草豆蔻提取物的制备方法及其在抑制单增李斯特菌中的应用

本发明涉及植物提取物领域，特别涉及草豆蔻提取物的制备方法及其在抑制单增李斯特菌中的应用。

背景技术：

1、植物提取物作为一种天然、无危害的抑菌、抗氧化剂原材料，近年来受到广泛学者的关注。通过对植物提取物的抑菌活性研究，寻找具备良好抑菌活性的植物提取物，有利于在抑菌产品中的广泛应用。

2、草豆蔻始载于汉代《名医别录》，列为上品。别名漏蔻、草蔻、大草蔻、偶子、草飞雷子、弯子等。据《中华人民共和国药典》(2020版一部)记载，草豆蔻为姜科植物草豆蔻alpinia katsumadai hayata的干燥近成熟种子。性辛，温。归脾、胃经。具有燥湿行气，温中止呕的功效，用于治疗寒湿内阻，脘腹胀满冷痛，暧气呕逆，不思饮食。

3、现有研究表明，草豆蔻中含有的黄酮和双苯庚酮类化合物，对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌、产气杆菌、肺炎克雷伯氏菌、嗜麦芽假单胞菌、洋葱假单胞菌等革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有不同程度的抑制作用(黄文哲等)，其中，豆蔻明、乔松素、反,反-1,7-二苯基-4,6-庚二烯-3-酮和山姜素是草豆蔻的抑菌活性成分。同时，草豆蔻提取物具有抗弯曲杆菌活性，且具有抗修饰活性，表明至少有两个抑制系统与草豆蔻提取物抗菌活性有关(a.klancnik等)，草豆蔻抗菌的活性物质还可用于奶牛乳腺炎等感染性疾病(彭芙等)。

4、单核细胞增生李斯特氏菌(listeria monocytogenes)，简称单增李斯特菌，是一种人畜共患病的病原菌，其广泛存在于自然界中，并通过口腔或粪便的途径传播疾病。新生儿、孕妇及老人易受到单增李斯特菌的感染，孕妇受到感染后，可能会流产、早产或死胎，老人受到感染，可能会患上败血症、脑炎或脑膜炎。

技术实现思路

1、鉴于此，本发明的目的在于提出草豆蔻提取物的制备方法及其在抑制单增李斯特菌中的应用，提供草豆蔻提取物的制备方法，以及其对单增李斯特菌抑菌活性的数据支持。

2、本发明的技术方案是这样实现的：

3、本发明的目的之一在于，提供一种草豆蔻提取物的制备方法，包括如下制备方法：取草豆蔻果壳或种子，打碎或阴干后打碎，按料液比1:(8-10)g/ml，加入水，加热后，加入咪唑类离子液体，进行超声提取或浸泡提取，水蒸气蒸馏，得草豆蔻提取物。

4、优选地，所述咪唑类离子液体为1-甲基咪唑氯盐，加入量为5-10wt％。

5、优选地，所述加热的温度为40-50℃，加热的时间为10-15min。

6、优选地，所述超声提取的功率为300-400w，超声提取的时间为25-35min，超声提取的温度为30-40℃。

7、进一步的，所述浸泡提取的时间为2-3h，浸泡提取的温度为30-40℃。

8、本发明的目的之二在于，提供一种草豆蔻提取物。

9、优选地，该草豆蔻提取物中包括桉叶油醇、α-水芹烯、石竹烯、α-松油醇、右旋萜二烯、2-茨酮、芳樟醇、莰烯和辛酸为主要的抑菌成分。

10、更优选地，该草豆蔻提取物中包括相对含量的桉叶油醇9.362％、α-水芹烯7.298％、石竹烯4.586％、α-松油醇4.267％、右旋萜二烯3.368％、2-茨酮2.947％、芳樟醇2.376％、莰烯2.135％和辛酸0.480％为主要的抑菌成分。

11、本发明的目的之三在于，提供一种草豆蔻提取物在抑制单增李斯特菌中的应用。

12、与现有技术相比，本发明的有益效果为：

13、本发明提取获得的草豆蔻提取物对单增李斯特菌具有良好的抑菌活性，其最低抑菌浓度(mic)为0.078mg/ml，最低杀菌浓度(mbc)为0.3125mg/ml；本发明选用咪唑类离子液体，即1-甲基咪唑氯盐，用于辅助超声提取草豆蔻，有助于破除细胞壁，溶出草豆蔻有效成分，提高草豆蔻提取物的得率，本发明草豆蔻提取物的得率达到1.26％。

14、本发明提取获得的草豆蔻提取物，经成分分析，含有相对含量的桉叶油醇9.362％、α-水芹烯7.298％、石竹烯4.586％、α-松油醇4.267％、右旋萜二烯3.368％、2-茨酮2.947％、芳樟醇2.376％、莰烯2.135％和辛酸0.480％等主要的抑菌成分，化合物种类丰富，且具有独特的风味成分，杀菌效果良好、持久，可作为独特风味的外用天然抑菌产品以及配方制剂。

技术特征：

1.一种草豆蔻提取物的制备方法，其特征在于，包括如下制备方法：取草豆蔻果壳或种子，打碎或阴干后打碎，按料液比1:(8-10)g/ml，加入水，加热后，加入咪唑类离子液体，进行超声提取或浸泡提取，水蒸气蒸馏，得草豆蔻提取物。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述咪唑类离子液体为1-甲基咪唑氯盐，加入量为5-10wt％。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述加热的温度为40-50℃，加热的时间为10-15min。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述超声提取的功率为300-400w，超声提取的时间为25-35min，超声提取的温度为30-40℃。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述浸泡提取的时间为2-3h，浸泡提取的温度为30-40℃。

6.一种根据权利要求1～5任意一项所述的制备方法提取获得的草豆蔻提取物。

7.根据权利要求6所述的草豆蔻提取物，其特征在于，包括桉叶油醇、α-水芹烯、石竹烯、α-松油醇、右旋萜二烯、2-茨酮、芳樟醇、莰烯和辛酸。

8.根据权利要求7所述的草豆蔻提取物，其特征在于，包括相对含量的桉叶油醇9.362％、α-水芹烯7.298％、石竹烯4.586％、α-松油醇4.267％、右旋萜二烯3.368％、2-茨酮2.947％、芳樟醇2.376％、莰烯2.135％和辛酸0.480％。

9.一种草豆蔻提取物在抑制单增李斯特菌中的应用，其特征在于，利用权利要求1～5任意一项所述的制备方法提取获得的草豆蔻提取物。

技术总结
本发明提出了草豆蔻提取物的制备方法及其在抑制单增李斯特菌中的应用，包括取草豆蔻果壳或种子，打碎或阴干后打碎，按料液比1:(8‑10)g/mL，加入水，加热后，加入咪唑类离子液体，超声提取或浸泡提取后，水蒸气蒸馏，得草豆蔻提取物。本发明提取获得的草豆蔻提取物对单增李斯特菌具有良好的抑菌活性，其最低抑菌浓度(MIC)为0.078mg/mL，最低杀菌浓度(MBC)为0.3125mg/mL；本发明选用咪唑类离子液体用于辅助超声提取草豆蔻，有助于破除细胞壁，溶出草豆蔻有效成分，提高草豆蔻提取物的得率，本发明草豆蔻提取物的得率达到1.26％。本发明提取获得的草豆蔻提取物，含有桉叶油醇、α‑水芹烯、石竹烯等主要的抑菌成分，化合物种类丰富，且具有独特的风味成分。

技术研发人员：王丹,于福来,江芊,胡璇,黄英,冯玲祥,卓小寓,王莺寰
受保护的技术使用者：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13