金属离子在促进活性成分溶酶体逃逸中的应用的制作方法

本发明涉及金属离子在促进活性成分溶酶体逃逸中的应用、包含所述金属离子的组合物，属于药物化学领域，属于药物化学领域。

背景技术：

1、核酸药物的应用往往需要特殊的递送载体，包括病毒载体和非病毒载体。常用病毒载体包括逆转录病毒、慢病毒、腺相关病毒等，病毒载体借助其天然的细胞感染性能顺利侵入细胞，转运效率高，然而免疫原性、负载能力有限、生产工艺复杂等因素限制其临床应用。非病毒载体是目前研究较多、应用前景较好的一类基因递送载体，主要通过递送材料形成的阳离子与mrna磷酸根离子的吸附作用负载mrna，形成脂质体或纳米粒等结构，保护其免受核酸酶的降解并改变其入胞途径，优势在于载体相对易得、免疫原性低、安全性较高。

2、近年来在新冠疫情的背景下，mrna疫苗由于其独特的优势的发展迅速。研究者们一方面通过对mrna自身元件进行修饰，增强其稳定性和蛋白表达水平，另一方面，通过开发能在体内更高效递送mrna的递送系统，以发挥更强免疫效果。

3、因此，开发具有更高递送效率的递送系统，对于核酸药物基因治疗的广泛应用具有重要意义。

4、影响mrna体内递送效率的因素很多，其中一个重要的方面是：mrna进入细胞后，很难从核内体/溶酶体逃逸到细胞质中进行翻译。核内体/溶酶体逃逸对于mrna的有递送递至关重要。因此，为了达到理想的mrna免疫效果，需要开发安全高效的mrna递送系统，使其能够促进mrna细胞摄取和溶酶体逃逸，进而在细胞质中高效翻译表达。

技术实现思路

1、本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的目的在于提供金属离子在促进活性成分溶酶体逃逸中的应用。

2、一方面，本发明提供了金属离子在促进活性成分溶酶体逃逸中的应用，所述金属离子与所述活性成分接触。

3、在具体地实施方式中，上述金属离子与活性成分的质量比为0.01∶1～100∶1

4、进一步地，所述金属离子是二价金属离子。

5、进一步地，所述二价金属离子任选自以下一种或多种：镁和/或镁的同族二价金属离子、锰和/或锰的同族二价金属离子、锌和/或锌的同族二价金属离子、钴和/或钴的同族二价金属离子。

6、进一步地，所述二价金属离子选自以下一种或多种：锰和/或锰的同族二价金属离子。

7、进一步地，所述二价金属离子是二价锰离子。

8、在具体地实施方式中，所述金属离子任选自以下一种或多种的镁和/或镁的同族金属离子、锰和/或锰的同族金属离子、锌和/或锌的同族金属离子、钴和/或钴的同族金属离子。

9、进一步地，所述金属离子任选自一种或多种锰和/或锰的同族金属离子。

10、进一步地，所述金属离子是锰离子，任选自以下一种或多种价态：+2、+3、+4、+5、+6和+7。

11、在具体地实施方式中，所述活性成分任选自核酸、小分子化药、大分子化药、蛋白药、多肽、抗体中的至少一种。

12、进一步地，所述活性成分选自核酸。

13、进一步地，所述核酸选自mrna、dna、反义寡核苷酸(aso)、sirna、shrnas、mirna、antimirs、mirnamimics、antimirs、适配体、质粒、sgrna中至少一种。

14、进一步地，所述核酸是mrna。

15、进一步地，所述mrna编码病毒的抗原蛋白。

16、进一步地，和/或所述mrna编码蛋白补充治疗相关蛋白。

17、进一步地，和/或所述mrna编码肿瘤抗原相关蛋白。

18、进一步地，和/或所述mrna编码基因编辑工具蛋白。

19、进一步地，和/或所述mrna编码细胞因子。

20、在具体地实施方式中，所述mrna编码弹状病毒科、呼肠弧病毒科、黄病毒科、披膜病毒科、嗜肝病毒种、正粘病毒科、副粘病毒科中至少一种病毒的抗原蛋白。

21、在具体地实施方式中，所述病毒选自疟疾病毒、合胞病毒、寨卡病毒、流感病毒、埃博拉病毒、天花病毒、狂犬病毒、甲型流感病毒、艾滋病病毒、汉坦病毒、登革热病毒、马尔堡病毒、sars病毒、肝炎病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、轮状病毒、诺如病毒、单纯疱疹病毒(hsv)、水痘病毒、eb病毒(ebv)、人类嗜t细胞病毒、人乳头瘤病毒(hpv)中至少一种。

22、另一方面，本发明提供一种组合物，包含任选自核酸、小分子化药、大分子化药、蛋白药、多肽、抗体中的至少一种的药物活性成分，其中：所述组合物还包括具有促进所述药物活性成分溶酶体逃逸的金属离子。

23、进一步地，所述金属离子是二价金属离子。

24、进一步地，所述二价金属离子任选自以下一种或多种：镁和/或镁的同族二价金属离子、锰和/或锰的同族二价金属离子、锌和/或锌的同族二价金属离子、钴和/或钴的同族二价金属离子。

25、在具体地实施方式中，所述选自。

26、进一步地，所述二价金属离子选自以下一种或多种：锰和/或锰的同族二价金属离子、镁和/或镁的同族二价金属离子。

27、进一步地，所述二价金属离子选自二价锰离子、二价镁离子、二价钙离子。

28、进一步地，所述二价金属离子优选为二价锰离子。

29、在具体地实施方式中，所述金属离子任选自以下一种或多种的镁和/或镁的同族金属离子、锰和/或锰的同族金属离子、锌和/或锌的同族金属离子、钴和/或钴的同族金属离子。

30、进一步地，所述金属离子是锰离子，任选自以下一种或多种价态：+2、+3、+4、+5、+6和+7。

31、在具体地实施方式中，所述药物活性成分选自核酸。

32、在具体地实施方式中，所述核酸选自mrna、dna、反义寡核苷酸(aso)、sirna、shrnas、mirna、antimirs、mirnamimics、antimirs、适配体、质粒、sgrna中至少一种。

33、进一步地，所述核酸是mrna。

34、进一步地，所述mrna编码病毒的抗原蛋白。

35、进一步地，和/或所述mrna编码蛋白补充治疗相关蛋白。

36、进一步地，和/或所述mrna编码肿瘤抗原相关蛋白。

37、进一步地，和/或所述mrna编码和/或基因编辑工具蛋白。

38、进一步地，和/或所述mrna编码细胞因子。

39、在具体地实施方式中，所述mrna编码弹状病毒科、呼肠弧病毒科、黄病毒科、披膜病毒科、嗜肝病毒种、正粘病毒科、副粘病毒科中至少一种病毒的抗原蛋白。

40、在具体地实施方式中，所述病毒选自疟疾病毒、合胞病毒、寨卡病毒、流感病毒、埃博拉病毒、天花病毒、狂犬病毒、甲型流感病毒、艾滋病病毒、汉坦病毒、登革热病毒、马尔堡病毒、sars病毒、肝炎病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、轮状病毒、诺如病毒、单纯疱疹病毒(hsv)、水痘病毒、eb病毒(ebv)、人类嗜t细胞病毒、人乳头瘤病毒(hpv)中至少一种。

41、在具体地实施方式中，所述组合物以任选自脂质纳米颗粒、plga纳米粒、胶束、脂质体、核-壳纳米粒、聚合物纳米颗粒中的一种形式存在。

42、在具体地实施方式中，所述组合物以脂质纳米颗粒形式存在。

43、进一步地，所述药物组合物进一步包含阳离子脂质、中性磷脂、类固醇或胆固醇、聚乙二醇化脂质的至少之一。

44、更进一步地，所述中性磷脂选自dope、dspc、dopc、dspe、dmpc、dmpe、dppc、dppe、depc、hspc、popc中至少一种。

45、在具体地实施方式中，上述金属离子与核酸的质量比为0.01∶1～100∶1。

46、再一方面，本发明提供一种基因转染率提高的脂质纳米粒，所述纳米粒包含金属离子。

47、进一步地，所述金属离子是二价金属离子。

48、进一步地，所述二价金属离子任选自以下一种或多种：锰和/或锰的同族二价金属离子、锌和/或锌的同族二价金属离子、钴和/或钴的同族二价金属离子。

49、进一步地，所述二价金属离子选自以下一种或多种：锰和/或锰的同族二价金属离子。

50、进一步地，所述二价金属离子是二价锰离子。

51、进一步地，所述金属离子任选自以下一种或多种的锰和/或锰的同族金属离子、锌和/或锌的同族金属离子、钴和/或钴的同族金属离子。

52、进一步地，所述金属离子任选自一种或多种锰和/或锰的同族金属离子。

53、进一步地，所述金属离子是锰离子，任选自以下一种或多种价态：+2、+3、+4、+5、+6和+7。

54、进一步地，上述纳米粒任选自脂质纳米颗粒、plga纳米粒、胶束、脂质体、核-壳纳米粒、聚合物纳米颗粒中的一种。

55、进一步地，所述纳米粒是脂质纳米颗粒。

56、进一步地，上述基因选自核酸。

57、进一步地，所述核酸选自mrna、dna、反义寡核苷酸(aso)、sirna、shrnas、mirna、antimirs、mirna mimics、antimirs、适配体、质粒、sgrna中至少一种。

58、进一步地，所述核酸是mrna。

59、进一步地，所述金属离子与核酸的质量比为0.01∶1～100∶1。

60、根据本发明的具体实施例，金属离子尤其是二价金属离子，例如锰离子、锌离子、钴离子及其同族金属离子可促进核酸、小分子化药、大分子化药、蛋白药、多肽、抗体等活性成分的溶酶体逃逸，进而提高活性成分在细胞内和或动物体内的药效学活性，最终实现药物临床疗效提高的目的。