防止骨质损失的配合治疗孕酮和雌激素激动剂的制作方法

专利名称：防止骨质损失的配合治疗孕酮和雌激素激动剂的制作方法
骨质疏松是一类病因不同但却以单位体积的骨质净损失为共同特征的疾病。骨质损失使得骨骼无法提供支撑身体的足够力量从而导致骨折。一种最普通的骨质疏松是在妇女绝经后不久发生的。大多数妇女在绝经后3-6年内，其骨小梁中骨质要失去20-60％。骨质的这种迅速损失通常与骨的再吸收和骨的变形有关。不过骨质的再吸收循环更占优势，而且其结果产生骨质的净损失。
因此，骨质疏松在绝经妇女中是严重的常见疾病。单就美国而言，估计有25,000,000妇女遭受此病折磨。这种疾病对个人健康上和经济上都造成危害。由于该病为慢性病而且有后遗症，需要持续和长期的治疗(住院和家庭护理)，由此带来了巨大经济损失。对年龄较大的病人来说，其骨质损失特别多。此外，尽管普遍认为骨质疏松不危及生命，但是在年老妇女中20-30％的死之率与髋骨骨折有关。这种高死亡率可能与绝经后骨质疏松直接相关。
骨组织中最易受绝经后骨质疏松影响的是骨小梁。这种组织通常是指呈海绵状或多孔状的骨而且主要集中在骨端附近、关节附近以及脊椎骨中。骨小梁是一些小体积的类骨质结构，其内部互相连结而且与更坚硬更致密的皮质组织相连，这种皮质组织构成了骨的外表面和中心骨干。骨小梁的这种交联的网状结构对外部皮质结构起了侧向支撑作用而且对整体结构的生物力强度起了关键性的作用。骨小梁的再吸收和损失就是导致绝经后骨质疏松症患者的骨骼衰退和骨折的主要原因。根据绝经后妇女骨小梁的骨质损失情况明显可知，最普通的骨折是发生在那些高度依靠骨小梁支持的骨骼，例如椎骨、持重骨(股骨)的颈骨、和前臂骨。事实上，髋骨骨折，腰骨骨折和椎骨粉碎性骨折都是绝经后骨质疏松症常有的标志。
绝经后骨质疏松症的治疗和研究中有一个非常重要的概念即骨折阈。骨折阈是一个骨密度值(也是指骨强度)，当骨密度下降到该值时骨折的可能性就大。这个密度值不是所有妇女的一个特定值而是每个人的一个相对值，并且与许多因素有关，如体重、生活方式或其它一些可能导致骨折的危险因素。
一般来说，大多数绝经前妇女的骨密度超过骨折阈，因而骨折发生的可能性低。当(或如果)一位绝经前妇女的骨密度即将接近骨折阈而且有骨折危险时，其骨密度和绝经后骨质损失速度都要进行测定。当一位妇女由于骨质疏松而面临骨折时，理想的治疗是增加骨密度(强度)使之超过骨折阈。另外，骨密度超过骨折阈的妇女最好应当使骨密度继续保持在骨折阈以上。
现在，对于绝经后骨质疏松症唯一可得的有效治疗方法是激素补充疗法，特别是雌激素补充疗法，因为骨质疏松的妇女都缺乏雌激素。雌激素在骨质疏松症治疗中的作用机理还不太清楚。不过，一般认为雌激素抑制了骨的再吸收。雌激素补充治疗(ERT)的最后效果是使妇女的骨密度保持在开始进行治疗时的水平上，也就是说雌激素补充治疗是保持骨密度。如果一位妇女在ERT开始进行时其骨密度超过骨折阈并且坚持ERT，那么她将使骨密度保持在骨折阈以上而发生骨折的危险性小。这一事实将支持妇女在绝经时或绝经后不久进行ERT的观点。
然而，当那些妇女骨密度已经低于骨折阈时，ERT将只能使骨密度保持在她们开始进行治疗时的那个水平上。这样，这些妇女骨密度保持在骨折阈以下并且发生骨折的危险性较大。但ERT对这些妇女来说仍是可取的，因为它避免了这种不好的情况变得更糟。不过，通过治疗如可能使骨密度大大增加到骨折阈以上从而达到比较正常的水平并且能够加以维持，那么这种治疗显然是优越的。现时还没有一种有效的改进的疗法能使得骨密度增加到这样的水平上。
如前所说，ERT是现时对经绝后骨质疏松症唯一有效的改进的治疗方法。在这些子宫被切除的妇女中，其自身能产生雌激素(通常以共轭的雌甾酮形式)。然而在大多数有子宫的妇女中，未被拮抗的雌激素增加了子宫内膜癌的危险性。因此，为减少这种危险性，孕激素也通常在配合性治疗或周期性治疗中被使用。
“抗雌激素”是一个专业术语，它在抑制或改进雌激素作用的几种不同类型的化合物中得到了比较广泛地应用。孕激素和雄激素被认为是“抗雌激素的…”[Goodman and Glilman，“治疗药理基础”(The Pharmacological Basisof Therapeutics)，6th Ed.，P1431]。此外，某些合成的化合物，如他莫昔芬，氯米芬，屈洛昔芬和萘福昔定都称作抗雌激素而且在实验中和临床上都显示了能阻断某些雌激素的作用。开发这些合成的“抗雌激素”主要用来治疗雌激素依赖性的胸癌。这些化合物都是具备某些雌激素活性的经典的激动剂/拮抗剂混合物。例如他莫昔芬是使用最广泛的抗雌激素，对人体具有雌激素的作用。
3-苯甲酰-苯并噻吩和孕激素的配合治疗已被发现对防止骨质损失是有效的。见EP 665,015A2。
本发明涉及抑制骨质损失的方法，包括给需要这种治疗的哺乳动物使用有效剂量的具有结构式I的化合物或它们的一种药用盐；再加有效剂量的孕激素。
式I为
其中R1和R2可以相同或不相同，条件是当R1和R2相同时，它们各为甲基或乙基；当R1和R2不同时，其中一个为甲基或乙基而另一个为H或苄基。优选的孕激素是6α-甲基孕甾酮、炔诺酮或异炔诺酮。优选的式I化合物是其R1和R2均为甲基。优选的盐为柠檬酸盐。
本发明涉及的是抑制骨质损失的方法。术语“抑制”其意思就是人们一般所认为的那种含义，即包括对受治疗者进行预防性治疗从而防止这些疾病中的一种或多种疾病的发生，并包括对这种情况或多种疾病的症状进行检查和/或针对这些症状进行治疗。因此，本发明的方法包括临床治疗和/或预防治疗(根据需要)。
实施本发明的方法是对需要治疗的患者给以使用有效剂量的式I化合物，
其中R1和R2可以相同或不相同，条件是当R1和R2相同时，它们为甲基或乙基；当R1和R2不同时，其中一个为甲基或乙基而另一个为H或苄基；或使用有效剂量该化合物的一种药用性盐；或者与一种有效剂量的选自6α-甲基孕甾酮、炔诺酮和异炔诺酮一起配合使用。
孕激素可以从市场购得，包括苯甲孕酮，烯丙孕素、阿马地酮醋酸酯、阿那孕酮醋酸酯、醋酸氯地孕酮、烯孕醇、醋酸氯孕酮、醋酸氯美孕酮、醋酸氯马地孕酮、去氧孕烯、地美炔酮、地屈孕酮、去氢氯炔诺酮、双醋炔诺醇、Etonogetrel、醋酸氟孕酮、孕氯酮、孕二烯酮、孕诺酮己酸酯、孕三烯酮、卤孕酮、羟孕酮己酸酯、左炔诺孕酮、利奈孕酮、美屈孕酮、安宫黄体酮、醋酸甲烯雌醇、双醋甲异炔诺醇、炔诺酮、醋酸炔诺酮、异炔诺酮、诺孕酯、诺孕美特、炔诺孕酮、奥索孕酮苯丙酸酯、孕酮、醋酸氢炔雌醚、奎孕酮、和替孕醇。
优选的孕激素为6α-甲基孕甾酮、炔诺酮和异炔诺酮。
孕激素每日剂量范围为0.1-10mg；与式I的化合物结合治疗时优选的每日剂量范围为0.25-5mg。
式I化合物是现有技术中已知的，而且基本上都是通过美国专利5,047,431所描述的方法来制备。该专利在本发明参考文献中引入。
结构式I中优选的化合物其R1和R2都为甲基。这个优选的化合物称为屈洛昔芬，即(E)-1-[4’-(2-甲基氨基乙氧基)苯基]-1-(3-羟苯基)-2-苯基丁-1-烯，它就是前面所述的一种抗雌激素药，对治疗激素依赖性乳腺肿瘤(美国专利5,047,431)，以及治疗雌激素或其类似物缺乏而引起的骨病都是有用的(美国专利5,254,594)。此外，已知屈洛昔芬与其它抗雌激素化合物如他莫昔芬相比具有较低的子宫萎缩效应。
在本发明的方法中，结构式I中的化合物尽管可以以游离碱的形式使用，但优选的是将其制成药用性盐的形式来使用。因此，在本发明的方法中所使用的化合物是可与很多种无机酸及优选地与有机酸生成药用的酸和碱加成盐，而且包括这些化合物在药物化学中常使用的生理上可接受的盐。这些盐也是本发明的一部分。用来生成这些盐的典型的无机酸包括盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、硫酸、磷酸、过二磷酸等。与有机酸生成的盐也可以使用，这些有机酸包括脂肪族单羧酸和二羧酸、辛基取代的链烷酸、羟基链烷酸和羟基链烷双酸、芳香族酸、脂肪族和芳香族磺酸。于是这类药用盐包括乙酸盐、苯乙酸盐、三氟乙酸盐、丙烯酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、氯代苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、邻乙酸基苯甲酸盐、萘-2-苯甲酸盐、溴化物、异丁酸盐、苯基丁酸盐、β-羟基丁酸盐、丁炔-1，4-二羟酸盐、己炔-1，4二羧酸盐、癸酸盐、辛酸盐、氯化物、肉桂酸盐、柠檬酸盐、甲酸盐、富马酸盐、乙醇酸盐、庚酸盐、马尿酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、羟基马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、异烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、邻苯二甲酸盐、对苯二甲酸盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、丙炔酸盐、丙酸盐、苯丙酸盐、水杨酸盐、癸二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、焦硫酸盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磺酸盐、苯磺酸盐、对-溴苯磺酸盐、氯苯磺酸盐、乙基磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐、甲磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、对-甲苯磺酸盐、二甲苯磺酸盐、酒石酸盐等。优选的盐为柠檬酸盐。
药用性酸加成盐的典型合成法是用等摩尔量的或过量的酸和结构式I中的化合物进行反应。该反应物一般合并加入到如乙醚或苯这样的互溶剂中。产物盐通常大约在一小时到十天之内从溶剂中沉淀出来，可通过过滤分离得到，或者可通过传统的方法将溶剂除去得到。
式I化合物的药用盐其溶解性一般比与生成该盐的化合物的溶解性高，因此它们经常是制成液体或乳液。
一经制备，游离碱或盐形式的式I化合物和一种孕激素一起便可以按照这里所描述的方法给需要治疗的患者使用。下面非限制性试验性实例说明了本发明的方法。
按照本发明的方法，结构式I中的化合物和孕激素是持续给药或按每天1-4次给药。
本发明所用的术语“有效量”的意思是指本发明的方法中所使用的组合物的量，该组合物能够抑制如本发明中所描述的疾病症状。本发明给药化合物的特定剂量当然取决于与该病例有关的一些具体情况。例如，这些情况包括给药的化合物、给药的途径、病人的状态和被治疗疾病的严重程度。典型的日剂量是一种无毒性剂量水平，即本发明的组合物的日用剂量为约0.25mg-约100mg/天。优选的日剂量为约1mg-约20mg/天。式I化合物和约0.1mg-约10mg的孕激素同时给药。
本发明的化合物可以有多种给药途径，包括口服、直肠给药、皮肤转运、皮下注射、静脉注射、肌内注射和鼻内给药。这些化合物在给药之前先制成制剂，至于选择哪一种制剂，由临床医师决定。通常是将一种式I化合物，或它的药用盐，与一种药用载体、稀释剂或赋形剂配成一种药物制剂。
这些制剂中活性成分的总量占该制剂重量的0.1-99.9％。这里“药用”或“药学上可接受的”是指这些载体、稀释剂、赋形剂和/或盐必须是和制剂中的其它组分相容而且对接受者是没有害的。
包含式I化合物的药物制剂可以通过现有技术中已知的方法使用众所周知的现成的组分来制备。例如式I化合物的制剂可以用普通的赋形剂、稀释剂或者载体进行制备，并可制成片剂、胶囊、混悬液和粉剂等。与这些制剂相适应的赋形剂、稀释剂和载体的例子包括如下填料和补充剂如淀粉、糖、甘露糖醇、还包括硅的衍生物；粘合剂如羧甲基纤维素和其它纤维素衍生物、藻酸盐、凝胶和聚乙烯吡咯烷酮；润湿剂如甘油；崩解剂如碳酸钙和碳酸氢钠；延缓溶解的试剂如石蜡；吸收促进剂如季铵类化合物；表面激活剂如十六烷醇、甘油单硬脂酸；吸附载体如高岭土和膨润土；和润滑剂如滑石、钙和镁的硬脂酸盐以及固态聚乙二醇。
这些化合物也可以制成便于口服给药的酏剂或溶液或者适合胃肠外给药(例如通过肌内、皮下或静脉内给药的途径)的溶液。
另外，该化合物也适合于制成控释制剂和其它相类似的制剂。这些制剂的作用是它们能在一段时间内仅仅(或优先)在特定的生理部位释放活性组分。包衣、包囊和保护性基质可以用聚合物或石蜡来制得。
式I化合物和孕激素一般以一种简便的剂型给药。下面的制剂实例仅仅起说明作用并不是用来限制本发明的范围。
在下面制剂中，“活性组分”指的是结构式I的化合物，或其盐；和孕激素一起。
制剂1明胶胶囊硬明胶胶囊的用以下成分制备组分 含量(mg/胶囊)活性组分0.25-100淀粉，NF 0-650淀粉流动性粉未 0-50硅流体350厘沲 0-15一种片剂用下面的成分制备制剂2片剂组分 含量(mg/片剂)活性组分0.25-100纤维素(微晶形) 200-650二氧化硅，薰制的 10-650硬脂酸 5-15这些组分混合然后压成片剂。
另外，每片包含0.25-100mg活性组分的片剂制备如下制剂3片剂组分含量活性组分 0.25-100淀粉 45纤维素，微晶形 35聚乙烯吡咯烷酮(10％的水溶液) 4羧甲基纤维素钠 4.5硬脂酸镁0.5滑石 1活性组分淀粉和纤维素通过一个45目的美国筛然后充分地混合。将聚乙烯吡咯烷酮溶液与该粉末状的混合物混合，然后通过14目的美国筛。将形成的颗粒在50-60℃下干燥然后通过18目的美国筛。将羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁和滑石预先通过一个60目的美国筛后加入上述颗粒中，混和搅拌后在压片机上压成片剂。
混悬液(每5ml剂量含0.25-100mg的药物)制备如下制剂4混悬液组分含量(mg/ml)活性组分0.25-100mg羧甲基纤维素钠 50mg糖浆 1.25mg苯甲酸溶液0.10mg调味剂 适量色素 适量纯化水至 5ml将该药物通过45目美国筛然后和羧甲基纤维素钠及糖浆一起混合成均匀的糊状物。将苯甲酸溶液、调味剂和色素用适量的水稀释后加入，搅拌，再加入足量的水达到所要求的体积。
一种气雾剂用下面的组分进行制备。
制剂5气雾剂组分含量(/％重量比)活性组分 0.25乙醇 25.75推进剂22(氯代二氟甲烷) 70.00将活性组分与乙醇一起混合然后将混合物加到一部分22号推进剂，冷却至30℃，然后转移到装填机里。在不锈钢容器里装入所需量的上述产物然后用剩下的推进剂稀释。在该容器上安装阀门。
栓剂制备如下制剂6栓剂组分 含量(mg/栓剂)活性组分 250饱和脂肪酸甘油酯 2,000将活性组分通过一个10目的美国筛，然后混悬于饱和脂肪酸甘油酯中，在此之前用必需的最少量热量进行预熔解。将该混合物注入2g容量的栓剂模具中然后冷却。
一种静脉内注射制剂制备如下制剂7静脉内注射制剂组分含量活性组分 200mg等渗盐水 1,000ml含上述组分的溶液以每分钟1ml的速度对病人进行静脉内给药。
实例1在这些实例中，采用了一种绝经后的骨质疏松模型，在这种模型中，对增加股骨骨密度的不同疗法的疗效进行测定。
从Charles River实验室(Partage，MI)获得年龄为75天的雌性SprgueDawley大鼠(重量范围225-275g)，它们共3个组住在可以随意地接近食物(钙含量约1％)和水的地方。室温保持在22.2±1.7℃，最小相对湿度为40％，室内光周期为12小时光照和12小时黑暗。
这些老鼠在到达后一星期，在给以麻醉药(44mg/kg氯胺酮和5mg/kg赛拉嗪(Butler，Indianapolis，IN))后进行双侧卵巢切除。在手术当天麻醉状态过去后或手术后35天开始用载体或结构式I化合物和孕激素进行治疗。
口服剂量为0.5ml 1％羧甲基纤维素(CMC)。
手术时进行体重测量，另外，观察期间每周也进行体重测量，根据体重变化来调整剂量。用赋形剂进行治疗的卵巢切除(受损伤的)和卵巢未切除的(完好的)两个实验小组分别作为阴性对照和阳性对照同时进行评估。
这些老鼠连续治疗35天(每一个治疗小组6只)，到第36天用断头法处死。35天的治疗足以使骨密度得到最大限度的恢复，骨密度用下面所描述的方法进行测量。在处死的时候，子宫被取出，与其它无关的组织相分离，并将液体组分在进行湿重称量前就除去以便证实雌激素的缺乏与卵巢全部切除有关。受卵巢切除的影响，子宫重量通常减少约75％。将上述子宫置入10％的中性福尔马林缓冲体系中以便进行一系列组织学研究。
右股骨经常用单光子吸收光谱法在离髌骨沟1mm处的远侧干骺端进行照射和扫描。密度计的测量结果代表骨密度值，骨密度值的大小显示了骨中矿物质成分的机能的大小和骨的厚度的大小。
权利要求
1.一种用于抑制骨质损失的药的制备方法，该方法包括使用结构式I的化合物
其中R1和R2可以相同或不相同，条件是当R1和R2相同时，它们各为甲基或乙基；当R1和R2不相同时，一个为甲基或乙基，另一个为H或苄基；或使用它们的药用盐；加上孕激素。
2.权利要求1的方法，其中结构式I的化合物是一种其中R1和R2均为甲基的化合物或其药用盐。
3.权利要求2的方法，其中所述的药用盐是柠檬酸盐。
4.权利要求1的方法，其中所述的孕激素选自由6α-甲基孕甾酮、炔诺酮和异炔诺酮组成的一组孕激素。
全文摘要
本发明提供抑制骨质损失的方法,包括需要这种治疗的哺乳动物给以使用有效剂量的结构式Ⅰ的化合物。其中R
文档编号A61K31/185GK1178668SQ9710341
公开日1998年4月15日 申请日期1997年2月28日 优先权日1997年2月28日
发明者戴维·B·麦克莱恩, 戴维·D·汤普森 申请人:美国辉瑞有限公司