地西他滨和西达尿苷组合的固体口服剂型的制作方法

地西他滨和西达尿苷组合的固体口服剂型
1.优先权声明
2.本技术要求于2020年2月25日提交的美国临时申请序列号62/981,304的权益，其全部内容通过援引并入本文。
技术领域
3.本发明涉及包括西达尿苷和地西他滨的固体口服剂型。更具体地，本发明涉及包括西达尿苷和地西他滨的固定剂量组合的固体口服剂型，其中该剂型提供的药代动力学和/或药效学作用等同于通过静脉内注射地西他滨所获得的药代动力学和/或药效学作用。


背景技术：

4.在人和其他生物体中，腺苷脱氨酶(ada，ec 3.5.4.4)和胞苷脱氨酶(cda,ec 3.5.4.5)分别用于对天然的氨基嘌呤和氨基嘧啶核苷进行脱氨基。它们也可以将基于核苷的活性药物转化为非活性的代谢物。cda是嘧啶补救途径的组分。它通过水解脱氨分别将胞苷和脱氧胞苷转化为尿苷和脱氧尿苷(arch.biochem.biophys.1991,290,285-292；methods enzymol.1978,51,401-407；biochem.j.1967,104,7p)。它也使一些临床上有用的药物的合成胞嘧啶类似物脱氨基(cancer chemother.pharmacol.1998,42,373-378；cancer res.1989,49,3015-3019；antiviral chem.chemother.1990,1,255-262)。胞嘧啶化合物转化为尿苷衍生物通常赋予治疗活性的丧失或副作用的增加。也已经证明对胞嘧啶类似物药物获得抗性的癌症通常过度表达cda(leuk.res.1990,14,751-754)。表达高水平cda的白血病细胞可以表现出对胞嘧啶抗代谢物的抗性，并且因此限制这类治疗剂的抗肿瘤活性(biochem.pharmacol.1993,45,1857-1861)。cda在肠道和肝脏中也高度表达，并且因此可以影响治疗性胞苷类似物的生物利用度。
5.地西他滨(5-氮杂-2'-脱氧胞苷)，一种胞苷类似物，是一种抗肿瘤药剂和低甲基化剂(hma)，用于治疗骨髓增生异常综合征(mds)，也对治疗急性髓细胞性白血病和慢性髓细胞性白血病具有潜在用途。当口服给药时，由于通过cda快速失活，导致地西他滨不是容易地生物可利用的。
[0006][0007]
西达尿苷((4r)-2
’‑
脱氧-2’,2
’‑
二氟-3,4,5,6-四氢尿苷；又称为e7727)是最近
开发的cda抑制剂。西达尿苷及其制备和/或使用方法在美国专利号8,268,800和9,834,576中被进一步公开，其全部内容通过援引并入本文。
[0008][0009]
由于地西他滨在口服给药时的生物利用度不足，目前使用地西他滨的治疗方法需要在5-7天、几个月或甚至几年中每天经肠胃外注射。口服可生物利用的地西他滨剂型能够减轻每月、多天的静脉输注或者皮下注射的负担，其有时涉及为了就诊的长途旅行。


技术实现要素：

[0010]
本发明部分地基于开发地西他滨和西达尿苷的固体口服剂型，其中，该固体口服剂型在每日给药至受试者后提供地西他滨的血浆水平，其中地西他滨的5天曲线下面积(auc)等同于每日以一小时输注给药的20mg/m2静脉内(iv)剂量的地西他滨的5天auc。在一些实施方式中，在每日给药这样的固体口服剂型至受试者后，地西他滨的第2天与第1天的auc的比率是约1.5:1至约2:1。
[0011]
本发明的另一方面涉及包括地西他滨和西达尿苷的固体口服剂型，其中，该固体口服剂型在每日给药至受试者后提供的药效学作用等同于每日以一小时输注给药的20mg/m2静脉内剂量的地西他滨的药效学作用。在特定的实施方式中，所述药效学作用是dna脱甲基化。
[0012]
本发明的另外方面涉及用于治疗有此需要的受试者中的疾患的方法，包括向受试者给药根据本发明的实施方式的固体口服剂型，从而治疗受试者的癌症。在一些实施方式中，所述疾患是癌症。
[0013]
本发明的进一步方面涉及用于抑制有此需要的受试者中的地西他滨的降解的方法，包括向受试者给药根据本发明的实施方式的固体口服剂型，从而抑制受试者中的地西他滨的降解。
[0014]
本发明的另一方面涉及降低有此需要的受试者中的dna甲基化(例如，line-1甲基化)的方法，包括向受试者给药根据本发明的实施方式的固体口服剂型，从而降低受试者中的dna甲基化。
[0015]
本发明的另外方面涉及根据本发明的实施方式的固体口服剂型在用于治疗疾患的方法、用于抑制地西他滨的降解的方法和减少dna甲基化(例如，line-1甲基化)的方法中的用途。
[0016]
本发明的这些和其他方面在以下发明描述中更详细地阐述。
附图说明
[0017]
图1是描述旨在确定西达尿苷和地西他滨的推荐剂量的1期剂量递增研究图。
[0018]
图2是图1中所描述的1期研究中几种给药方案的地西他滨平均浓度(ng/ml)随时间(h)变化的图。
[0019]
图3是描述2期随机交叉研究的图，其旨在确定图1的1期研究中认定的西达尿苷和地西他滨的剂量。
[0020]
图4示出了在图3中描述的2期研究中口服地西他滨/西达尿苷和iv地西他滨在第1、2和5天的平均地西他滨auc
0-24
(h
·
ng/ml)。
[0021]
图5a和5b示出了在图3中描述的2期研究中，astx727(周期1)至iv地西他滨(周期2)的顺序的相对line-1甲基化(％)。图5a提供astx727疗程的相对line-1进展，并且图5b提供iv地西他滨疗程的相对line-1进展。
[0022]
图6a和6b示出了在图3中描述的2期研究中，iv地西他滨(周期1)至astx727(周期2)的顺序的相对line-1甲基化(％)。图6a提供iv地西他滨疗程的相对line-1进展，并且图6b提供astx727疗程的相对line-1进展。
[0023]
图7是描述3期随机交叉研究的图，其旨在确定astx727口服剂型的与iv地西他滨的等效性、功效、安全性和最大line-1脱甲基化。
[0024]
图8示出了图7中描述的3期研究中的口服astx727和iv地西他滨的pk分析。图8示出了口服astx727在第1、2和5天的血浆地西他滨auc
0-24
(h
·
ng/ml)，以及iv地西他滨在第1和5天的auc
0-24
(h
·
ng/ml)。
[0025]
图9提供了如图7中描述的在周期1和周期2期间口服astx727和iv地西他滨两者的最大line-1脱甲基化lsm(95％ci)。
具体实施方式
[0026]
下面更详细地解释本发明。本说明书并不旨在成为本发明可以被实施的所有不同方式或可以添加至本发明的所有特征的详细目录。例如，关于一种实施方式说明的特征可以并入其他实施方式中，并且关于某一特定实施方式说明的特征可以从该实施方式中删除。此外，对本文提示的各种实施方式的众多变化和添加，根据本公开对于本领域人员来说是显而易见的，这些变化和添加不背离本发明。因此，以下说明书旨在说明本发明的一些特定的实施方式，并且并非详尽地说明其所有排列、组合和变化。
[0027]
除非上下文另有说明，否则本文描述的本发明的各种特征特别旨在可以以任何组合使用。此外，本发明还考虑在本发明的一些实施方式中，可以排除或省略本文阐述的任何特征或特征组合。为了说明，如果说明书陈述复合物包括组分a、b和c，则特别意指a、b或c中的任一种或其组合可以单独或以任何组合被省略和放弃。
[0028]
除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的技术人员通常理解的相同含义。本文中本发明的描述中使用的术语仅用于描述具体实施方式的目的，并不旨在限制本发明。
[0029]
本文提及的所有出版物、专利申请、专利、核苷酸序列、氨基酸序列和其他参考文献，其全部内容通过援引并入本文。
[0030]
定义
[0031]
如在本发明的说明书和所附权利要求中使用的，单数形式“一/多个/种(a)”、“一/多个/种(an)”和“该/所述(the)”也旨在包括复数形式，除非上下文另有明确规定。
[0032]
如本文所用，“和/或”是指并涵盖一个或多个相关列出的项目的任何和所有可能的组合，以及当解释为可替代方案(“或”)时缺少组合。
[0033]
此外，本发明还考虑在本发明的一些实施方式中，可以排除或省略本文阐述的任何特征或特征组合。
[0034]
此外，当提及可测量值，诸如本发明的化合物或试剂的量、剂量、时间、温度等时，如本文所用，术语“约”意指涵盖特定量的
±
10％、
±
5％、
±
1％、
±
0.5％或甚至
±
0.1％的变化。
[0035]
如本文所用，过渡短语“基本上由
……
组成”应解释为涵盖所述的材料或步骤以及不实质地影响所要求保护的发明的一种或多种基本并且新颖的特征的那些。因此，如本文所用，术语“基本上由
……
组成”不应当解释为与“包括”等同。
[0036]“有效量”是指产生预期效果(例如，增强cda底物药物的半衰期、生物利用度或功效，治疗受试者的癌症，降低受试者的dna甲基化，抑制受试者的胞苷脱氨酶，或抑制cda底物药物被胞苷脱氨酶降解)所需要的量。
[0037]“auc”是指活性剂诸如地西他滨的浓度时间曲线下的面积。
[0038]“半衰期”是指受试者中的化合物的浓度或量降低至给定浓度或量的恰好一半所需要的时间。
[0039]“药学上可接受的”是指，对于患者从药学和/或毒理学的观点来看，和/或对于生产药物的化学家从关于组合物、制剂、稳定性、患者接受度、生物利用度和与其他成分的相容性的方面的物理和/或化学的观点来看，可以接受的性质和/或物质。
[0040]“药学上可接受的盐”是指本发明的化合物的酸或碱盐，该盐具备期望的药理学活性并且不是生物或其他方面所不期望的。该盐可以用酸形成，包括但不限于，乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙烷-磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、草酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。碱盐的实例包括但不限于铵盐、碱金属盐诸如钠盐和钾盐、碱土金属盐诸如钙盐和镁盐、有机碱的盐诸如二环己基胺盐、n-甲基-d-葡糖胺和氨基酸诸如精氨酸和赖氨酸的盐。在一些实施方式中，碱基含氮基团可以用试剂季铵化，所述试剂包括低卤代烃诸如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物；二烷基硫酸盐诸如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸盐；长链卤化物诸如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂酰基氯化物、溴化物和碘化物；以及芳烷基卤化物诸如苯乙基溴化物。
[0041]“单位剂型”是指适合作为人或其他动物受试者的单一剂量的物理上的离散单位。各单位剂型可包含经计算以产生预期效果的预定量的活性物质(例如，本发明的化合物或组合物，cda底物药物和/或其他治疗剂)。
[0042]“任选的”或“任选地”是指后续描述的事件或情况可以发生或可以不发生，并且该描述包括其中所述事件或情况发生的例子和不发生的例子。例如，“任选地取代”的烷基涵盖未取代的烷基和取代的烷基两者。
[0043]
术语“增强”或“增加”是指特定参数增加至少约1.25倍、1.5倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、8倍、10倍、12倍、15倍等。
[0044]
如本文所用，术语“抑制”或“降低”或其语法变化是指所指定的水平或活性减小或减少至少约15％、25％、35％、40％、50％、60％、75％、80％、90％、95％或以上。在特定的实施方式中，抑制或降低导致很少或基本上没有可检测到的活性(最多，微不足道的量，例如，小于约10％或甚至5％)。
[0045]“受试者”是指细胞或组织、体外或体内、动物或人。动物或人受试者也可以称为“患者”。
[0046]“动物”是指具有感觉和自愿运动能力的活生物体，并且其生存需要氧气和有机食物。
[0047]“哺乳动物”是指具有毛发或毛皮的温血脊椎动物。实例包括但不限于人、马、猪、牛、鼠、犬或猫物种的成员。
[0048]
术语“治疗(treat)”、“治疗(treating)”或“治疗(treatment of)”(或语法上等同术语)意指降低或至少部分改善或减轻受试者的病症的严重程度，和/或达成至少一种临床症状的某种缓和、减轻或减少。关于疾病、疾患或病症的“治疗”可以指：(i)抑制疾病、疾患或病症，例如，阻止其发展；和/或(ii)缓解疾病、疾患或病症，例如，使得临床症状消退。
[0049]
关于疾病、疾患或病症的“预防”是指预防疾病、疾患或病症，例如，使得该疾病、疾患或病症的临床症状不发展。如本文所用，术语“预防(prevent)”、“预防(prevents)”或“预防(prevention)”(及其语法等同物)也可以指延迟疾病或疾患的发作，或在该疾病或疾患发作时减轻症状。该术语不意为暗示疾病的完全去除并且涵盖降低病症的发病率或延迟病症的发作和/或进展的任何类型的预防性治疗。
[0050]
术语向受试者“给药(administering)”或“给药(administration)”本发明的化合物和/或组合物包括向受试者引入或递送化合物以发挥其预期功能的途径。对于本发明的固体口服剂型，给药方法旨在为口服。将固体口服剂型的药代动力学和药效学与静脉内给药地西他滨所获得的药代动力学和药效学进行了比较，地西他滨通常经由输注提供。当述及输注给药超过一(1)小时时，其意指在该时间周期内给药包括所述浓度的地西他滨的溶液。给药包括自我给药和他人给药。
[0051]“癌症”是指细胞的异常生长，其倾向于以不受控制的方式增殖，并且在一些情况下，倾向于转移(扩散)。特定癌症类型包括但不限于公开号us 2006/0014949中认定的癌症及以下癌症：心脏的：肉瘤(例如，诸如血管肉瘤、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、脂肪肉瘤等)、粘液瘤、横纹肌瘤、纤维瘤、脂肪瘤和畸胎瘤；肺的：支气管癌(例如，诸如鳞状细胞、未分化小细胞、未分化大细胞、腺癌等)、肺泡的(例如，诸如细支气管)癌、支气管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、软骨瘤性错构瘤、间皮瘤；胃肠道的：食道(例如，诸如鳞状细胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤等)、胃(例如，诸如癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤等)、胰腺(例如，诸如导管腺癌、胰岛素瘤、胰高血糖素瘤、胃泌素瘤、类癌瘤、舒血管肠肽瘤等)、小肠(例如，诸如腺癌、淋巴瘤、类癌瘤、卡波氏肉瘤(kaposi’s sarcoma)、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神经纤维瘤、纤维瘤等)、大肠(例如，诸如腺癌、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、错构瘤、平滑肌瘤等)；泌尿生殖道：肾脏(例如，诸如腺癌、维尔姆斯瘤(wilm's tumor)肾母细胞瘤、淋巴瘤、白血病等)、膀胱和尿道(例如，诸如鳞状细胞癌、移行细胞癌、腺癌等)、前列腺(例如，诸如腺癌、肉瘤)、睾丸(例如，例如精原
细胞瘤、畸胎瘤、胚胎性癌、畸胎癌、绒毛膜癌、肉瘤、间质细胞癌、纤维瘤、纤维腺瘤、腺瘤样瘤、脂肪瘤等)；肝：肝癌(例如肝细胞癌等)、胆管癌、肝母细胞瘤、血管肉瘤、肝细胞腺瘤、血管瘤；骨：骨原性肉瘤(例如，诸如骨肉瘤等)、纤维肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、软骨肉瘤、尤文氏肉瘤(ewing’s sarcoma)、恶性淋巴瘤(例如，诸如网状细胞肉瘤)、多发性骨髓瘤、恶性巨细胞瘤脊索瘤、骨软骨瘤(例如，诸如骨软骨外生骨疣)、良性软骨瘤、成软骨细胞瘤、软骨粘液纤维瘤、骨样骨瘤和巨细胞瘤；神经系统：颅骨(例如，诸如骨瘤、血管瘤、肉芽肿、黄色瘤、畸形性骨炎等)、脑膜(例如，诸如脑膜瘤、脑膜肉瘤、神经胶质瘤等)、脑(例如，诸如星形细胞瘤、髓母细胞瘤、胶质瘤、室管膜瘤、生殖细胞瘤[松果体瘤]、多形性胶质母细胞瘤、少突神经胶质瘤、神经鞘瘤、视网膜母细胞瘤、先天性肿瘤等)、脊髓(例如，诸如神经纤维瘤、脑膜瘤、胶质瘤、肉瘤等)；妇科：子宫(例如，诸如子宫内膜癌等)、子宫颈(例如，诸如宫颈癌、瘤前宫颈不典型增生等)、卵巢(例如，诸如卵巢癌[浆液性囊腺癌、粘液性囊腺癌、未分类癌]、颗粒-膜细胞瘤、塞莱二氏细胞瘤(sertoli-leydig cell tumor)、无性细胞瘤、恶性畸胎瘤等)、外阴(例如，诸如鳞状细胞癌、上皮内癌、腺癌、纤维肉瘤、黑色素瘤等)、阴道(例如，诸如透明细胞癌、鳞状细胞癌、葡萄状肉瘤(胚胎性横纹肌肉瘤)、输卵管(癌)等)；血液的：血液(例如，诸如骨髓性白血病[急性和慢性]、急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、骨髓增生性疾病、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征等)、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤；皮肤：恶性黑色素瘤、基底细胞癌、鳞状细胞癌、卡波氏肉瘤、痣发育不良性痣、脂肪瘤、血管瘤、皮肤纤维瘤、瘢痕瘤、牛皮癣等；以及肾上腺：神经母细胞瘤。
[0052]
固体口服剂制剂
[0053]
本发明提供包括地西他滨和西达尿苷的固体口服剂型。该固体口服剂型被称为astx727并作为销售，用以治疗骨髓增生异常综合征。先前，已示出在给药口服剂量的地西他滨之前给药口服剂量的西达尿苷增强了地西他滨的暴露。然而，鉴于地西他滨的低生物利用度和一般口服给药相比于静脉内给药的生物利用度降低，因此，预期包括地西他滨和西达尿苷的固体口服剂型具有比静脉内注射地西他滨显著更低的生物利用度。出乎意料地，本发明的发明人已发现，固体口服剂型在每日给药至受试者(例如，人)后提供地西他滨的血浆水平，其中地西他滨的5天曲线下面积(auc)等同于每日以一小时输注给药的20mg/m2静脉内(iv)剂量的地西他滨的5天auc。另外，本发明的发明人已发现，在ipss-低危和ipss-中危-1骨髓增生异常综合征(mds)癌症患者中，相对于那些用iv地西他滨获得的，地西他滨和西达尿苷组合的固体口服剂型具有等同或改进的表观遗传效应(例如，line-1脱甲基化，例如，f细胞扩增％)和/或降低的骨髓抑制效应(例如，中性粒细胞减少)。如本文所用，术语“等同”是指相对参考值变化小于10％的值，例如，小于10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％或1％。
[0054]
因此，根据本发明的实施方式提供包括地西他滨和西达尿苷两者的固体口服剂型。如本文所用，术语“地西他滨”和“西达尿苷”包括化合物本身及其任何药学上可接受的盐。在本发明的一些实施方式中，提供包括地西他滨和西达尿苷的固体口服剂型，其中，该固体口服剂型在每日给药至受试者后提供地西他滨的血浆水平，其中地西他滨的5天auc等同于每日以一小时(1h)输注给药的20mg/m
2 iv剂量的地西他滨的5天auc。在本发明的一些实施方式中，在向受试者每日给药后，地西他滨的第2天与第1天的auc(auc
0-24
)的比率为约1.5:1至约2:1，例如，约1.5:1至约1.8:1，例如，约1.7:1至约2:1，例如，约1.5:1、1.6:1、
1.7:1、1.8:1、1.9:1或2:1。
[0055]
使用主要终点pk分析集(primary endpoint pk analysis set)以计算给药固体剂型后的地西他滨5天累积auc
0-t
暴露。使用下列假定：
[0056]
1)在给药固体剂型的第2天达成稳定状态；
[0057]
2)基于第2天的稳定状态达成，来自第2天和第5天的地西他滨auc
0-t
代表在给药固体剂型的假定的5天中第2天至第5天的每日auc
0-t
。
[0058]
因此，为使用来自3天连续pk采样的pk数据计算总体5天口服地西他滨auc
0-t
暴露，将第1天auc
0-t
(第一固体剂型剂量)加上(第2天auc
0-t
+第5天auc
0-t
)
×
2。若第2天的auc
0-t
不可用，则将其替换成第5天的auc
0-t
；反之亦然。
[0059]
为计算在iv地西他滨后的地西他滨5天auc
0-t
暴露，基于处方信息(处方信息2014)，即对于5天输注，相比第1天在第5天没有累积，将(第1天auc
0-t
+第5天auc
0-t
)/2乘以5。若第1天的auc
0-t
不可用，则将其替换成第5天的auc
0-t
；反之亦然。注意t＝24hr，因此auc
0-t
为auc
0-24
。
[0060]
在本发明的一些实施方式中，该固体口服剂型在每日给药至受试者后提供的药效学作用等同于每日以一小时(1h)输注给药的20mg/m2静脉内剂量的地西他滨的药效学作用。药效学作用的类型包括现在已知或之后发现的任何作用。在特定实施方式中，所述药效学作用是dna脱甲基化。
[0061]
包括地西他滨和西达尿苷的药物组合物(例如，化合物、组合物、药物和/或治疗剂)作为固体口服剂型提供，意指所述药物组合物呈固体形式并且配制用于口服给药。可以使用任何合适的固体口服剂型。根据本发明的实施方式的固体口服剂型的实例包括片剂(例如，那些针对颊、舌下和全身吸收的)、囊片、丸剂、散剂、颗粒、适用于舌头的糊剂、包括硬质明胶胶囊和软质明胶胶囊的胶囊、口腔喷雾剂、糖锭剂、锭剂和小丸。药物组合物可配制用于即时、持续或控制释放。
[0062]
本发明的药物组合物可使用已知材料和技术制备，其可包括但不限于混合和/或共混地西他滨和西达尿苷与药学上可接受的赋形剂。
[0063]
在本发明的一些实施方式中，固体口服剂型包括在约30:100至约40:100(例如，约35:100)的范围内的重量比的地西他滨和西达尿苷。
[0064]
在本发明的一些实施方式中，固体口服剂型是包括约35mg地西他滨的单位剂型。在本发明的一些实施方式中，固体口服剂型是包括约100mg西达尿苷的单位剂型。此外，在一些实施方式中，固体口服剂型是包括约35mg地西他滨和约100mg西达尿苷的单位剂型。在本发明的一些实施方式中，该单位剂型包括约35mg地西他滨和约100mg西达尿苷和至少一种药学上可接受的赋形剂。
[0065]“药学上可接受的赋形剂”可以意指本身非治疗剂的任何物质，用作载剂、稀释剂、佐剂、粘结剂和/或负载体以将治疗剂递送至受试者，或添加至药物组合物以改善其处理或储存性质，或允许或促进化合物或组合物形成单位剂型用于给药。药学上可接受的赋形剂是药学领域中众所周知的，并且描述于，例如《雷明顿药物科学》，马克出版有限公司，宾夕法尼亚州伊斯顿(例如，第20版，2000年)，以及《药用辅料手册》，美国制药协会，华盛顿特区(例如，第1版、第2版和第3版，分别为1986年、1994年和2000年)。如本领域技术人员将已知，
赋形剂可提供各种功能并且可以描述为，例如，润湿剂、缓冲剂、悬浮剂、润滑剂、乳化剂、崩解剂、吸收剂、防腐剂、表面活性剂、着色剂、调味剂和甜味剂。药学上可接受的赋形剂的实例包括但不限于：(1)糖，诸如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，诸如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(3)纤维素及其衍生物，诸如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、乙酸纤维素、羟丙基甲基纤维素(羟丙甲纤维素)和羟丙基纤维素；(4)粉末状黄芪胶；(5)麦芽；(6)明胶；(7)滑石；(8)赋形剂，诸如可可脂和栓剂蜡；(9)油，诸如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；(10)二醇，诸如丙二醇；(11)多元醇，诸如甘油、山梨糖醇、甘露醇和聚乙二醇；(12)酯，诸如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)琼脂；(14)缓冲剂，诸如氢氧化镁和氢氧化铝；(15)海藻酸；(16)无热原水；(17)等渗盐水；(18)林格氏溶液(ringer's solution)；(19)乙醇；(20)ph缓冲溶液；(21)聚酯、聚碳酸酯和/或聚酐；以及(22)药物制剂中采用的其他无毒可相容物质。
[0066]
稀释剂的实例包括乳糖、乳糖一水合物、纤维素、微晶纤维素、山梨糖醇、脱水磷酸氢钙和脱水硫酸钙。粘结剂的实例包括明胶、葡萄糖、乳糖、纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素(羟丙甲纤维素)、羟丙基纤维素、淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、藻酸钠、羧甲基纤维素和阿拉伯胶。崩解剂的实例包括交联羧甲基纤维素钠、交聚维酮、羟基乙酸淀粉钠和淀粉。助流剂的实例包括胶体二氧化硅、玉米淀粉和滑石。润滑剂的实例包括硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙、滑石、石蜡、月桂基硫酸钠、苯甲酸钠和聚乙二醇。
[0067]
在一些实施方式中，固体口服剂型包括稀释剂、粘结剂、崩解剂、助流剂和润滑剂中的一种或多种。在一些实施方式中，固体口服剂型包括稀释剂、粘结剂、崩解剂、助流剂和润滑剂。在本发明的特定实施方式中，固体口服剂型包括以下赋形剂：乳糖一水合物作为稀释剂；羟丙基甲基纤维素作为粘结剂；交联羧甲基纤维素钠作为崩解剂；胶体二氧化硅作为助流剂；以及硬脂酸镁作为润滑剂。在本发明的一些实施方式中，将这样的组分形成为片剂。在一些实施方式中，该片剂是即释片剂。另外，在特定实施方式中，该片剂用可着色的薄膜包覆。可以使用任何药学上可接受的包衣，但在一些实施方式中，该片剂用包衣进行包覆。
[0068]
在一些实施方式中，西达尿苷以约17-22％w/w的量存在于固体口服剂型中，例如，约17.0、17.2、17.4、17.6、17.8、18.0、18.2、18.4、18.6、18.8、19.0、19.2、19.4、19.6、19.8、20.0、20.2、20.4、20.6、20.8、21.0、21.2、21.4、21.6、21.8或22.0％w/w或其中的任何范围，例如，约19.42％w/w。
[0069]
在一些实施方式中，地西他滨以约4-8％w/w的量存在于固体口服剂型中，例如，约4.0、4.2、4.4、4.6、4.8、5.0、5.2、5.4、5.6、5.8、6.0、6.2、6.4、6.6、6.8、7.0、7.2、7.4、7.6、7.8或8.0％w/w或其中的任何范围，例如，约6.8％w/w。
[0070]
在一些实施方式中，稀释剂(例如，乳糖一水合物)以约55-70％w/w的量存在于固体口服剂型中，例如，约55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69或70％w/w或其中的任何范围，例如，约62.62％w/w。
[0071]
在一些实施方式中，粘结剂(例如，羟丙甲纤维素)以约1-3％w/w的量存在于固体口服剂型中，例如，约1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0、2.2、2.4、2.6、2.8或3.0％w/w或其中的任何范围，例如，约1.94％w/w。
[0072]
在一些实施方式中，崩解剂(例如，交联羧甲基纤维素钠)以约3-7％w/w的量存在
于固体口服剂型中，例如，约3.0、3.2、3.4、3.6、3.8、4.0、4.2、4.4、4.6、4.8、5.0、5.2、5.4、5.6、5.8、6.0、6.2、6.4、6.6、6.8或7.0％w/w或其中的任何范围，例如，约4.85％w/w。
[0073]
在一些实施方式中，助流剂(例如，胶体二氧化硅)以约0.5-2％w/w的量存在于固体口服剂型中，例如，约0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9或2.0％w/w或其中的任何范围，例如，约0.97％w/w。
[0074]
在一些实施方式中，润滑剂(例如，硬脂酸镁)以约0.1-2％w/w的量存在于固体口服剂型中，例如0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9或2.0％w/w或其中的任何范围，例如，约0.49％w/w。
[0075]
在一些实施方式中，固体口服剂型包括表2中列出的组分。
[0076]
表1
[0077][0078][0079]
在一些实施方式中，固体口服剂型包括表2中列出的组分。
[0080]
表2
[0081][0082]
本发明的另一方面涉及单位剂型和包括至少一个单位剂型的试剂盒，该单位剂型
包括地西他滨和西达尿苷。在一些实施方式中，试剂盒提供包括西达尿苷和地西他滨的单位剂型，其中在每日给药至受试者(例如，人)后，地西他滨的5天auc血浆水平等同于每日以一小时(1h)输注给药的20mg/m
2 iv剂量的地西他滨的5天auc。替代地或另外地，在一些实施方式中，提供包括单位剂型的试剂盒，该单位剂型包括地西他滨和西达尿苷，其中在每日给药至受试者(例如，人)后提供的药效学作用等同于每日以一小时(1h)输注给药20mg/m2的静脉内剂量的地西他滨的药效学作用。因此，该试剂盒可包括1、2、3、4、5或更多根据本发明的实施方式的固体口服剂型。在一些实施方式中，该试剂盒包括5、6或7个包括约35mg地西他滨和约100mg西达尿苷和至少一种药学上可接受的赋形剂的单位剂量片剂。
[0083]
试剂盒可进一步包括适用于商业销售的容器和/或包装。该容器可以是本领域已知的任何常规形状或形式，其由药学上可接受的材料制成，诸如纸或纸板盒、玻璃或塑料瓶或罐、可重复密封的袋子，或具有根据治疗方案用于挤出包装的单独剂量的泡罩包装。一个包装中可以一起使用一个以上的容器。例如，片剂可包含在泡罩包装中，而该泡罩包装包含在盒子中。在一些实施方式中，容器是瓶，例如，包含单位剂型(例如，约5单位剂型)的30-cc白色高密度聚乙烯瓶。该瓶可进一步包含干燥剂，例如，二氧化硅干燥剂筒。在一些实施方式中，容器是泡罩包装，例如，由箔盖上的铝箔形成，每个空腔包含一个片剂。泡罩包装可存在于纸盒中。
[0084]
试剂盒可进一步包括信息。可以在可读媒介上提供信息。可读媒介可以包括标签。信息可以直接面向医师、药师或患者。信息可以表明单位剂型可以引起一种或多种不良反应。信息可以包括诸如以本文所描述的方式给药单位剂型的说明。可以以多种方式提供这些说明。
[0085]
信息可以例如通过以下与容器相关联：书写在黏附地固定于容器的标签(例如，处方标签或单独标签)上；作为书面包装插页包括于容器内部；直接施加至该容器，诸如印刷在盒子或泡罩包装的壁上；或如通过捆缚或绑扎随附，例如作为经由线、绳或其他线、系索或栓绳型装置固定于瓶颈的说明卡。
[0086]
使用本发明的固体口服剂型的方法
[0087]
根据本发明的实施方式提供向受试者给药包括西达尿苷和地西他滨的固体口服剂型的方法。在特定实施方式中，提供向受试者给药包括地西他滨和西达尿苷的固体口服剂型的方法，其中，该固体口服剂型在每日给药至受试者(例如，人)后提供地西他滨的血浆水平，其中地西他滨的5天auc等同于每日以一小时(1h)输注给药的20mg/m
2 iv剂量的地西他滨的5天auc。在一些实施方式中，在每日给药至受试者后，第2天与第1天的地西他滨的auc的比率是约1.5:1至约2:1。在本发明的一些实施方式中，该方法包括向受试者给药包括地西他滨和西达尿苷的固体口服剂型，其中该固体口服剂型在每日给药至受试者后提供的药效学作用等同于每日以一小时(1h)输注给药20mg/m2的静脉内剂量的地西他滨的药效学作用。在特定实施方式中，所述药效学作用是dna脱甲基化。使用的固体口服剂型可以是本文描述的任何固体口服剂型。
[0088]
此外，提供了在有此需要的受试者中治疗用地西他滨可治疗的疾患的方法，包括向受试者给药根据本发明的实施方式的固体口服剂型，因而治疗受试者的疾患。在一些实施方式中，用地西他滨可治疗的疾患是过度增生性疾患，例如，癌症。该方法可用于治疗已知或之后发现地西他滨能有效治疗的任何癌症。在特定实施方式中，疾患是选自血液学癌
症和实体癌的癌症。血液学癌症的实例包括骨髓增生异常综合征(mds)、白血病(例如，急性淋巴细胞白血病(all)、急性髓细胞性白血病(aml)、慢性髓细胞性白血病(cml)、骨髓增生性肿瘤(mpn)或慢性骨髓单核细胞性白血病(cmml))和淋巴瘤(例如，霍奇金淋巴瘤(hodgkin's lymphoma)、非霍奇金淋巴瘤或t细胞淋巴瘤)。在一些实施方式中，实体癌包括胰腺癌、卵巢癌、腹膜癌、非小细胞肺癌、乳腺癌、神经外胚层瘤和/或肉瘤。
[0089]
在一些实施方式中，本发明提供用于治疗过度增生性疾患(例如，癌症)的方法，其中该癌症是mds。mds是一组骨髓源性血细胞的共有不适当成熟的癌症疾患，并且症状可不同。国际预后评分系统(ipss)基于患者血红蛋白水平、绝对中性粒细胞计数(anc)、血小板计数以及骨髓原始细胞百分比将mds严重程度评为数个风险组。风险组包括“低危”、“中危-1”、“中危-2”和“高危”。存在其他风险组评分方法，诸如修订的ipss(ipss-r)和基于who分类的预后评分系统(wpss)，如nccn患者指南，骨髓增生异常综合征，2018中所述的。本发明的方法可用于治疗过度增生性疾患，例如，基于任何评分方法诊断为mds的任何风险组的受试者(例如，人患者)中的癌症。在一些实施方式中，需要本发明的受试者可包括经诊断患有较低风险mds(定义为ipss低危和/或中危-1)的受试者。
[0090]
在本发明的一些实施方式中，提供了用于抑制有此需要的受试者中的地西他滨的降解的方法，包括向受试者给药根据本发明的实施方式的固体口服剂，从而抑制受试者中的地西他滨的降解。
[0091]
在一些实施方式中，本发明提供了降低有此需要的受试者中的dna甲基化的方法，包括向受试者给药根据本发明的实施方式的固体口服剂型，从而降低受试者中的dna甲基化(例如，从而使得能够降低由cda底物药物的dna甲基化)。相对于治疗前的受试者中的甲基化水平，dna甲基化可被降低。在一些实施方式中，该给药降低line-1的dna甲基化。line-1是本领域已知的人dna(例如，受试者)中发现的长散在核元件，并且其甲基化水平可使用本领域中的标准技术测量以确定低甲基化剂诸如cda底物药物(例如，地西他滨)的遗传效应。
[0092]
本发明的发明人已示出，向有此需要的受试者给药根据本发明的实施方式的固体口服剂型可向该受试者提供多种有利反应。例如，在一些实施方式中，相较于对照测量，例如，相较于该给药前的受试者中的dna甲基化(例如，受试者“基线”dna甲基化)，该给药将受试者中的dna甲基化降低至少5％(例如，至少5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15％或更多或其中的任何值或范围)。受试者中的dna甲基化可通过本领域中的任何标准技术定量和/或定性评估，例如，相较于对照如由相对总体甲基化的标志物测量，例如，相较于对照如通过line-1甲基化测量。例如，在一些实施方式中，相较于对照测量，例如，相较于该给药前的受试者中的line-1甲基化(例如，受试者基线line-1甲基化)，该给药将受试者中的line-1甲基化降低至少5％(例如，至少5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15％或更多)。例如，在一些实施方式中，该给药可将受试者中的line-1甲基化降低至少5％、至少8％、至少10％或至少15％或更多。在一些实施方式中，该给药可将受试者中的line-1甲基化降低约5％至约20％、约6％至约15％或约8％至约10％。
[0093]
在一些实施方式中，在28天周期后，该给药可在不超过两周(例如，不超过连续14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3或2天或其中的任何值或范围)将受试者的绝对中性粒细胞计数(anc)减少至小于0.5x109个细胞/l血液。在一些实施方式中，在治疗期间(例如，在多个、
重复的28天周期之间)，该给药在不超过两周(例如，超过二、三、四、五、六周等)将该受试者的绝对中性粒细胞计数(anc)减少至小于0.5x109个细胞/l血液。
[0094]
在一些实施方式中，相较于“基线”对照f细胞/红细胞％(例如，相较于治疗前患者的f细胞/红细胞％，例如，相较于未经受治疗的患者群体(例如，健康患者群体)的平均f细胞/红细胞％)，任选地如由每个样本(例如，在患者血液样本中)f细胞/红细胞％测量，该给药将血红蛋白f表达细胞(即，f细胞)扩增至少5％(例如，至少5、6、7、8、9、10、15、20、25或30％或更多)。例如，在一些实施方式中，相较于基线对照，该给药可将受试者中的f细胞％扩增至少5％、至少8％、至少10％、至少15％或至少23％或更多。在一些实施方式中，相较于基线对照，该给药可将受试者中的f细胞％扩增约5％至约30％、约6％至约24％，或约8％至约20％。
[0095]
在一些实施方式中，该给药将f细胞扩增至每个样本(例如，在患者血液样本中)总红细胞的至少10％至至少30％或更多的总量(例如，至少15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％或30％或更多的f细胞/红细胞或其中的任何值或范围)。例如，在一些实施方式中，该给药可将f细胞扩增至样本中总红细胞的至少15％、至少20％、至少23％、至少35％或更多的总量。在一些实施方式中，该给药可将f细胞扩增至样本中总红细胞的约15％至约30％、约18％至约25％，或约15％至约35％的总量。
[0096]
在本发明的方法的一些实施方式中，受试者可以是哺乳动物。在本发明的方法的一些实施方式中，受试者可以是人。
[0097]
本领域技术人员已知的用于调节药物递送的时间和顺序的任何给药方案可在必要时使用和重复以实现本发明的方法中的治疗。例如，本发明的固体口服剂型可通过单一剂量、多个离散剂量或持续输注每日给药1、2、3或4次。在特定实施方式中，固体口服剂型每日给药一次。
[0098]
在本发明的一些实施方式中，根据本发明的实施方式的固体口服剂型的给药可每28天周期进行约1天至约28天(例如，每28天周期约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27或28天)。在特定实施方式中，固体口服剂型的给药为每28天周期进行五天(例如，连续5天)每天一次。在一些实施方式中，根据本发明的实施方式的固体口服剂型的给药可每28天周期进行连续数天。例如，根据本发明的实施方式的固体口服剂型可以连续5天给药。在一些实施方式中，根据本发明的实施方式的固体口服剂型可以在任何连续3天给药(例如，在周一、周二和周三“mtw”；在周二、周三和周四“twth”；在周三、周四和周五“wthf”；在周四、周五和周六“thfs”；在周五、周六和周日“fss”；在周六、周日和周一“ssm”；和/或在周日、周一和周二“smt”等)。在一些实施方式中，根据本发明的实施方式的固体口服剂型的给药可以每28天周期进行连续5天(例如，mtwthf或连续5天的任何其他组合)、连续7天(mtwthfss或连续7天的任何其他组合)、连续14天(例如，连续两周)；连续21天(例如，连续三周)和/或连续28天(例如，连续四周)。连续数天治疗可以每28天周期重复一次或多次，例如，每周、每隔一周。
[0099]
在一些实施方式中，根据本发明的实施方式的固体口服剂型的给药可以每28天周期进行非连续数天，例如，进行1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26或27或更多的非连续数天。非连续数天可包括28天周期中每隔一天(例
如，mwf)、每两天、每三天、每四天、每五天、每六天、每七天等的方案。非连续数天可以包括于28天周期内给药连续数天(例如，“给药”)，接着不给药数天(例如，“停药”)，接着给药连续数天(例如，“给药”)等。例如，在一些实施方式中，给药可进行非连续2天(例如，每周一和周五或非连续2天的任何其他组合)。在一些实施方式中，给药可进行非连续3天(例如，mwf或非连续3天的任何其他组合)。该非连续数天治疗可以每28天周期重复一次或多次，例如，每周、每隔一周。
[0100]
在一些实施方式中，本发明的多个28天治疗周期之间可以经过0至31天或更长的时间段(例如，0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31或更长)。无治疗的时间段可以是期望的，以允许本发明的受试者(例如，人患者)有足够的健康以继续治疗。治疗周期之间的时间段可由医师使用本领域中的标准技术确定并且可以基于每个受试者单独确定，例如，如基于足够的血球计数，例如，足够的中性粒细胞减少(例如，受试者中的绝对中性粒细胞计数(anc)至少或大于0.5x109个细胞/l)，以及可以基于给药医师的判断在治疗疗程中进行调整。在一些实施方式中，治疗周期之间的时间段可以是最小的，例如，无时间段，例如，立即开始下一个28天时间段。在一些实施方式中，治疗周期之间的时间段可以是1周、2周、3周、4周、5周、6周或更长。
[0101]
在一些实施方式中，给药可以进行例如每28天周期总计10天，其中给药的10天包括每28天周期中，连续5天给药(例如，5天“给药”)，接着连续2天不给药(例如，2天“停药”)，接着连续5天给药(例如，5天“给药”)。在一些实施方式中，给药可以进行例如总计14天，其中给药的14天包括每28天周期中，7天“给药”，接着7天“停药”，接着7天“给药”。在一些实施方式中，给药可以进行例如总计9天，其中给药的9天包括每28天周期中，连续3天“给药”，接着连续4天“停药”，接着连续3天“给药”，接着连续4天“停药”，接着连续3天“给药”。在一些实施方式中，给药可以进行例如总计9天，其中给药的9天包括每28天周期中，非连续3天“给药”(例如，mwf)，接着1天“停药”，接着非连续3天“给药”(例如，mwf)，接着1天“停药”，接着非连续3天“给药”。
[0102]
在一些实施方式中，根据本发明的实施方式的固体口服剂型的给药可以每28天周期进行一周或多周，例如，每28天周期进行一周、两周、三周或四周。所述周可以为连续和/或非连续的。
[0103]
给药方案可以包括预处理和/或与至少一种附加的治疗剂共同给药。在这种情况下，包括地西他滨和西达尿苷的固体口服剂型可以与至少一种附加的治疗剂同时、分别或依次给药。附加的治疗剂也可以包括在固体口服剂型内。
[0104]
化疗剂的实例包括但不限于：烷化剂(例如，其可以包括多柔比星、环磷酰胺、雌莫司汀、卡莫司汀、丝裂霉素、博来霉素等)；抗代谢物(例如，其可以包括5-氟-尿嘧啶、卡培他滨、吉西他滨、奈拉滨、氟达拉滨、甲氨蝶呤等)；铂化剂(platinating agent)(例如，其可包括顺铂、奥沙利铂、卡铂等)；拓扑异构酶抑制剂(例如，其可包括拓泊替康、伊立替康、依托泊苷等)；微管蛋白剂(例如，其可包括紫杉醇、多西他赛、长春瑞滨、长春碱、长春新碱、其他紫杉烷类、埃博霉素类等)；信号抑制剂(例如，激酶抑制剂、抗体、法尼基转移酶抑制剂等)；以及其他化疗剂(例如，他莫昔芬、抗有丝分裂剂，诸如polo样激酶抑制剂或aurora激酶抑制剂等)。
[0105]
在一些实施方式中，本发明考虑每天约35mg剂量的地西他滨，并且因此，例如，对
于五天给药方案，考虑每28天的治疗周期累积近似约175mg的累积剂量的地西他滨。如被判断为对受试者(例如，患者)必要的，本领域技术人员可以使用已知技术修改剂量水平、给药模式和给药方案。
[0106]
在一些实施方式中，本发明考虑每天约100mg剂量的西达尿苷，并且同样对于五天给药方案，考虑每28天治疗周期累积近似约500mg的累积剂量。如被判断为对受试者(例如，患者)必要的，本领域技术人员可以使用已知技术修改剂量水平、给药模式和给药方案。
[0107]
在一些实施方式中，可以通过以如本发明的固体口服剂型中存在的相同量和/或比率并使用相同给药方案分别(例如，以单独的剂型)给药西达尿苷和地西他滨来进行本发明的方法。
[0108]
对本领域技术人员来说，显而易见的，本发明的特定实施方式可以指向上文指示的方面以及其他方面中的一个、一些或全部，并且可以涵盖上文和下文指示的实施方式以及其他实施方式中的一个、一些或全部。
[0109]
除在工作实例中，或另有指示的情况外，本说明书和权利要求中使用的表示成分的量、反应条件等的所有数字均应理解为由术语“约”修饰。因此，除非有相反的指示，否则这样的数字是近似值，其可以根据本发明寻求获得的所需特性而变化。至少，并且不是试图将等同原则的应用限制于权利要求的范围，每个数值参数应根据有效数字个数和普通的舍入技术来解释。
[0110]
尽管阐述本发明宽泛范围的数值范围和参数是近似值，但尽可能精确地报告工作实例中阐述的数值。然而，任何数值都固有地包含某些误差，这些误差必然地由它们各自的测试测量中存在的标准偏差而引起。
[0111]
已描述了本发明，将在下列实施例中更详细地解释本发明，包括这些实施例仅出于说明的目的，并且其不旨在限制本发明。
[0112]
实施例
[0113]
实施例1：astx727的1期研究
[0114]
astx727的1期研究是剂量递增研究，旨在确定可能达到与标准剂量地西他滨iv(地西他滨20mg/m
2 iv)等同的auc的西达尿苷和地西他滨的推荐剂量。图1提供研究设计的概述。在周期1中，各患者在第-3天接受队列限定剂量的口服地西他滨，在第1天接受1-h静脉内输注的地西他滨20mg/m2，以及在第2-5天接受队列限定剂量的口服地西他滨加西达尿苷。在周期2和以后，在第1-5天给与口服地西他滨和西达尿苷。首先递增西达尿苷的剂量，并且一旦西达尿苷对cda抑制达到最大效果就递增地西他滨。每个队列仅递增一种药物。给与固定剂量而不针对体重或体表面积作调整。地西他滨的第-3、1、2和5天包括全天的药代动力学分析。口服地西他滨的起始剂量为20mg并且西达尿苷为40mg(人等同剂量，其安全裕度是猕猴中未观测到不良反应水平的大约100倍高)。若口服药物的平均地西他滨auc小于队列中iv地西他滨的平均地西他滨auc的90％，且如果未观测到剂量限制性毒性，则进行各药物的递增。剂量限制性毒性定义为4级血液毒性或3级持续超过14天且与潜在疾病无关。一旦以被视为安全的剂量达到了被设为主要终点且用iv地西他滨建立的地西他滨auc目标范围，则将最接近iv地西他滨暴露的队列扩增至18名可评估患者。若患者已耐受初始分配的剂量，则由研究者自行决定，允许先前已接受较低剂量的患者进行剂量递增。
[0115]
通过经验证的液相色谱-串联质谱分析用edta(乙二胺四乙酸)处理的血浆来表征
地西他滨的药代动力学概况，用四氢尿苷(santa cruz biotechnology,dallas,tx)进行稳定，并且地西他滨的线性测定范围为0.5-100ng/ml。在第一个周期期间，在第-3、1、2和5天(同样在第3和4天剂量给药之前立即)收集系列血浆样本(从剂量给药前直至给药后24h)。具体而言，在剂量给药前和该剂量后0.25h、0.5h、1.0h(对于iv仅1.083h)、1.5h、2h、3h、4h、6h、8h和24h获得药代动力学样本。
[0116]
因为疾病进展、不可接受的毒性、患者要求、同意退出或研究者自行决定由于缺乏益处，患者可停止治疗或从该研究退出。
[0117]
1期研究的结果示出于表3和图2中。
[0118]
表3：1期剂量递增auc
[0119][0120]
ced＝西达尿苷；dec＝地西他滨；gcv％＝几何变异系数
[0121]a口服剂量不是体重或体表面积调整的。在所有队列中iv剂量是20mg/m2。
[0122]b队列1中的一名受试者作为极端异常而被排除。
[0123]c来自18名患者的iv数据，一名患者作为极端异常而被排除。
[0124]d为总iv群体(n＝41)计算的总5天iv auc
0-t
的几何平均值。
[0125]
在图2中，两条突出显示的曲线示出来自100mg西达尿苷与30和40mg口服地西他滨的暴露(表3中的队列4和5)。在这些剂量下，该口服地西他滨暴露在iv地西他滨暴露的81％至128％之间。基于此，预测在30至40mg之间的地西他滨的中等剂量(其为35mg)与iv最匹配。
[0126]
实施例2:astx727的2期研究剂量确定
[0127]
astx727的2期研究是随机交叉设计，在周期1中每天iv地西他滨20mg/m2(5天)与每天一次口服地西他滨/西达尿苷(5天)，在周期2中患者交换为另一种药物(参见图3)。从周期3开始，所有患者继续每天一次口服地西他滨/西达尿苷(5天)，每28天一个周期，直至进展。
[0128]
2期中患者的基线特性示出于表4中。
[0129]
表4：2期患者基线特性
[0130]
[0131][0132]
地西他滨和西达尿苷在1期的剂量递增和剂量扩增阶段中以及在2期的初始剂量确定阶段期间作为地西他滨(35mg)和ced(100mg)的单独的胶囊给与，并且然后在2期的第二阶段中和在3期中作为组合的地西他滨(35mg)和西达尿苷(100mg)两者的单一固定剂量组合(fdc)片剂(astx727)给与。3期临床研究中使用的astx727 fdc片剂的组成示出于表5中。
[0133]
表5：astx727片剂的组成
[0134][0135]
地西他滨(35mg)和西达尿苷(100mg)的单独的胶囊的血浆地西他滨5天auc
0-t
示出于表6a中，并且单一astx727片剂的血浆地西他滨5天auc
0-t
示出于表6b中。
[0136]
表6a：2期pk(西达尿苷+地西他滨胶囊与iv dec)
[0137][0138]
iv＝20mg/m
2 iv输注(1h)地西他滨口服＝100mg西达尿苷和35mg地西他滨胶囊
[0139]
ci＝置信区间；iv＝静脉内；geo.lsm＝几何最小二乘平均数；cv＝变异系数
[0140]
表6b：2期pk(astx727与iv dec)
[0141][0142]
iv＝20mg/m
2 iv输注(1h)地西他滨口服＝astx727 fdc片剂(100/35mg西达尿苷/地西他滨)
[0143]
ci＝置信区间；iv＝静脉内；geo.lsm＝几何最小二乘平均数；cv＝变异系数
[0144]
图4提供了口服100mg西达尿苷和35mg地西他滨与单一输注地西他滨20mg/m2后的个体和几何平均血浆地西他滨auc
o-24
。口服5天地西他滨暴露是iv地西他滨暴露的大约98％，证实在片剂中为西达尿苷和地西他滨选择的剂量与iv地西他滨很匹配。
[0145]
在第一周期的第1、8、15、22和29天，用长散在核元件-1(line-1)甲基化亚硫酸氢盐测序分析(yang,as,koshi kd,choi sw,et al.dna methylation changes after 5-aza-2-deoxycytidine therapy in patients with leukemia.can.res.2006；66；5495-503)评估血液学和总体dna甲基化。治疗后dna甲基化的变化表示为相对变化(％)，计算为：100x([给定治疗后一天的甲基化]-[基线甲基化]。在各周期的第1天在治疗前进行(对于血液学，在前两个周期中每周进行)通过体检和实验室监测(血液学、代谢图谱和肝酶)的不良事件评估。在治疗的同时，评估患者的不良事件和临床反应，包括血液学、代谢图谱、肝酶、定向体检、生命体征、输注记录和剂量记录。一旦停止治疗，即对患者进行关于存活和转化为急性髓性白血病的随访。由研究者自行决定许可剂量减少或延迟以允许从药物相关的骨髓抑制中恢复。
[0146]
line-1研究的结果示出于图5a-5b和6a-6b中。该研究的2期功效和安全性数据分别示出于表7和8中。
[0147]
表7：2期功效(最优反应a和输注独立性b)
[0148][0149]aiwg 2006标准；b在基线依赖的患者中至少8周的输注独立性
[0150]
表8：2期安全性-在≥5％的患者中级别≥3的相关ae
[0151][0152]
实施例3：3期研究
[0153]
3期是随机交叉设计，其中将符合条件接受地西他滨的mds和cmml患者随机分配至顺序a，其中在周期1中他们接受astx727，然后在周期2中接受iv地西他滨，或具有相反顺序的顺序b。从周期3开始，所有患者均接受astx727，以评估长期功效和安全性。需要118名可评估患者以示出在口服与iv给药之间的auc等效性。参见图7。受试者的主要入选标准：1)iv地西他滨的候选者；2)ecog ps 0-2；3)至少3个月的预期寿命；4)足够的器官功能；和5)允许一个先前周期的hma。主要终点包括总血浆水平5天地西他滨auc等效性(在80％至125％之间的口服/iv 90％ci)。次要终点是功效，包括反应速率、输注独立性、反应的持续时间、无白血病和总体存活；astx727的安全性；和max line-1脱甲基化。
[0154]
在3期中治疗的133名患者中，123名完成了iv和口服5天周期两者，以评估两者的地西他滨auc。口服/iv的血浆5天地西他滨auc的比率是大约99％，90％的置信区间为约93％至106％。经pk评估处理的所有患者的敏感性和次要分析均证实了主要分析结果(参见表9)。
[0155]
表9：主要终点(5天地西他滨auc等效性)
[0156][0157]1配对患者群体：在具有足够pk样本的随机前2个周期中，接受astx727和iv地西他滨两者的患者。
[0158]
研究以高置信度满足其主要终点：口服/iv血浆5天地西他滨auc～99％，90％ci为～93-106％。所有敏感性和次要pk auc分析证实了来自主要分析的发现。
[0159]
图8示出了astx727在第1、2和5天以及iv地西他滨在第1和5天两者的个体患者暴露。可以看出，尽管口服地西他滨以固定剂量给与而iv基于体表面积给与，但经口服地西他滨或iv地西他滨治疗的患者的个体暴露很大程度上彼此重叠。地西他滨在第1天的auc略低于第2-5天的auc和iv给药的auc。地西他滨在第2天与第1天的auc的比率为约1.5:1至约2:1。
[0160]
图9示出了当在周期1和2中将口服与iv比较时，通过line-1测定所测量的总体dna脱甲基化的药效学效应也几乎相同。口服与iv之间的dna甲基化的差异为《1％且不显著。
[0161]
总之，相较于iv地西他滨20mg/m2，口服astx727固定剂量片剂(西达尿苷/地西他滨100/35mg)达成血浆地西他滨5天auc全身暴露的～99％(主要终点)。此外，在所有auc敏感性和次要分析中证实了稳健的结果。此外，该口服astx727达成了与iv地西他滨几乎相同
的药效学效应(line-1dna脱甲基化％中《1％差异)。另外，在2期的长期随访中观测到的持久性临床反应、50％输注独立性和18.3个月的中位数存活与iv地西他滨一致。此外，在随机前2个周期中，口服astx727与iv地西他滨之间的不良事件(包括gi不良事件)中无显著差异。
[0162]
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