专利名称：含苯并咪唑类驱肠虫药和亚甲二氧苯基类化合物的增效组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及含有苯并咪唑类驱肠虫药的药用组合物(尤其是不仅仅兽医应用)，以及通过与胡椒基丁醚或其他亚甲基二氧苯基类杀虫剂增效剂一起应用的增效作用。
苯并咪唑类是广泛用作为控制家畜和农业牲畜体内寄生虫(尤其是线虫)的熟知的一类驱肠虫药物。阿苯达唑是用于人的驱肠虫药物。虽然上述药物成功地被应用，但是许多上述苯并咪唑类驱肠虫药在体内通过氧化作用过程被降解，结果加速了它们的排泄，因而限制了其效果，这意味着需要定期的给药。
此外，某些寄生虫对特定的苯并咪唑类驱肠虫药具有抗性。
胡椒基丁醚是熟知的杀虫剂增效剂(见Merck Index 7446)。胡椒基丁醚与其他的亚甲二氧苯基类杀虫剂增效剂广泛地与拟除虫菊酯杀虫剂一起应用。
据报道(Food Chem.Toxico1.(1992 Dec)30(12)，1021-30)，通过用微粒体单氧化酶系统的抑制剂(即2-二乙氨基乙基-2，2-二苯基戊酸酯盐酸盐和胡椒基丁醚)进行预处理，结果苯并咪唑类驱肠虫剂噻苯哒唑对小白鼠肾的急性毒性作用增高。该参考文献仅限于毒性方面的研究，没有公开关于该处理对驱肠虫效果的影响。
一般来讲，本发明涉及以下的发现苯并咪唑类的驱肠虫作用可以通过同时服用亚甲二氧苯基类杀虫剂增效剂如胡椒基丁醚而提高。
因此，本发明尤其提供了药物组合物，该组合物含有驱肠虫有效剂量的苯并咪唑类或其前体药物以及亚甲二氧苯基类增效剂。
所述苯并咪唑类药物在体内尤其易受到氧化降解作用。如果所述苯并咪唑含有一硫代基，那么体内的氧化作用通常是这样进行的经过亚砜代谢产物(它也可有驱肠虫活性)变为无活性的砜。
另一氧化的作用过程包括例如在苯并咪唑环5位上的羟基化作用。
本发明还涉及应用亚甲二氧苯基类增效剂以增强所述苯并咪唑类或其前体药物的效果。
此外，本发明包括治疗动物和人体内寄生虫感染的方法，该方法是服用苯并咪唑类或其前体药物以及亚甲二氧苯基类增效剂。
所述亚甲二氧苯基类增效剂是肝脏胞色细胞P450体系的抑制剂。许多该类杀虫剂增效剂(它们本身不具有驱肠虫或杀虫作用)称作为拟除虫菊酯类杀虫剂的增效剂，并且通常将其包括在本发明内。具体的增效剂包括胡椒基丁醚、胡椒基环己烯酮、羧乙基胡椒基环己烯酮、芝麻素、正丙基增效剂和增效砜(化学名为1，2-(亚甲二氧基)-4-[2-(辛基亚硫酰基)丙基]苯)。
所述药用组合物可以包括适用于施药方法的药学上适用的惰性载体或稀释剂。因此，所述药用组合物可以经口给药或者非经胃肠道给药(包括皮下注射、肌内注射和静脉注射)。对于经口给药，该药用组合物可以作为灌服制剂(例如溶液剂或水混悬液剂)。按照已知的制剂技术，该灌服制剂可以含有合适的混悬剂、防腐剂、增稠剂或乳化剂。经口给药还可以为将所述组合物加到粮食中的方式给药，或作为食物块。还可以将所述组合物配制成小丸剂或颗粒剂。特别是给人服用，可以将所述组合物配制成固体单位剂量形式(例如片剂，胶囊剂或扁囊剂)，或配制成液体单位剂量形式(例如含有液体的胶囊剂)。
所述组合物可以作为瘤胃内的大丸剂给予反刍动物服用，该大丸剂保留在反刍动物的瘤胃中，并在延长的时间内传送该组合物。合适的瘤胃内的大丸剂在本技术领域内是已知的。
对于非经胃肠道给药，所述组合物可以为无菌溶液剂或混悬液剂，并且可以含有防腐剂和使所述组合物与预计的接受者的血液等张的其他物质。所述组合物通常可以单位剂量或多倍剂量置于封口容器内。
所述组合物还可以配制成局部给药制剂(例如糊剂、粘稠的液体或凝胶)，或者为通常所说的冲洗剂(pour-on formulation)，其中有效药物流过皮肤。
所述组合物还可以配制成直肠给药、经鼻给药或阴道给药的剂型。
所述苯并咪唑类药物可以与亚甲二氧苯基类增效剂一起以单一的组合物形式服用，或者将所述苯并咪唑类药物与亚甲二氧苯基类增效剂在很短的时间间隔内分别地服用，以致于在接受者的身体内这两种药物进行混合。
另外，所述组合物可以按驱肠虫给药惯用的其他方式给药。
按照亚甲二氧苯基类增效剂所产生的增效作用，虽然所述苯并咪唑类药物的用量可以减少，但通常以无毒的常用剂量给予苯并咪唑类药物。根据体重，苯并咪唑类药物一般以1-50mg/kg给药。另外，亚甲二氧苯基类增效剂的用量取决于苯并咪唑类药物自身的效果和性质，但通常的剂量范围为0.01-0.5g/kg体重。亚甲二氧苯基类增效剂与苯并咪唑类药物的比例为10～500∶1，尤其为30～120∶1(按重量比)。
苯并咪唑类药物可以细分为不同的类型，例如有含有硫代基的，含有亚砜基的，含有醚基的，以及含有氨基甲酸甲酯的。含有噻唑基团的苯并咪唑类药物(例如噻苯达唑和坎苯达唑)是不太好的。
所述苯并咪唑类药物通常在体内经历氧化降解作用，但据信胡椒基丁醚或其他的亚甲二氧苯基类增效剂具有减轻该氧化降解的作用，因而提高了苯并咪唑类药物的血浆含量，所以可以延长其滞留的时间。特别优选的苯并咪唑类药物及其前体药物包括奈托比胺、非班太尔、阿苯达唑、阿苯达唑亚砜、芬苯达唑、奥芬达唑、三氯苯达唑、三氯苯达唑亚砜、噻苯达唑、坎苯达唑、奥苯达唑和鲁苯达唑。
本发明组合物尤其不仅仅兽医应用，一般的动物包括家畜和农业牲畜，尤其是反刍动物，特别是猪、山羊、马、牛、绵羊、狗、猫和家禽。
该组合物也适合人应用，特别适合于对耐药性的体内寄生虫。胃肠道感染特别有用的组合物含有阿苯达唑或阿苯达唑亚砜以及胡椒基丁醚。
所述组合物对体内寄生虫肠虫，尤其是胃肠道的线虫、绦虫和吸虫是有效的。具体的例子包括钩虫病、蛔虫病、绕虫病、类园线虫病和鞭虫病。
本申请应用的术语前体药物是本技术领域熟知的术语，其意思是指一药物本身未必是有效的，但它在体内可转变为驱肠虫有效的代谢产物。奈托比胺和非班太尔是前体药物，它们在体内转变为苯并咪唑类化合物。
下面仅以实施例叙述本发明的具体情况。实施例1(芬苯达唑)为了使个体之间的误差减至最小，我们的试验方案为交叉给药设计(每种动物用作为其自身的对照)。在交叉给药设计之间有5周冲刷期。在本试验中应用6只山羊。
第一阶段以7.5mg/kg的剂量经口给予芬苯达唑(Panacur2.5％)。给药之前和给药后0.25、0.5、1、2、4、8、12、24、32、48、72和96小时采集血样。
第二阶段在给予芬苯达唑(7.5mg/kg)之前1小时，经肌内给予动物胡椒基丁醚，剂量为0.5g/kg。如第一阶段中一样采集血样。
用高效液相色谱分析血浆标本中的芬苯达唑。
从表1所示，将胡椒基丁醚与芬苯达唑并用，导致血浆浓度-时间曲线(AUC)下的面积明显增加，并且也明显地延长了芬苯达唑的保留时间。
图1列示了单独给予芬苯达唑血浆的芬苯达唑的浓度(方格)，或芬苯达唑与胡椒基丁醚并用血浆的芬苯达唑的浓度(棱形)。
图2列示了在单独给予芬苯达唑之后有效代谢产物芬苯达唑亚砜相应的含量(空心园圈)，以及与胡椒基丁醚并用有效代谢产物芬苯达唑亚砜相应的含量(实心园圈)。实施例2(阿苯达唑)在本试验中应用5只绵羊。
按以上相同的方案进行，但驱肠虫药应用阿苯达唑(Valbazen2.5％)，其剂量为7.5mg/kg。用高效液相色谱分析血浆标本中代谢产物阿苯达唑亚砜。
结果见表1和图3。
图3列示了单独给予阿苯达唑血浆的阿苯达唑亚砜(有效代谢产物)的浓度(方格)，以及与胡椒基丁醚并用阿苯达唑亚砜(有效代谢产物)的血浆浓度(棱形)。
表1血浆浓度-时间曲线下的面积(μg.h/ml)有效药物 单独应用 有效药物与胡椒基丁醚并用芬苯达唑 4.17 16.57芬苯达唑亚砜 7.72 22.90阿苯达唑亚砜 25.61 45.41实施例3(最佳剂量)为了测定胡椒基丁醚与芬苯达唑的最佳浓度比例进行了6阶段试验。
在6个阶段给予6只一年龄的黑面绵羊固定剂量(5mg/kg)的芬苯达唑(Panacur 2.5％)。按表2所列方案，同时经胃管给予胡椒基丁醚。这是指在给予苯并咪唑类药物的同时每只绵羊得到0、15、31、63、125和250mg/kg胡椒基丁醚。
按实施例1应用的同样采血方案进行，在本研究的每个阶段之间有4周冲刷期。
在单个动物中分析所有的合并用药的比例，因此得到的目标剂量比为胡椒基丁醚63mg/kg芬苯达唑5mg/kg(比例为12.6至1)。
在本试验结束时，杀死所有的动物，并进行严格的肉眼和病理组织学检查。未见异常的肉眼能见到的疾患。病理组织学检查的结果表明没有明显的过量用药的毒性。实施例4(效果)进行本研究是为了测定并用胡椒基丁醚与芬苯达唑对苯并咪唑类具有抗性的刍胃寄生虫的效果，并且与单独应用胡椒基丁醚和芬苯达唑进行比较。
将24只寄生胎的首次用作试验的萨福克种杂种小羊分配为4组，每组6只。每只小羊经口得到6000条对苯并咪唑类药物具有抗性的普通奥期脱氏线虫和2400条对苯并咪唑类药物具有抗性的捻转血矛线虫。
感染动物28天之后如下述进行处理1组 未处理2组 经胃管给予胡椒基丁醚(63mg/kg)3组 经胃管给予芬苯达唑(5mg/kg)4组 经胃管给予胡椒基丁醚(63mg/kg)和芬苯达唑(5mg/kg)。
按照实施例1中应用的方案从所有动物中采集血样。
对所有小羊的粪便取样并在治疗后7天将其全部杀死(35天)。用MeMaster卵计数技术(Gordon和Whitlock(1939)J.Councilfor Scientific and Industrial Res.，12，50)测定类便中线虫卵数目，用Ritchie等(1966)(Amer.J.Vet.Res.，27，659-667)的稀释方法测定普通奥斯脱氏线虫。测定所有刍胃动物的捻转血矛线虫的数目。
结果表明，单独应用芬苯达唑以及合并应用胡椒基丁醚和芬苯达唑，在粪便中卵的数目分别减少79.7％和98.4％(表3)。与单独应用芬苯达唑相比，在减少粪便中卵的数目方面合并应用明显更有效(P＜0.05)。
既不应用胡椒基丁醚也不单独应用芬苯达唑，尸体剖检中发现明显地减少了存在于羊刍胃中普通奥斯脱氏线虫数目。但是，合并用药减少了普通奥斯脱氏线虫84.9％(表4)。
在尸体剖检中发现，单独应用芬苯达唑以及合并的药均明显地减少了捻转血矛线虫的数目。但是与单独应用芬苯达唑相比，合并用药明显更有效(P＜0.005)。单独应用胡椒基丁醚是无效的(表5)。实施例5(肝细胞研究)为了测定胡椒基丁醚和芬苯达唑(50μmol)的代谢相互作用，应用由大鼠中培养的肝细胞开始进行试验。在单独给予芬苯达唑时，细胞培养基中芬苯达唑的浓度约为2μg/ml。在与胡椒基丁醚并用，保持了更高浓度的芬苯达唑(约3.7μg/ml)。在胡椒基丁醚存在下，亚砜和砜代谢产物的浓度更低。从该试验中得知，胡椒基丁醚通过大鼠肝细胞抑制芬苯达唑的氧化代谢作用。实施例6应用奥芬达唑重复实施例5的方法并得到同样的结果。实施例7应用阿苯达唑重复实施例5的方法并得到同样的结果。实施例8应用三氯苯达唑重复实施例5的方法并得到同样的结果。
表2为了测定胡椒基丁醚与芬苯达唑的最佳比例，滴定试验(实施例3)的剂量方案如下羊1羊2羊3羊4羊5羊6交叉给药剂量1 0 250125 63125250215 0250 31 63125331 15 0 15 31 63463 31 15 0 1 31525 63 31250 0 16 250 125 63125250 0表3在治疗7天之后羊粪便中卵的数目，平均值±SD每克粪便中卵的数目1组 未处理 491±2672组 胡椒基丁醚 483±3423组 芬苯达唑 100±84*4组 胡椒基丁醚加芬苯达唑88±20**方差分析表明，与1组(对照组)相比差异显著(P＜0.005**，P＜0.05*)。
表4治疗7天之后杀死的羊中普通奥斯脱氏线虫的数目，平均值±SD普通奥斯脱氏线虫的数目1组 未处理 2985±6542组 胡椒基丁醚 3783±4413组 芬苯达唑 2875±13084组 胡椒基丁醚加芬苯达唑450±565方差分析表明，与1组(对照组)相比差异显著(P＜0.001)。
表5治疗7天之后杀死的羊中捻转血矛线虫的数目，平均值±SD捻转血矛线虫的数目1组 未处理 345±692组 胡椒基丁醚 320±133*3组 芬苯达唑 58±294组 胡椒基丁醚加芬苯达唑 7±8*方差分析表明，与1组(对照组)相比差异显著(P＜0.001)。
权利要求
1. 含有驱肠虫有效剂量的苯并咪唑类药物或其前体药物以及亚甲二氧苯基类增效剂的药用组合物，条件是该苯并咪唑类驱肠虫剂不是噻苯达唑。
2. 按照权利要求1所述的组合物，该苯并咪唑类药物含有硫代基团。
3. 按照权利要求2所述的组合物，其中所述苯并咪唑类驱肠虫剂是选自阿苯达唑、芬苯达唑和三氯苯达唑。
4. 按照权利要求1所述的组合物，其中所述苯并咪唑类药物含有亚砜基团。
5. 按照权利要求4所述的组合物，其中所述苯并咪唑类药物选自阿苯达唑亚砜、奥芬达唑和三氯苯达唑亚砜。
6. 按照权利要求1所述的组合物，其中所述苯并咪唑类药物为氨基甲酸甲酯。
7. 按照权利要求6所述的组合物，其中所述苯并咪唑类药物是选自阿苯达唑、阿苯达唑亚砜、芬苯达唑、奥芬达唑、奥苯达唑和鲁苯达唑。
8. 按照权利要求1所述的组合物，其中所述苯并咪唑前体药物是选自奈托比胺和非班太尔。
9. 按照上述任何一项权利要求所述的组合物，其中亚甲二氧苯基类增效剂是选自胡椒基丁醚、羧乙基胡椒基环己烯酮、芝麻素、正丙基增效剂和增效砜。
10. 按照上述任何一项权利要求所述的组合物，其中苯并咪唑类药物或其前体药物与亚甲二氧苯基类增效剂的比例为1∶10～500(重量比)。
11. 按照上述任何一项权利要求所述的组合物，该组合物还含有药用载体。
12. 应用驱肠虫有效剂量的苯并咪唑类药物或其前体药物以及亚甲二氧苯基类增效剂制备具有增效作用的驱肠虫有效的组合物。
13. 人或动物的驱肠虫治疗的方法，该方法包括服用驱肠虫有效剂量的苯并咪唑类药物或其前体药物以及亚甲二氧苯基类增效剂。
14. 按照权利要求13所述的方法，其中根据人或动物体重服用的苯并咪唑类药物的剂量为1～50mg/kg。
15. 按照权利要求13或14所述的方法，其中根据人或动物体重服用的亚甲二氧苯基类增效剂的剂量为0.01-0.5g/kg。
全文摘要
人或动物中应用苯并咪唑类药物(如芬苯达唑、阿苯达唑、奥芬达唑或三氯苯达唑)驱肠虫的效果可以通过应用胡椒基丁醚或其他亚甲二氧苯基类增效剂而增强。
文档编号A61K31/415GK1117267SQ9419109
公开日1996年2月21日 申请日期1994年2月2日 优先权日1993年2月3日
发明者H·A·本查欧伊, Q·A·麦克尔拉 申请人:英国技术集团有限公司