新的血小板凝集抑制剂的制作方法

专利名称：新的血小板凝集抑制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的化合物、其制备方法、其用途和含有该新化合物的药物组合物。该新化合物在治疗、特别是预防血小板凝集方面是有用的。
背景和先有技术许多会聚路径导致血小板凝集。无论最初的刺激是什么，最终共同结果是由于纤维蛋白原结合于膜结合部位，糖蛋白IIb/IIIa(GPIIb/IIIa)而造成血小板的交叉连接。GBIIb/IIIa抗体或对抗药的高抗血小板效力，可通过它们对该最终共同结果的干扰来解释。不过，该效力也可解释已由这类试剂观察到的出血问题。
凝血酶可以引起血小板聚集，这大部份与其它路径无关，但是，大量的凝血酶似乎不可能在未通过其他机理预先活化血小板之前存在。凝血酶抑制剂如水蛭素是高效抗血栓形成剂，但是，由于它们既起抗血小板剂和又起抗凝血剂作用，可能再引致过多出血(TIMI9a调研者(1994)，Circulation 90，pp.1624-1630；打开闭合的冠状动脉的全球采用的策略(GUSTO)IIa调研者(1994)Circulation 90，pp.1631-1637；Neuhaus K.L等，(1994)Circulation 90，pp.1638-1642)。
已知阿司匹林对血小板凝集作用具有有益作用(参见例如，抗血小板试验者的合作(1994)，Br.Med. J.308，pp.81-106；抗血小板试验者的合作(1994)，Br.Med.J.308，pp.159-168)，但是，对于其它ADP来源引起的凝集作用，例如损伤细胞或在湍动血流状态下释放的ADP不起作用。ADP的重要作用被下述事实支持，即其它试剂如肾上腺素和5-羟色胺(5HT，又称serotonin(5-羟色胺))将仅仅在ADP存在下产生凝集作用。
本发明的发明人始于下述观点，即对ADP对其血小板膜受体，P2T-purinoceptor作用的拮抗剂，可能会给出一种比阿司匹林更有效的抗血栓形成剂，但要比血纤蛋白原受体的拮抗剂对出血的显著作用要更弱。
US4543255公开了2-氨基-6-取代的嘌呤2′-脱氧核糖呋喃糖苷和2-氨基-6-取代的-8-氮杂嘌呤2′-脱氧核糖呋喃糖苷的碳环类似物。先于该专利的化合物是作为对疱疹病毒具有抑制作用而被公开。
WO 90/06671公开了治疗乙型肝炎病毒的各种核甙的碳环类似物的用途。
本发明的目的是要寻找一类新化合物，它们具有改进的P2T-受体拮抗药活性并且对已知的抗血小板剂有显著的优点，如对P2T-受体有改进的效力、减低的副作用、无毒和较好的选择性。
上述问题由于提供了一类如下所述的5，7-二取代的1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基衍生物新化合物而得到解决。
发明概要本发明的新化合物由通式(I)定义，
式中B是O或CH2；X选自NR1R2，SR1和C1-C7烷基；Y选自SR1，NR1R2和C1-C7烷基；R1和R2各自独立地选自H或在烷基链上或烷基链中任意取代有一个或多个O、S、N或卤素的C1-C7烷基；R3和R4都是H或者R3和R4一起形成键；A是COOH、C(O)NH(CH2)pCOOH、C(O)N[(CH2)qCOOH]2、C(O)NHCH(COOH)(CH2)rCOOH，或5-四唑基，其中p、q和r各是或独立地是1、2或3。
烷基的定义包括直链、支链和环烷基，以及饱和和不饱和烷基链。
O、S和N取代基可以是在烷基链上或烷基链内。这一定义意味着在C1-C7烷基中的一个亚甲基可任意地被O、S或NH置换和其中烷基链也可任意地被一个或多个OH、SH、NH2或卤素取代。
卤素包括氯和氟。
在本发明范围内也包括通式(I)化合物的药用盐以及前药如其酯和其酰胺。
在本发明范围内也包括通式(I)化合物的互变异构体、对映体和非对映体形式。
本发明优选的化合物是如下的通式(I)化合物，式中X是NR1R2；Y是SR1；A是C(O)NHCH(COOH)(CH2)rCOOH；和其中R1、R2和r的定义同前。
本发明特别优选的化合物是如下的通式(I)化合物，式中X是NR1R2，其中R1是氢和R2的定义同上；Y是SR1，其中R1是任意取代有一个或多个卤素的C1-C5烷基；和A是C(O)NHCH(COOH)CH2COOH。
本发明最优选的化合物是(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脱氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸；[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]丙酰基]-L-天冬氨酸；[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3二羟基环戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸；和[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸单铵盐。
本发明的新化合物在治疗，特别是预防血小板凝集方面是有用的。因而，本发明的新化合物作为抗血栓形成剂是有用的，也因此在治疗或预防不稳性心绞痛、冠状血管成形术(PTCA)和心肌梗塞方面是有用的。
本发明的化合物在治疗或预防粥样硬化的初期的动脉血栓形成并发症，例如血栓形成发作、外周血管病、心肌梗塞(即无血栓溶解)也是有用的。
由于干涉了粥样硬化疾病如心管成形术、动脉内膜切除术、斯腾特氏印模植入(stent placement)、冠状的和其它的血管移植外科手术，本发明的化合物的进一步适应症可用于治疗或预防动脉血栓形成并发症。
本发明的化合物的进一步适应症还可用于治疗或预防外科或机械损伤的血栓形成并发症，如紧接外科或意外创伤、修复手术包括皮肤活瓣(skin flap)和“复位”手术如胸复位的组织修补。
本发明的化合物还可用于预防机械诱导的体内血小板激活如心肺旁路(微血栓栓塞的预防)；预防机械诱导的体外血小板激活，例如应用化合物对血液产品，如血小板浓缩物的保护；预防分流术闭塞，如肾渗析和去血浆法，血管损伤/炎症，如脉管炎、动脉炎、肾小球性肾炎，和组织移植排斥等继发的血栓形成。
本发明的化合物有用的进一步适应症是扩散血栓形成/血小板消耗组分如播散的血管内凝结、血栓形成的血小板减少性紫癜、溶血的尿毒综合症、败血病的血栓形成并发症、成人呼吸窘迫综合症、抗磷脂综合症、肝素诱导的血小板减少症和子痫前期/子痫。
本发明的化合物的进一步的适应症还可用于治疗和预防静脉血栓形成如深度静脉血栓形成、静脉闭合病、血液状态如血小板增多和红细胞增多，和偏头痛。
在本发明的特别优选实施方案中，这些化合物用于治疗不稳性心绞痛、冠状血管成形术和心肌梗塞。
在本发明的另一特别优选实施方案中，本发明的化合物可用作为辅助性治疗以预防在控制不稳性心绞痛、冠状血管成形术和急性心肌梗塞期间的冠状动脉血栓形成，此即周围血栓溶解在血栓形成的病症治疗中通常可用于辅助治疗的试剂为，例如肝素和/或阿司匹林，还有将提及的一些。
制备方法本发明的化合物可用如下方法制备。
A)(i)将起始原料4，5-二氨基-2，6-二巯基嘧啶进行烷基化反应后接着重氮化，得到通式(II)化合物，
式中R1的定义如通式(I)。
(ii)步骤(i)的通式(II)的产物与通式(III)化合物在惰性溶剂中和碱存在下反应，
式中P2是保护基；和L是离去基。可以使用的溶剂包括DMF和可以使用的碱包括氨基钠。反应在 20°-50℃进行。反应优选在环境温度下，溶剂为乙腈和碱为氢化钠。适宜的保护基包括酰基如苯甲酰基，和适宜的离去基包括卤素如溴。
该步骤中使用的通式(III)试剂由适当保护的核糖的卤化来制备。
然后基团X＝NR1R2(其中R1和R2的定义如通式I)可以通过与通式为HNR1R2(其中R1和R2的定义如通式(I))化合物反应而导入。该反应在惰性溶剂中于0°-150℃下进行；优选溶剂是1，4-二噁烷和温度为100℃。
保护基P2可以通过用亲核试剂如在醇溶剂的醇盐，优选在甲醇中的甲醇钠在60℃下处理而除去。
在该步骤中获得的产物是通式(IV)化合物，
式中X是NR1R2；Y是SR1；和其中，R1和R2的定义如通式(I)。
(iii)将步骤(ii)的式(IV)产物，在惰性溶剂中和无机或有机酸催化剂存在下于-15°-100℃，与适宜的羰基化合物或与原甲酸酯反应，得到通式(V)化合物，
式中X是NR1R2；Y是SR1；B是O；和P1是保护基，优选P1/P1一起形成环。P1/P1最好是乙氧基亚甲基，在1，4-二噁烷中用原甲酸三乙酯于50℃和三氯乙酸存在下引入。
B)(i)将4，6-二羟基-2-巯基嘧啶烷基化后接着硝化，然后将两个羟基转变成离去基，得到通式(VI)化合物，
式中R1的定义如通式(I)；和M是离去基；可以使用的离去基的例子是卤素。
在碱如丁基锂存在下在惰性溶剂如四氢呋喃中于10°-100℃下，将通式(VI)化合物与适当保护的5，6-二羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-3-酮，优选[3aS-(3aα，4β，7β，7aα]-四氢-2，2-二甲基-4，7-亚甲基-1，3-二噁环戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)酮反应，得到通式(VII)化合物，
式中Y是SR1；R1的定义如通式(I)；M是离去基；和P1是保护基。
优选P1/P1一起形成环如异亚丙基，和优选的离去基为氯。
优选的碱是氢化钠，溶剂是DMF和反应在环境温度下进行。
(ii)步骤(i)的通式(VII)产物中的硝基和内酰胺被还原，接着环化为三唑。
可提及的硝基的还原方法包括，在氢气氛下于1-5巴压力和适宜的溶剂如乙醇中，用过渡金属催化剂如在活性炭上的钯氧化。优选使用铁在酸性溶剂如乙酸中，在20°-150℃，最好在100℃下进行。
可提及的内酰胺的还原方法包括，在惰性溶剂如四氢呋喃中于O°-100℃下使用金属氢化物如氢化锂铝的复合物。优选在甲醇中的硼氢化钠在0°-30℃。
形成的二氨基醇，使用适宜溶剂中的金属亚硝酸盐或亚硝酸烷基酯如在稀盐酸水溶液中的亚硝酸钠，在-20°-100℃下经重氮化反应而环合。优选在80℃使用乙腈中的亚硝酸异戊酯。
在惰性溶剂中于0°-150℃下，通过与通式为HNR1R2的化合物反应导入X＝NR1R2基团，得到通式(V)的化合物，式中X是NR1R2；Y是SR1；R1和R2的定义如通式(I)；B是CH2；和P1是保护基。
优选溶剂是1，4-二噁烷，优选反应温度是100℃下进行。优选P1/P1一起形成环，其中P1/P1最好为异亚丙基。
C)(i)将步骤A)和B)的产物，即步骤A)和B)分别获得的通式(V)化合物氧化并经行烯化反应，得到通式(VIII)化合物，
式中B是O或CH2；X，Y和P1分别如步骤(A)和(B)的通式(V)中所定义的；A是COOR11，其中R11是低级(芳)烷基；和R3和R4一起形成键。
可以提及的氧化方法包括Swern反应并使用Dess Martin试剂，在适宜的溶剂中和-78°-120℃下。优选Pfitzner-Moffatt氧化反应，在DMSO中于环境温度下进行，保护基P1/P1一起形成环，最好P1/P1是异亚丙基。可提到的烯化方法包括Peterson反应和Horner Emmons反应。优选Wittig反应，使用磷内鎓盐如(烷氧羰基亚甲基)三苯膦，特别优选(叔丁氧羰基亚甲基)三苯膦。
(ii)使用酸或碱或氢解条件经脱酯化作用除去R11和最后进行脱保护，得到通式(I)化合物，式中X是NR1R2；Y是SR1；B是O或CH2；R1和R2的定义同通式(I)；R3和R4一起形成键；和A是COOH。
基团R11包括甲基、乙基、异丙基、叔丁基和苄基。使用酸性或碱性条件经水解可以除去R11。碱性水解可用在溶剂如乙醇水溶液中的金属氢氧化物或氢氧化季铵盐如氢氧化钠于10°-100℃下进行。优选在四氢呋喃水溶液中的氢氧化锂在环境温度下。酸性水解可用无机酸如HCl或强有机酸如三氟乙酸在适宜溶剂如1，4-二噁烷水溶液中进行。用过渡金属催化剂如钯/炭，在1-5巴的氢气氛下，在适宜溶剂如乙酸中氢解可除去苄基。优选的R11为叔丁基和在二氯甲烷中用三氟乙酸进行水解。
酰基和苄基情形中的保护基可以如上述R11所述那样除去，甲硅烷基保护基可用例如氟离子除去。低级烷基可用例如三溴化硼除去。亚甲基和乙氧基亚甲基可用例如无机或有机酸除去。所有这些方法可以在-80°-150℃温度下进行。优选R11为叔丁基和P1/P2为异亚丙基时，可用在二氯甲烷中的三氟乙酸于环境温度下同时除去。
D)(i)通式(I)的化合物，式中X是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；R1和R2的定义如通式(I)中；B是O或CH2；R3和R4是氢或一起形成键；和A是COOH；与具结构式为NH2(CH2)pCOOR11、NH[(CH2)qCOOR11]2或NH2CH(COOR11)(CH2)rCOOR11的化合物反应，式中p、q和r是1、2或3和R11是低级(芳)烷基；采用在肽合成中所用的方法，例如使用偶合剂。可用的偶合剂包括1，1′-羰基二咪唑、N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1，2-二氢喹啉。
通式(I)的化合物，式中X是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2，C1-C7烷基；B是O或CH2；R3或R4是氢或一起形成键；和A是C(O)NH(CH2)pCOOR11、C(O)N[(CH2)qCOOR11]2或C(O)NHCH(COOR11)(CH2)rCOOR11，其中p、q和r是1，2或3，和R11是低级(芳)烷基；在此步骤中也被获得。
可提及的基团R11包括甲基、乙基、异丙基、叔丁基和苄基。偶合反应在适宜溶剂中于-15°-120℃进行。优选在N，N-二甲基甲酰胺中的二环己基碳二亚胺或溴-三吡咯烷磷鎓六氟磷酸盐，在0℃至室温下进行。
(ii)步骤(i)的通式(I)产物被脱脂化，得到通式(I)的化合物，其中B是O或CH2；X是NR1R2，SR1，或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2，或C1-C7烷基；R1和R2各自和独立地为H或在烷基链内或烷基链上被一个或多个O、S、N或卤素任意取代的C1-C7烷基；R3和R4都为H，或R3和R4一起形成键；和A是C(O)NH(CH2)pCOOH、C(O)N[(CH2)qCOOH]2或C(O)NHCH(COOH)(CH2)rCOOH，其中p、q和r各自和独立地为1，2或3。
可提及的基团R11包括甲基、乙基、异丙基、叔丁基和苄基。基团R11可经酸性或碱性条件水解除去。碱性水解可以用金属氢氧化物或氢氧化季铵盐如氢氧化钠在溶剂如乙醇水溶液中于10°-100℃温度下进行。优选在四氢呋喃水溶液中的氢氧化锂在环境温度下进行。酸性水解可以用无机酸如HCl或强有机酸如三氟乙酸在适宜的溶剂如1，4-二噁烷水溶液中进行。苄基可采用过渡金属催化剂如钯/炭在1-5巴氢气压下，在适宜溶剂如乙酸中氢解而除去。优选为R11为叔丁基，用二氯甲烷中的三氟乙酸水解。
E)(i)步骤C(ii)所得产物经还原，得到通式(I)化合物，其中B、X、Y、R1和R2的定义如上面的步骤C(ii)；A是COOH；和R3和R4都是氢。
可采用的还原方法包括利用过渡金属催化剂如钯/炭，在1-5巴的氢压下于适宜的溶剂如乙酸中氢化。优选使用在60-100℃和四氢呋喃(THF)溶剂中由适宜的前体如2，4，6-三异丙基苯磺酰肼产生的二酰亚胺。
F)(i)适当保护的5-氨基-1-(β-D-呋喃核糖基)-1，2，3-三唑-4-甲酰胺，优选5-氨基-1-[2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-1，2，3-三唑-4-甲酰胺用碱处理后，再以通式为R1COOR5的酯处理，式中R1的定义如通式(I)和R5是低级烷基。然后，进行保护，得到通式(IX)化合物，
式中Y是C1-C7烷基；P1是保护基，和优选P1/P1一起形成环；P2是保护基；和M是OH。
可提及的保护基P2包括低级烷基或酰基。优选P2为乙酰基，它是在适当溶剂如二氯甲烷中于环境温度下以乙酰氯和三乙胺处理而引入。
最优选P1/P1是异亚丙基和P2是乙酰基。
(ii)M为OH的通式(IX)化合物被卤化，和在惰性溶剂中于0°～150℃下以通式HNR1R2化合物处理导入X＝NR1R2基。然后，除去保护基P2，得到通式(V)化合物，其中X是NR1R2；R1和R2的定义如通式(I)；Y是C1-C7烷基；B是O；和P1是保护基，和优选P1/P1一起形成环。最优选的是P1/P1为异亚丙基。
可提及的卤化剂包括P(III)或P(V)，或者S(II)或S(IV)卤化物如三氯化磷，温度为0°-150℃。反应可以在作为溶剂的卤化剂或其它惰性溶剂如二氯甲烷中进行。优选氯化亚硫酰回流在DMF/氯仿中。
用于导入X＝NR1R2基的优选溶剂是1，4-二噁烷，温度为100℃。保护基P2可以在这些条件下除去。或者，也可以用酸性或碱性水解法除去。
优选在环境温度下使用在甲醇中的氨。
(iii)将步骤(ii)的通式(V)的产物进行如步骤C(i)和(ii)所述的相同反应，得到通式(I)化合物，其中X是NR1R2；R1和R2的定义如通式(I)；B是O；Y是C1-C7烷基；A是COOH；和R3和R4一起形成键。
G)(i)适宜的保护基P3被引入至保护了的5-氨基-1-(β-D-呋喃核糖基)-1，2，3-三唑-4-甲酰胺，优选5-氨基-1-[2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-1，2，3-三唑-4-甲酰胺。所得的中间体用碱处理，优选氢化钠，然后，用通式如下的试剂处理，
其中L是离去基，优选咪唑基，得到通式(X)化合物，
式中P1是保护基，优选P1/P1一起形成环；和P3是保护基，优选甲硅烷基。最优选的是其中P1/P1为异亚丙基和P3为叔丁基二甲基硅烷基。
(ii)步骤(i)的通式(X)产物，在惰性溶剂如THF中于-20°-50℃下用碱如丁基锂处理，接着，用烷基化剂R1G(其中G是离去基如卤素和R1的定义如通式(I))处理。优选用氢化钠作为碱，在DMF中于环境温度下，和G是碘。然后，从上述化合物除去P3并用新的保护基P2代替。优选P2是酰基。
优选P3是甲硅烷基，它可用氟离子处理而除去并用酰基置换。最优选P3是叔丁基二甲基硅烷基，它可通过与在THF中用氟化四正丁基铵反应而除去，接着，在环境温度下与二氯甲烷中的乙酰氯反应，引入保护基P2。
最后，进行卤化反应，得到通式(IX)的化合物，其中M是离去基，例如卤素和优选氯；P1是保护基，优选P1/P1一起形成环；和P2是保护基，优选乙酰基；和Y是SR1。
可提及的卤化剂包括P(III)或P(V)，或者S(II)或S(IV)卤化物，如三氯化磷，卤化温度为0°-150℃。反应可以在作为溶剂的卤化剂或其它惰性溶剂如二氯甲烷中进行。优选回流在DMF/氯仿中的氯化亚硫酰。
(iii)步骤(ii)的产物在惰性溶剂如THF中于-20°-150℃与烷基亲核试剂如格氏试剂反应，优选的烷基亲核试剂是在Pd(II)催化剂存在下使用的烷基锡。然后，除去保护基P2，得到通式(V)化合物，其中X是C1-C7烷基；Y是SR1；R1的定义如通式(I)；B是O；和P1是保护基，优选P1/P1一起形成环，最优选的是异亚丙基。
保护基P2可以通过酸性或碱性水解除去。优选P2是乙酰基，它可以在环境温度下用在甲醇中的氨处理而除去。
H)(i)通式(I)化合物，其中X是NR1R2；Y是SR1；R1和R2的定义如通式(I)；B是O；R3和R4都是氢；和A是C(O)NHCH(COOR11)(CH2)rCOOR11，其中r是1，2或3，和R11的定义同上；在惰性溶剂如THF中于-20℃至100℃，用氧化剂如单过氧邻苯二甲酸镁处理，接着，在惰性溶剂中于0°-150℃用通式HNR1R2化合物处理，得到通式(I)化合物，其中X是NR1R2；Y是NR1R2；B是O；R3和R4都是氢；和A是C(O)NHCH(COOR11)(CH2)rCOOR11，其中r是1，2或3和R11的定义如上面步骤D)。
优选用m-氯过氧苯甲酸作氧化剂，在乙醇溶剂中于环境温度下，和置换反应是在1，4-二噁烷中于100℃下进行。
I)通式(I)化合物，其中X是SR1；Y是SR1；B是O；R3和R4都是氢；和A是COOH；可以通过通式(II)化合物(其中R1的定义如通式(I))与通式(XI)化合物反应来制备，
式中R12是低级烷基和P4是保护基如乙酰基。
该反应可以通过在酸如三氯乙酸存在下在减压和50°-175℃下一起加热这些化合物进行。优选R12是乙基，P4是乙酰基和反应是在对甲苯磺酸存在下在水泵真空和140℃下进行。
保护基和基团R12然后可以在酸性或碱性条件下水解除去，得到通式(I)化合物，其中X是SR1；Y是SR1；R1的定义如通式(I)；B是O；R3和R4都是氢；和A是COOH。
可采用的水解剂和条件的例子是在醇中的金属醇盐和0°-100℃，或者可采用在二氯甲烷中的三氟乙酸。优选R12是乙基和P4是乙酰基，和于环境温度下在四氢呋喃水溶液中使用氢氧化锂。
在该反应步骤中起始原料化合物之一的通式(XI)化合物的制备，起初是从(E)-甲基-5，6-二脱氧-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-核-庚-烯-5-呋喃糖醛酸乙酯经酸性水溶液如乙酸水溶液水解和在碱如吡啶和适宜的溶剂如二氯甲烷存在下与酰化剂如乙酰氯反应，接着进行还原，例如用过渡金属催化剂如钯/炭在1-3巴氢压下在适宜溶剂如乙醇中氢化。
J)通式(I)的化合物，其中X是NR1R2；Y是SR1；R1和R2的定义如通式(I)；B是O或CH2；R3和R4都是氢；和A是5-四唑基；按以下方法制备。
步骤A(iii)的产物或步骤B(ii)的产物，即通式(V)的化合物，其中B是O或CH2和X和Y的定义如上述通式(V)，和P1是保护基，优选P1/P1一起形成环，被氧化，接着烯化并随之还原。
可提及的氧化方法包括Swern反应和在适宜溶剂中于-78°-120℃下使用Dess Martin试剂。在DMSO溶剂中环境温度下用其中P1/P1为异亚丙基的通式(V)化合物优选进行Pfitzner-Moffatt氧化反应。可提及的烯化方法包括Peterson反应和Horner Emmons反应。优选用磷内鎓盐(三苯基膦亚基)乙腈进行Wittig反应。可提及的还原方法包括用过渡金属催化剂如钯/炭在氩气氛下于适宜的溶剂如乙酸中于0°-100℃氢化。优选在4巴压力下在乙醇溶剂中于环境温度下以钯/炭氢化。
这样获得的产物是通式(XII)化合物，
式中B是O或CH2；P1是保护基，优选P1/P1一起形成环和最优选P1/P1是异亚丙基；和R1和R2的定义如通式(I)。
通式(XII)化合物与叠氮化物如叠氮化钠在惰性溶剂如DMF中于0°-175℃反应。异亚丙基是优选的保护基。优选在110℃使用甲苯中的叠氮化三丁基锡。
保护基然后用无机或有机酸在惰性溶剂中于0°-100℃下处理而除去。优选在环境温度下用二氯甲烷中的三氟乙酸。这样就得到通式(I)的产物，其中X是NR1R2；Y是SR1；R1和R2的定义如通式(I)；B是O或CH2；R3和R4都是氢；和A是5-四唑基。
K)将通式(I)化合物还原，其中X是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；R1和R2的定义如通式(I)；B是CH2或O；R3和R4一起形成键；和A是COOR11，其中R11的定义如上面通式(I)；得到通式(VIII)化合物，其中R3和R4为氢；和X、Y、B、A、R11和P1的定义如上。
可提及的还原方法包括用过渡金属催化剂如钯/炭在1-5巴氢压下在适宜的溶剂如乙酸中氢化。优选在60°-100℃下的四氢呋喃中从适宜的前体如2，4，6-三异丙基苯磺肼产生的二酰亚胺。
(ii)将步骤(i)的产物进行如步骤D(ii)中所述的同样反应条件，得到通式(I)化合物，其中X是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；R1和R2的定义如通式(I)；B是CH2或O；和A是COOH。
通式(I)化合物及其盐和前药如其酯或其酰胺，可以用常规技术从其反应混合物中分离。
通式(I)化合物的盐，可以通过其游离酸或其盐或者其游离碱或其盐或其衍生物，与一个或多个当量的适宜的碱或酸反应形成。该反应可以在该盐不溶的溶剂或介质中或者在该盐可溶的溶剂中进行，如水、乙醇、四氢呋喃或乙醚，它们可以真空除去或通过冷冻干燥除去。该反应也可以是复分解过程或可以在离子交换树脂上进行。虽然可以使用各种盐例如离析的或纯化的产物，不过优选无毒的生理上可接受的盐。
通式(I)化合物的药用酯可以通过常规技术，如酯化作用或酯基转移作用制备。
通式(I)化合物的药用酰胺可以通过常规技术，如相应酸的酯与氨或适宜的胺反应来制备。
本发明的详细说明本发明将由以下实施例更详细地说明，但是，这些不构成对本发明的限制。
如果没有另外的指明，实施例中的温度是指摄氏度。
实施例实施例1[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸钠盐]a)2-(丙硫基)-4，6-(1H，5H)嘧啶二酮将丙基碘(136ml)加到含有氢氧化钠(55.6g)的4，6-二羟基-2-巯基嘧啶(200g)在水(800m1)的悬浮液中。搅拌反应混合物2周，然后浓缩至一半体积，加入2N盐酸并过滤出产物(167g)。MS(EI)186(M+，100％)。b)6-羟基-5-硝基-2-(丙硫基)-4(1H)-嘧啶酮将步骤a)产物(70g)缓慢加入至冰冷的发烟硝酸(323ml)中。将混合物搅拌1小时，然后倾倒在冰上并过滤分离出产物(65g)。MS(EI)231(M+)，41(100％)。c)4，6-二氯-5-硝基-2-(丙硫基)嘧啶将N，N-二乙基苯胺(150ml)滴加到搅拌着的步骤b)产物(134g)在磷酰氯(500ml)中的悬浮液中，并将所得溶液加热回流1小时。将冷的反应混合物倾倒在冰上然后用乙醚(3×500m1)萃取。将合并的萃取物干燥并浓缩。色谱提纯(SiO2，洗脱剂；异己烷∶乙醚，19∶1)得到标题化合物(128g)。MS(EI)271，269，267(M+)，41(100％)。d)[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]5-[6-氯-5-硝基-2-(丙硫基)-嘧啶-4-基]-四氢-2，2-二甲基-4，7-亚甲基-1，3-二噁环戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)-酮将氢化钠(60％，400g)分批加到在THF(500ml)中的[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]-四氢-2，2-二甲基-4，7-亚甲基-1，3-二噁环戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)-酮(18.3g)中。在搅拌1小时时将溶液滴加到在THF(500mk)中步骤c)的产物(54.0g)中。将反应混合物在室温下搅拌45分钟，然后浓缩并通过色谱法纯化(SiO2，洗脱剂，二氯甲烷∶异己烷，3∶2)得到标题化合物(79.2g)。MS(APCI)417，415(M+H+)，415(10(％)。e)[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]5-[5-氨基-6-氯-2-(丙硫基)-嘧啶-4基-]-四氢-2，2-二甲基-4，7-亚甲基-1，3-二噁环戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)-酮将还原铁粉(50g)加到在冰醋酸(1.8L)中的步骤d)产物(50.0g)溶液中，并将反应混合物加热回流15分钟。将冷的反应混合物浓缩并将残余物溶于乙醚(2L)，然后用碳酸氢钠溶液(2×1L)洗涤。干燥有机相并浓缩得到标题化合物(42.6g)。MS(APCI)387，385(M+H+)，385(100％)。f)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[5-氨基-6-氯-2-(丙硫基)-4-嘧啶基氨基]-四氢-2，2-二甲基4H-环戊基-1，3-二噁环戊烯-4-甲醇将硼氢化钠(8.37g)加到冰冷的在甲醇(1.3L)中的步骤e)产物(42.6g)的溶液中。搅拌1小时后，将溶液倾入至水中(2L)，并用乙醚(2×1L)萃取。将合并萃取物干燥并浓缩。纯化(SiO2，洗脱剂，二氯甲烷∶乙酸乙酯，1∶1)得到标题化合物(36.1g)。MS(APCI)419，417(M+H+)，417(100％)。g)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-氯-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-甲醇将亚硝酸异戊酯(24.9ml)加入到在乙腈(80ml)中的步骤f)产物(36.0g)的溶液中，并将溶液在70℃下加热1小时。将冷的反应混合物浓缩并纯化(SiO2，洗脱剂，二氯甲烷∶乙酸乙酯，4∶1)得到标题化合物(33.6g)。MS(EI)401，399(M+H+)，43(100％)。h)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-(丁基氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-甲醇将在1，4-二噁烷(500ml)中的步骤g)产物(16.75g)和n-丁胺(30ml)加热回流1小时。浓缩反应混合物并纯化残余物(SiO2，洗脱剂，二氯甲烷∶乙酸乙酯，4∶1)，得到标题化合物(17.8g)。MS(APCI)437(M+H+，100％)。i)[3aR-(3aα，4α(E)，6α，6aα)]-3-[6-[7-(丁基氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-基[-2-丙烯酸的1，1-二甲基乙基酯用1，3-二环己基碳化二亚胺(0.72g)处理搅拌着的步骤h)产物(0.5g)，吡啶(0.093ml)和三氟乙酸(0.048ml)在DMSO(25ml)中的混合溶液，并将混合物在室温下搅拌24小时。
加入(t-丁氧基羰基亚甲基)三苯基膦(0.69g)并另搅拌反应18小时。将反应混合物冷却至0℃，用乙酸乙酯(100ml)稀释并加入草酸(0.51g)。30分钟后过滤混合物并用饱和碳酸氢钠溶液(100ml)洗涤，干燥并浓缩。色谱纯化(SiO2，洗脱剂己烷∶乙酸乙酯，5∶1)得到标题化合物(0.55g)。MS(FAB)533(M+H+，100％)。j)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸钠盐在室温下，将步骤i)的产物(0.8g)在50％三氟乙酸水溶液(100ml)中的溶液搅拌5小时。浓缩反应混合物并用乙酸乙酯(30ml)重结晶产物。用甲醇∶水(2∶3，30ml)溶解游离酸并用Dowex 50×100离子交换树脂(钠型)处理，用水洗脱。冷冻干燥得到标题盐为无色固体(0.43g)。NMRδH(d6-DMSO)6.59(1H，dd)，5.89(1H，d)，4.94(1H，m)，4.45(1H，t)，4.12(1H，t)，3.45(2H，m)，2.83(3H，m)，2.47(1H，m)，2.00(1H，m)，1.5(4H，m)，1.20(2H，m)，0.82(3H，t)，0.71(3H，t).
实施例2[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸的双钠盐a)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3二羟基环戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸的双(1，1-二甲基乙基)酯将L-天冬氨酸二叔丁酯盐酸盐(0.46g)和三乙胺(0.23ml)加到实施例1的化合物(0.6g)在DMF(25ml)中的溶液中。加入1-羟基苯并三唑(0.22g)并在冰浴中冷却上述溶液，然后加入1，3-二环己基碳化二亚胺(0.34g)。反应混合物在0℃搅拌30分钟然后在室温下搅拌3天。除去溶剂后，用色谱法纯化(SiO2，洗脱剂氯仿∶甲醇，40∶1)得到标题化合物(0.63g)。MS(FAB)664(M+H+)，57(100％)。b)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸二钠盐在室温下，将步骤a)的产物(0.60g)在含三氟乙酸(30ml)的二氯甲烷(30ml)溶液搅拌2小时。浓缩溶液并纯化残余物(HPLCNova-PakC18柱洗脱液为0.1％乙酸铵水溶液∶甲醇从50∶50到0∶100经15分钟)得到标题盐为无色固体(0.19g)。NMRδH(d6-DMSO)6.74(1H，dd)，6.12(1H，d)，5.07(1H，m)，4.38(1H，m)，4.05(1H，t)，3.95(2H，m)，3.12(2H，t)，2.85(1H，m)，2.49(1H，m)，2.30-2.45(2H，m)，2.0(1H，m)，1.75(2H，m)，1.52(2H，m)，1.47(2H，m)，1.0(3H，t)，0.98(3H，t).
实施例3[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-环戊烷丙酸钠盐a)[1S-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸乙酯用1，3-二环己基碳化二亚胺(0.87g)处理搅拌着的实施例1h)的产物(0.6g)，吡啶(0.112ml)和三氟乙酸(0.058ml)的DMSO(25ml)溶液，并在室温下搅拌混合物24小时。加入(乙酯基亚甲基)三苯基膦(0.90g)并将反应另搅拌18小时。将反应混合物冷却至0℃用乙酸乙酯(100ml)稀释并加草酸(0.51g)。30分钟后过滤混合物并用饱和碳酸氢钠溶液(100ml)洗涤滤液，干燥并浓缩。残余物用二氯甲烷(50ml)/三氟乙酸(50ml)溶解并搅拌过夜。除去溶剂并用色谱法纯化残余物(SiO2，二氯甲烷∶乙酸乙酯，1∶1作为洗脱剂)，得到标题化合物(0.36g)。MS(FAB)465(M+H+，100％)。b)[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并-[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-环戊烷丙酸乙酯将2，4，6-三异丙基苯磺酰肼(0.50g)加到步骤a)的产物(0.35g)的无水THF(175ml)的溶液中，并将所得溶液在70℃加热3小时。
将冷的反应混合物用色谱法纯化(SiO2，洗脱剂二氯甲烷∶乙酸乙酯，1∶1)，得到标题化合物(0.16g)。MS(EI)466(M+)，43(100％)。c)[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-环戊烷丙酸钠盐将一水合氢氧化锂(14mg)加到步骤b)的产物(0.16g)在THF(10ml)/水(10ml)的溶液中。在室温下搅拌溶液18小时，然后真空除去溶剂。纯化(HPLC Nova-PakC18柱，洗脱液为0.1％乙酸铵水溶液∶甲醇由50∶50到0∶100经15分钟)得到标题酸，用甲醇(2ml)溶解并加1N氢氧化钠溶液(0.28ml)。浓缩，得到标题盐(0.13g)。MS(ESI)439(M-Na+H+，100％).NMRδH(D2O)5.07(1H，m)，4.65(1H，t)，4.08(1H，t)，3.49(2H，t)，3.05(2H，m)，2.62(1H，m)，2.36(2H，m)，2.17(1H，m)，2.00(1H，m)，1.70(2H，m)，1.65(2H，m)，1.61(2H，m)，1.40(2H，m)，1.00(3H，t)，0.97(3H，t).
实施例4[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(丁氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸钠盐a)2-(戊硫基)-4，6(1H，5H)-嘧啶二酮将碘戊烷(15.6ml)在乙醇中(25ml)的溶液加入到2N氢氧化钠溶液(100ml)中的4，6-二羟基-2-巯基嘧啶(14.4g)溶液中，并在室温下搅拌所得反应混合物四天。减压下除去乙醇并加入N，N-二甲基甲酰胺(80ml)和碘戊烷(1.56ml)，然后将反应混合物另搅拌16小时。加入2N HCl溶液酸化该溶液并笔出水层。将剩余的胶状物溶解于甲醇中并蒸发至干，然后用甲苯(×2)共沸。固体用乙醚研制，过滤并干燥得到标题化合物，为白色固体(11.9g)。MS(EI)214(M+)，144(100％)。b)6-羟基-5-硝基-2-(戊硫基)-4(1H)-嘧啶酮使用步骤a)的产物按照实施例1b)的方法制备。MS(EI)259(M+)，43(100％)。c)4，6-二氯-5-硝基-2-(戊硫基)-嘧啶使用步骤b)的产物按照实施例1c)的方法制备。MS(FAB)295，297，299(M+H+)，41(100％)。d)[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]5-[6-氯-5-硝基-2-(戊硫基)-嘧啶-4-基]-四氢-2，2-二甲基-4，7-亚甲基-1，3-二噁环戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)-酮使用步骤c)的产物按照实施例1d)的方法制备。MS(FAB)445，443(M+H+)，443(100％)。e)[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]5-[5-氨基-6-氯-2-(戊硫基)-嘧啶-4-基]-四氢-2，2-二甲基-4，7-亚甲基-1，3-二噁环戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)-酮使用步骤d)的产物按照实施例1e)的方法制备。MS(EI)414，412(M+)，412(100％)。f)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[5-氨基-6-氯-2-(戊硫基)-4-嘧啶基氨基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊二烯并-1，3-二噁环戊烯-4-甲醇使用步骤e)的产物按照实施例1f)的方法制备。MS(EI)418，416(M+)，327(100％)。g)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-氯-5-(戊硫基)-3H1，2，3-三唑并-[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-甲醇使用步骤f)的产物按照实施例1g)的方法制备。MS(APCI) 430，428(M+H+)，338(100％)。h)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)- 6 -[7-(丁氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并-[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-甲醇使用步骤g)的产物按照实施例1h)的方法制备。MS(FAB)465(M+H+，100％)。i)[3aR-(3aα，4α(E)，6α，6aα)]-3-[6-[7-(丁氨基)-5(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并-[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-基]-2-丙烯酸的1，1-二甲基乙酯使用步骤h)的产物按照实施例1i)的方法制备。MS(FAB)561(M+H+)，505(100％)。j)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(丁氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸钠盐使用步骤i)的产物按照实施例1j)的方法制备。MS(FAB)487(M+Na+H+)，465(100％).NMRδH(d6-DMSO)9.00(1H，t)，6.43(1H，dd)，5.70(1H，d)，4.97(1H，q)，4.32(1H，t)，3.87(1H，t)，3.50-3.47(2H，m)，3.12-3.04(2H，m)，2.68(1H，m)，2.38-2.34(1H，m)，1.93-1.89(1H，m)，1.64(2H，m)，1.62(2H，m)，1.37-1.30(6H，m)，0.91(3H，t)，0.87(3H，t).
实施例5以下化合物按照实施例4的方法制备[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(乙氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸钠盐a)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-(乙氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并-[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-甲醇MS(FAB)437(M+H+，100％)。b)[3aR-(3aα，4α(E)，6α，6aα)]-3-[6-[7-乙氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-基]-2-丙烯酸的1，1-二甲基乙酯MS(FAB)533(M+H)+，477(100％)。c)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(乙氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸钠盐MS(FAB)459(M+Na+H+)，437(100％).NMRδH(d6-DMSO)8.99(1H，t)，6.55(1H.dd)，5.76(1H，d)，4.98(1H，q)，4.32(1H，t)，3.90(1H，t)，3.81-3.50(2H，m)，3.16-3.08(2H，m)，2.74-2.70(1H，m)，2.46-2.37(1H，m)，1.98-1.89(1H，m)，1.71-1.67(2H，m)，1.37-1.24(4H，m)，1.19(3H，t)，0.86(3H，t)实施例6[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(丁氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-环戊烷丙酸钠盐使用实施例4的产物按照实施例3 b)的方法制备。MS(APCI)467(M+H+)，295(100％).NMRδH(d6-DMSO)8.97(1H，t)，4.93-4.86(1H，m)，4.32(1H，t)，3.88(1H，t)，3.49-3.45(2H，m)，3.07-3.05(2H，m)，2.28-2.08(1H，m)，2.01-1.92(3H，m)，1.74-1.55(7H，m)，1.37-1.33(6H，m)，0.90(3H，t)，0.86(3H，t).
实施例7[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(乙氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-环戊烷丙酸钠盐使用实施例5的产物按照实施例3b)的方法制备。MS(FAB)461(M+Na+H+)，154(100％).NMRδH(d6-DMSO)8.96(1H，t)，4.91(1H，q)，4.33(1H，t)，3.75(1H，t)，3.51(2H，m)，3.08-3.06(2H，m)，2.30-2.24(1H，m)，2.06-1.93(3H，m)，1.75-1.55(5H，m)，1.37-1.09(4H，m)，1.15(3H，t)，0.87(3H，t).
实施例8[1R-(1α，2α，3β，5β)]-3-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-5-[2-(1H-四唑5-基)乙基]-1，2-环戊二醇a)[3aR-(3aα，4α(E)，6α，6aα)]-3-[6-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，2-二甲基-四氢-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-基]-2-丙烯腈使用实施例1h)的产物和(三苯基膦亚基)乙腈按照实施例1i)的方法制备。MS(EI)457(M+)，414(100％)。b)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-3-[6-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，2-二甲基-四氢-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-基]-丙腈在4个大气压的氢气作用下，将在乙醇(300ml)中的含有10％的钯/碳(0.37g)的步骤a)产物(0.75g)搅拌48小时。过滤除去催化剂并浓缩滤液得到标题化合物(0.34g)。MS(FAB)460(M+H+，100％)。c)[3aS-(3aα，4α，6α，6aα)]-N-丁基-5-(丙硫基)-3-[6-[2-(1H-四唑-5-基)乙基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]-嘧啶-7-胺将在甲苯中的步骤b)产物(0.40g)和叠氮化三丁基锡(0.70g)加热回流48小时，然后浓缩。色谱法纯化(SiO2，二氯甲烷∶甲醇，95∶5为洗脱剂)得到标题化合物(0-19g)。MS(FAB)503(M+H+，100％)。d)[1R-(1α，2α，3β，5β)]-3-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并-[4，5-d]嘧啶-3-基]-5-[2-(1H四唑-5-基)乙基]-1，2-环戊烷二醇使用步骤c)的产物按照实施例1j)的方法制备。MS(FAB)463(M+H+，100％).NMRδH(d6-DMSO)8.64(1H，t)，5.11(1H，m)，4.96(1H，m)，4.85(1H，m)，4.38(1H，m)，3.83(1H，m)，3.50(2H，m)，3.07(2H，m)，2.97(2H，m)，2.41(1H，m)，2.00(2H，m)，1.80(2H，m)，1.69(2H，m)，1.61(2H，m)，1.35(2H，m)，0.97(3H，m)，0.91(3H，t).
实施例9[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]丙酰基]-L-天冬氨酸a)[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]丙酰基]-L-天冬氨酸的双(1，1-二甲基乙基)酯将N，N-二异丙基乙基胺(0.35mL)加到由L-天冬氨酸二叔丁基酯，盐酸盐(0.28g)，溴三-吡咯烷-磷鎓六氟磷酸盐(0.44g)和实施例3产物(0.44g)在DMF(20ml)中的溶液。在室温下搅拌反应混合物1小时，然后浓缩。色谱法纯化(SiO2，乙酸乙酯为洗脱剂)得到标题化合物(0.49g)。MS(APCI)666(M+H+，100％)。b)[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]丙酰基]-L-天冬氨酸使用步骤a)的产物按照实施例2b)的方法制备。NMRδH(d6-DMSO)9.03(1H，brs)，7.79(1H，d)，4.92(1H，m)，4.35(1H，m)，4.19(1H，t)，3.75(2H，m)，3.49(2H，t)，3.08(2H，m)，2.43(1H，m)，2.32(1H，m)，2.18(3H，m)，1.91(1H，m)，1.73(3H，m)，1.58(2H，m)，1.34(2H，m)，1.00(3H，t)，0.98(3H，t).
实施例10[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸a)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-甲醇将硼氢化钠(1.16g)加到冰冷的在甲醇(200ml)中的步骤1e)产物的溶液中。搅拌1小时后浓缩溶液并用色谱法(SiO2，乙醚作为洗脱剂)纯化残余物。将得到的中间产物溶于乙腈(300ml)并加入亚硝酸异戊酯。在60℃下搅拌反应混合物30分钟，然后浓缩并将残余物溶于1，4-二噁烷(300ml)。在室温下，向反应混合物中加入己胺(20ml)并搅拌2小时。浓缩反应混合物并将残余物纯化(SiO2，乙醚为洗脱剂)得到标题化合物(4.69g)。MS(APCI)465(M+H+，100％)。b)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸使用步骤a)产物，先按照实施例1i)方法，然后按照实施例1j)方法制备。NMRδH(D2O)9.03(1H，t)，6.96(1H，dd)，5.89(1H，d)，5.31(1H，s)，5.10(1H，s)，5.00(1H，m)，4.29(1H，t)，4.02(1H，t)，3.49(2H，m)，3.01(2H，m)，2.83(2H，m)，2.49(1H，m)，2.01(1H，m)，1.72(2H，m)，1.65(2H，m)，1.29(6H，m)，0.98(3H，t)，0.86(3H，t).c)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3二羟基环戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸的双(1，1-二甲基乙基)酯使用步骤b)的产物按照实施例9a)的方法制备。MS(APCI)692(M+H+，100％)。d)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3二羟基环戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸使用步骤c)的产物按照实施例2b)的方法制备。NMRδH(d6-DMSO)7.94(1H，d)，7.23-7.11(1H，s)，6.75(1H，dd)，6.17(1H，d)，5.19(1H，s)，5.08(1H，s)，5.00(1H，m)，4.31(2H，m)，3.96(1H，m)，3.62(2H，m)，3.07(2H，m)，2.81(1H，m)，2.49-2.31(3H，m)，2.01(1H，m)，1.67(2H，m)，1.61(2H，m)，1.31(6H，m)，0.96(3H，t)，0.85(3H，t).
实施例11以下化合物按照实施例1的方法制备。a)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(3，3-二甲基丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸i)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-(3，3-二甲基丁氨基)5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-甲醇MS(APCI)465(M+H+，100％)。ii)[3aR-(3aα，4 α(E)，6α，6aα)]-3-[6-[7-(3，3-二甲基丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-基]-2-丙烯酸的1，1-二甲基乙酯MS(APCI)561(M+H+，100％)。iii)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(3，3-二甲基丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸NMRδH(d6-DMSO)8.59(1H，t)，6.84(1H，dd)，5.84(1H，d)，5.03-4.96(1H，m)，3.98(1H，m)，3.52(2H，m)，3.07(2H，m)，2.81(1H，m)，2.43(1H，m)，1.97(1H，m)，1.75(2H，m)，1.55(2H，m)，0.99(3H，t)，0.95(9H，s).b)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(2-甲氧基)乙氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸i)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-(2-甲氧基)乙氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-甲醇MS(FAB)439(M+H+，100％)。ii)[3aR-(3aα，4α(E)，6α，6aα)]-3-[6-[7-(2-甲氧基)乙氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-基]-2-丙烯酸的1，1-二甲基乙酯MS(FAB)535(M+H+，100％)。iii)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(2-甲氧基)乙氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸MS(FAB)439(M+H+，100％)。
实施例12[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基丙酰基]-L-天冬氨酸a)[1R-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊烷丙酸使用步骤10b)的产物按照实施例3b)的方法制备。MS(APCI)467(M+H+，100％)。b)[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基丙酰基]-L-天冬氨酸的双(1，1-二甲基乙基)酯使用步骤a)的产物按照实施例9a)的方法制备。MS(APCI)694(M+H+，100％)。c)[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5d-]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基丙酰基]-L-天冬氨酸使用步骤b)的产物按照实施例2b)的方法制备。NMRδH(d6-DMSO)8.90(1H，brs)，7.61(1H，d)，4.97(1H，m)，4.36(1H，t)，4.21(1H，m)，3.47(2H，m)，3.77(1H，m)，3.07(2H，t)，2.51(2H，m)，2.28(1H，m)，2.20(2H，m)，1.93(1H，m)，1.77(1H，m)，1.62(3H，m)，1.59(3H，m)，1.33(6H，m)，1.00(3H，t)，0.88(3H，t).
实施例13[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫基]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸单铵盐a)2-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-4，6(1H，5H)-嘧啶二酮按照实施例1a)的方法制备。MS(APCI，阴极电离)239(M-H+)，143(100％)。b)2-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-6-羟基-5-硝基-4(1H)-嘧啶二酮使用步骤a)的产物按照实施例1b)的方法制备。MS(APCI，阴极电离)284(M-H+，100％)。c)4，6-二氯-2-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-5-硝基-嘧啶使用步骤b)的产物按照实施例1c)的方法制备。NMRδH(CDCl3)3.30(2H，m)，2 60(2H，m)d)[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]5-[6-氯-2-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-5-硝基-嘧啶-4-基]-四氢-2，2-二甲基-4，7-亚甲基-1，3-二噁环戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)-酮使用步骤c)的产物按照实施例1d)的方法制备。NMRδH(CDCl3)4.77(1H，s)，4.73(1H，d)，4.56(1H，d)，3.33(2H，m)，3.05(1H，s)，2.58(2H，m)，2.33(1H，d)，2.20(1H，t)，1.53(3H，s)，1.36(3H，s)e)[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]5-[5-氨基-6-氯-2-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]嘧啶-4-基]-四氢-2，2-二甲基-4，7-亚甲基-1，3-二噁环戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)-酮使用步骤d)的产物按照实施例1e)的方法制备。MS(APCI)439(M+H+，100％)。f)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[[5-氨基-6-氯-2-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-4-嘧啶基]氨基]-四氢-2，2-二甲基-4H环戊-1，3-二噁环戊烯-4-甲醇使用步骤e)的产物按照实施例1f)的方法制备。MS(APCI)443(M+H+，100％)。g)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-甲醇使用步骤f)的产物，先按照实施例1g)方法制备，然后按照实施例1h)方法制备。MS(APCI)509(M+H+，100％)。h)[3aR-(3aα，4α(E)，6α，6aα)]-3-[6-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊-1，3-二噁环戊烯-4-基]-2-丙烯酸的1，1-二甲基乙酯使用步骤g)的产物按照实施例1i)的方法制备。MS(APCI)605(M+H+)，549(100％)。i)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸使用步骤h)的产物按照实施例1j)的方法制备。MS(APCI)509(M+H+，100％)。j)[1R-(1α(E)，2，3β，4α)]-N-[3-[4-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸的双(1，1-二甲基乙基)酯使用步骤i)的产物按照实施例9a)的方法制备。MS(APCI)736(M+H+)，624(100％)。k)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸单铵盐使用步骤j)的产物按照实施例2b)的方法制备。NMRδH(d6-DMSO)7.90(1H，d)，6.76-6.68(1H，dd)，6.15(1H，d)，，4.99(1H，m)，4.30(2H，m)，3.71(2H，t)，3.30(2H，m)，2.74(5H，m)，2.50(1H，m)，2.42(2H，m)，2.11(3H，s)，1.98(1H，m).
实施例14(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脱氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸a)2，6-双(丙硫基)-4，5-嘧啶二胺将正碘丙烷(2.52ml)加到搅拌着的在1N氢氧化钾溶液(26.4ml)中的4，5-二氨基-2，6-二巯基嘧啶(2.0g)溶液中。搅拌24小时后过滤收集固体得到标题化合物为粉红色固体(2.2g)。MS(EI)258(M+，100％)。b)5，7-双(丙硫基)-1H-1，2，3 三唑并[4，5-d]嘧啶在50℃下，将亚硝酸钠(0.6g)在水中(7ml)的溶液加到搅拌着的在醋酸∶水(1∶1，90ml)中的步骤a)产物(2.0g)的悬浮液中。在50℃下搅拌反应混合物1小时并过滤收集固体得到标题化合物(1.71g)。MS(EI)269(M+)，43(100％)。c)5，7-双(丙硫基)-3-(2，3，5-三-O-苯甲酰基-β-D-呋喃核糖基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶将溴化氢气体通入在二氯甲烷(15ml)中的1-O-乙酰基-2，3，5-三-O-苯甲酰基-β-D-呋喃核糖(2.02g)的冰冷溶液中，通气15分钟。在0℃搅拌反应1小时，然后在室温下搅拌15分钟。浓缩溶液并用二氯甲烷(3×50ml)共沸残余物。将氢化钠(60％，0.19g)加到搅拌着的步骤b)产物(1.08g)在乙腈(29ml)中的悬浮液中。在室温下搅拌15分钟后，加入在乙腈(10ml)中上述的溴代糖，并继续搅拌24小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水间分配，干燥有机层并浓缩。色谱法纯化(SiO2，二氯甲烷∶乙醚，39∶1，作为洗脱剂)得到5，7-双(丙硫基)-3-(2，3，5-三-O-苯甲酰基-β-D-呋喃核糖基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶[MS(FAB)714(M+H+)，105(100％)]和5，7-双(丙硫基)-2-(2，3，5-三-O-苯甲酰基-β-D-呋喃核糖基)-2H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶[MS(FAB)714(M+H+)，105(100％)](1.9g)的混合物。进一步洗脱得到5，7-双(丙硫基)-1-(2，3，5-三-O-苯甲酰基-β-D-呋喃核糖基)-1H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶为无色泡沫状物(0.46g)。MS(FAB)714(M+H+)，105(100％)。d)N-丁基-5-(丙硫基)-3-(β-D-呋喃核糖基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺将正丁胺(7.37g)加到在1，4-二噁烷(100ml)和水(30ml)中的步骤c)所得的异构体混合物(9.0g)溶液中。在100℃下加热溶液40小时然后浓缩。将残余物溶解在0.1M甲醇钠的甲醇(250ml)溶液中，并将反应混合物加热回流30分钟。冷却至室温，加入醋酸调至pH7并浓缩溶液。色谱法纯化(SiO2，氯仿∶异丙醇，85∶15作为洗脱剂)得到标题化合物为无色玻璃状物(2.0g)。MS(电喷雾)399(M+H+，100％)。e)N-丁基-5-(丙硫基)-3-[2，3-O-(乙氧基亚甲基)-β-D-呋喃核糖基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺用三氯乙酸(0.44g)和原甲酸三乙酯(0.44g)处理步骤d)产物(0.40g)在1，4-二噁烷中的溶液。在50℃下加热溶液90分钟。用二氯甲烷(100ml)稀释冷却的溶液，用饱和碳酸氢钠溶液(50ml)和水(50ml)洗涤，然后干燥并浓缩。色谱法纯化(SiO2，己烷∶乙酸乙酯，2∶1作为洗脱剂)得到标题化合物为无色固体(0.32g)。MS(FAB)455(M+H+)，267(100％)。f)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸乙酯用1，3-二环己基碳化二亚胺(4.42g)处理步骤e)产物(3.25g)，吡啶(0.57g)和三氟乙酸(0.41g)在DMSO(30ml)中的搅拌溶液。在室温下搅拌混合物24小时。加入乙氧羰基亚甲基三苯膦(3.98g)，再搅拌反应18小时。将反应混合物冷却至0℃，用乙酸乙酯(400ml)稀释并加入草酸(3.51g)。30分钟后过滤混合物并用饱和碳酸氢钠溶液(200ml)洗涤滤液，干燥并浓缩。色谱法纯化(SiO2，己烷∶乙酸乙酯，5∶1作为洗脱剂)得到中间体。将其溶解在80％醋酸(水液)(25ml)中并在36℃下加热2天。浓缩溶液并将残余物通过色谱法纯化(SiO2，己烷∶乙酸乙酯，2∶1，为洗脱剂)得到标题化合物为无色固体(1.84g)。MS(FAB)467(M+H+)，267(100％)。g)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸使用步骤f)的产物按照实施例3c)的方法制备。NMRδH(d6-DMSO)9.10(1H，t)，6.82(1H，dd)，6.15(1H，d)，5.89(1H，d)，4.76(1H，t)，4.60(1H，t)，4.39(1H，t)，3.50(2H，m)，3.08(2H，m)，1.69(2H，m)，1.61(2H，m)，1.34(2H，m)，0.98(3H，t)，0.91(3H，t).MS(FAB)439(M+H+)，267(100％).
实施例15(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸a)(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸的双(1，1-二甲基乙基)酯使用实施例14的产物按照实施例2a)的方法制备。MS(电喷雾)666(M+H+，100％)。b)(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸使用步骤a)的产物按照实施例2b)的方法制备。NMRδH(d6-DMSO)12.57(2H，brs)，9.09(1H，t)，8.42(1H，d)，6.70(1H，dd)，6.13(2H，m)，5.78(1H，d)，5.60(1H，d)，4.71(1H，m)，4.56(2H，m)，4.40(1H，q)，3.50(2H，q)，3.07(2H.m)，2.63(2H，m)，1.68(2H，m)，1.60(2H，m)，1.35(2H，m)，0.98(3H，t)，0.91(3H，t)。
实施例16以下化合物按照实施例14和15的方法制备(E)-N-[1-[7-氨基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸单铵盐a)5-(丙硫基)-3-(β-D-呋喃核糖基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺将在甲醇(1L)中的由实施例14c)得到的异构体混合物(12.0g)溶液冷却至0℃，通氨气饱和。在室温下搅拌溶液72小时，然后浓缩。色谱法纯化(SiO2，二氯甲烷∶甲醇，14∶1，为洗脱剂)得到标题化合物为无色固体(4.94g)。MS(电喷雾)343(M+H+，100％)。b)5-(丙硫基)-3-[2，3-O-(乙氧基亚甲基)-β-D-呋喃核糖基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺MS(电喷雾)399(M+H+，100％)。c)(E)-1-[7-氨基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸乙酯MS(电喷雾)411(M+H+，100％)d)(E)-1-[7-氨基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸MS(电喷雾)383(M+H+，100％)。e)(E)-N-[1-[7-氨基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸的双(1，1-二甲基乙基)酯MS(电喷雾)610(M+H+，100％)。f)(E)-N-[1-[7-氨基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸单铵盐NMRδH(d6-DMSO)8.53(1H，brs)，8.18(1H，brs)，6.66(1H，dd)，6.62(1H，d)，6.15(1H，d)，4.78(1H，t)，4.54(1H，t)，4.39(1H，t)，4.25(1H，m)，3.05(2H，m)，2.53-2.25(2H，m)，1.68(2H，m)，0.97(3H，t)。
实施例17(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酰基]-L-天冬氨酸单铵盐a)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酸乙酯使用步骤14f)的产物按照实施例3b)的方法制备。MS(电喷雾)469(M+H+，100％)。b)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酸使用步骤a)的产物按照实施例3c)的方法制备。MS(电喷雾，阴极电离)439(M-H+，100％)。c)(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酰基]-L-天冬氨酸的双(1，1-二甲基乙基)酯使用步骤b)的产物按照实施例2a)的方法制备。MS(电喷雾)668(M+H+，100％)。d)(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酰基]-L-天冬氨酸单铵盐使用步骤c)的产物按照实施例2b)的方法制备。NMRδH(d6-DMSO)9.07(1H，t)，7.69(1H，d)，6.04(1H，d)，5.50(2H，brs)，4.76(1H，t)，4.18(2H，m)，3.91(1H，m)，3.49(2H，q)，3.08(2H，t)，2.46-2.23(2H，m)，2.18(2H，t)，1.93(1H，m)，1.70(3H，m)，1.60(2H，m)，1.34(2H，m)，0.99 (3H，t)，0.91(3H，t)。
实施例18(E)-N-[1，5，6-三去氧-1-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸单铵盐a)3-(5-O-苯甲酰基-β-D-呋喃核糖基)-N-己基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺使用正己胺按照实施例14d)的方法制备。MS(FAB)531(M+H+)，295(100％)。b)3-[5-O-苯甲酰基-2，3-O-(1-甲基亚乙基-β-D-呋喃核糖基]-N-己基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺用对甲苯磺酸(4.4g)处理在含2，2-二甲氧基丙烷(11.4ml)的丙酮(120ml)中的步骤a)产物(4.93g)。在室温下搅拌所得溶液2小时，用三乙胺(3.25ml)碱化，并浓缩。色谱法纯化(SiO2，环己烷∶乙醇，95∶5作为洗脱剂)得到标题化合物(5.03g)。MS(电喷雾)571(M+H+，100％)。c)N-己基-3-[2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺将在甲醇(88ml)中的0.1M甲醇钠溶液中的步骤b)产物(5.02g)溶液，加热回流30分钟。加入醋酸(1ml)并浓缩。色谱法纯化(SiO2，二氯甲烷∶乙腈，95∶5为洗脱剂)得到标题化合物(3.63g)。MS(电喷雾)467(M+H+，100％)。d)(E)-1，5，6-三去氧-1-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸的1，1-二甲基乙基酯使用步骤c)的产物按照实施例1i)的方法制备。MS(FAB)563(M+H+，100％)。e)(E)-1，5，6-三去氧-1-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸用步骤d)的产物按照实施例1j)的方法制备。MS(FAB)467(M+H+)，295(100％)。f)(E)-N-[1，5，6-三去氧-1-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸的双(1，1-二甲基乙基)酯使用步骤e)的产物按照实施例9a)的方法制备。MS(FAB)694(M+H+)，295(100％)。g)(E)-N-[1，5，6-三去氧-1-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸单铵盐使用步骤f)的产物按照实施例2b)的方法制备。MS(FAB)582(M+H+)，295(100％)。NMRδH(d6-DMSO)8.74(1H，t)，8.00(1H，m)，6.66(1H，dd)，6.23(1H，d)，6.15(1H，m)，4.76(1H，m)，4.55(1H，t)，4.40(1H，t)，4.27(1H，t)，3.50(2H，m)，3.07(2H，m)，2.51(2H，m)，1.68(4H，m)，1.30(6H，m)，0.98(3H，m)，0.87(3H，m)。
实施例19(E)-1-[7-(N-丁基-N-甲基-氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]-嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸a)N-丁基-N-甲基-5-(丙硫基)-3-(β-D-呋喃核糖基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺使用N-甲基丁胺，按照实施例14d)的方法制备。MS(FAB)413(M+H+)，281(100％)。b)N-丁基-N-甲基-5-(丙硫基)-3-[2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺使用步骤a)的产物按照实施例18b)的方法制备。MS(FAB)453(M+H+)，281(100％)。c)(E)-1-[7-(N-丁基-N-甲基-氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]-嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸的1，1-二甲基乙基酯使用步骤b)的产物按照实施例1i)的方法制备。MS(FAB)549(M+H+，100％)。d)(E)-1-[7-(N-丁基-N-甲基-氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]-嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸使用步骤c)的产物按照实施例1j)的方法制备。MS(FAB)453(M+H+，100％)。NMRδH(d6-DMSO)6.51(1H，dd)，6.12(1H，d)，5.83(1H，d)，4.71(1H，t)，4.51(1H，t)，4.31(1H，m)，3.76(2H，m)，3.71(3h，s)，3.08(2H，m)，1.69(4H，m)，1.61(2H，m)，1.34(2H，m)，0.94(6H，m)。
实施例20(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸a)2-(2，3，5-三-O-苯甲酰基-β-D-呋喃核糖基)-5，7-双(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶和2-(2，3，5-三-O-苯甲酰基-β-D-呋喃核糖基)-5，7-双(甲硫基)-2H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶使用5，7-双(甲硫基)-1H-三唑并[4，5-d]嘧啶(J. A.Montgomery，A. T. Shortnacy，G. Arnett，W. H. Shannon，J. Med. Chem.，1997，20，401中所描述的方法制备)按照实施例14c)的方法制备。色谱法纯化(SiO2，二氯甲烷∶乙酸乙酯，99∶1为洗脱剂)得到标题化合物(13.3g)。MS(电喷雾)658(M+H+，100％)。b)N-丁基-3-[2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-5-(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺将正丁基胺(13.5ml)加到步骤a)所得的异构体混合物(22.5g)在二噁烷(175ml)/水(25ml)中的溶液中。在室温下搅拌溶液24小时后浓缩。用在0.1M甲醇钠的甲醇(500ml)溶液溶解残余物并加热回流30分钟。放冷至室温后将溶液浓缩，并将残余物溶解在DMF。(80ml)中。加入对甲苯磺酸(5.91g)和2，2-二甲氧基丙烷(50ml)，在室温下搅拌反应混合物24小时。浓缩溶液并将残余物在乙酸乙酯(500ml)和饱和碳酸氢钠溶液(500ml)间分配，干燥有机相并浓缩。色谱法纯化(SiO2，己烷∶乙酸乙酯，7∶3为洗脱剂)得到标题化合物为无色固体(3.67g)。MS(电喷雾)411(M+H+，100％)。c)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸乙酯使用步骤b)的产物和(乙氧羰基亚甲基)三苯膦，按照实施例1i)的方法制备。MS(FAB)479(M+H+，100％)。d)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸乙酯将步骤c)的产物(1.4g)溶解在2M HCl的甲醇(75ml)溶液中，在室温下搅拌反应混合物15分钟后浓缩。用乙酸乙酯(300ml)溶解残余物，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤(3×100ml)，干燥并浓缩。色谱法纯化(SiO2，二氯甲烷∶甲醇，97∶3为洗脱剂)得到标题化合物为无色固体(1.10g)。MS(FAB)439(M+H+)，239(100％)。e)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸使用步骤d)的产物按照实施例3c)的方法制备。MS(FAB)411(M+H+)，154(100％)。f)(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸的双(1，1-二甲基乙基)酯使用步骤e)的产物按照实施例2a)的方法制备。MS(FAB)638(M+H+)，239(100％)。g)(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸使用步骤f)的产物按照实施例2b)的方法制备。MS(FAB)526(M+H+)，239(100％)。
实施例21(E)-1-[5-丁基-7-(丁氨基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸a)5-丁基-3，4-二氢-3-[2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-7H-1，2，3-三唑并[4，5-d]-嘧啶-7-酮将钠(4.6g)溶解在乙醇(200ml)中，然后加入5-氨基-1-[2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖醛酰基]-1H-1，2，3-三唑-4-甲酰胺(按照G.Biagi et al，Farmaco，1992，47，525描述方法制备)(6.0g)，并加热回流混合物。加入戊酸甲酯(10.5ml)继续回流17小时。用Dowex 50×8-200(H+型)中和混合物，过滤并浓缩滤液。用乙醇溶解残余物，加入醋酸并浓缩溶液。色谱法纯化(SiO2，己烷∶乙酸乙酯，7∶3为洗脱剂)得到标题化合物为无色油状物(3.08g)。MS(FAB)366(M+H+)。b)5-丁基-3，4-二氢-3-[5-O-乙酰基-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-7H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-酮将三乙胺(0.42g)和乙酰氯(0.3g)顺序加入至步骤a)的产物(1.41g)在二氯甲烷(50ml)中的冰冷溶液中。在5℃搅拌混合物30分钟，然后用盐水洗涤，干燥并浓缩。色谱法纯化(SiO2，二氯甲烷∶甲醇，95∶5作为洗脱剂)得到标题化合物(1.2g)。MS(EI)408(M+H+)。c)5-丁基-7-氯-3-[5-O-乙酰基-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶加热回流在氯仿(30ml)中的步骤b)产物(1.19g)和DMF(299mg)，加入亚硫酰氯(3.47g)并保持回流45分钟。在冰浴中冷却后，将混合物慢慢加入搅拌着的饱和碳酸氢钠溶液中。用二氯甲烷(3×200ml)萃取混合物，干燥合并的有机相，过滤并浓缩。色谱法纯化(SiO2，己烷∶乙酸乙酯，5∶1为洗脱剂)得到标题化合物(1.14g)。MS(EI)427，425(M+H+)。d)N，5-二(丁基)-3-[2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺使用步骤c)的产物按照实施例1h)的方法制备。MS(EI)420(M+)。e)(E)-1-[5-丁基-7-(丁氨基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸的1，1-二甲基乙基酯使用步骤d)的产物按照实施例1i)的方法制备。MS(FAB)517(M+H+，100％)。f)(E)-1-[5-丁基-7-(丁氨基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸使用步骤e)的产物按照实施例1j)的方法制备。NMRδH(d6-DMSO)8.87(1H，t)，6.71(1H，dd)，6.20(1H，m)，5.89(1H，d)，4.75(1H，m)，4.56(1H，t)，4.37(1H，t)，3.54(2H，q)，2.73(2H，t)，1.74(2H，m)，1.62(2H，m)，1.35(4H，m)，0.91(6H，t)。
实施例22(E)-1-[7-丁基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脱氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸a)5-氨基-1-[5-O-[(1，1-二甲基乙基)二甲基硅烷基]-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-核糖呋喃糖醛酰基]-1H-1，2，3-三唑-4-甲酰胺5-氨基-1-[2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-核糖呋喃糖醛酰基]-1H-1，2，3-三唑-4-甲酰胺(由G.Biagi等Farmaco，1992，47，525所述方法制备)(10.0g)，咪唑(2.20g)和叔丁基二甲基硅烷基氯(4.98g)的DMF(200ml)溶液，在室温下搅拌16小时。浓缩该反应液，提纯残留物(SiO2，二氯甲烷∶乙酸乙酯＝1∶1作洗脱剂)，得到标题化合物(1.20g)。MS(EI)398(M-CH3+)，73(100％)。b)3，6-二氢-3-[5-O-[(1，1-二甲基乙基)二甲基硅烷基]-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-5-巯基-7H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-酮在DMF(100ml)中的步骤a)的产物(26.0g)于1小时内加到搅拌的氢化钠(60％，2.52g)在DMF(200ml)的悬浮液中。加1，1-硫代羰基二咪唑(11.2g)并回流加热反应混合物1小时，然后浓缩反应混合物。残留物溶于水(1L)中，用冰醋酸酸化并过滤分离出标题化合物(14.1g)。MS(FAB)456(M+H+)，69(100％)。c)3-[5-O-[(1，1-二甲基乙基)二甲基硅烷基]-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-3，4-二氢-5-(丙硫基)-7H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-酮将步骤b)的产物(19.3g)加到搅拌的氢化钠(60％，1.41g)在DMF中(200ml)的悬浮液中。15分钟后加入碘丙烷(3.55ml)并搅拌混合物1小时，然后浓缩。残余物在水(1L)和二氯甲烷(1L)间分配。干燥有机层，浓缩，得到(18g)标题化合物。MS(FAB)498(M+H+)，73(100％)。d)3-[2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-3，4-二氢-5-(丙硫基)-7H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-酮将氟化四丁铵(1M THF溶液40.6ml)加到搅拌的步骤c)产物(20.2g)的THF(300ml)溶液中，并于室温下搅拌反应混合物12小时。浓缩反应液，残余物在水(1L)和乙酸乙酯(1L)间分配。干燥有机相并浓缩，得到14.1g标题化合物。MS(电喷雾)382(M+H+，100％)。e)3-[5-O-乙酰基-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-3，4-二氢-5-(丙硫基)-7H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-酮用步骤d)的产物按实施例21b)的方法制备。MS(电喷雾)443(M+H+，100％)。f)3-[5-O-乙酰基-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-7-氯-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶用步骤e)的产物按实施例21c)的方法制备。MS(FAB)444，446(M+H+)。g)3-[5-O-乙酰基-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-7-丁基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶将氯化双(三苯膦)钯(II)(40mg)和四丁基锡(0.81ml)加到步骤f)的产物(500mg)在1-甲基-2-吡啶烷酮(5ml)的溶液中，并于100℃下搅拌所得混合物2小时，然后于室温下搅拌72小时。反应混合物于水(100ml)和乙酸乙酯(200ml)间分配。用盐水(500ml)洗涤有机层、干燥并浓缩。色谱纯化(SiO2，己烷∶乙酸乙酯85∶15为洗脱剂)，得到标题化合物(230mg)。MS(FAB)466(M+H+)。h)7-丁基-3-[2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶用步骤g)的产物按实施例16a)的方法制备。MS(FAB)424(M+H+)。i)(E)-1-[7-丁基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脱氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸的1，1-二甲基乙酯用步骤h)的产物按实施例1i)的方法制备。MS(FAB)520(M+H+)。j)(E)-1-[7-丁基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脱氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸用步骤i)的产物按实施例2b)的方法制备。NMRδH(CDCl3)7.00(1H，d)，6.52(1H，s)，6.01(1H，d)，5.30(2H，brs)，4.94(1H，s)，4.56(1H，t)，4.76-4.81(2H，d)，3.12(4H，brs)，1.80(2H，q)，1.70(2H，q)，1.37(2H，q)，0.99(3H，t)，0.89(3H，t)。
实施例23(E)-N-[1-[5，7-二(丁氨基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脱氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酰基]-L-天冬氨酸单铵盐a)(E)-N-[1-[7-丁氨基-5-(甲磺酰基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脱氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酰基]-L-天冬氨酸的双(1，1-二甲基乙基)酯于1小时内将3-氯过氧苯甲酸(50％，0.12g)的乙醇(1ml)溶液加到搅拌的实施例17c)的产物(0.1g)的乙醇(2ml)溶液中。室温下搅拌16小时后，溶液用二氯甲烷(50ml)稀释，然后用偏亚硫酸氢钠水溶液(30ml)和碳酸钠水溶液(2×20ml)洗涤。干燥有机层并浓缩得到标题化合物(90mg)。MS(FAB)700(M+H+)，299(100％)。b)(E)-N-[1-[5，7-二(丁氨基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脱氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酰基]-L-天冬氨酸的双(1，1-二甲基乙基)酯用步骤a)的产物按实施例1h)的方法制备。MS(FAB)665(M+H+，100％)。c)(E)-N-[1-[5，7-二(丁氨基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脱氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酰基]-L-天冬氨酸的单铵盐用步骤b)的产物按实施例2b)的方法制备。MS(电喷雾)553(M+H+，100％)。
实施例24(Z)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脱氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸a)N-丁基-5-(丙硫基)-3-[2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-呋喃核糖基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺用实施例14e)的产物按实施例18b)的方法制备。MS(FAB)439(M+H+)，267(100％)。b)(Z)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脱氧-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸的1，1-二甲基乙酯用步骤a)的产物按实施例1i)的方法制备，标题化合物作为少量产物被分离。MS(FAB)535(M+H+，100％)。c)(Z)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基-1，5，6-三脱氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸用步骤b)的产物按实施例1j)的方法制备。MS(FAB)439(M+H+)，267(100％)。NMRδH(d6-DMSO)8.76(1H，t)，6.22(1H，m)，6.14(1H，m)，5.85(1H，d)，5.48(1H，m)，4.84(1H，t)，4.25(1H，m)，3.50(2H，m)，3.09(2H，m)，1.71(2H，m)，1.63(2H，m)，1.35(2H，m)，0.99(3H，t)，0.91(3H，t)。
实施例25N-丁基-5-(丙硫基)-3-[5，6-二脱氧-6-(1H-四唑-5-基)-β-D-核-呋喃己糖基-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺a)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脱氧-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛腈用步骤24a)的产物和(三苯基膦亚基)乙腈按实施例1i)的方法制备。MS(FAB)460(M+H+，100％)。b)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脱氧-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-核-呋喃庚糖醛腈用步骤a)的产物按实施例8b)的方法制备。MS(APCI)462(M+H+，100％)。c)N-丁基-5-(丙硫基)-3-[5，6-二脱氧-2，3-(1-甲基亚乙基)-6-(1H-四唑-5-基)-β-D-核糖己基呋喃糖基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺将叠氮三甲基硅烷(0.30g)和氧化二丁基锡(32mg)加到步骤b)的产物(0.60g)的甲苯(6ml)溶液中，加热回流所得溶液72小时。一冷至室温即除去溶剂，并将残余物经色谱提纯(SiO2，乙酸乙酯∶异己烷∶乙酸＝100∶100∶1为洗脱剂)，得到标题化合物(0.26g)。MS(FAB)505(M+H+)，267(100％)。d)N-丁基-5-(丙硫基)-3-[5，6-二脱氧-6-(1H-四唑-5-基)-β-D-核-呋喃己糖基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5d]嘧啶-7-胺用步骤c)的产物按实施例1j)的方法制备。粗产物用乙酸乙酯研制，得到标题化合物(0.13g)。MS(FAB)465(M+H+)，267(100％)。NMRδH(d6-DMSO)9.08(1H，t)，6.08(1H，d)，5.65(1H，d)，5.35(1H，m)，4.76(1H，t)，4.30(1H，t)，3.98(1H，m)，3.50(2H，m)，3.06(2H，m)，2.92(2H，m)，2.05(2H，m)，1.63(4H，m)，1.34(2H，m)，0.97(3H，t)，0.91(3H，t)。
实施例261，5，6-三脱氧-1-[5，7-双(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-呋喃庚糖醛酸钠盐a)(E)-1，2，3-三-O-乙酰基-5，6-二脱氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸乙酯(E)-甲基-5，6-二脱氧-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖甙糖醛酸乙酯(按A. J. Cooper，R. G.Salomon，Tetrahedron Lett.，1990，31，3813中所述方法制得)(8.0g)在乙酸(256ml)和水(64ml)的混合物中于80℃下加热16小时，然后，在室温下放置48小时。蒸发后的残余物溶于吡啶(160ml)中并用乙酸酐(19.8ml)处理。24小时后，反应混合物用乙酸乙酯(500ml)稀释并用稀HCl洗涤。干燥并蒸发，所得油状物经色谱纯化(SiO2，异己烷∶乙酸乙酯＝5∶1为洗脱剂)，得到标题化合物(5.34g)。MS(FAB+RbI)431，429(M+Rb+)，285(100％)。b)1，2，3-三-O-乙酰基-5，6-二脱氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酸乙酯用步骤a)的产物按实施例8b)的方法制备。MS(FAB-RbI)433，431(M+Rb+)，185(100％)。c)2，3-二-O-乙酰基-1，5，6-三脱氧-1-[5，7-双(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-呋喃庚糖醛酸乙酯和2，3-二-O-乙酰基-1，5，6-三脱氧-1-[5，7-双(丙硫基)-2H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-2-基]-β-D-核呋喃庚糖醛酸乙酯步骤b)的产物(1.00g)和步骤14b)的产物(0.78g)与对甲苯磺酸(12mg)混合并在水泵真空下充分搅拌。将反应混合物浸入140℃的油浴中并继续加热10分钟。冷却反应瓶并将反应混合物溶于氯仿。用饱和碳酸氢钠溶液洗涤、干燥和蒸发，并将残余物经色谱提纯(SiO2，二氯甲烷∶乙酸乙酯＝15∶1为洗脱剂)，得到标题化合物(5.34g)为分离不开的混合物。d)1，5，6-三脱氧-1-[5，7-双(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-呋喃庚糖醛酸钠盐用步骤c)的产物按实施例3c)的方法制备。MS(FAB+RbI)433，431(M+Rb+)。
药物组合物本发明的新化合物可以胃肠外、静脉、吸入或口服给药。优选的给药途径是静脉输注。
当决定对个别患者最适宜的具体给药程序和剂量水平时，给药剂量将取决于给药途径、疾病的严重程度、患者的年龄和体重，以及医生通常考虑的其它因素。
可使用的药物组合物例子，和适宜的辅药、稀释剂或载体如下所述供静脉注射或输注纯水或盐水溶液；吸入组合物粗乳糖；片剂、胶囊剂和糖衣丸微晶纤维素、磷酸钙、硅藻土、糖如乳糖、葡萄糖或甘露醇、滑石、硬脂酸、淀粉、碳酸氢钠；和/或明胶。
栓剂天然或硬化油或蜡。
当本发明的化合物用于水溶液例如供输注用时，可能需要掺入其它赋形剂。特别要叙述的是螯合剂、抗氧化剂、张度调节剂、pH调节剂和缓冲剂。如果需要，含有通式(I)化合物的溶液可以通过冷冻干燥或喷雾干燥被蒸发，得到可以在使用前再组成的固体组合物。该组合物可以含有适宜的防腐、稳定和润湿剂，增溶剂例如水溶性纤维素、聚合物如羟丙基甲基纤维素，或水溶性二醇如丙二醇，甜味剂和着色剂和矫味矫臭剂。适宜的话，化合物可配制成持续释放剂型。
本发明的另一方面是提供通式(I)的化合物或其药用盐，用于制备治疗血小板凝集疾病的药物。
本发明的又一方面是提供治疗涉及血小板凝集的任何病症的方法，为此，将有效量的通式(I)化合物给予遭受该病症的患者。
通式(I)化合物的药用盐包括碱金属盐如钠和钾盐，碱土金属盐如钙和镁盐，第III族元素的盐如铝盐；和铵盐。与适合的有机碱的盐例如与羟胺的盐，低级烷基胺如甲胺或乙胺，取代的低级烷胺如羟基取代的烷胺；或单环氮杂环化合物如哌啶或吗啉；和氨基酸的盐如精氨酸、赖氨酸等，或其N-烷基衍生物；或氨基糖如N-甲基-D-葡糖胺或氨基葡糖。刚刚所述的盐仅仅是可以用于本发明的盐的例子，这不以任何方式被认为是详尽的。
优选的通式(I)化合物的药用盐是碱金属盐和铵盐，更优选的是钠盐和单铵盐。
生物评价本发明化合物作为血小板凝集作用抑制剂的效果可通过其作为P2T受体拮抗剂的能力测定，如下面筛选所阐明在洗过的人血小板中的P2T受体激动剂/拮抗剂活性的定量制备将(100ml)人静脉血等分于3个试管中，每个含有4ml 3.2％的柠檬酸三钠作为抗凝血剂。这些试管在240G离心15分钟，得到血小板富集的血浆(PRP)，向其中加入300mg/ml的环前列腺素(prostacyclin)以在洗涤过程中稳定血小板。无PRP的红细胞可通过于125G离心10分钟，接着于640G再离心15分钟而获得。弃去上清液，将血小板沉淀再悬浮于改良的，无钙台罗德氏溶液(10ml)CFT，组成为NaCl 137mM、NaHCO311.9mM、NaH2PO40.4mM、KCl2.7mM、MgCl21.1mM、葡萄糖5.6mM，以95％O2/5％CO2通气并保持于37℃。在加入300ng/ml PGI2之后，该混合的悬浮液于640G再离心15分钟。丢弃上清液，将血小板起初再悬浮于10ml CFT中，再加CFT调节最后的血小板计数为2×155/ml。最后的悬浮液排除空气并于3℃下贮存于60ml注射器中。为了从PGI2-抑制作用中恢复正常功能，血小板至少要在最后再悬浮2小时后用于聚集作用的研究。
在所有研究中，3ml等分的血小板悬浮液加到含有CaCl2溶液(60μl50mM，最终浓度为1mM)的试管中。加入纤维蛋白原(Sigma，F4883)和8-硫苯基茶碱(8-SPT，阻断化合物的任何P1激动剂活性)，分别得到0.2mg/ml(60μl10mg/ml可凝蛋白质在盐水中的溶液)和300nM(10μl 15mM在6％葡萄糖的溶液)的最终浓度。血小板或适宜的缓冲液以150μl体积加到96井平皿的各个井中。所有的测定以一式三份以各个供体的血小板进行。
方案a)激动剂/拮抗剂效力的评定在96井平皿中的凝集应答由在660nm的平皿读数器所给出的吸收度的变化测定。
平皿中各井的吸收度在660nm读出以确定基线图。试验化合物的盐水或适宜的溶液以10μl体积加到各个井中，得到0、0.01、0.1、1、10或100mM的最终浓度。然后，在定轨摇床上定位于10摇动平皿5分钟并于660nm读吸收度。在这一点的凝集作用是试验化合物的激动剂活性的表征。然后，加盐水或ADP(30mM；10μl 450mM)于每个井中并在摇动5分钟之后于660nm读出吸收度。
拮抗剂效力以对照ADP应答的％抑制作用测定。
当如上试验时，本发明的化合物呈现抗凝集活性。
权利要求
1.通式(I)的化合物及其药用盐和前药，
式中B是O或CH2；X选自NR1R2，SR1和C1-C7烷基；Y选自SR1，NR1R2和C1-C7烷基；R1和R2各自独立地选自H或在烷基链上或烷基链中任意取代有一个或多个O、S、N或卤素的C1-C7烷基；R3和R4都是H或者R3和R4一起形成键；A是COOH、C(O)NH(CH2)pCOOH、C(O)N[(CH2)qCOOH]2、C(O)NHCH(COOH)(CH2)rCOOH，或5-四唑基，其中p、q和r各是或独立地是1、2或3。
2.权利要求1的式(I)的化合物，其中X是NR1R2；Y是SR1；A是C(O)NHCH(COOH)(CH2)rCOOH；和其中R1、R2和r的定义如权利要求1。
3.权利要求2的化合物，其中X是NR1R2，其中R1是氢和R2的定义如权利要求1；Y是SR1，其中R1是任意取代有一个或多个卤素的C1-C5烷基；和A是C(O)NHCH(COOH)(CH2)COOH。
4.权利要求1的化合物，该化合物是[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸钠盐]；[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3 [4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3 三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸的双钠盐；[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-环戊烷丙酸钠盐；[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(丁氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸钠盐；[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(乙氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸钠盐；[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(丁氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊烷丙酸钠盐；[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(乙氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-环戊烷丙酸钠盐；[1R-(1α，2α，3β，5β)]-3-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-5-[2-(1H-四唑-5-基)乙基]-1，2-环戊二醇；[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]丙酰基]-L-天冬氨酸；[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸；[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(3，3-二甲基丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸；[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(2-甲氧基)乙氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酸；[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基丙酰基]-L-天冬氨酸；[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫基]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸单铵盐；(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3基-]-1，5，6-三脱氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸；(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸；(E)-N-[1-[7-氨基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸单铵盐；(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酰基]-L-天冬氨酸单铵盐；(E)-N-[1，5，6-三去氧-1-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸单铵盐；(E)-1-[7-(N-丁基-N-甲基-氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸；(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸；(E)-1-[5-丁基-7-(丁氨基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸；(E)-1-[7-丁基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脱氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸；(E)-N-[1-[5，7-二(丁氨基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脱氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酰基]-L-天冬氨酸单铵盐；(Z)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基-1，5，6-三脱氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸；N-丁基-5-(丙硫基)-3-[5，6-二脱氧-6-(1H-四唑-5-基)-β-D-核-呋喃己糖基-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺；1，5，6-三脱氧-1-[5，7-双(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-呋喃庚糖醛酸钠盐。
5.权利要求4的化合物，该化合物是(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸。
6.权利要求4的化合物，该化合物是[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]丙酰基]-L-天冬氨酸。
7.权利要求4的化合物，该化合物是[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酰基-L-天冬氨酸。
8.权利要求4的化合物，该化合物是[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫基]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸单铵盐。
9.权利要求1的通式(I)化合物的盐。
10.权利要求9的化合物，该化合物是权利要求1的通式(I)化合物的碱金属盐或铵盐。
11.权利要求10的化合物，该化合物是权利要求1的通式(I)化合物的钠盐。
12.权利要求10的化合物，该化合物是权利要求1的通式(I)化合物的单铵盐。
13.权利要求1的通式(I)化合物，其中该化合物以其互变异构体、对映异构体或非对映体的任一形式存在。
14.权利要求1的通式(I)化合物用于治疗。
15.权利要求14的化合物，其中治疗适应症是预防血小板凝集。
16.权利要求14的化合物，其中治疗适应症是指不稳性绞痛。
17.权利要求14的化合物，其中治疗适应症是指冠状血管成形术。
18.权利要求14的化合物，其中治疗适应症是指心肌梗塞。
19.权利要求16-18的化合物，其中治疗是指附加治疗。
20.权利要求1的化合物的用途，用于制造治疗血小板凝集病症用的药物。
21.权利要求1的化合物的用途，用于制造治疗不稳性绞痛用的药物。
22.权利要求1的化合物的用途，用于制造治疗冠状血管成形术用的药物。
23.权利要求1的化合物的用途，用于制造治疗心肌梗塞用的药物。
24.权利要求21-23的用途，其中该用途是为了附加治疗。
25.一种药物组合物，它含有作为活性组分的权利要求1的通式(I)化合物，和药用载体。
26.权利要求1的通式(I)化合物的制备方法，包括以下步骤A)(i)将起始原料4，5-二氨基-2，6-二巯基嘧啶进行烷基化反应后接着重氮化，得到通式(II)化合物，
式中R1的定义如通式(I)；(ii)步骤(i)的通式(II)化合物与通式(III)化合物在惰性溶剂中和碱存在下，于-20-50℃反应，
其中P2为保护基；和L为离去基团；然后，基团X＝NR1R2是通过与式NHR1R2的化合物在惰性溶剂中于0°-150℃反应而引入，其中R1和R2如上式(I)所定义，而后，保护基P2通过以亲核试剂处理而被除去，给出式(IV)化合物
式中X是NR1R2；Y是SR1；和其中，R1和R2的定义如通式(I)；(iii)将步骤(ii)的式(IV)产物，在惰性溶剂中和无机或有机酸催化剂存在下于-15°-100℃，与适宜的羰基化合物或与原甲酸酯反应，得到通式(V)化合物
式中X是NR1R2；Y是SR1；B是O；和P1是保护基；B)(i)将4，6-二羟基-2-巯基嘧啶烷基化后接着硝化，并转化醇为离去基，得到通式(VI)的化合物，
其中R1的定义如通式(I)；和M为离去基；然后，将该化合物与适当保护的5，6-二羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-3-酮，在碱存在下于惰性溶剂中在10℃到100℃温度下反应，给出通式(VII)的化合物，
其中Y为SR1；R1定义如式(I)；M为离去基；和P1是保护基，(ii)将步骤(i)的产物中的内酰胺和硝基功能基还原，随之环化成三唑；还原生成的二氨基醇并用下述重氮化反应而环化使用金属亚硝酸盐或亚硝酸烷基酯在适宜溶剂中于温度-20℃至100℃下；然后在惰性溶剂中于0°-150℃下，通过与通式HNR1R2的化合物反应而引入基团X＝NR1R2，给出通式(V)的化合物，其中X为NR1R2；Y为SR1；B为CH2；和P1是保护基；C)(i)将步骤A)和B)的产物，即步骤A)和B)分别获得的通式(V)的化合物氧化并进行烯化反应，得到通式(VIII)化合物，
其中B为O或CH2；X，Y和P1分别如步骤(A)和(B)的通式(V)中所定义的；A是COOR11，其中R11是低级(芳)烷基；和R3和R4一起形成键；(ii)使用酸或碱或氢解条件经脱酯化作用而除去R11和最后进行脱保护，得到通式(I)化合物，其中X是NR1R2；Y为SR1；R1和R2如式(I)中所定义；B是O或CH2；R3和R4一起形成键；和A是COOH；D)(i)通式(I)的化合物，其中X是SR1，NR1R2，或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2，C1-C7烷基；R1和R2如通式(I)中所定义；B是O或CH2；R3和R4是氢或一起形成键；和A是COOH；与结构式为NH2(CH2)pCOOR11、NH[(CH2)qCOOR11]2、或NH2CH(COOR11)(CH2)rCOOR11的化合物反应，其中p、q和r是1，2或3和R11是低级(芳)烷基；采用在肽合成中所用的方法，给出式(I)的化合物，其中X是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2，C1-C7烷基；R1和R2如式(I)中所定义；B是O或CH2；R3或R4是氢或一起形成键；和A是C(O)NH(CH2)pCOOR11、C(O)N[(CH2)qCOOR11]2或C(O)NHCH(COOR11)(CH2)rCOOR11，其中p、q和r是1，2或3，和R11是低级(芳)烷基；(ii)步骤(i)的通式(I)的产物被脱脂化，得到通式(I)的化合物，其中B是O或CH2；X是NR1R2，SR1，或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2，或C1-C7烷基；R1和R2各自独立地为H，或在烷基链内或烷基链上被一个或多个O、S、N或卤素任意取代的C1-C7烷基；R3和R4都为H，或R3和R4一起形成键；和A是C(O)NH(CH2)pCOOH、C(O)N[(CH2)qCOOH]2、或C(O)NHCH(COOH)(CH2)rCOOH，其中p、q和r各自独立地为1，2或3；E)(i)步骤C(ii)所得产物经还原，得到通式(I)化合物，其中B、X、Y、R1和R2的定义如上面的步骤C(ii)，A是COOH；和R3和R4都是氢。F)(i)将适当保护的5-氨基-1-β-D-呋喃核糖基-1，2，3-三唑-4-甲酰胺，用碱处理并随之用式R1COOR5的酯处理，其中R1的定义如结构(I)和R5是低级烷基，然后进行保护，得到式(IX)的化合物，
式中Y是C1-C7烷基；P1是保护基；P2是保护基；和M是OH；(ii)在前一步中得到的式(IX)的化合物被卤化，并在惰性溶剂中于0～150℃温度下用通式HNR1R2的化合物处理以引入X＝NR1R2基，然后，除去保护基P2，得到通式(V)化合物，其中X是NR1R2；Y是C1-C7烷基；B是O；和P1是保护基，(iii)将步骤(ii)的通式(V)的产物进行如步骤C(i)和(ii)所述的相同反应，得到通式(I)的化合物，其中X是NR1R2；B是O；Y是C1-C7烷基；A是COOH；和R3和R4一起形成键；G)(i)适宜的保护基P3被引入至保护了的5-氨基-1-β-D-呋喃核糖基-1，2，3-三唑-4-甲酰胺，所得的中间体用碱处理，随之用下式的试剂处理
其中L为离去基，得到式(X)化合物
其中P1和P3各自独立地为保护基；(ii)将步骤(i)的通式(X)的产物在惰性溶剂中于-20℃至50℃温度下用碱处理，接着用烷基化剂R1G处理，其中G是离去基，而R1如式(I)中所定义，其后除去P3并用新的保护基P2代替，并最后进行卤化反应，得到式(IX)的化合物，其中M是离去基；P1是保护基，P2是保护基；Y是SR1；和R1如式(I)中所定义；(iii)将步骤(ii)的式(IX)的产物与烷基亲核剂于温度-20℃和150℃之间反应，随后除去保护基P2，得到式(V)的化合物，其中X是C1-C7烷基；Y是SR1；R1如式(I)中所定义；B是O；和P1是保护基；H)(i)式(I)的化合物，其中X是NR1R2；Y是SR1；R1和R2如式(I)中所定义；B是O；R3和R4均是氢；和A是C(O)NHCH(COOR11)(CH2)rCOOR11，其中r是1，2或3，和R11如上所定义；用一种氧化剂于惰性溶剂中在温度为-20℃和100℃间处理，随之用式HNR1R2的化合物在惰性溶剂中于温度0℃～150℃处理，得到式(I)的化合物，其中X是NR1R2；Y是NR1R2；B是O；R3和R4均为氢；和A是C(O)NHCH(COOR11)(CH2)rCOOR11，其中r是1，2或3，和R11如上述所定义；I)将式(II)的化合物(其中R1如式(I)中所定义)与式(XI)的化合物反应
其中R12是低级(芳)烷基和P4是保护基，该反应是通过在一种酸存在下于减压下和在温度50℃和175℃间将化合物一起加热，随后在酸性或碱性条件下水解除去保护基和R12基，得到式(I)的化合物，其中X是SR1Y是SR1；R1如式(I)中所定义；B是O；R3和R4均为氢；和A是COOH；式(XI)的化合物的制备起初是由(E)-甲基-5，6-二脱氧-2，3-O-(1-甲基亚乙基)-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸乙酯经酸性水溶液水解，和在碱和一种适宜的溶剂存在下与酰化剂反应，随后还原；J)将步骤A(iii)的产物或步骤B(ii)的产物氧化，接着进行烯化反应，并随之还原，得到式(XII)的化合物
其中B是O或CH2；P1是保护基；和R1和R2如式(I)中所定义；然后将该化合物与叠氮化物在惰性溶剂中，于温度在0℃和175℃间反应，随后通过与无机酸或有机酸在惰性溶剂中于温度在0℃和100℃间进行处理而除去保护基，得到式(I)的化合物，其中X是NR1R2；Y是SR1；R1和R2如式(I)中所定义；B是O或CH2；R3和R4均为氢；和A是5-四唑基，K)(i)将通式(I)的化合物被还原，其中X是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；R1和R2如式(I)所定义；B是CH2；R3和R4一起形成键；和A是COOR11，其中R11如上述步骤C(ii)所定义；得到式(VIII)的化合物，其中R3和R4是氢；和X、Y、B、A和P1如上述所定义；(ii)将步骤(i)的产物进行如步骤D(ii)所述的相同的反应，得到式(I)的化合物，其中X是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；B是CH2或O；和A是COOH。
27.权利要求1的化合物，其中B、X、Y、R1、R2、R3和R4的定义同权利要求1，和A选自COOR11、C(O)NH(CH2)pCOOR11、C(O)N[(CH2)qCOOR11]2和C(O)NHCH(COOR11)(CH2)rCOOR11，其中p、q和r是1，2或3和R11是低级(芳)烷基。
28.权利要求26的化合物，其中M、Y和P1的定义同权利要求26。
29.一种治疗血小板凝集病症的方法，该方法包括对遭受所说血小板凝集病症的对象施用有效量的权利要求1的通式(I)化合物。
30.权利要求29的方法，其中血小板凝集病症是不稳性心绞痛。
31.权利要求29的方法，其中血小板凝集病症是冠状血管成形术。
32.权利要求29的方法，其中血小板凝集病症是心肌梗塞。
全文摘要
通式(Ⅰ)化合物,其中B是O或CH
文档编号A61K31/505GK1195353SQ96196720
公开日1998年10月7日 申请日期1996年7月4日 优先权日1995年7月11日
发明者D·科克斯, A·加尔, P·维利斯 申请人:英国阿斯特拉药品有限公司