一种皮肤修复用药物配方及其混合方法与流程

1.本发明涉及皮肤药品技术领域，尤其涉及一种皮肤修复用药物配方及其混合方法。


背景技术：

2.创伤、感染等各种原因可以导致大面积的皮肤及软组织缺损；皮肤创伤的愈合是一个复杂而有规律的生物反应过程，可以分为止血、炎症、细胞增殖、受损组织重塑4个生物过程。
3.目前传统药物在辅助新生血管形成效果发明并不明显，近年来间充质干细胞(mesenchymal stem cell，msc)治疗在组织再生修复中的作用得到了广泛验证，特别是在皮肤及软组织再生修复中取得了可靠的疗效。但细胞治疗仍面临安全性、稳定性、致瘤性等难题。


技术实现要素：

4.基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种皮肤修复用药物配方及其混合方法，本发明通过多肽sikvav、紫草水提物和生长因子的相互配合，使得本发明根据创伤愈合的动态过程，具有复合活性功能，促进皮肤结构的重建。
5.本发明提出了一种皮肤修复用药物配方，其原料包括：羟丁基壳聚糖、多肽sikvav、紫草水提物、生长因子和水，其中，生长因子为igf-1、bdnf、gdnf、tgf-β、vegf、hgf组成的混合物。
6.上述igf-1是指类胰岛素一号生长因子；bdnf是指脑源性神经营养因子；gdnf是指胶质源性神经营养因子；tgf-β是指转化生长因子-β；vegf是指血管内皮细胞生长因子；hgf是指肝细胞生长因子。
7.上述多肽sikvav、生长因子、羟丁基壳聚糖、紫草水提物可以从市场购得。
8.优选地，羟丁基壳聚糖、多肽sikvav、紫草水提物的重量比为5:0.5-1:1-1.5。
9.优选地，羟丁基壳聚糖的含量为4.5-5.5wt％。
10.优选地，igf-1的浓度为10-12μg/l、bdnf的浓度为1-1.5μg/l、gdnf的浓度为1-1.5μg/l、tgf-β的浓度为1-1.5μg/l、vegf的浓度为0.5-1μg/l、hgf的浓度为0.5-0.7μg/l。
11.本发明还提出了上述皮肤修复用药物配方的混合方法，包括如下步骤：将紫草水提物、生长因子和水混匀，然后加入多肽sikvav分散均匀，再加入羟丁基壳聚糖，低温搅拌混匀，然后凝胶化，灭菌得到皮肤修复用药物配方。
12.优选地，低温搅拌的温度为5-10℃。
13.优选地，低温搅拌24-36h混匀。
14.优选地，升温至35-37℃凝胶化，灭菌得到皮肤修复用药物配方。
15.上述水均为无菌水。
16.有益效果
17.本发明选用多肽sikvav、紫草水提物以适宜比例相互配合，可以促进成纤维细胞的增殖、并促进成纤维细胞分泌生长因子egf、bfgf、tgf-β1，vegf，促进合成胶原蛋白；进而促进伤口的愈合；另外紫草水提物还可以促进人脐静脉内皮细胞的增殖和迁移，增加人脐静脉内皮细胞中毛细血管样结构的数量；调节生长因子igf-1、bdnf、gdnf、tgf-β、vegf、hgf的浓度，可以促进肉芽组织形成和血管生成，最终加快创面愈合的进程；本发明通过多肽sikvav、紫草水提物和生长因子的相互配合，使得本发明根据创伤愈合的动态过程，具有复合活性功能，促进皮肤结构的重建；且本发明不含细胞，避免了细胞导致的安全性、致瘤性等问题；选用羟丁基壳聚糖制作水凝胶，患者容易接受，且临床可操作性好。
具体实施方式
18.下面，通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明，但是应该明确提出这些实施例用于举例说明，但是不解释为限制本发明的范围。
19.实施例1
20.一种皮肤修复用药物配方，其原料包括：50g羟丁基壳聚糖、5g多肽sikvav、15g紫草水提物、生长因子和1000g无菌水，其中，生长因子为igf-1、bdnf、gdnf、tgf-β、vegf、hgf组成的混合物；igf-1的浓度为10μg/l、bdnf的浓度为1.5μg/l、gdnf的浓度为1μg/l、tgf-β的浓度为1.5μg/l、vegf的浓度为0.5μg/l、hgf的浓度为0.7μg/l。
21.上述皮肤修复用药物配方的混合方法，包括如下步骤：按重量将紫草水提物、生长因子和水混匀，然后加入多肽sikvav超声分散均匀，再加入羟丁基壳聚糖，于5℃低温搅拌36h混匀，然后升温至35℃凝胶化，灭菌得到皮肤修复用药物配方。
22.实施例2
23.一种皮肤修复用药物配方，其原料包括：50g羟丁基壳聚糖、10g多肽sikvav、10g紫草水提物、生长因子和1000g无菌水，其中，生长因子为igf-1、bdnf、gdnf、tgf-β、vegf、hgf组成的混合物；igf-1的浓度为12μg/l、bdnf的浓度为1μg/l、gdnf的浓度为1.5μg/l、tgf-β的浓度为1μg/l、vegf的浓度为1μg/l、hgf的浓度为0.5μg/l。
24.上述皮肤修复用药物配方的混合方法，包括如下步骤：按重量将紫草水提物、生长因子和水混匀，然后加入多肽sikvav超声分散均匀，再加入羟丁基壳聚糖，于10℃低温搅拌24h混匀，然后升温至37℃凝胶化，灭菌得到皮肤修复用药物配方。
25.实施例3
26.一种皮肤修复用药物配方，其原料包括：50g羟丁基壳聚糖、8g多肽sikvav、12g紫草水提物、生长因子和1000g无菌水，其中，生长因子为igf-1、bdnf、gdnf、tgf-β、vegf、hgf组成的混合物；igf-1的浓度为11μg/l、bdnf的浓度为1.2μg/l、gdnf的浓度为1.2μg/l、tgf-β的浓度为1.2μg/l、vegf的浓度为0.8μg/l、hgf的浓度为0.6μg/l。
27.上述皮肤修复用药物配方的混合方法，包括如下步骤：按重量将紫草水提物、生长因子和水混匀，然后加入多肽sikvav超声分散均匀，再加入羟丁基壳聚糖，于5℃低温搅拌30h混匀，然后升温至36℃凝胶化，灭菌得到皮肤修复用药物配方。
28.对比例1
29.不添加多肽sikvav，其他同实施例3。
30.对比例2
31.不添加紫草水提物，其他同实施例3。
32.对比例3
33.不添加生长因子，其他同实施例3。
34.对比例4
35.不添加多肽sikvav、紫草水提物和生长因子，其他同实施例3。
36.取spf级雄性9周龄c57bl/6j小鼠30只，体重约25g。在24℃恒温下单笼饲养。术前准备及麻醉、脱毛后，使用无菌的6mm活检打孔器在小鼠背部中线两侧的腰部水平刻两个直径6mm的圆形轮廓，齿镊提起轮廓中间的皮肤，眼科剪剪开全层皮肤并切除圆形部分组织，中线另一侧的对称位置重复此操作；用固定板来防止创面收缩。固定板制备：用12mm活检打孔器在1mm厚的硅胶板上取下直径12mm的圆，并用8mm活检打孔器在12mm圆形硅胶板的中央打孔，形成一个圆环，消毒后作为创面固定板。将固定板圆心对准创面圆心，并用缝线间断缝合将固定板固定在所有创面外周，防止创面收缩；
37.将小鼠随机分成a、b、c组，每组10只；a组小鼠左侧创面为空白对照组；a组小鼠右侧创面为实施例3组；b组小鼠左侧创面为对比例1组；b组小鼠右侧创面为对比例2组；c组小鼠左侧创面为对比例3组；c组小鼠右侧创面为对比例4组；
38.小鼠单笼饲养，所有创面均每3d给予一次常规消毒处理并更换固定板。每次消毒后，空白对照组创面直接覆盖透气透明膜，其余各组创面均给予相应的水凝胶200mg，均匀涂布后覆盖透气透明膜；
39.持续观察组创面出血及愈合情况，在第3、6、9、12、15d分别对创面进行拍照，使用image-proplus 6.0分析软件测量未愈合创面面积并计算创面愈合率。创面愈合率＝(原始创面面积-未愈合创面面积)/原始创面面积
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100％。结果如表1所示。
40.表1愈合结果
[0041][0042][0043]
由表1可以看出本发明可以促进伤口的愈合。
[0044]
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，
任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。