本发明涉及一种活性成分，特别涉及一种有降血糖作用的莲子红衣提取物及其制备方法。
背景技术：
随着人们生活水平的提高，饮食、环境等因素的影响使糖尿病的发病率极高。糖尿病是一种发病机制较复杂的内分泌系统疾病，多引起糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱，以高血糖和尿糖为特征，与癌症和心脑血管病并称为世界三大健康杀手。
莲子红衣为莲子壳与莲子果实中间包裹的一层红褐色种皮，其味涩，在莲子加工业一般通过打磨的方式将其去除。在磨除红衣的过程中，通常需要打磨两次才能将红衣彻底去除干净。红莲经第一遍粗打磨后所得的深褐色粉末为莲子头道红衣粉，此时略露出白色莲子肉；经第二遍细打磨后所得的淡粉色粉末为莲子红衣二道粉，此时莲子为白色可在市场销售。因此，莲子一道红衣粉和莲子二道红衣粉是莲子加工生产中的副产物，每加工100kg红莲，就会磨去约15kg红皮衣粉，只能得到约85kg白莲。据统计，我国每年在白莲加工过程中会产生约1万吨莲子红衣粉，其中红衣一道粉约占6000多吨。目前莲子红衣粉尚无有效的利用方式，只能大量的废弃于田间地头，对环境造成污染。
经本发明人测定，这些废弃物中含有多酚、多糖等多种活性物质，因此拟从中提取出一种具有降血糖作用的莲子红衣提取物。既有助于减缓高血糖患者的痛苦，又可以解决莲子产业副产物多的难题，充分利用自然资源，避免环境污染，拓宽莲产业开发应用空间，给莲产业带来附加效益。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种有降血糖作用的莲子红衣提取物及其制备方法。
一种有降血糖作用的莲子红衣提取物，其中，它是由下述方法制备：首先将莲子一道粉和水或者亲水性有机溶剂混合搅匀，然后将所得物经超声浸提后干燥。
本发明一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，其中，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：6-14(g：ml)将莲子一道粉和40-80％乙醇水溶液混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将所述混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为20-40min，共浸提1-4次，每次超声浸提的时间相同，第一次浸提后，每次浸提均是将离心所得的沉淀物和步骤1中所述的相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将所述的浸提液在在35-60℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物。
本发明一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，其中，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：10(g：ml)将莲子一道粉和60％乙醇水溶液混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为30min，共浸提2次；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将的浸提液在40℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物。
本发明的一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，其中，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：6-14(g：ml)将莲子一道粉和40-80％甲醇水溶液混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，每次超声浸提时间为20-40min，共浸提1-4次，每次超声浸提的时间相同，第一次浸提后，每次浸提均是将离心所得的沉淀物和步骤1中相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将的浸提液在35-60℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物。
本发明一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，其中，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：10(g：ml)将莲子一道粉和60％甲醇水溶液混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为30min，共浸提2次；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将的浸提液在40℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物。
本发明一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，其中，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：6-14(g：ml)加入40-80％丙酮水溶液，搅匀；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为20-40min，共浸提1-4次，每次超声浸提的时间相同，第一次浸提后，每次浸提均是将离心所得的沉淀物和步骤1中相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将的浸提液在35-60℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物。
本发明一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，其中，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：10(g：ml)分别加入60％丙酮水溶液，搅匀；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为30min，共浸提2次；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将的浸提液在40℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物。
本发明一种有降血糖作用的莲子红衣提取物在制备降血糖药物中的应用。
本发明一种有降血糖作用的莲子红衣提取物在制备降血糖功能性食品中的应用。
本发明的优点：对食品加工中产生的废弃物进行处理，减少了对于环境的污染，化废为宝，并获得一种可在功能性食品中应用的具有降血糖作用的莲子红衣提取物。
本发明中所涉及到的乙醇水溶液、甲醇水溶液、丙酮水溶液的浓度均为体积比浓度。
具体实施方式
实施例一
在制备过程中以乙醇为提取溶剂，制备一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的方法。
1、一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：6(g：ml)将莲子一道粉100g和40％乙醇水溶液600ml混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为20min，共浸提1次；
(3)浸提液35℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物1.53g；低温冷藏。
2、一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：10(g：ml)将莲子一道粉100g和60％乙醇水溶液1000ml混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为30min，共浸提2次；第一次浸提后，第二次浸提是将离心所得的沉淀物和步骤1中相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中2次浸提所得的浸提液后，将浸提液在40℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物1.98g，低温冷藏。
3、一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：14(g：ml)将莲子一道粉100g和80％乙醇水溶液1400ml混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为40min，共浸提4次；第一次浸提后，每次浸提均是将离心所得的沉淀物和步骤1中相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中每次超声浸提所得的浸提液后将浸提液在60℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物2.01g，低温冷藏。
实施例二
在制备过程中以甲醇为提取溶剂，制备一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的方法。
1、一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：6(g：ml)将莲子一道粉100g和40％甲醇水溶液600ml混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为20min浸提1次；
(3)浸提液在35℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物1.69g；低温冷藏。
2、一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：10(g：ml)将莲子一道粉100g和60％甲醇水溶液1000ml混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为30min，共浸提2次，第一次浸提后，每次浸提均是将离心所得的沉淀物和步骤1中相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将浸提液在40℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物2.21g，低温冷藏。
3、一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：14(g：ml)将莲子一道粉100g和80％甲醇水溶液1400ml混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为40min，共浸提4次，第一次浸提后，每次浸提均是将离心所得的沉淀物和步骤1中相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将浸提液在60℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物2.30g，低温冷藏。
实施例三
在制备过程中以丙酮水溶液为提取溶剂，制备一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的方法。
1、一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：6(g：ml)将莲子一道粉100g和40％丙酮水600ml溶液混合均匀得到混合液；(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为20min浸提1次；
(3)浸提液在35℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物1.49g；低温冷藏。
2、一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：10(g：ml)将莲子一道粉100g和60％丙酮水溶液1000ml混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为30min，共浸提2次，第一次浸提后，每次浸提均是将离心所得的沉淀物和步骤1中相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将浸提液在40℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物1.74g，低温冷藏。
3、一种有降血糖作用的莲子红衣提取物的制备方法，依次包括以下步骤：
(1)按料液比1：14(g：ml)将莲子一道粉100g和80％丙酮水溶液1400ml混合均匀得到混合液；
(2)在室温下将混合液超声浸提后离心所得的上清液为浸提液，超声浸提时间为40min，共浸提4次，第一次浸提后，每次浸提均是将离心所得的沉淀物和步骤1中相同浓度相同体积的同样液体混合均匀后再次用超声浸提；
(3)合并步骤2中每次所得的浸提液后将浸提液在60℃的条件下旋蒸浓缩，干燥即得莲子一道粉提取物1.92g，低温冷藏。
实施例四本发明降血糖功能的证实实验
1材料和方法
1.1实验动物：
spf级icr小鼠，25-27g，雄性，北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号：scxk(京)2012-0001。
spf级大小鼠维持饲料：碳水化合物64％，蛋白质21％，脂肪4％，纤维5％，购自北京科澳协力饲料有限公司。
1.2主要仪器与试剂
1.2.1仪器：ja2003c电子天平上海越平科学仪器有限公司；fe20实验室ph计梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司；22pco2435可见分光光度计上海棱光技术有限公司；dhg-9246a型电热恒温鼓风干燥箱上海精密实验设备有限公司；kh-100e型超声波清洗器昆山禾创超声仪器有限公司；hh-501超级恒温水浴(数显)常州国华电器有限公司；ikarv10旋转蒸发仪；hitacchi(r9a)高速冷冻离心机himaccr22gⅱ；等。
1.2.2原料和试剂：莲子一道粉，产自湖南湘潭，由三湘莲业贸易公司提供，干燥磨碎过60目筛，备用。nah2po4·2h20、na2hpo4·12h20、天津市光复科技发展有限公司；hcl、无水乙醇、氯仿(分析纯)北京化工厂；抗坏血酸、tris北京汇海科技有限公司；dpphsigma公司；猪油市售猪肉湿法熬制而成等。葡萄糖测定试剂盒，上海荣盛生物技术有限公司；超氧化物歧化酶(sod)试剂盒，丙二醛(mda)试剂盒，谷胱甘肽过氧化物酶(gsh-px)试剂盒，糖化血红蛋白(ghb)试剂盒，糖化血清蛋白(gsp)试剂盒，南京建成生物工程研究所；四氧嘧啶(alloxan)，sigma公司；葡萄糖，麦芽糖，冰醋酸，硫酸，乙醇，nacl，苦味酸，考马斯亮蓝，均为分析纯，天津市光复科技有限公司；结晶牛血清清蛋白，北京汇海科技有限公司。强生onetouch血糖仪、血糖试纸条，美国强生公司；手动玻璃匀浆器，752n紫外可见分光光度计，上海精科；elx808酶标仪，美国biotek公司；tomos1-14微型离心机，美国thermo公司。
1.3试验方法
1.3.1实验分组
取30只小鼠，适应环境饲养3天，饲喂普通饲料，自由饮水、觅食。四氧嘧啶诱导高血糖糖尿病小鼠模型：小鼠适应环境后，每天禁食不禁水12h，按160mg/kg.bw/天、0.1ml/10g·bw/天腹腔注射四氧嘧啶(用0.9％生理盐水溶解)，3天后，禁食不禁水12h，血糖仪测定空腹血糖值，血糖在15mmol/l-25mmol/l且连续出现多食、多饮、多尿症状者为造模成功，本次获得24只造模成功小鼠，综合考虑体重和空腹血糖值，将造模成功后的糖尿病模型小鼠分组，分别为模型对照组、实验高剂量组(600mg/kg·bw/天)、实验低剂量组(300mg/kg·bw/天)，每组各8只。另取16只正常小鼠作为正常对照组和正常实验组(600mg/kg·bw/天)，每组各8只。各组作好标记，均食用普通饲料，正常和模型对照组每天灌胃蒸馏水一次，实验组每天按时灌胃受试样品一次。实验周期为2周。观察各组小鼠在造模前后和干预后1周、2两周的血糖和体重变化，本实施例中所述的提取物为实施例一第2组中所得的莲子一道粉提取物，其他实施例中所得的莲子一道粉经实验证实也有相同的效果。
1.3.2小鼠空腹血糖值的测定
小鼠禁食不禁水12h，分别于干预前、干预一周和两周后用强生onetouch血糖仪测定小鼠的空腹血糖值。
1.3.3小鼠口服糖耐量实验
各组小鼠禁食不禁水12h，实验组动物按0.1ml/10g·bw灌胃给予莲子红衣提取物溶液，正常对照组和模型对照组灌服等体积蒸馏水。灌胃后30min，各组动物均灌胃葡萄糖溶液2.5g/kg·bw，在随后的2h内，分别在0、0.5、1、2h时剪尾采血，测定血糖值。糖耐量曲线面积(auc)按照下列公式计算：
曲线面积(auc)＝0.25×(0h血糖+0.5h血糖)+0.25×(0.5h血糖+1h血糖)+0.5×(1h血糖+2h血糖)
1.4数据处理：
用spss19.0统计软件处理数据，进行显著性分析，分析结果以均值±标准偏差表示。
2、实验结果
2.1动物实验小鼠一般观察
造模后小鼠多食、多饮、多尿、体质量减轻，即“三多一少”症状十分明显，提取物高剂量组、提取物低剂量组糖尿病小鼠症状得以缓解。
表1提取物各剂量组对小鼠体重变化(均值±标准偏差)
注：采用spss19.0软件lsd法进行显著性分析，与正常组比较，#表示p<0.05，##表示p<0.01；与模型对照组比较，*表示p<0.05，**表示p<0.01；与造模前比较，△表示p<0.05，△△表示p<0.01。
如表1所示，糖尿病小鼠与造模前比较，体重均出现极显著性降低现象(p<0.01)，但通过莲子红衣提取物干预后，体重降低的现象得以缓解。从干预一周后，体重已与干预前无显著性差异(p>0.05)，即小鼠体重有所增加，且明显高于模型对照组(p>0.05)。正常实验组小鼠体重与正常对照组始终保持在同一水平。
2.2莲子红衣提取物对小鼠空腹血糖值的影响
表2提取物各剂量组对小鼠血糖值的影响(均值±标准偏差)
注：采用spss19.0软件lsd法进行显著性分析，与正常对照组比较，#表示p<0.05，##表示p<0.01；与模型对照组比较，*表示p<0.05，**表示p<0.01；与干预前比较，△表示p<0.05，△△表示p<0.01。
如表2所示，糖尿病小鼠在灌胃干预两周后，高血糖症状明显得到缓解，高剂量组血糖值比干预前下降54.41％，低剂量组血糖值下降43.08％，模型对照组血糖值无明显变化。干预一周后，实验高剂量组、低剂量组小鼠的空腹血糖值就开始极显著低于模型对照组(p<0.01)；干预两周后，这两组组小鼠血糖值已与正常对照组小鼠保持在同一水平，不存在显著性差异(p>0.05)。正常实验组小鼠空腹血糖值与正常对照组始终保持在同一水平。
2.3莲子红衣提取物对小鼠糖耐量的影响
表3提取物各剂量组对小鼠糖耐量的影响(均值±标准偏差)
注：采用spss19.0软件lsd法进行显著性分析，与模型对照组比较，*表示p<0.05，**表示p<0.01。
如表3所示，实验高剂量组和低剂量组的血糖曲线面积均低于模型对照组，其中高剂量组与模型对照组存在极显著性差异(p<0.01)。由此可见，莲子红衣提取物在适宜浓度范围内均可显著改善糖尿病小鼠口服糖耐量。正常实验组小鼠糖耐量值与正常对照组在同一水平，无显著性差异。
综上所述，莲子红衣提取物对糖尿病小鼠降血糖功效显著。与高血糖模型对照组比较，一次口服600mg/kg.bw剂量莲子红衣提取物即可有效控制2h糖耐量曲线下面积；连续给予300～600mg/kg.bw剂量莲子红衣提取物2周后，糖尿病小鼠的体重和空腹血糖值都得以改善，而对正常小鼠的体重、空腹血糖值和糖耐量能力均无不良影响。根据卫生部2003年颁布的《保健食品检验与评价技术范围》对辅助降血糖保健食品的判定标准可知，本专利产品具有辅助降血糖功能。