一种具有促消化功效的溶栓酶制品及其制备方法与流程

本发明属于医药保健技术领域，具体涉及一种具有促消化功效的溶栓酶制品及其制备方法。

背景技术：

胀气是典型的消化不良症状，是胃、肠道疾病的一种症状，生活压力、情绪紧张、缺乏消化酶、不良饮食习惯、消化不良、胃肠疾病、便秘等均可能会引起胀气。引起胀气的常见因素有：一、胃肠道内气体排出障碍；二、胃肠道中气体吸收障碍，正常情况下，腹腔内大部分气体，可经肠壁血管吸收后，由肺部排出体外，当肠壁血液循环发生障碍时，会影响肠腔内气体吸收，从而引起腹胀；三、因不良饮食习惯导致大量空气进入胃肠，同时胃肠蠕动功能减弱或消失，导致肠腔内的气体排不出体外，进而引起腹胀；四、因某些原因如胃肠蠕动变慢，导致食物在胃肠中停留时间过长，在微生物的作用下，导致食糜发酵产生大量的气体，引起腹胀。

因此，要改善胀气症状，除需改变饮食习惯外，还需改善肠壁微循环，促进肠胃蠕动，加快胃肠道中食物的排出速度，同时抑制产气微生物的活性。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种能有效缓解胀气，增加胃酸分泌，加速胃肠蠕动及胃肠排空，同时抑制气体产生的促消化的溶栓酶制品及其制备方法。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种具有促消化功效的溶栓酶制品，含有以下重量份的成分：溶栓酶粉10-15份、枯草芽孢杆菌粉15-25份、山楂粉15-20份、菜菔子粉15-20份、大麦芽粉30-40份、陈皮粉10-15份。

优选地，一种具有促消化功效的溶栓酶制品，含有以下重量份的成分：溶栓酶粉10-15份、枯草芽孢杆菌粉20-25份、山楂粉15-20份、菜菔子粉15-20份、大麦芽粉35-40份、陈皮粉10-15份。

优选地，一种具有促消化功效的溶栓酶制品，含有以下重量份的成分：溶栓酶粉15份、枯草芽孢杆菌粉25份、山楂粉20份、菜菔子粉20份、大麦芽粉40份、陈皮粉15份。

优选地，制备的溶栓酶制品中溶栓酶粉纯度至少为90％。

优选地，制备的溶栓酶制品为散剂、片剂、颗粒剂、汤剂、口服液和膏剂中的任意一种。

本发明还提供了一种具有促消化功效的溶栓酶制品的制备方法，所述溶栓酶制品为片剂，包括以下步骤：

步骤1，原料干燥、粉碎：将山楂晒干、去籽打粉备用；将干燥萝卜种子打粉即得菜菔子粉，备用；将大麦芽晒干、打粉备用；将陈皮晒干、打粉备用；

步骤2，过筛：将步骤1中的粉状原料过80-100目筛网，对于不能通过的进行二次粉碎直至全部过筛备用；

步骤3，制备溶栓酶粉：菌种subtilisin-qk在25～35℃下发酵12～24h，取发酵液的上清液纯化、冻干，备用；

步骤4，制备枯草芽孢杆菌粉：取步骤3中发酵液的沉淀物洗涤、冻干，备用；

步骤5，混合、压片：将步骤2、步骤3、步骤4制备的山楂粉、菜菔子粉、大麦芽粉、陈皮粉、溶栓酶粉及枯草芽孢杆菌粉按重量比例混匀，压片即得具有促消化功效的溶栓酶片剂。

优选地，所述步骤3中菌种subtilisin-qk在发酵前还包括胰蛋胨培养基的制备，将菌种subtilisin-qk置于所述胰蛋胨培养基中发酵。

优选地，所述胰蛋胨培养基的制备方法为：取胰蛋白胨10～20g，植物蛋白胨2～8g，氯化钠3～7g，加水至1000ml，ph调至7.0～7.5，121℃灭菌10～20min备用。

优选地，所述步骤3中将发酵液的上清液用浓度至少为4mol/l硫酸铵溶液盐析纯化。

本发明制备的溶栓酶制品可以用于促消化药品或保健品的制备。

与现有技术相比，本发明技术效果主要体现在：

(1)溶栓酶为一种由枯草芽孢杆菌subtilisin-qk发酵产生的具有溶解血栓作用的蛋白酶，该蛋白酶可经口服吸收，进而改善人体微循环。溶栓酶可以明显改善胃肠壁的微循环，增加肠道对肠腔内气体的吸收能力，减轻胀气程度。

(2)枯草芽孢杆菌可以抑制肠道内产气微生物的生长，减少气体产生，从而达缓解胀气的作用。

(3)山楂、菜菔子、大麦芽、陈皮是中医中常用的治腹胀、促消化的药材，与溶栓酶和杆草芽孢杆菌配合制成片剂后，使用方便，且溶栓酶与枯草芽孢杆菌能加强中药组合的药效。

本发明利用具有溶解血栓、改善微循环功能的溶栓酶为原料，辅以能促进胃酸分泌、刺激胃肠蠕动的无毒中药材山楂、菜菔子、大麦芽、陈皮，同时补充枯草芽孢杆菌来抑制产气微生物的生长，减少气体产生，从而达到刺激胃肠蠕动，促进胃酸分泌，缓解胀气。本法所制产品所用原料均为药食同源的材料，且制作成本低，安全无毒副作用，具有较广的适应人群范围。

附图说明

图1是本发明实施例8提供的一种促消化的溶栓酶片剂在改善小鼠消化不良功效上的效果图；

图2是本发明实施例9提供的一种促消化的溶栓酶片剂不同服药量在改善小鼠消化不良功效上的效果图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

本发明使用的菌种subtilisin-qk己保存于国家典型培养物保藏中心，菌种编号为cctccno：m203078。

实施例1

本发明实施例1提供一种具有促消化功效的溶栓酶片剂及其制备方法，包括以下步骤：

步骤1，将山楂晒干、去籽打粉备用；将干燥萝卜种子打粉即得菜菔子粉，备用；将大麦芽晒干、打粉备用；将陈皮晒干、打粉备用；

步骤2，将步骤1中的粉状原料过80-100目筛网，对于不能通过的进行二次粉碎直至全部过筛，备用；

步骤3，取胰蛋白胨12g，植物蛋白胨2.5g，氯化钠4g，加水至1000ml，用氢氧化钠和盐酸溶液将ph调至7.2，之后放入121℃高压灭菌锅中灭菌10～12min制成胰蛋胨培养基备用；将菌种subtilisin-qk放于上述胰蛋胨培养基中，在25℃下发酵15h，取发酵液在10000r/min下离心5min得到含有溶栓酶的上清液，用4mol/l的硫酸铵溶液将上清液中的溶栓酶逐步盐析纯化，将纯化后的溶栓酶冻干得到纯度92％的溶栓酶粉备用；

步骤4，取步骤3中发酵液的沉淀物用蒸馏水溶解离心，如次反复清洗三次后冻干备用；

步骤5，将步骤2、步骤3、步骤4制备的山楂粉150g、菜菔子粉150g、大麦芽粉300g、陈皮粉120g、溶栓酶粉100g及枯草芽孢杆菌粉200g按重量比例混匀，压片即得溶栓酶片剂。

实施例2

本发明实施例2提供一种具有促消化功效的溶栓酶片剂及其制备方法，包括以下步骤：

步骤1，将山楂晒干、去籽打粉备用；将干燥萝卜种子打粉即得菜菔子粉，备用；将大麦芽晒干、打粉备用；将陈皮晒干、打粉备用；

步骤2，将步骤1中的粉状原料过80-100目筛网，对于不能通过的进行二次粉碎直至全部过筛，备用；

步骤3，取胰蛋白胨15g，植物蛋白胨4g，氯化钠5g，加水至1000ml，用氢氧化钠和盐酸溶液将ph调至7.3，之后放入121℃高压灭菌锅中灭菌12～15min制成胰蛋胨培养基备用；将菌种subtilisin-qk放于上述胰蛋胨培养基中，在25℃下发酵24h，取发酵液在10000r/min下离心5min得到含有溶栓酶的上清液，用4.5mol/l的硫酸铵溶液将上清液中的溶栓酶逐步盐析纯化，将纯化后的溶栓酶冻干得到纯度93％的溶栓酶粉备用；

步骤4，取步骤3中发酵液的沉淀物用蒸馏水溶解离心，如次反复清洗三次后冻干备用；

步骤5，将步骤2、步骤3、步骤4制备的山楂粉200g、菜菔子粉200g、大麦芽粉400g、陈皮粉150g、溶栓酶粉150g及枯草芽孢杆菌粉250g按重量比例混匀，压片即得溶栓酶片剂。

实施例3

本发明实施例3提供一种具有促消化功效的溶栓酶片剂及其制备方法，包括以下步骤：

步骤1，将山楂晒干、去籽打粉备用；将干燥萝卜种子打粉即得菜菔子粉，备用；将大麦芽晒干、打粉备用；将陈皮晒干、打粉备用；

步骤2，将步骤1中的粉状原料过80-100目筛网，对于不能通过的进行二次粉碎直至全部过筛，备用；

步骤3，取胰蛋白胨18g，植物蛋白胨7g，氯化钠6g，加水至1000ml，用氢氧化钠和盐酸溶液将ph调至7.3，之后放入121℃高压灭菌锅中灭菌15～20min制成胰蛋胨培养基备用；将菌种subtilisin-qk放于上述胰蛋胨培养基中，在30℃下发酵20h，取发酵液在10000r/min下离心5min得到含有溶栓酶的上清液，用4.5mol/l的硫酸铵溶液将上清液中的溶栓酶逐步盐析纯化，将纯化后的溶栓酶冻干得到纯度92％的溶栓酶粉备用；

步骤4，取步骤3中发酵液的沉淀物用蒸馏水溶解离心，如次反复清洗三次后冻干备用；

步骤5，将步骤2、步骤3、步骤4制备的山楂粉180g、菜菔子粉150g、大麦芽粉300g、陈皮粉100g、溶栓酶粉120g及枯草芽孢杆菌粉150g按重量比例混匀，压片即得溶栓酶片剂。

实施例4

本发明实施例4提供一种具有促消化功效的溶栓酶片剂及其制备方法，包括以下步骤：

步骤1，将山楂晒干、去籽打粉备用；将干燥萝卜种子打粉即得菜菔子粉，备用；将大麦芽晒干、打粉备用；将陈皮晒干、打粉备用；

步骤2，将步骤1中的粉状原料过80-100目筛网，对于不能通过的进行二次粉碎直至全部过筛，备用；

步骤3，取胰蛋白胨15g，植物蛋白胨6g，氯化钠5g，加水至1000ml，用氢氧化钠和盐酸溶液将ph调至7.4，之后放入121℃高压灭菌锅中灭菌15～20min制成胰蛋胨培养基备用；将菌种subtilisin-qk放于上述胰蛋胨培养基中，在35℃下发酵18h，取发酵液在10000r/min下离心5min得到含有溶栓酶的上清液，用5mol/l的硫酸铵溶液将上清液中的溶栓酶逐步盐析纯化，将纯化后的溶栓酶冻干得到纯度91％的溶栓酶粉备用；

步骤4，取步骤3中发酵液的沉淀物用蒸馏水溶解离心，如次反复清洗三次后冻干备用；

步骤5，将步骤2、步骤3、步骤4制备的山楂粉150g、菜菔子粉200g、大麦芽粉350g、陈皮粉100g、溶栓酶粉150g及枯草芽孢杆菌粉200g按重量比例混匀，压片即得溶栓酶片剂。

实施例5

本发明实施例5提供一种具有促消化功效的溶栓酶片剂及其制备方法，包括以下步骤：

步骤1，将山楂晒干、去籽打粉备用；将干燥萝卜种子打粉即得菜菔子粉，备用；将大麦芽晒干、打粉备用；将陈皮晒干、打粉备用；

步骤2，将步骤1中的粉状原料过80-100目筛网，对于不能通过的进行二次粉碎直至全部过筛，备用；

步骤3，取胰蛋白胨20g，植物蛋白胨8g，氯化钠7g，加水至1000ml，用氢氧化钠和盐酸溶液将ph调至7.3，之后放入121℃高压灭菌锅中灭菌15～20min制成胰蛋胨培养基备用；将菌种subtilisin-qk放于上述胰蛋胨培养基中，在25℃下发酵24h，取发酵液在10000r/min下离心5min得到含有溶栓酶的上清液，用4mol/l的硫酸铵溶液将上清液中的溶栓酶逐步盐析纯化，将纯化后的溶栓酶冻干得到纯度93％的溶栓酶粉备用；

步骤4，取步骤3中发酵液的沉淀物用蒸馏水溶解离心，如次反复清洗三次后冻干备用；

步骤5，将步骤2、步骤3、步骤4制备的山楂粉150g、菜菔子粉200g、大麦芽粉400g、陈皮粉150g、溶栓酶粉100g及枯草芽孢杆菌粉150g按重量比例混匀，压片即得溶栓酶片剂。

实施例6

本发明实施例6提供一种不含溶栓酶，也不含枯草芽孢杆菌粉的片剂及其制备方法，包括以下步骤：

步骤1，将山楂晒干、去籽打粉备用；将干燥萝卜种子打粉即得菜菔子粉，备用；将大麦芽晒干、打粉备用；将陈皮晒干、打粉备用；

步骤2，将步骤1中的粉状原料过80-100目筛网，对于不能通过的进行二次粉碎直至全部过筛，备用；

步骤3，将步骤2制备的山楂粉200g、菜菔子粉200g、大麦芽粉400g、陈皮粉150g按重量比例混匀，压片即得片剂。

实施例7

本发明实施例7提供一种验证本发明实施例1～实施例6所制备的产品在促消化功效上的方法。

选取70只功能性消化不良模型大鼠，雌雄各半，体重175±10g，分成1、2、3、4、5、6、7组，每组10只，单只单笼饲养。其中第1～6组给予正常饲料、上述实施例1～实施例6中的片剂4g及饮水，第7组给予正常饲料及饮水。连续饲喂7天，称重残留饲料量并计算每组大鼠日均取食量，以验证产品对模型大鼠消化情况的影响。

各实施例制备的片剂促消化效果评价如表1所示(表中数字代表各成分按重量份混合的份数)：

表1

从表1中可以看到，本发明实施例1～实施例5制备的溶栓酶片剂对小鼠胀气情况有明显改善，实施例6表明添加了溶栓酶粉和枯草芽孢杆菌粉的片剂对改善小鼠消化情况具有更好的效果。

实施例8

本发明实施例8提供一种验证本发明实施例2所制备的溶栓酶片剂在改善小鼠消化不良功效上的方法。

选取30只功能性消化不良模型大鼠，雌雄各半，体重175±10g，分成3组，每组10只，单只单笼饲养。其中第一组为空白组，给予正常饲料及及饮水；第二组为对照组，给予含5片(4g)武汉健民牌健胃消食片的饲料及饮水；第三组为处理组，给予本发明实施例5所制溶栓酶片剂4g、正常饲料及饮水。连续饲喂7天，称重残留饲料量并计算每组大鼠日均取食量，以验证产品对模型大鼠消化情况的影响，结果如图1所示。

由图1可知，随着饲喂时间的进行，空白处理组大鼠进食量与第1天相比无明显变化。但对照组和处理组，随着饲养时间的进行，进食量日渐恢复，表明消化不良逐渐解除，同时处理组进食恢复情况优于对照组，表明本发明制备的溶栓酶片剂对大鼠消化不良解除速度优于健胃消食片。

实施例9

本发明实施例9提供一种验证本发明实施例2所制备的溶栓酶片剂不同服用量在改善小鼠消化不良功效上的方法。

选取30只功能性消化不良模型大鼠，雌雄各半，体重175±10g，分成3组，每组10只，单只单笼饲养。其中第一组为空白组，给予正常饲料及及饮水；第二组、第三组为处理组，给予饲料及饮水，同时第二组每天灌胃2g本发明实施例2所制产品，第三组每天灌胃4g本发明实施例2所制产品。连续饲喂7天，称重残留饲料量并计算每只组大鼠日均取食量，以验证不用服用量产品对模型大鼠消化情况的影响，结果如图2所示。

从图2可以看到，当小鼠服药量减到一半时，本发明制备的溶栓酶片剂对改善小鼠消化不良状况仍然具有较好的功效。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求的保护范围为准。