1.本发明涉及食欲素受体拮抗抑制用组合物。此外本发明还涉及抑制食欲素与其受体(食欲素受体)结合的方法等。
背景技术：
：：2.食欲素是由存在于下丘脑外侧区的神经细胞所产生的神经肽。食欲素受体是食欲素特异性受体，食欲素作用于食欲素受体时，可发挥提高动物的觉醒程度，增加摄食量等作用。因此具有抑制食欲素与其受体结合作用(食欲素受体拮抗抑制作用)的物质，也被期待具有抑制觉醒状态的作用等。3.专利文献1中记载有，作为食欲素受体拮抗剂而使用的化合物。此外作为食欲素受体拮抗抑制剂已知苏沃雷生(suvorexant)。但是尚不知晓为来自天然的化合物且具有食欲素受体拮抗抑制作用的化合物。4.专利文献5.专利文献1：日本特开2018‑135349号公报技术实现要素：6.本发明的目的在于提供可抑制食欲素与其受体结合的新型食欲素受体拮抗抑制用组合物。此外，本发明的目的还在于提供抑制食欲素与其受体结合的方法。7.本发明者们为解决上述课题进行了深入研究，结果发现吡咯喹啉醌或其盐具有优异的食欲素受体拮抗抑制作用。吡咯喹啉醌是包含于多种食用植物中的化合物，认为即使长时间摄取其安全性也高。8.即，本发明涉及以下的食欲素受体拮抗抑制用组合物等。9.[1]一种食欲素受体拮抗抑制用组合物，其特征在于，含有吡咯喹啉醌或其盐作为有效成分。[0010][2]根据上述[1]所述的食欲素受体拮抗抑制用组合物，其特征在于，吡咯喹啉醌的盐为吡咯喹啉醌的钠盐。[0011][3]根据上述[1]或[2]中所述的食欲素受体拮抗抑制用组合物，其特征在于，为饮食品。[0012][4]根据上述[1]～[3]中任一项所述的食欲素受体拮抗抑制用组合物，其特征在于，附有由食欲素受体拮抗作用所发挥的功能的标示。[0013][5]一种抑制食欲素与其受体结合的方法，其特征在于，投用吡咯喹啉醌或其盐。[0014][6]一种吡咯喹啉醌或其盐的应用，其特征在于，用于抑制食欲素与其受体的结合。[0015]根据本发明，可提供能抑制食欲素与其受体结合的新型食欲素受体拮抗抑制用组合物。由于本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物具有优异的食欲素受体拮抗抑制作用，且含有安全性高的物质作为有效成分，因此作为饮食品、医药品等而有用。此外，根据本发明，也提供抑制食欲素与其受体结合的方法。附图说明[0016]图1是表示阴性对照组(n.c.)、阳性对照组(p.c.)及吡咯喹啉醌二钠盐添加组(pqq)中的酶活性的图表。[0017]图2是表示阴性对照组(n.c.)、阳性对照组(p.c.)及吡咯喹啉醌二钠盐添加组(pqq)中的脱氢酶活性的图表。具体实施方式[0018]本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物含有吡咯喹啉醌或其盐作为有效成分。[0019]食欲素被鉴定为食欲素a和食欲素b，其产生于下丘脑外侧区。食欲素受体中存在食欲素1受体及食欲素2受体的2种亚型。本发明中的食欲素受体包含任一种亚型，优选食欲素2受体。在一种方式中，本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物适合用于抑制食欲素a与食欲素2受体的结合。[0020]吡咯喹啉醌为氧化还原辅酶。由于吡咯喹啉醌或其盐存在于植物、细菌、动物等多种生物体内，因此可从多种生物中提取来制备。吡咯喹啉醌或其盐也可以使用市售品。在本发明中，只要能产生本发明的效果，可以使富含吡咯喹啉醌或其盐的来自植物的原料等含有于本发明的组合物中。[0021]作为吡咯喹啉醌的盐，优选可用于饮食品、医药品等的盐，例如可列举钠盐、钾盐等碱金属盐；钙盐、镁盐等碱土金属盐等。在盐中，优选钠盐。[0022]吡咯喹啉醌的盐中的盐的取代数为1～3，优选为2。吡咯喹啉醌的盐可以为1种，也可以为2种以上。作为吡咯喹啉醌的盐，优选吡咯喹啉醌的二钠盐。[0023]如后述的实施例所示，吡咯喹啉醌或其盐具有抑制食欲素与食欲素受体结合的作用。因此吡咯喹啉醌或其盐作为食欲素受体拮抗剂而起作用。吡咯喹啉醌或其盐，可用于在对象中抑制食欲素与其受体的结合。[0024]吡咯喹啉醌或其盐包含于天然物质或饮食品中，是具有食用经验的化合物。因此从安全性的观点出发，例如认为吡咯喹啉醌或其盐即使每日摄取问题也较少。根据本发明，可提供含有安全性高的成分作为有效成分的食欲素受体拮抗抑制用组合物。[0025]本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物可适用于治疗性用途(医疗用途)或非治疗性用途(非医疗用途)的任一种。所谓非治疗性是指不包含医疗行为，即不包含人类的手术、治疗或诊断的概念。[0026]本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物可制成饮食品、医药、医药部外品、饲料等形式。本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物，其自身可以是用于食欲素受体拮抗抑制的饮食品、医药、医药部外品、饲料等，也可以是调配至上述中而使用的原料或制剂等。[0027]本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物，作为一例，可以制剂的形式来提供，但并不仅限于本形式。可以将该制剂直接作为组合物，或者，也可以作为包含该制剂的组合物来提供。在一种方式中，本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物也可称作食欲素受体拮抗抑制剂。[0028]从充分获得本发明的效果的观点出发，本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物优选为口服用组合物。作为口服用组合物，可列举饮食品、口服用的医药、医药部外品、饲料，优选为饮食品或口服用医药，更优选为饮食品。[0029]就本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物而言，只要不损害本发明的效果，除本发明中的有效成分(吡咯喹啉醌或其盐)之外，可以含有任意的添加剂，任意的成分。这些添加剂及成分可根据组合物的形式等进行选择，一般而言可使用能够用于饮食品、医药、医药部外品、饲料等的物质。将本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物制成饮食品、医药、医药部外品、饲料等时，其制造方法无特别限定，可通过一般的方法制造。[0030]例如将本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物制成饮食品时，可向本发明中的有效成分中，调配能用于饮食品中的成分(例如，食品原料，根据需要所使用的食品添加物等)，而制成多种饮食品。饮食品无特别限定，例如可列举一般的饮食品、健康食品、健康饮料、功能性标示食品、特定保健用食品、患者用饮食品等。上述健康食品、功能性标示食品、特定保健用食品等，例如可作为细粒剂、片剂、颗粒剂、散剂、胶囊剂、咀嚼剂、糖浆剂、液剂、流食等的各种制剂形式来使用。[0031]将本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物制成医药或医药部外品时，例如，可向本发明中的有效成分中，调配药理学上所允许的载体，根据需要所添加的添加剂等，而制成各种剂型的医药或医药部外品。这种载体、添加剂等只要是能用于医药或医药部外品的物质，且是药理学上所允许的物质即可，例如赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、抗氧化剂、着色剂等的1或2种以上。作为医药或医药部外品的投用(摄取)形式，可列举口服或非口服(经皮、经粘膜、经肠、注射等)，但从更充分地获得本发明的效果的观点出发，优选口服投用。将本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物制成医药或医药部外品时，优选制成口服用医药或医药部外品。作为用于口服投用的剂型，可列举液剂、片剂、散剂、细粒剂、颗粒剂、糖衣片、胶囊剂、悬浮液、乳剂、咀嚼剂等。医药也可以是非人动物用医药。[0032]将本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物制成饲料时，只要将本发明中的有效成分调配至饲料中即可。饲料中还包含饲料添加剂。作为饲料，例如可列举牛、猪、鸡、羊、马等所用的家畜用饲料；兔、大鼠、小鼠等所用的小动物用饲料；狗、猫、小鸟等所用的宠物食品等。[0033]本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物中所含的吡咯喹啉醌或其盐的含量无特别限定，可根据其形式等进行设定。[0034]本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物中的吡咯喹啉醌或其盐的含量，作为吡咯喹啉醌，例如在组合物中优选为0.0001重量％以上，更优选为0.001重量％以上，此外，优选为90重量％以下，更优选为50重量％以下。在一种方式中，就吡咯喹啉醌或其盐的含量而言，作为吡咯喹啉醌，在食欲素受体拮抗抑制用组合物中优选0.0001～90重量％，更优选0.001～50重量％。在另一种方式中，就吡咯喹啉醌或其盐的总含量而言，在食欲素受体拮抗抑制用组合物中可以为0.0001～97重量％，也可以为0.001～55重量％。在一种方式中，将本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物制成饮食品、医药、医药部外品、饲料等时，优选将吡咯喹啉醌或其盐的含量设成上述范围。[0035]本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物可通过对应其形式的适当方法摄取或投用。从充分获得本发明的效果的观点出发，本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物优选口服摄取(口服投用)。[0036]本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物的摄取量(也可称投用量)无特别限定，只要是能够获得抑制食欲素与食欲素受体结合的效果的量(有效量)即可，可根据投用形式、投用方法适当设定。[0037]在一种方式中，以人(成年人)为对象使其口服摄取或投用食欲素受体拮抗抑制用组合物时，就吡咯喹啉醌或其盐的摄取量而言，作为吡咯喹啉醌，体重为60kg时每1日的摄取量优选为1～200mg，更优选为5～60mg。优选1日1次以上，例如分1日1次～数次(例如2～3次)来摄取上述量。[0038]本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物，通过抑制食欲素与食欲素受体的结合而对于有望预防或改善的症状或疾病的预防或改善有用。已知食欲素与睡眠觉醒、摄食行为、情绪有所关联。此外报告有食欲素与失眠症、高血糖、阿尔茨海默症等症状或疾病有关。例如报告有，通过摄取食欲素受体拮抗抑制剂即苏沃雷生，可缩短睡眠等待时间，缩短客观性中途觉醒时间，增加总睡眠时间，提高睡眠效率(sleep.2013feb1；36(2):259‑267.)。此外已知苏沃雷生具有糖负荷试验时的血糖值上升抑制效果(endocrinology.2016nov；157(11):4146‑4157.epub2016sep15.)。此外报告有，在小鼠中，因睡眠不足及食欲素肽的注入会导致β‑淀粉样蛋白水平上升(science.2009nov13；326(5955):1005‑1007.)。另一方面，β‑淀粉样蛋白水平、老年斑的形成，在淀粉样前体蛋白基因突变的小鼠中，因食欲素受体拮抗剂即阿莫伦特(almorexant)的注入而减少。此外，在上述基础上，也暗示通过拮抗抑制食欲素受体，有获得抗肥胖、抑制食欲、抗抑郁、抗焦虑作用的可能性。因此，如果摄取或投用本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物，通过食欲素受体拮抗抑制作用，例如，可期待获得改善睡眠(例如，缩短睡眠等待时间，缩短中途觉醒时间，减少中途觉醒次数等的睡眠质量的改善)，预防或改善血糖值异常，预防或改善阿尔兹海默症等的效果。通过改善睡眠，例如可预防或改善睡眠障碍。[0039]本说明书中症状或疾病的预防包含，防止症状或疾病的发病，延迟症状或疾病的发病，降低症状或疾病的发病率，减轻症状或疾病的发病风险等。症状或疾病的改善包含，使对象从症状或疾病中恢复，缓和症状或疾病，延迟或防止症状的恶化或疾病的发展。恢复包含至少部分的恢复。[0040]摄取或投用本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物的对象(也可称投用对象)无特别限定。优选人或非人哺乳动物，更优选人。[0041]作为摄取或投用本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物的对象，优选需要或希望抑制食欲素与其受体的结合的对象。作为这类对象，例如可列举有失眠、高血糖、阿尔兹海默症等症状的人等。本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物例如，以通过抑制食欲素与其受体的结合而有望预防或改善的症状或疾病的预防等为目的，也可以用于健康者。[0042]本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物中，可以附有由食欲素受体拮抗抑制作用所发挥的功能的标示。本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物中例如可以附有，“改善睡眠”、“改善血糖值”及“预防认知功能下降”等的1种或2种以上的功能的标示。[0043]在本发明的一种实施方式中，本发明的食欲素受体拮抗抑制用组合物优选为附有上述标示的饮食品。此外上述标示也可以为用于获得上述功能的内容的标示。[0044]本发明也包含以下的方法及应用。[0045]一种抑制食欲素与其受体结合的方法，其特征在于，投用吡咯喹啉醌或其盐。glucose,l‑glutamine,sodiumpyruvate,andsodiumbicarbonate,liquid,sterile‑filtered,suitableforcellculture)(sigma‑aldrich公司)。[0062](5)以最终浓度达到50nm的方式添加食欲素a，于5％co2、37℃的条件下孵育24小时。[0063](6)回收上清液。[0064](7)根据orexin2receptorreporterassaykit(caymanchemicalcompany)附属的实验指南，测定上清液的酶(seap)活性。[0065](8)在本试验中，将代替吡咯喹啉醌二钠盐添加苏沃雷生1μm的组设为阳性对照，将代替吡咯喹啉醌二钠盐添加二甲基亚砜(dmso)的组设为阴性对照。以各组n＝3进行试验。[0066]作为食欲素受体拮抗剂作用的指标，将以上述方法测定的酶(seap)活性的结果(平均±标准误差)示于图1。图1是表示阴性对照组(n.c.)、阳性对照组(p.c.)及吡咯喹啉醌二钠盐添加组(pqq)中的酶活性的图表。图1所示的结果以将阴性对照组的酶活性设为1而得的相对值来表示。[0067]在该评价系统中，食欲素受体拮抗剂作用越强酶活性越低。[0068]如图1所示，通过添加吡咯喹啉醌二钠盐100μg/ml，显示出与苏沃雷生1μm同等的食欲素受体拮抗剂作用。[0069]＜实施例2＞[0070]对于实施例1的吡咯喹啉醌二钠盐添加组，使用wst‑8cellproliferationassaykit(caymanchemicalcompany)，测定吡咯喹啉醌二钠盐添加后的细胞增殖。测定方法依据附属的实验指南。已知脱氢酶活性与活细胞的数量成正比。该试剂盒为利用此原理，测定从细胞释放至培养基中的脱氢酶活性的试剂盒。针对实施例1的阴性对照组及阳性对照组，也以相同的方法测定dmso或苏沃雷生添加后的细胞增殖。[0071]图2是表示阴性对照组(n.c.)、阳性对照组(p.c.)及吡咯喹啉醌二钠盐添加组(pqq)中的脱氢酶活性的图表。结果(平均±标准误差)以将阴性对照组的脱氢酶活性设为1而得的相对值来表示。[0072]如图2所示，吡咯喹啉醌二钠盐添加组与阳性对照组、阴性对照组相比，细胞数并未减少。由此认为，实施例1中所观察到的因添加吡咯喹啉醌二钠盐所导致的酶活性的降低，并非是因为细胞死亡所造成，而是由对食欲素受体的拮抗剂作用所造成。当前第1页12当前第1页12