一种具有抑制Aβ聚集活性的化合物的制备方法与用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于微生物药物领域，特别涉及一种具有抑制A0聚集活性的化合物的制 备方法与用途。
【背景技术】
[0002] 阿尔茨海默症（Alzheimer'sdisease，AD)是一种慢性的大脑退行性疾病，由于 大脑器质性损害引起脑功能障碍，使记忆、理解、自我控制能力等发生进行性退化和持续性 智能损害，影响到日常的生活运动，是老年期痴呆的最常见类型。近年来随着我国人口老龄 化的加重，AD的发病率及患病率也逐渐增高，AD的发病机制和防治渐渐成为了国内外研宄 的热点，也得到了越来越多的医学关注。
[0003] 目前，关于AD的发病机制尚不完全清楚，但临床发现AD患者脑中的标志性病理特 征表现为区域性神经元丧失、细胞内神经元纤维缠（neurofibrillarytangles，NFTs)和主 要由0-淀粉样蛋白（amyloid|3-protein，A|3)组成的老年斑。淀粉样蛋白级联假说强调 毒性Af3是AD病变的始发因子，在AD病程中发挥关键作用。大量实验证实，Af3对神经元 具有神经营养和神经毒双重作用，低浓度Af3对未成熟分化的神经元表现出营养作用，随 A0逐渐积累浓度升高，对成熟分化的神经元则呈现出神经毒性，使树突和轴突退缩，导致 神经元减少或缺失。
[0004] 目前针对AD的临床治疗药物主要为胆碱酯酶抑制剂、自由基清除剂、抗炎药、脑 细胞代谢和血液循环改善剂、钙拮抗剂等，但这些药物均存在一定的毒副作用和使用限制。 因而筛选具有抑制A0聚集的小分子先导化合物正成为研制AD治疗药物的热点。
【发明内容】
[0005] 本发明的首要目的在于提供一种生产具有抑制Ae聚集活性的化合物的链霉菌。 本发明的另一目的在于提供所述的化合物的制备方法。本发明的再一目的在于提供所述的 化合物或链霉菌的用途。
[0006] 本发明的目的通过下述技术方案实现：
[0007] -种生产具有抑制A0聚集活性的化合物的链霉菌，为保藏编号为CCTCCNO: M2015103的链霉菌X210408(Str印tomycessp.X210408)。所述的具有抑制A0聚集活性 的化合物的结构如式I所示：
[0008]
【主权项】
1. 一种生产具有抑制ae聚集活性的化合物的链霉菌，其特征在于：所述的具有抑制 A0聚集活性的化合物的结构如式I所示：
所述的链霉菌的保藏编号为CCTCC NO :M 2015103。
2. -种利用权利要求1所述的链霉菌制备式I所示化合物的方法，其特征在于包括如 下步骤： (1) 将权利要求1所述的链霉菌经平板活化后接种于ISP2液体培养基中培养，再转接 到OB培养基中进行发酵；所述的OB培养基的配方为：燕麦粉20g/L，牛肉提取物3g/L，葡萄 糖 20g/L，FeSO4O. 4g/L，MgCl2 ? 4H20 0? 4g/L，CaC033g/L，海盐 3g/L，pH 值为 7. 0 ; (2) 将步骤（I)获得的发酵液用乙酸乙酯萃取、浓缩得粗提物； (3) 将步骤（2)获得的粗提物在硅胶中用二氯甲烷和甲醇组成的洗脱液进行洗脱，收 集洗脱液； (4) 将步骤（3)获得的含有目的化合物的洗脱液浓缩，通过柱层析以及半制备液相分 离纯化得到式I所示化合物。
3. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（3)中所述的硅胶为300~400目 的硅胶。
4. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于包括如下步骤： (1) 将权利要求1所述的链霉菌经平板活化后接种于ISP2液体培养基中，28°C、220r/ min条件下振荡培养3d，再以5%的接种量接种到OB培养基中，28°C、220r/min条件下振荡 培养7d ; (2) 将步骤（1)获得的发酵液用等体积乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，减压浓缩 获得乙酸乙酯提取物； (3) 将步骤（2)获得的提取物在硅胶中进行梯度洗脱，依次用体积比分别为100:1、 90:1、80:1、60:1、40:1、20:1、10:1的二氯甲烷和甲醇组成的七个洗脱液进行洗脱，依次获 得七个洗脱液洗出的组分； (4) 将步骤（3)获得含有目的化合物的组分合并后，减压浓缩，再将浓缩后的合并组分 进行羟丙基葡聚糖凝胶LH20柱层析以及C18半制备液相分离纯化，得到式I所示化合物。
5. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于包括如下步骤：步骤（2)和（4)中所述减 压浓缩的温度为40~100°C。
6. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于包括如下步骤：步骤（4)中所述的LH20柱 层析所用洗脱液为体积比1:1的二氯甲烷和甲醇；所述的C18半制备液相分离纯化所用的 流动相为体积比85:15的甲醇和水。
7. 权利要求1所述的链霉菌在制备A 0聚集抑制剂和/或治疗痴呆症的药物中的应 用。
8. 权利要求1中式I所示化合物在制备A0聚集抑制剂和/或治疗痴呆症的药物中的 应用。
9. 一种A0聚集抑制剂或治疗痴呆症的药物，其特征在于：包含式I所示化合物。
10. 根据权利要求7或8所述的应用或权利要求9所述的药物，其特征在于：所述的痴 呆症为阿尔茨海默症。
【专利摘要】本发明公开了一种具有抑制Aβ聚集活性的化合物的制备方法与用途，属于微生物药物领域。具有抑制Aβ聚集活性的化合物的结构如式Ⅰ所示，该化合物可通过保藏编号为CCTCC NO：M 2015103的链霉菌X210408发酵分离制备得到。式Ⅰ所示化合物具有较强的抑制Aβ聚集的活性，且具有良好的剂量依赖性。其可用于制备Aβ聚集抑制剂，并用于制备阿尔茨海默症以及其他形式痴呆的治疗药物。本发明为治疗阿尔茨海默症提供了新的途径。CCTCC NO：M201510320150312
【IPC分类】C12R1-465, C12P21-04, C12N1-20, A61P25-28, A61K38-12
【公开号】CN104818226
【申请号】CN201510151251
【发明人】洪葵, 叶弯弯, 田二丽, 邓子新
【申请人】武汉大学
【公开日】2015年8月5日
【申请日】2015年4月1日