中药组合物在制备与高尿酸相关疾病的药物中的应用的制作方法

1.本发明涉及中药技术领域，特别是涉及一种中药组合物在制备与高尿酸相关疾病的药物中的应用。


背景技术：

2.随着人们生活水平的不断提高和饮食结构的改变，痛风和高尿酸血症的患病率在全球范围呈逐年上升的趋势，已成为严重威胁人类健康的常见病、多发病。痛风是由于嘌呤代谢紊乱和(或)尿酸排泄障碍所致尿酸排泄减少的一组疾病，其临床特点为高尿酸血症、反复发作的急性痛风性关节炎、痛风石沉积，严重者呈关节畸形及功能障碍，常累及肾脏引起慢性间质性肾炎，伴尿酸性尿路结石。本病常与肥胖、糖脂代谢紊乱、高血压、动脉硬化、冠心病等聚集发生，为代谢综合征的组成之一，是心脑血管疾病发病的重要危险因素之一。
3.目前现有的降低尿酸药主要包括丙磺舒、磺吡酮、苯溴马隆、别嘌醇等。但该类药物的副作用较多，而且还对肝、肾有明显副作用，不适宜长用，特别对于老年患者，长期服用可能有更大的隐患。因此寻找安全有效且适合长期服用的降低尿酸的药物是迫在眉睫。
4.随着现代医学及科技的发展，针对中医药治疗高尿酸血症的现代研究越来越多。多项研究已证实，中医药在改善患者临床症状、降低患者血尿酸水平等方面具有较好的疗效。在安全性方面，中医药具有天然、低毒的特点及优势，通过药物配伍、炮制、煎煮等方法能有效降低药物本身及药物之间的毒副作用，服用不良反应较小，患者易于耐受。因此，研究新型的治疗效果好、毒副作用小的治疗高尿酸血症的药物具有重要意义。


技术实现要素：

5.基于此，有必要针对上述问题，提供一种中药组合物在制备与高尿酸相关疾病的药物中的应用，将该中药组合物应用到治疗与高尿酸血症相关的疾病中，具有较好的治疗效果。
6.一种中药组合物在制备与高尿酸相关疾病的药物中的应用，所述中药组合物的活性成分由以下重量份的原料组成：狗脊400-800份、金樱子150-220份、鸡血藤300-420份、千斤拔100-200份、黑老虎300-420份、牛大力180-300份、女贞子20-40份、桑寄生90-250份、菟丝子20-40份、延胡索13-52份、两面针13-52份、乳香6-24份、没药10-30份。
7.上述中药组合物，其方源自舒筋健腰丸，但原方的功能为补益肝肾，强健筋骨，驱风除湿，活络止痛。常用于腰膝酸痛，特别是用于包括外感风、寒、湿、热、燥等导致的关节疼痛等。此方的原适应症为用于腰椎间盘突出症、腰椎管狭窄症引起的腰膝酸痛、坐骨神经痛，以及膝骨关节炎引起的膝骨关节炎疼痛。
8.而本发明人经过研究，发现并证明该中药组合物不仅可降低高尿酸血症合并急性痛风性关节炎大鼠的尿酸水平，缓解炎症反应，还能降低炎症因子水平，抑制xod活力、促进ua排泄、下调相关炎症蛋白的表达。
9.在其中一个实施例中，所述中药组合物的活性成分由以下重量份的原料组成：狗
脊600
±
60份、金樱子192
±
20份、鸡血藤360
±
36份、千斤拔144
±
15份、黑老虎360
±
36份、牛大力240
±
24份、女贞子30
±
3份、桑寄生180
±
18份、菟丝子30
±
3份、延胡索26
±
3份、两面针26
±
3份、乳香12
±
1份、没药20
±
2份。
10.在其中一个实施例中，所述与高尿酸相关疾病包括：高尿酸血症和/或痛风性关节炎。
11.在其中一个实施例中，所述与高尿酸相关疾病为高尿酸血症导致的急性痛风关节炎。
12.在其中一个实施例中，所述中药组合物通过促进尿酸排泄和降低炎症反应水平达到治疗高尿酸血症合并急性痛风关节炎的作用。实验表明，该中药组合物具有促进ua排泄、抑制xod活力、下调相关炎症蛋白的表达的作用。
13.在其中一个实施例中，所述中药组合物通过以下方法制备得到：
14.s1、取狗脊、金樱子、千斤拔和黑老虎的木部，加入水煎煮，过滤，浓缩，得稠膏；
15.s2、取鸡血藤、牛大力、女贞子、桑寄生、菟丝子、延胡索、两面针、乳香、没药和黑老虎的皮部，用粉碎机粉碎，得混合粗粉；
16.s3、将步骤s2所得混合粗粉加入步骤s1所得稠膏，混匀，干燥，粉碎成细粉，过筛，混匀即得。
17.在其中一个实施例中，所述中药组合物通过以下方法制备得到：s1中，按照10
±
1g水/g药材的量加入水进行煎煮，煎煮1-2次，每次1.5
±
1h。
18.在其中一个实施例中，所述药物为口服制剂，所述药物中还包括药学上可接受的辅料。
19.可以理解的，具体口服制剂包括片剂、胶囊剂、丸剂、散剂等常见剂型。
20.在其中一个实施例中，所述药物为丸剂。
21.在其中一个实施例中，所述丸剂通过以下方法制备得到：取所述中药组合物，以炼蜜进行泛丸，包衣，干燥，抛光，即得。
22.与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
23.本发明的中药组合物不仅可降低高尿酸血症合并急性痛风性关节炎大鼠的尿酸水平，缓解炎症反应，还能降低炎症因子水平，抑制xod活力、促进ua排泄、下调相关炎症蛋白的表达。
24.可将该中药组合物应用于制备治疗与高尿酸相关疾病的药物中，具有较好的应用前景。
附图说明
25.图1为中药组合物对高尿酸血症导致急性痛风性关节炎大鼠和正常关节肿胀度的影响折线图；
26.图2为24h中药组合物对高尿酸血症导致急性痛风性关节炎大鼠关节肿胀度的影响照片；
27.图3为中药组合物对高尿酸血症导致急性痛风性关节炎大鼠踝关节滑膜形态学的影响(放大倍数为200)。
具体实施方式
28.为了便于理解本发明，下面将参照相关附图对本发明进行更全面的描述。附图中给出了本发明的较佳实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
29.除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
30.以下实施例所用试剂和原料，如非特别说明，均为市售购得；以下实施例所用方法，如非特别说明，均为常规方法可实现。
31.实施例1
32.一种中药组合物。
33.该中药组合物由以下原料及其重量份数制成：狗脊600份、金樱子192份、鸡血藤360份、千斤拔144份、黑老虎360份、牛大力240份、女贞子30份、桑寄生180份、菟丝子30份、延胡索26份、两面针26份、乳香12份、没药20份。
34.该中药组合物的制备方法如下：
35.s1、取相应量的狗脊、金樱子、千斤拔、黑老虎的木部等，每次加原料重量10倍的水煎煮2次，每次1.5h，合并煎液，过滤，浓缩，得稠膏；
36.s2、取相应量的鸡血藤、牛大力、女贞子、桑寄生、菟丝子、延胡索、两面针、乳香、没药和黑老虎的皮部用粉碎机粉碎，得混合粗粉；
37.s3、将步骤s2所得混合粗粉加入步骤s1所得稠膏，混匀，干燥，粉碎成细分，过筛，混匀即得。
38.实施例2
39.一种中药组合物丸剂。
40.取实施例1制备的中药组合物，按每100g粉末用炼蜜35g泛丸，包衣，干燥，抛光，即得。
41.实施例3
42.对高尿酸血症合并急性痛风性关节炎大鼠的药效学的实验研究
43.以下所用中药组合物均为实施例1制备的中药组合物。
44.一、实验材料
45.1、实验动物：sd大鼠，spf级，雄性，体重180.0～220.0g，购于广东省医学实验动物中心，共54只。
46.2、中药组合物：取狗脊、金樱子、鸡血藤、千斤拔、黑老虎、牛大力、女贞子、桑寄生、菟丝子、延胡索、两面针、乳香、没药原料及其重量份数按实施例1制成。
47.3、试剂：黄嘌呤氧化酶(xod)测试盒(南京建成生物工程研究所)；尿酸(ua)测试盒(南京建成生物工程研究所)；肿瘤坏死因子-α(tnf-α)试剂盒(武汉华美生物工程有限公司)；白细胞介素-10(il-10)试剂盒(武汉华美生物工程有限公司，)；白细胞介素-1β(il-1β)试剂盒(武汉华美生物工程有限公司)；尿酸钠(麦克林公司)；氧嗪酸钾(麦克林公司)；秋
水仙碱(西双版纳版纳药业有限责任公司)。
48.二、实验方法
49.1、分组和建模
50.sd大鼠适用性饲养1周后，称量体重，分为6组，每组9只大鼠，其中5组分别为阳性组、模型组、高剂量组、中剂量组和低剂量组，均按照下述方法进行建模，空白组给予等量生理盐水。
51.高尿酸血症合并急性痛风性关节炎模型建立方法：配制3％氧嗪酸钾，以1ml/100g行腹腔注射，2次/d，连续注射7d，开始建模后的第4天，将大鼠麻醉，选右踝关节外侧后方为穿刺点，在大鼠右侧踝关节后侧沿跟腱内侧以30～40
°
方向刺入至关节腔，感觉有落空感后，将0.05ml(25mg/ml)的尿酸钠溶液注入到关节腔，以关节囊对侧鼓起为注入标准，诱导急性痛风性关节炎(aug)模型。
52.注射后大鼠出现跛行、关节肿胀、不能负重，视为造模成功。正常组相同部位注射同等体积的0.9％生理盐水。表1、表2、表3、表4中模型组和空白组相关数据比较，均具有显著性差异，表明本研究建模成功。
53.2、给药
54.初次氧嗪酸钾注射后，即进行给药，连续给药7d。空白组和模型组，灌胃等体积生理盐水；阳性组给予0.05mg/100g秋水仙碱；按实施案例1制成的中药组合物分为：低剂量组(75mg/100g)、中剂量组(150mg/100g)和高剂量组(300mg/100g)，每组9只大鼠。
55.三、观察项目
56.1、一般指标：大鼠一般状态、精神状态等，记录体质量。
57.2、关节肿胀度变化：造模前及模型建成后2h、4h、8h、24h、48h，分别用游标卡尺测量右侧后肢踝关节同一部位的长宽，算出周径(取平均值)，计算肿胀率。
58.肿胀率(％)＝(致炎后踝关节周径-致炎前踝关节周径)/致炎前踝关节周径
×
100％。
59.3、大鼠步态评分及关节炎症指数评定
60.步态评分：0级(0分)：可正常行走；1级(1分)：跛行，下肢稍弯曲；2级(2分)：行走呈跛行，下肢仅能接触地面；3级(3分)：重度跛行，且无三足着地行走。
61.关节炎症指数：0级(0分)：关节部位正常，未出现肿胀；1级(2分)：关节皮肤红肿并伴有明显骨性标志；2级(4分)：关节皮肤红肿及关节部位红肿；3级(6分)：关节以内及以外部位均出现红肿。
62.4、大鼠踝关节滑膜病理学观察
63.将关节滑膜组织放入4％多聚甲醛溶液中固定，梯度酒精脱水，常规石蜡包埋，5μm切片，he染色后显微镜下观察关节滑膜组织病理形态学改变。
64.5、大鼠生化指标的检测
65.末次给药后1h，腹主动脉取血，离心10min(3 000r/min)，取血清。酶比色法测定血清ua，比色法测定血清xod，elisa法测定血清tnf-α、il-1β和il-10。
66.6、统计学处理
67.实验结果采用spss 20.0软件进行分析，数据描述采用x
±
s，其中x为平均值，两两比较采用t检验。p＜0.05表明具有显著的统计学差异，p＜0.01表明具有非常显著的统计学
差异。
68.四、实验结果
69.1、一般指标
70.经观察，实验过程中，大鼠状态佳，精神状态正常，体重无显著差异。
71.2、大鼠步态评分及关节炎症指数评定
72.大鼠步态评分及关节炎症指数评定结果如下表所示。
73.表1.中药组合物对高尿酸血症合并急性痛风性关节炎大鼠步态评分和炎症指数的影响(n＝9，)
[0074][0075]
注：和模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01。
[0076]
上述结果显示，中药组合物高剂量组、中剂量组、低剂量组和阳性组步态评分显著低于模型组，而与阳性组无统计学差异(p＞0.05)。即表明本发明的中药组合物能够明显改善大鼠步态和关节炎症指数，且效果优于阳性药物。
[0077]
3、关节肿胀度变化和关节滑膜变化
[0078]
大鼠关节肿胀度变化结果如下表和图1-2所示。
[0079]
表2.中药组合物对高尿酸血症合并急性痛风性关节炎大鼠关节肿胀度的影响(n＝9，)。
[0080][0081][0082]
注：和模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；和阳性组比较，
#
p＜0.05，
##
p＜0.01。
[0083]
图1为中药组合物对高尿酸血症合并急性痛风性关节炎大鼠和正常关节肿胀度的影响折线图，图2为在24h时大鼠关节肿胀度照片示意。图3为第七天时大鼠踝关节滑膜形态学显微照片(显微镜放大200倍观察)。
[0084]
上述结果显示，在24h时，阳性组和高剂量组关节肿胀度显著低于模型组；在48h，
阳性组和高剂量组关节肿胀度显著低于模型组，低剂量组和中剂量组关节肿胀度显著高于阳性组，阳性组和高剂量组间无统计学差异(p＞0.05)。
[0085]
4、大鼠生化指标检测结果
[0086]
大鼠生化指标检测结果如下表所示。
[0087]
表3.中药组合物对高尿酸血症合并急性痛风性关节炎大鼠ua和xod的影响(n＝9，)。
[0088][0089]
注：和模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；和阳性组比较，
#
p＜0.05，
##
p＜0.01。
[0090]
上述结果表明，阳性组和高剂量组、中剂量组、低剂量组ua均低于模型组，而阳性组和高剂量组、中剂量组、低剂量组间无统计学差异(p＞0.05)。
[0091]
阳性组和高剂量组、中剂量组、低剂量组xod均低于模型组，阳性组和高剂量组、中剂量组间无统计学差异(p＞0.05)，而阳性组xod低于低剂量组。
[0092]
表4.中药组合物对高尿酸血症合并急性痛风性关节炎大鼠tnf-α和il-10、il-1β的影响(n＝9，)。
[0093][0094][0095]
注：和模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；和阳性组比较，
#
p＜0.05，
##
p＜0.01。
[0096]
阳性组和高剂量组、中剂量组tnf-α均低于模型组，而阳性组和高剂量组、中剂量组、低剂量组间无统计学差异(p＞0.05)。
[0097]
阳性组和高剂量组、中剂量组、低剂量组il-10均低于模型组，而阳性组和高剂量组、中剂量、低剂量组组间无统计学差异(p＞0.05)。
[0098]
阳性组和高剂量组、中剂量组、低剂量组il-1β均低于模型组，而阳性组il-1β低于中剂量组和低剂量组。
[0099]
综合上述结果表明，本发明的中药组合物可降低高尿酸血症合并急性痛风性关节
炎大鼠的尿酸水平，降低炎症因子水平、抑制xod活力、促进ua排泄，从而达到治疗效果。
[0100]
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
[0101]
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。