末，然后混合均匀；(2)提取和过滤：将经粉碎的组分投置于提取罐中，加入组分总重量5～30倍的水或乙醇溶剂，在55～80℃条件下提取1～3次，每次的提取时间为30～180min；然后将提取物料用过滤，或离心，或压榨的方式收集澄清滤液。(3)，微滤：将澄清滤液用截留孔径0.5～5um微滤膜除去大直径的菌体、悬浮固体等杂质，得到微滤液。(4)浓缩或干燥：将微滤液浓缩，得到浓缩液或稠膏，或将稠膏干燥成固体粉末。优选的，微滤后还可以4)超滤和纳滤。超滤：将微滤液用截留分子量5000～30000da的超滤膜进行超滤，除去大分子色素、鞣质等杂质，得到超滤液。纳滤：将超滤液用截留分子量80～300da的纳膜进行纳滤，除去水或乙醇溶剂，得到纳滤液。(6)浓缩或干燥：将纳滤液浓缩，得到浓缩液或稠膏，或将稠膏干燥成固体粉末。优选的，步骤(2)中的提取温度为60～70℃，提取时间为60～90min。优选的，所述微滤膜的孔径为1～2μm。优选的，所述超滤膜的截留分子量为8000～20000da。优选的，所述纳滤膜的截留分子量为100～200da。本发明可以造粒，制丸或装胶囊等，每粒有效含量为500mg。或者加入20倍的蒸馏水配成原液或者直接配置成针剂。与现有技术相比，本发明与如下有益效果：具有明显降低丙氨酸氨基转移酶(alt)和转氨酶(ast)功效，有良好保肝护肝效果，减少脂肪肝沉积；可以有效改善肝脏功能，延缓或者防止肝硬化的产生，最大限度阻断肝病癌变发展。附图说明图1为本发alt检测对比图(图中显示饮用本发明(15毫克/千克/日)四个月的samp10和samp8amp8血液中的丙氨酸氨基转移酶(alt，sigmaunites/ml)含量明显回降，与正常samr1小白鼠的水平相当。图2为为本碱性磷酸酶检测对比图(图表2显示饮用飞蓟(silymarin)(15毫克/千克/日)四个月的samp10和samp8amp8血液中的碱性磷酸酶(alkalinephosphatase，sigmaunites/ml)含量明显回降，与正常samr1小白鼠的水平相当。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明作进一步描述，但实施例并不构成对本发明要求保护范围的限制。本发明护肝降脂的组合物利用组合型中药成分协同增效，对脂肪肝和酒精肝保健和治疗具有优良效果。其中，水飞蓟含有飞蓟素，具有抗发炎、细胞保护及抗致癌活性功效，可保护肝脏，改善肝脏功能。枸杞子对脂质代谢或抗脂肪肝有较好作用，主要是因为其中含有甜菜碱，能在体内起甲基供应体的作用。泽泻可以使高胆固醇和高脂肪饮食在肝中脂肪含量明显降低，具有抗脂肪肝作用；另外含有胆碱、卵磷酯、甲硫氨酸、甲酰四氢叶酸、维生素b12、生物素以及不饱和脂肪酸等多种祛脂物质。茵陈可以治疗或者减轻细胞肿胀、气球样变、脂肪变性与坏死，使肝细胞糖元与核糖核酸含量有所恢复或接近正常，血清谷丙转氨酶活性下降。山楂可减轻脂类在器官内的沉积，有明显降低血清胆固醇含量的作用。人参对动物和高脂血症患者的高密度脂蛋白胆固醇的增加和脂肪肝有明显改善作用。绞股兰具有明显的降血脂作用。决明子具有明显的降血脂作用，其所含的大黄素成分有助于促进肠蠕动，抑制了胆固醇的吸收。此外加入丹参、田七、灵芝、姜黄以及橘皮等中药，可以协同生效。以上诸药在本发明记载的配比下合用，协同生效，具有良好保肝护肝，减少脂肪肝沉积；可保护肝脏，改善肝脏功能的功效。下表为本发明护肝降脂的组合物实施例1-6一种护肝降脂的组合物的制备方法，其包括的步骤如下：(1)原料预处理：分别将枸杞子、泽泻、茵陈、山楂、人参、绞股兰、决明子、葛根、虎杖、肉豆蔻、橘皮、水飞蓟、丹参、田七、灵芝、姜黄中药材组分挑捡，去除杂质，然后粉碎过50目筛获得粉末，然后混合均匀；(2)提取和过滤：将经粉碎的组分投置于提取罐中，加入组分总重量20倍的水或乙醇溶剂，在65℃条件下提取3次，每次的提取时间为60min；然后将提取物料离心方式收集澄清滤液。(3)，微滤：将澄清滤液用截留孔径0.5～5um微滤膜除去大直径的菌体、悬浮固体等杂质，得到微滤液。(4)浓缩或干燥：将微滤液浓缩，得到浓缩液或稠膏，或将稠膏干燥成固体粉末。优选的，微滤后还可以超滤和纳滤，可以作为针剂或者药品活性物。超滤：将微滤液用截留分子量6000～25000da的超滤膜进行超滤，除去大分子色素、鞣质等杂质，得到超滤液。纳滤：将超滤液用截留分子量100～250da的纳膜进行纳滤，除去水或乙醇溶剂，得到纳滤液。(6)浓缩或干燥：将纳滤液浓缩，得到浓缩液或稠膏，或将稠膏干燥成固体粉末。优选的，所述微滤膜的孔径为1.5μm。优选的，所述超滤膜的截留分子量为15000da。优选的，所述纳滤膜的截留分子量为150da。本发明可以造粒，制丸或装胶囊等，每粒有效含量为500mg。或者加入20倍的蒸馏水配成原液或者直接配置成针剂。效果实验实施例中得到的用于治疗脂肪肝病的组合物溶解于饮用水让samp8脂肪肝小鼠、samr1正常小鼠自由饮用。材料与方法动物：samp8和samr1小鼠是美国纽约州立基研究所提供，所有小鼠存养在无菌的12小时昼夜交替和恒温的动物房间。动物可以自由摄取食物和饮用水。每组动物15至20只左右，用药前，用药后二个月或四个月检测对照了samp8、samr1以及samp8引用空白水的肝功能，200微升的血请液从小鼠眼角用毛细管提取，血液中的丙氨酸氨基转移酶(alt)，碱性磷酸酶(ap)和转氨酶(ast)含量用试剂盒(sigma，usa)测试。实验结果如图1所示，图1中显示饮用实施例(15毫克/千克/日)四个月的samp8血液中的丙氨酸氨基转移酶(alt，sigmaunites/ml)含量明显回降，与正常samr1小白鼠的水平相当，而引用空白对照水得肝功能并无改变。图表2显示饮用实施例(15毫克/千克/日)四个月的的samp8血液中的碱性磷酸酶(alkalinephosphatase，sigmaunites/ml)含量明显回降，与正常samr1小白鼠的水平相当，，而引用空白对照水得肝功能并无改变。在光学显微镜观察下喂食饮用实施例(15毫克/千克/日)四个月的samp8小鼠肝脏明显好转，没有发现轻症性肝损害、空泡性脂肪肝、肝炎、肝纤维化、肝硬化等5类组织病变。而喂食时空白对照食物组samp8小鼠则可以看到这些病变。肝功能检测也发现饮用实施例(15毫克/千克/日)四个月的samp8小鼠肝功能检测指标明显好转。可见饮用实施例可治疗samp8小鼠自发形成脂肪肝病。为什么samp8小鼠会出现肝损伤，脂肪肝呢？我们认为有以下几种原因：1)可能因为samp8小白鼠出现遗传变异，导致抗氧化损伤能力下降；2)由此产生过氧化脂、过氧化物质过多，如我们发现的4-羟基壬烯酸(4-hne)在samp8肝中显著增加，可能引起细胞膜损伤；3)细胞内自由基增加会刺激p38，丝裂原激活的蛋白激酶(mapk)和氨基末端蛋白激酶(jnk)信号传递通路；4)刺激库普弗(kupffer)细胞和星形的(stellate)细胞合成分泌细胞因子cytokine、il-8、tnf、和tgf等；5)tnf和tgf可以通过自分泌(autocrine)和旁分泌(paracrine)效应作用于自身细胞和邻近细胞的特异受体，通过信号传递通道，激活半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)等因子引起细胞凋亡(apoptosis)和肝细胞损伤。在光学显微镜观察下喂食本发明组合物的samp8小鼠肝脏明显好转，没有发现轻症性肝损害、空泡性脂肪肝、肝炎、肝纤维化、肝硬化等5类组织病变。而喂食空白对照食物组则可以看到这些病变。肝功能检测也发现喂食本发明以上实施例组合物的samp8小鼠肝功能检测指标明显好转。机理分析如下：在细胞水平上，肝脏内部的细胞如肝细胞(hepatocytes)，库普弗细胞(kupffercells)，hepaticstellatecells(itocells，lipocytes)，巨噬细胞(macrophage)，inflammatorycellsand内皮细胞(endotheliumcells)也受到不同程度的刺激，他们的自身对有害因子的反应又可以引起自身和邻近细胞的二次反应。在亚细胞器中，内质网，线粒体，溶酶体。在分子水平上，外源有害物质如酒精可以引起肝细胞中细胞色素酶(cyp2e1)增加，细胞色素p4502e1(cyp2e1)是一种i相毒物代谢酶，它是代谢某些外源性和内源性化合物的重要酶系，是cyp450代谢酶家族中的重要一员。增加肝细胞氧化有害物质(reactiveoxygenspecies，ros)，增加革兰阴性菌的脂多糖(lipopolysacchride，lps)/脂多糖结合蛋白(lbp)，cd14/tlr4(md2)，tnfα/cyp2e1的相互作用，异常的细胞因子(cytokines)反应，通过激活nrf2、nfkb、erk1、jund/ap-1的传递通道，引起线粒体分子异常反应，造成hepaticstellatecells过激反应，肝纤维化发生。本发明提供了一种治疗脂肪肝的药物选择，在治疗脂肪肝酒精肝上且效果明显。具有明显降低丙氨酸氨基转移酶(alt)和转氨酶(ast)功效，有良好保肝护肝效果，减少脂肪肝沉积；可以有效改善肝脏功能，延缓或者防止肝硬化的产生。毒理学试验1、急性毒性试验取icr种正常小白鼠，雌雄各半，体重21±2kg。将本品配成40.5％的最大饱和水溶液。每鼠第一日灌胃给药两次，间隔12小时，每次药量为0.3ml/10g，给药后观察七天。结果七日内小白鼠无一只死亡，且毛发有光泽，饮食，大、小便均正常。七天后将小白鼠处死，进行肉眼尸检，结果也未见内脏有颜色和形态改变。经计算ld50＞16.0g/kg(相当于原生药75.0)，相当于临床人用量的187倍。2、长期毒性试验取sd种大白鼠80只，体重187±16g，雌雄各半，随机分为四组，每组20只，大剂量组(1.38g/kg)，相当于成人临床用量的10.7倍，中剂量组(0.54g/kg)，相当于成人临床用量的5.3倍，小剂量组(0.228g/kg)和水对照组(10ml/kg)。每日灌胃给药一次，连续给药一个月。每周称体重一次，每日观察其食量、外观、行为、分泌物、粪便等。一个月后，断头处死，取血进行有关检验，对主要脏器称湿重，求脏体比并进行病理学检查。(1)一般状况的观察：给大鼠灌胃给药后，大、中、小剂量组大鼠，毛发有光泽，活动自如，体态正常，摄食、粪便等均未见异常，体重逐渐增加，与对照组相比，无明显变化(p＞0.05)。(2)血液学检查：一个月后将大鼠断头，立即采血检查红血球(rbc)，白血球(wbc)计数，血红蛋白(hb)测定和白血球分类。结果表明，各项指标大、中、小剂量，与对照组相比，无明显异常(均p＞0.05)。(3)对血液生化指标的影响：a、肝功的测定：包括sgpt、sgot、总蛋白、白蛋白。实验结果见表1。表1对大鼠sgpt的影响x±sd组别动物数sgpt(u)sgot(u)总蛋白(g/l)白蛋白(g/l)对照组2086±1463±2268±2636±18小剂量组2090±1575±1876±1534±16中剂量组2094±2166±1679±1446±11大剂量组2096±2375±2465±1649±21验结果表明：大、中、小剂量组与对照组相比较，对肝功无明显影响(均p＞0.05)。b、肾功能测定：包括尿素氮、肌酐、实验结果见表2。表2对血浆尿素氮和肌酐含量的影响x±sd组别动物数血浆尿素氮含量mg％肌酐含量mg％对照组2013.6±2.71.4±0.6小剂量组207.5±1.61.9±0.4中剂量组207.4±2.50.9±0.6大剂量组207.8±2.41.0±0.5实验结果表明：大、中、小剂量组与对照组相比较，尿素氮及肌酐均无明显变化(均p＞0.05)，对肾功能无明显影响。(4)脏体比观察：头处死大白鼠后，迅速取出心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、卵巢、睾丸，滤纸上除去血液，称其湿重，求其脏体比。实验结果表明：各组大鼠心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、卵巢、睾丸体比，与对照组相比较，均无明显变化(均p＞0.05)，对主要脏器系数无明显影响。实验结束后，处理动物时，行肉眼尸检，结果各组大鼠的心、肝、脾、肺肾、肾上腺、胸腺、卵巢、睾丸、子宫、胃、肠、胸腔及腹腔，均未见有颜色、形态异常，无活动性病变。遂取心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、小肠、肠系膜淋巴结、胸骨骨髓、肾上腺、胸腺、甲状腺组织，用10％甲醛固定，石蜡包埋，切片he染色，镜下进行病理观察。结果，同对照组比较，各给药组动物以上组织细胞结构清晰，未发现与给药有关的病理学改变。以上所述者，仅为本发明的较佳实施例而已，当不能以此限定本发明实施的范围，即大凡依本发明申请专利范围及新型说明内容所作的简单等效变化与修饰，皆仍属本发明专利涵盖的范围内。当前第1页12