一种吸入式噻托溴铵脂质体混悬液及其制备方法和应用与流程

本发明属于医药，具体涉及一种吸入式噻托溴铵脂质体混悬液及其制备方法和应用。

背景技术：

1、慢性阻塞性肺病(copd)简称慢阻肺，是一种最常见的慢性炎症性肺疾病。全球40岁以上人群的发病率高达9％～10％，我国为8.2％。然而传统的治疗药糖皮质激素和支气管扩张药不足以有效预防慢性阻塞性肺病的发展。此外，有研究表明这些常规的治疗药并不具有特异性，如果系统地、高剂量地使用会对健康产生不利影响。

2、噻托溴铵能长时间阻滞胆碱能神经介导的支气管平滑肌收缩，可持久地扩张支气管，有效改善肺功能，缓解呼吸困难，降低慢性阻塞性肺部疾病(copd)加重的频率，是一种长效抗胆碱能支气管扩张药，主要用于慢性阻塞性肺部疾病的维持治疗。目前噻托溴铵的上市剂型只有吸入喷雾和吸入粉雾两种剂型。此外，在噻托溴铵相关药动学实验中，给年轻的健康志愿者吸入干粉后测得的绝对生物利用度为19.5％，而噻托溴铵的口服溶液的绝对生物利用度只有2～3％。采用吸入途径给药时，大部分药物(60-90％)沉积在胃肠道，只有少量药物(10-40％)到达靶器官肺。因此，亟需发明一种吸入式噻托溴铵脂质体混悬液以提高噻托溴铵的肺部生物利用度。

技术实现思路

1、针对上述情况，本发明提供一种吸入式噻托溴铵脂质体混悬液及其制备方法和应用，可有效增强慢阻肺患者的治疗。

2、本发明提供的技术方案如下：

3、一种吸入式噻托溴铵脂质体混悬液，所述吸入式噻托溴铵脂质体混悬液包括脂质体包封的噻托溴铵和游离的噻托溴铵；所述包封的噻托溴铵包埋在脂质体内部，所述脂质体可采用豆磷脂、卵磷脂、胆固醇、二月桂酞磷脂酞胆碱、二硬脂酰磷脂酰甘油(dspg)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(dspc)、二棕榈酰磷脂酰胆碱(dppc)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(dspe-peg 2000)等制备而成，但由于肺泡ⅱ型上皮细胞分泌的一种复杂的脂蛋白肺表面活性物质，其主要成分为二棕榈酰卵磷脂(dppc)，此外，聚乙二醇化的磷脂(二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000)具有近中性的表面电荷，可以有效促进药物肺粘液层的渗透。因此为了使药物更有效的跨越肺粘液屏障，提高药物肺部生物利用度，所述脂质体更优采用二棕榈酰磷脂酰胆碱、胆固醇和二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000制备而成。

4、进一步的，所述二棕榈酰磷脂酰胆碱、胆固醇和二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000的质量比为6～8:0.5～1:0.5～0.8。

5、进一步的，所述吸入式噻托溴铵脂质体混悬液的粒径范围为200-500nm。

6、本发明还提供上述吸入式噻托溴铵脂质体混悬液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将二棕榈酰磷脂酰胆碱、胆固醇和二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000加入有机溶剂，加入噻托溴铵溶液，并进行水化，在冰浴条件下对混合液进行超声分散，得到吸入式噻托溴铵脂质体混悬液。

7、进一步的，所述有机溶剂为氯仿或无水乙醇。

8、进一步的，二棕榈酰磷脂酰胆碱、胆固醇和二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000的总质量与有机溶剂的质量体积比为4～5mg:1ml。

9、进一步的，所述噻托溴铵溶液采用氯化钠溶液或乙醇溶液溶解。

10、进一步的，所述氯化钠溶液的ph为3.0-3.2，浓度为0.9％，所述氯化钠溶液采用0.1mol/l盐酸作ph调节剂。

11、进一步的，超声分散前采用旋转蒸发仪除去有机溶剂。

12、本发明还提供上述吸入式噻托溴铵脂质体混悬液需经专用雾化器装置气雾化后并经肺吸入递送药物。

13、本发明还提供上述吸入式噻托溴铵脂质体混悬液在制备慢阻肺雾化药物中的应用。

14、吸入式噻托溴铵脂质体混悬液的制备可采用以下方法：

15、方法一：称取质量比6～8:0.5～1:0.5～0.8的二棕榈酰磷脂酰胆碱(dppc)、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(dspe-peg 2000)置于圆底烧瓶中后，加入适量氯仿，待其溶解混匀后使用旋转蒸发仪除去有机溶剂，在瓶底内部得到一层均匀的白色薄膜；加入适量含有噻托溴铵原料药的0.9％氯化钠溶液(ph 3.0-3.2，0.1mol/l盐酸作ph调节剂)进行水化，然后冰浴条件下对脂质体混悬液进行超声分散(100w，5min)，即得到噻托溴铵脂质体混悬液。

16、方法二：称取质量比6～8:0.5～1:0.5～0.8的dppc、胆固醇以及dspe-peg 2000于圆底烧瓶内，加入适量无水乙醇溶解混匀，再缓慢加入一定量含噻托溴铵原料药的乙醇溶液，水浴条件下使用旋转蒸发仪除去有机溶剂；再加入适量ph3.0-3.2(0.1mol/l盐酸作ph调节剂)的0.9％氯化钠溶液进行水化，然后冰浴条件下对脂质体混悬液进行超声分散(100w，5min)，即得到噻托溴铵脂质体混悬液。

17、所述吸入式噻托溴铵脂质体混悬液中含有的脂质优选自豆磷脂、卵磷脂、胆固醇、二月桂酞磷脂酞胆碱、二硬脂酰磷脂酰甘油(dspg)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(dspc)、二棕榈酰磷脂酰胆碱(dppc)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(dspe-peg 2000)等，由于肺泡ⅱ型上皮细胞分泌的一种复杂的脂蛋白肺表面活性物质，其主要成分为二棕榈酰卵磷脂(dppc)，此外，聚乙二醇化的磷脂(二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000)具有近中性的表面电荷，可以有效促进药物肺粘液层的渗透。因此为了使药物更有效的跨越肺粘液屏障，更优选自二棕榈酰磷脂酰胆碱(dppc)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(dspe-peg2000)、胆固醇。

18、所述吸入式噻托溴铵脂质体混悬液的粒径范围为200-500nm。

19、不同方法制备得到的脂质体结果如表1所示，不同方法制备的脂质体包封率无明显差异，然而使用方法一得到的脂质体粒径较小，因此噻托溴铵脂质体混悬液的制备方法优选自方法一。

20、所述方法制备的吸入式噻托溴铵脂质体混悬液经雾化器递送药物。

21、所述方法制备的吸入式噻托溴铵脂质体混悬液由脂质(磷脂、胆固醇)和包埋在脂质体内部中的噻托溴铵所制备，该混悬液包含脂质体包封的噻托溴铵和游离的噻托溴铵，其可以被雾化器气雾化并经肺吸入，以促进慢阻肺的治疗。

22、有益效果

23、提高噻托溴铵药物生物利用度可以采用肺部靶向策略，包括利用颗粒大小被动靶向肺部和避免被肺黏液当作外来物质而被捕获清除。颗粒在呼吸道的沉积是取决于其大小的，吸入液滴或颗粒的空气动力学直径大于5μm的较大颗粒通常会导致颗粒在口咽区沉淀，从而进入胃肠道而不是呼吸道；颗粒直径在1-5μm之间，则会沉积在下呼吸道、终末细支气管和肺泡中，从而穿透肺组织。

24、脂质体是具有良好生物相容性、生物可降解性的囊泡，能够包封和携带药物，并已用于广泛的制药应用，包括雾化药物递送。脂质体主要由磷脂和胆固醇组成，其组成成分与肺组织生物膜成分相似，被脂质体包封的药物经患者吸入后可以避免被肺黏液捕获并清除，从而有效穿透肺组织屏障；同时调整药脂比和制备方法以控制脂质体的粒径大小，再通过调整雾化装置雾化吸入针对特定部位在肺腔内递送所需剂量的药物，从而提高体内药物肺部靶向率、最大限度地减少剂量和药物的全身分布以及副作用。

25、本发明提供了吸入式噻托溴铵脂质体混悬液，其用于慢阻肺的治疗，具有以下优点：1)减少药物剂量；2)粒径可控且小，可提高药物肺部沉积率；3)选用肺表面活性剂相似组成成分的磷脂，可避免被肺黏液捕获清除，跨越肺组织屏障；4)雾化吸入给药可减少药物全身分布及副作用；5)提高药物的生物利用度。