制备动物用驱寄生虫药组合物的方法

专利名称：制备动物用驱寄生虫药组合物的方法
本申请是申请号为90110426.4、申请日为1990年12月19日、发明名称为“动物用驱寄生虫药组合物”的发明专利申请的分案申请。
总的来说，本发明涉及的是驱寄生虫药组合物和用其治疗被体内和体外寄生虫感染的动物的用途，所述寄生虫例如蠕虫、线虫、蜱和其它种类寄生虫。更具体地说，本发明涉及的是含有丙硫咪唑和有机磷酸酯，即匹拉克罗福(pyraclofos)的组合物，以及用其治疗由抗苯并咪唑寄生虫引起的感染的用途。
对主人和养畜者来说，动物的寄生虫感染，特别是家畜例如牛、马、羊和猪、家禽或宠物的寄生虫感染，长期以来一直是一个问题。人们发现大部分动物寄生虫属于原生生物、蠕虫(蛔虫和扁虫)和节肢动物。蠕虫病是由被称为蠕虫的寄生虫引起的宿主动物的感染。蠕虫病是家畜如猪、羊、马、牛、山羊、狗和猫以及家禽的一种严重的流行病。在蠕虫中，被称为线虫或蛔虫的寄生虫类在各类动物中能引起普遍而且是严重的感染。最常发现的影响到上述动物的寄生虫种类有血矛线虫属、毛园线虫属、胃线虫属、细颈线虫属、古柏线虫属、蛔虫属、仰口线虫属、结节线虫属、夏柏特线虫属、鞭虫属、园线虫属、毛线线虫属、网尾线虫属、毛细线虫属、异刺线虫属、弓蛔虫属、鸡蛔虫属、蛲虫属、钩口线虫属、钩虫属、弓蛔线虫属和副蛔虫属。某些线虫，例如古柏线虫属和结节线虫属主要侵害肠道，而其它的例如血矛线虫属和胃线虫属则大量地存在于胃中。在肺中发现有网尾线虫属和其它寄生虫。还有其它的寄生虫会寄居在肌体的其它组织和器官中，例如心脏、血管、和皮下级织及淋巴组织。寄生虫感染，被称为蠕虫病，会引起贫血、营养不良，体重下降以及对肠壁和其它组织和器官的严重损害。并且如果不经治疗，可能导致宿主动物死亡。
由各种节肢动物如蜱和螨、蚤、虱、蝇、蚊子引起的其它寄生虫感染，是造成动物不够健康的原因，例如发痒、不清洁和不舒适。而且它们还是蠕虫之类体内寄生虫的传播载体，这些蠕虫举例有吸虫、绦虫和线虫，它们能引起动物致命的疾病。
目前已有治疗体内寄生虫的种种驱肠虫剂组合物，也有治疗体外寄生虫的其它组合物。在这些组合物中含有被称为苯并咪唑和苯并咪唑氨基甲酸酯的各种化合物。例如，见U.S.专利号3,956,499；3,574,845和3,915,986。这些化合物有丙硫咪唑[甲基5-(正-丙基硫代)-1H-苯并咪唑-2-基氨基甲酸酯]、苯硫哒唑[甲基5-(苯硫代)-1H-苯并咪唑-2-基氨基甲酸酯]、氧苯哒唑[甲基5-(正丙氧基)-1H-苯并咪唑-2-基氨基甲酸酯]、磺唑氨酯[甲基5-(苯亚磺酰)-1H-苯并咪唑-2-基氨基甲酸酯]、丁苯咪酯、噻苯咪唑酯、甲苯咪唑、氟苯哒唑、里高噻苯达唑(ricobendazole)、鲁撒噻苯哒唑(luxabendazole)及其它。这些苯并咪唑是可商购得到的。例如，丙硫咪唑目前在市场上以商标名“valbazen”[Smithkline Beecham动物健康实验室]出售，其用作牛的除蠕虫剂。
然而，各种蠕虫对这些苯并咪唑中的一些已产生了抗药性。特别是单独的丙硫咪唑对于越来越多的抗苯并咪唑线虫来说，已成为无效的控制剂。因而，一些苯并咪唑已经与有机磷酸酯化合物组合在一起用于相似的用途。例如，美国专利4,436,737提供了一种含有苯并咪唑和有机磷酸酯，即profenofos的驱虫药组合物。profenofos的分子式为C11H15ClBrO3PS。组合的产物(丙硫咪唑和profenofos)用来杀灭有苯并咪唑抗性的蠕虫，例如捻转血矛线虫和蛇形毛园线虫。
南非专利6602811提供了一种含有有机磷酸酯和氧苯哒唑或噻苯咪唑的驱虫药组合物。
日本专利59033204公开了一种含有有机磷酸酯和噻苯咪唑的杀真菌剂。
欧洲专利181525公开了由四咪唑与一些有机磷酸酯包括毒死蜱组合成的驱虫药。
美国专利3,992,533提到以硫代磷酸苯酯做为杀灭植物致病害虫的广谱杀虫剂。
英国专利申请2,094,625提到一种驱虫药组合物，它含有烷基S取代的苯并咪唑基氨基甲酸酯和O-乙基-O-(4-溴代-2-氯苯基)-3-丙基硫代磷酸酯。
美国专利3,244,586提到了有机磷酸酯毒死蜱，分子式为C9H11Cl3NO3PS的化合物。
美国专利4,531,005提到了可用做植物杀虫剂的一些有机磷酸酯化合物，包括pyraclofos。
美国专利4,531,005提到了4-吡唑基磷酸酯，它可用做生产4-吡唑基硫代磷酸酯的中间体。后者以农用杀虫剂和杀螨剂闻名。
本领域还仍然需要有效的驱寄生虫药组合物，用于治疗或防止寄生虫感染，特别是用于杀灭对现有技术中的组合物具有天然抗药性或逐渐产生抗药性的那些寄生虫。
一方面，本发明提供了一种驱寄生虫组合物，用于防止、治疗控制和/或从动和身上除去体内或体外寄生虫，可以给动物施予有效剂量的该组合物，而不会引起动物有害的毒性效应。在一种实施方案中，本发明的组合物包括活性组分pyraclofos。在另一实施方案中，组合物包括pyraclofos与一种苯并咪唑组合而成的活性组分。还有一实施方案中，组合物中的苯并咪唑是丙硫咪唑。
另一方面，本发明提供了能使本发明的驱寄生虫药组合物体内给药，从而治疗内寄生虫感染的配方。
本发明的其它方面包括有本发明的驱寄生虫药配方的适宜的剂量单位。
本发明的再一方面是防止、治疗或控制由蠕虫引起的动物内寄生虫感染的方法，所述的蠕虫例如扁虫和蛔虫。该方法包括给动物服用如上所述的驱寄生虫药组合物或配方。
本发明进一步提供了一种防止、治疗或控制由昆虫和蜘蛛引起的动物体外寄生虫感染的方法。该方法包括给动物口服驱外寄生虫药组合物，该组合物包括pyraclofos或负载于适当载体上的有关化合物。
本发明的其它方面和优点在以下的对优选实施例的详细说明部分将进一步进行叙述。
本发明提供一种驱寄生虫药、特别是驱蠕虫剂组合物和使用该组合物来防止、治疗、控制和/或除去动物的各种寄生虫感染的方法，所述的寄生虫感染包括由体内寄生虫如蠕虫和体外寄生虫如节肢动物引起的二种。本组合物的效用包括可治疗由对其它驱寄生虫药组合物有抗药性的寄生虫引起的寄生虫感染，特别是对普遍使用蠕虫剂化合物、丙硫咪唑有抗药性的寄生虫引起的寄生虫感染。
发明人发现，有机磷酸酯化合物，即pyraclofos，也即一种公知的植物杀虫剂可以用作组合物的活性组份，有效地除去或控制动物的体内寄生虫。同时还意外地发现，pyraclofos可以通过体内给药，但最好是口服给药来控制动物的外寄生虫。pyraclofos可以单独或与公知的驱寄生虫药化合物组合在一起制成对动物安全的体内给药药剂，所述公知的驱寄生虫药化合物例如为苯并咪唑或苯并咪唑氨基甲酸酯，如丙硫咪唑。
pyraclofos的化学名称为O-[1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-4-基]-O-乙基-S-丙基硫代磷酸酯。该化合物的结构式为
该化合物和它的制备方法在美国专利4,531,005特别是其实施例18中进行了详细的叙述。这一专利在此引入做为参考，目的是提供有关该化合物的情报。商标名“Boltage”[Takeda Industries，日本]可得到pyraclofos。
pyraclofos可以单独做驱寄生虫药组合物的活性组份。发明人发现更理想的是，与一种选择出的苯并咪唑结合在一起形成的驱蠕虫剂组合物，其表现出较高的功效并且对动物没有毒性。
包括有pyraclofos和苯并咪唑的这一组合物来说对于一般的苯并咪唑、或具体来说为丙硫咪唑的药物具有显著抗药性的寄生虫特别有效，即线虫、捻转血矛线虫、胃线虫属circumcincta和蛇形园毛线虫。
虽然本文实施例的组合物和配方中具体公开的是pyraclofos，但上述组合物中的pyraclofos可以被一些在后面提到的称作与“pyraclofos相关的化合物”的化合物来替代。与pyraclofos相关的化合物包括具有下述通式的吡唑基磷酸酯
其中R1为低级烷基；R2为低级烷氧基或低级烷基硫代基；R3为氢原子或低级烷氧基羰基；X为氧原子或硫原子；Y为低级烷基，低级烷氧基，低级烷基硫代基，卤素原子，硝基或三氟甲基；n为整数0，1，2或3。
就通式(II)而言，R1为低级烷基是指具有1至4个碳原子的直链或支链烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基等等。R2为低级烷氧基是指具有1至4个碳原子的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基等等。R2为低级烷基硫代基是指含有1至4个碳原子的烷基硫代基，例如甲硫基、乙硫基、正丙硫基、异丙硫基、正丁硫基、异丁硫基、仲丁硫基等等。R3为低级烷氧基羰基是指具有2至5个碳原子的烷氧基羰基，例如甲氧基羰基、乙氧基羰基等等。在由Y所表示的基团中，低级烷基、低级烷氧基和低级烷基硫代基是指与相应的R1和R2限定范围相同的基团，但叔丁基也可用做低级烷基。Y还表示卤素原子，它包括氟、氯、溴和碘、符号n表示由Y所代表的取代基的数目，当存在两个或更多这样的取代基时，它们可以相同或不同。进一步说，当取代基Y是低级烷氧基并且n等于2时，两个烷氧基可以合在一起，表示一个亚烷基二氧基，例如亚甲二氧基、亚丙二氧基等等，这也属于本发明的范围之内。
在可用于本发明来取代pyraclofos的与pyraclofos相关的化合物中，在下面表1中列出的具有式II的取代基的化合物尤为重要。进一步说，式(II)中R1为乙基和R2为正丙硫基的化合物是特别理想的。
表1R1R2R3XYn n化合物编号 物理常数281 CH3OCH3HS - 0 nD1.5696262 C2H5OC2H5H S - 0 nD1.5520283 C2H5OC3H7(n) H S - 0 nD1.5425284 C2H5SC3H7(n) H O - 0 nD1.5407305 C2H5SC3H7(n) H S - 0 nD1.5783266 C2H5OC3H7(n) -COOC2H5S - 0nD1.5432207 C2H5SC3H7(n) -COOC2H5O - 0nD1.5434208 C2H5SC3H2(n) -COOC2H5S - 0nD1.5683209 C2H5SC3H7(n) H O 4-Br 1nD1.5755
2710 C2H5SC3H7(n) H S4-Br1 nD1.60252411 C2H5OC2H5H S2-Cl1 nD1.55162412 C2H5SC3H7(n) H O2-Cl1 nD1.54932013 C2H5SC3H7(n) H O3-Cl1 nD1.56552414 C2H5SC3H7(n) H S3-Cl1 nD1.59222415 C2H5OC2H5H S4-Cl1 nD1.56352416 C2H5SC3H7(n) H O4-Cl1 nD1.56042017 C2H5SC3H7(n) H S4-Cl1 nD1.59332018 C2H5SC3H7(n) H O4-F 1 nD1.53682819 C2H5SC3H7(n) H S4-F 1 nD1.56952020 C2H5SC3H7(n) H O4-I 1 nD1.6000
2421C2H5OC2H5H S2-CH31nD1.55172522C2H5SC3H7(n)H O2-CH31nD1.55252523C2H5SC3H7(n)H O4-CH31nD1.54092024C2H5SC3H7(n)H O4-(n)C3H71nD1.54462825C2H5SC3H7(n)H S4-CH3O1nD1.57572026C2H5SC3H7(n)H O4-CH3S1nD1.58832027C2H5SC3H7(n)H O3-CF31nD1.51692028C2H5SC3H7(n)H S3-CF31nD1.54452729C2H5SC3H7(n)H O2，4-Cl22nD1.55862030C2H5SC3H7(n)H S2，4-Cl22nD1.58932731C2H5SC3H7(n)H O3，4-Cl22nD1.5737
2032 C2H5SC3H7(n)HS3，4-Cl22，nD1.59822633 C2H5SC3H7(n)HO3，5-Cl22，nD1.56982734 C2H5OC2H5(n)HS2，4-(CH3)22 nD1.53612735 C2H5SC3H7(n)HO2，4-(CH3)22 nD1.53552836 C2H5SC3H7(n)HO2，6-(CH3)22 nD1.52642837 C2H5SC3H7(n)HO2-F，4-Cl 2 nD1.54812838 C2H5SC3H7(n)HO2-CH3，4-Cl 2 nD1.5474
现在与pyraclofos或与其相关的化合物组合成组合物最优选的苯并咪唑是丙硫咪唑[甲基5-(正丙硫基)-1H-苯并咪唑-2-基氨基甲酸酯]，如在本文的实施例中的组合物和配方中具体公开的那样。然而，可以用其它公知的并且商业上可获得的苯并咪唑或在动物体内能代谢转化成适当的苯并咪唑的药物前体来取代这些组合物中的丙硫咪唑。这些其它的苯并咪唑包括以下这些苯硫哒唑[甲基5-(苯硫基)-1H-苯并咪唑-2-基氨基甲酸酯]氧苯哒唑[甲基5-(正丙氧基)-1H-苯并咪唑-2-基氨基甲酸酯]磺唑氨酯[甲基5-(苯亚磺酰)-1H-苯并咪唑-2-基氨基甲酸酯]丁苯咪酯[甲基5-(丁基)-1H-苯并咪唑-2-基氨基甲酸酯]噻苯咪唑酯[异丙基2-(4-噻唑基)-5-苯并咪唑氨基甲酸酯]甲苯咪唑[甲基5-苯甲酰-2-苯并咪唑氨基甲酸酯]和氟苯哒唑[甲基5-(4-氟苯甲酰)-1H-苯并咪唑-2-基氨基甲酸酯]。Ricobendazole和Luxabendazole也是公知的苯并咪唑。本领域的技术人员借助于公知技术，例如上面所描述的本领域中的那些技术可以制备出上述这些苯并咪唑。
可通过体内代谢转化成所选择的苯并咪唑的药物前体也可以用来代替本发明的组合物中的丙硫咪唑。在公知的药物前体中有托布津[1，2-亚苯基双(亚氨基碳硫代基)双氨基甲酸二乙酯]。例如，见美国专利3,745,187和3,769,308。另外一种可使用的药物前体是苯硫醚胍。即[2-[(甲氧乙酰)氨基]-4-(苯硫基)-苯基]碳亚氨基]双氨基甲酸二甲酯。还可以使用的是尼土比明(Netobimin)酯。本领域技术人员可以通过公知的和常规的方法制备出这些公知的化合物。
含有pyraclofos的本发明的驱寄生虫药组合物能有效地显著减少体内和体外寄生虫的数目和/或将它们全部消除。这些组合物还可以有效地在局部施用以防止动物感染体内和体外寄生虫。再者，本发明的组合物的特性是，当以有效剂量给动物口服并使之吸收组合物时，对动物基本上没有毒性。
虽然本发明的组合物特别适用于治疗、防止或控制特别是由抗苯并咪唑蠕虫引起蠕虫病，但这些组合物也还可以用于治疗由其它寄生虫引起的疾病。例如，含有仅由pyraclofos和/或一种或多种其它与pyraclofos相关化合物做活性组份的本发明的组合物可以用于治疗和抑止狗感染上恶丝虫属，啮齿动物感染Nematospiroides、Sypbasia和Aspiculuris，动物和家禽感染体外节肢动物寄生虫例如蜱、螨、虱和蚤，羊感染绿蝇属和螫剌昆虫，牛感染移栖双翅目若虫例如皮下蝇属，马感染胃蝇属以及啮齿动物感染黄蝇属。
在本发明的化合物中，pyraclofos和更广泛的化合物(II)类，特别是其中R1为乙基和R2为正丙硫基的，表现出有惊人的控制和抑制以宠物为食的害虫的效果，例如蚊、蚤和虱，以及惊人的控制和抑制在驯养的家畜身上寄生的害虫的效果，例如蜱，并且它们可以安全地以口服形式给温血动物服用。
按照对本发明组合物所指明的特定用途，本发明的驱寄生虫药组合物可以按兽医领域中专业人员公知的程序给动物施药。例如，在治疗动物的外寄生虫和内寄生虫时，如通过动物皮肤表层吸食的蜱和在体内寄生的蠕虫，可以给这些动物内用本发明的组合物。
体内给药优选的是通过口服途径，而其它体内给药的方式，没有什么限制，包括直接给药到瘤胃中、腹膜内、肌肉内、气管内，静脉内或者出可以采用以下给药。
通过将pyraclofos或与其相关的化合物，优选的是与丙硫咪唑组合在一起，均匀地分散在惰性介质或稀释剂中，就可以制备出本发明的组合物。“惰性介质”一词是指不与pyraclofos或丙硫咪唑发生反应并可安全地给动物用药的任何药用介质。
这些组合物可以配制成各种口服剂型，例如胶囊、丸剂、片剂、颗粒剂、溶液、口服膏和其它标准的可口服的形式。对于口服给药来说，也可以将本发明的组合物均匀地混合在动物的配给料中，溶于或悬浮在饮用水中或者混入上述的一种剂型中。在某些情况下，可以单独给动物饲喂口服剂型成品。定量给药的介质优选的是配给料的一个组份或是可以做为配给料的一个组份的物质。适用于这些组合物的介质或稀释剂尤其包括麦芽澄清液(malt clearing)、玉米粉、酒糟、粉碎的牡蛎壳、麦麸、可溶性糖蜜、玉米穗轴粉、大豆粉和粉碎的石灰石。通过例如研磨、搅拌、粉碎或旋转搅拌来将活性化合物细密地分散在这些介质的各处。
为了能通过口服和其它内部传递途径来体内给药，可以将pyraclofos和/或丙硫咪唑溶于或分散在液体介质中来制备这些组合物。理想的液体介质有植物油，如花生油、棉籽油、玉米油、水和生理盐水溶液。目前用于含有pyraclofos和丙硫咪唑组合配方的最理想的介质是玉米油。
上面提到的剂型制品可以按照常规的制药程序来制造，即向活性组份中添加稀释剂、崩解剂、防沫剂、润滑剂、分散剂、表面活性剂、粘合剂和乳化剂。这些选择性组份可以选自淀粉、乳糖、滑石、硬脂酸镁、胶体二氧化硅、微晶纤维素、磷酸二钙、膨润土、硫酸钙半水合物、羟基丙基甲基纤维素、玉米淀粉、淀粉羟基乙酸钠、十二烷基硫酸钠、聚山梨酸酯85(Polysorbate 85-商品名)(Sanyo Chemical)、苯磺酸酯CALX(ICI)、Synperonic NP13(ICI)、Synperonic PEL44(ICI)、苯甲醇、丙二醇、植物树脂(木树脂)等等。可以采用的乳化剂、例如Solketal、丙三醇缩甲醛、苯甲醇、羧甲基纤维素、Sorpol1200(Toho Chemical)、聚山梨酸酯80(Sanyo Chemical)、鲸蜡醇和Brij58(ICI)。后两种乳化剂对于组合成的组合物是理想的。再有，还可以添加任选的硬化剂，例如，Cabosil(Cabot)。
现在Pyraclofos和丙硫咪唑组合的最理想配方是采用玉米或其它植物油做液体介质，并含有最佳浓度为1％Brij 58，1％鲸蜡醇和1％胶体二氧化硅。这一配方优选的是瘤胃内给药，但也可采用口服。这一配方，当丙硫咪唑和Pyraclofos在其中均质后，很快地悬浮，在约5℃的低温时仍保持流动性。这一配方的任选组份包括香味料和染料。
Pyraclofos单独或Pyraclofos和丙硫咪唑组合在一起做活性组份时该活性组份的剂量在组合物的总重中可以在很宽的范围内变化。活性组份的百分比含量还可以按照宿主动物的种类、要治疗的寄生虫的类型、感染或侵染的严重程序以及宿主的体重来改变。当然，产生最佳效果所用的组合物的量取决于特定的活性化合物、要治疗的宿主动物的种类、以及寄生虫感染或流体的类型和程度。再有，活性组份的释放速率可以通过各种技术例如微胶囊包裹自由地调节。
从Pyraclofos和丙硫咪唑组合的现场试验来看，体内给药的有效剂量范围包括Pyraclofos从约5至约50mg/kg动物体重和丙硫咪唑从约1.0至约10.0mg/kg动物体重。优选的是，对羊给药时，组合物中pyraclofos存在的量为约30mg/kg，丙硫咪唑的量为3.8mg/kg。对牛来说，丙硫咪唑的剂量可以增加到10mg/kg。必要时可随着其它组份的影响对这些剂量进行调整。
口服制品一般含有约1至80％(重量)的活性化合物((Pyraclofos)单独或与丙硫咪唑组合)，优选是约10至30％(重量)。但一般来说，活性化合物的适用口服剂量是每千克动物体重约0.1mg至2,000mg，优选的是约1mg至1200mg，并且最好是这一剂量一次给药。理想的剂量是含有约40mg/kg活性化合物。
对于以饲料预混合物给药来说，理想的是饲料可含有约1至80％(重量)的活动化合物，优选的是10至30％(重量)，活性化合物即单蚀的Pyraclofos或Pyraclofos与丙硫咪唑组合物。用于直接饲喂动物的饲料添加剂可含有约1至50％(重量)的活性化合物，优选的是5至25％(重量)。这样的饲料添加剂可添加到动物的配给料中，其量值为足以保证活性化合物的浓度能有效地治疗或控制寄生虫感染。活性化合物优选的浓度取决于上述因素以及化合物的种类，但是为了保证适当的驱动寄生虫的药效，一般要求所用的化合物的浓度为约1.0至50.0％，优选的是约10至30％。
除口服以外，以其它途径给药的制品，一般含有约1至80％(重量)的活动化合物，优选的是约10至50％(重量)。对于肠胃外给药来说，一般可用的剂量为约0.1mg至300mg/每剂每动物千克体重，优选的是约1mg至30mg/每剂每动物千克体重。
优选的方式是，用本发明的组合物以重复的剂量对动物进行治疗，以抑制原发感染的再感染或复发。具体地说，用本发明的组合物在相对短的期间内重复给药，例如对宠物来说在1至5天的期间内给药。
下面的实施例对本发明的各个方面进行了说明，但并非意味着限制本发明的范围。
实施例1本发明组合物的制备下面所用的“活性组份”一词除非特别指明外是指Pyraclofos。
A.丙硫咪唑下面实施例中使用的苯并咪唑丙硫咪唑是商业上可获得的，在水悬浮液中每升含有19克该化合物的Valbazen[Smithkline BeechamAnimal Health，Lincoln，NE]。
B.Pyraclofos按下述方法可以制备出Pyraclofos的数种溶液将Pyraclofos(20.0％w/w)、磷酸苯酯CALX(4.0％w/w)、Synperonic NP13(6.0％w/w)和Solven 100(70.0％w/w)混合并搅拌得到溶液，然后用水将其稀释得到浓度为250ppm的乳浊液。
通过将活性组份(30.0％w/w)溶于玉米油(70.0％w/w)中可制备出另一种溶液，得到的均匀溶液可用于口服给药。
颗粒制剂的制备是通过下述步骤实现的将活性组份(10.0％w/w)和木树脂(4.0％w/w)或Synperonic NP13(4.0％w/w)溶于二氯甲烷中，并将该溶液添加到混合器中的颗粒状石膏中(20-60目；86.0％w/w)，在充分的混合后，将溶剂除去，接着干燥得到颗粒。
通过湿法成粒法制备出另一种颗粒制剂。将活性组份(25.0％w/w)与硫酸钙半水合物(75.0％w/w)混合，然后用一盘子将该混合物干燥或用流化床干燥器干燥并装入到适宜的容器中。
通过下述步骤可制备出片剂将适当量的10％淀粉糊[硬脂酸镁(1.0％w/w)、玉米淀粉(5.0％w/w)、淀粉羟基乙酸钠(2.0％w/w)、十二烷基硫酸钠(1.0％w/w)和微晶纤维素(41.0％w/w)添加到活性组份(50.0％w/w)]中，制备出用于造粒的湿的料块，将该料块造粒并用盘子或流化床干燥器进行干燥，将干燥的颗粒过筛，加入剩余的组份，将该混合物模压制得片剂。
如果需要，可以以该片剂为芯再涂上一层成膜物质，例如在水溶液或非水溶剂体系中的羟基丙基甲基纤维素。还可以在成膜物质溶液中加入成型剂以及适宜的颜料。
口服液制剂通过将活性组份(5.0％w/w)溶于聚山梨酸酯85(5.0％w/w)、苯甲醇(3.0％w/w)和丙二醇(30.0％w/w)来进行制备，用磷酸盐缓冲剂将该溶液的pH值调整到6.0～6.5，并用水(57.0％w/w)稀释到特定的最终体积。将该液体充入到饮用水容器中来使用。
口服膏制剂按如下步骤进行制备，在50～60℃将二硬脂酸铝分散在椰子油(85.5％w/w)与聚山梨酸酯85(3.0％w/w)的混合物中，在不断搅拌的条件下将分散液冷却至室温，接着将糖精钠(2.5％w/w)和活性组份(4.0％w/w)分散在其中得到口服膏。
数种注射制剂按如下进行制备一种注射制剂的制备步骤是，将20.0％w/w活性组份溶于36.0％w/w乙醇和10％w/w表面活性剂(Synperonic PEL44)的混合物中，将该溶液用34.0％w/w丙二醇稀释至特定的最终体积，按确定的制药程序对该溶液进行消毒，例如通过细菌过滤器过滤或高压加热处理，并在无菌条件下将溶液装入到单位剂量的容器中。
另一种注射制剂的制备步骤是将10％w/w活性组份溶于10％w/w聚山梨酸酯80和50％w/w丙三醇缩甲醛的混合物中，接着添加1.0％w/w苯甲醇，用注射用29％w/w的水将该溶液稀释至特定的最终体积，按确定的制药程序对这一溶液进行充分的消毒，并在无菌条件下将其装入到单位剂量的容器中。
另一种注射用制剂的制备步骤是，将10.0％w/w活性组份、0.5％w/w羧甲基纤维素(CMC)和89.5％w/w生理盐水混合制成均匀的悬浮液，所得注射液适于腹膜内或静脉内给药。
再一种注射制剂的制备步骤是，将10.0％w/w活性组份、20.0％w/w Sorpol1200和70.0％w/w生理盐水混合制成均匀的悬浮液，得到的注射液适于腹膜内或静脉内给药。
C.Pyraclofos加丙硫咪唑通过将植物油均质处理制备出三种实验的组合产物，某一含有1％Brij58、1％鲸蜡醇和1％胶体二氧化硅、10mg/kg Pyraclofos和3.8mg/kg丙硫咪唑。其它两种配方与之相似，不同的是它们分别相应含有20mg/kg Pyraclofos和3.8mg/kg丙硫咪唑以及30mg/kg Pyraclofos和3.8mg/kg丙硫咪唑。
实施例2-组合现场实验进行以下的实验，来评价添加和不添加丙硫咪唑的分级剂量的Pyraclofos，对于治疗受抗苯并咪唑属种捻转血予线虫、胃线虫属Circumcincta和蛇形毛圆线虫的成虫感染的羊的驱蠕虫效力。
单独的丙硫咪唑和其组合产物如上面的实施例1所述。所用的Pyraclofos以100g/L比例存在于植物油中。
抗苯并咪唑(BZ-R)属种捻转血予线虫(H/C)、胃线虫属Circumcincta(O/C)和蛇形毛圆线虫(T/C)在现场从动物身上得到的。从感染10天内的培育物中得到感染幼虫。
在试验开始前至少两周，给56只9月龄断乳的两种性别的美利奴羊口服ivermectin(0.2mg/kg)进行治疗，使其没有蠕虫、并饲养在地上网状结构地板的畜舍中。所有的羊都用编号的塑料耳签来识别，并用含有维生素-矿物质添加剂的苜蓿颗粒食物随意喂养。如表2所排列共八个治疗组(每组七只羊)，试验安排如下在第1天、2天和3天对所有的羊进行感染，在这连续3天的每天，所有的羊都接种下述剂量的感染性幼虫H/C 3000O/C 2000T/C 3000感染性幼虫每一种都存在于近100ml的水中，通过食管内施予，在第23天对所有羊的粪蛋计数。根据每种性别内体重的排列顺序，在第24天将羊随意分成8组，每组七只羊。
在第25天进行给药治疗。确定各个剂量体积，并将每剂都准备好，放入标贴有预定的受药体的耳签数码的校准注射器内，所有的治疗均直接经皮瘤胃(intraruminal)穿剌给药。
在治疗七天后，对每只羊的粪蛋进行计数并进行分组大批培养幼虫。在第36天将羊宰杀以得到蠕虫总数(TWC)，分割出皱胃和小肠，并通过标准技术测定TWC。
治疗结果列于下面的表2。在表中，W代表阉公羊，E代表母羊，1表示美利努短毛羊，2表示杂种长毛羊，H/C表示捻转血予线虫，O/C表示胃线虫属Circumcincta，T/C表示蛇形圆毛线虫。
实施例3-仅用Pyraclofos杀体内寄生虫的生物学现场试验给感染有犬丝虫的狗口服含有PyraclofosO-[1-(4-氯苯基)吡唑-4-基]O-乙基-S-正丙硫基磷酸酯的组合物胶囊制剂评价它的杀内寄生虫效果。
在口服该组合物的前两天，对末稍血液中的微丝蚴计数。从侧静脉血管中抽1ml血，用亚甲基兰沉淀法(1500rpm，10分钟)收集寄生虫，并在显微镜下进行检测。
对狗禁食一夜，在接着的三天内，通过胃管饲法给狗口服10，100或1000mg组合物/kg体重/天。在从口服治疗的最后一天算起的第1，3，5和8天按上面所述采血样和进行检测。还用显微镜检测粪便中的体内寄生虫。
在10,100和1000mg/kg的任一组中，从经过治疗的动物的侧静脉血管中抽取的血样来看对微丝蚴都呈阴性。在10mg/kg组中，发现有一例在粪便中排出了蛔虫(犬弓蛔虫)。
这样，在下面的表3中所示的结果表明，对于减少受犬丝虫感染的狗的血液中微丝蚴的数目，而且对于控制狗的蛔虫来说，单独的Pyraclofos是有效的。在下表中，状态*表示狗的毛色和脾气，微丝蚴**是在给药前(0天)和给药最后一天后的第1，3，5和8天测定的。+号表示检测到有微丝蚴；(+)表示有稀少的微丝蚴。-号表示没检测到微丝蚴。这些结果提供了有关狗的总体情况和其它观察方面的报告。
表2组 治 疗羊序号 性别/ 体重 蠕虫总数种类 FECFEC第2天 第1天 第8天 第14天5 (kg)(EPG) (EPG) H/C O/C T/C未治疗1385W124.50 15,400 24,200 3,960.00 40.00 8,440.00477W227.50 25,800 56,400 9,640.000.00 6,440.00482W122.50 23,000 39,000 4,880.00 40.00 7,480.00483W120.50 54,800 50,800 6,720.00 320.00 12,840.0010 484E123.50 31,400 37,000 6,040.00 80.00 8,960.00956E216.00 32,200 50,600 1,640.00 40.00 11,240.00959E221.00 54,800 43,400 2,720.00 240.00 7,720.00平均值 22.21 33,914 44,200 5,085.71 108.57 9,017.14标准偏差3.3414,190 11,228 2,481.42 112.56 2,090.07152 丙硫咪唑 897E119.00 22,800520 200.00 80.00 1,480.003.8mg/kg 899W122.00 27,600440 80.000.00 280.00486W121.50 20,400 1,080 320.00 40.00 1,960.00913E219.50 43,200280 120.00 40.00 1,200.00925E225.007,200 1,440 320.00 40.00 1,120.0020 934W228.00 14,800120 40.00 120.00 2,280.00950E224.00 16,800640 80.00 100.000 920.00平均值 22.71 22,114646 165.71 68.57 1,320.00标准偏差 2.95 10,454429 107.82 51.11 616.613 pyraclofos 896E117.5054,00028,0001,840.00120.0010,200.0010mg/kg481E224.0035,40040 480.00 80.00 7,400.00899W226.5011,400 1,3600.00 40.00 6,640.00936W222.0014,000 7,8001,360.00 0.00 7,040.005 949E224.5021,000 9,400 600.00 40.00 6,560.00951E221.0027,200 3,600 200.00 0.00 6,680.00986W224.6043,60042,2002,960.00 40.00 8,800.00平均值 22.8629,51413,2001,062.86 45.71 7,617.14标准偏差 2.7514,53714,683 979.76 39.59 1,276.22104 Pyraclofos 394E126.0016,600 240 40.00 0.00 680.0020mg/kg 487E120.0037,800 3,200 40.00 80.00 2,600.00708E218.0026,800 2400.00 0.00 960.00774W226.0033,200 400 40.00 40.00 3,280.00904W222.0039,800 2,000 480.00160.00 2,840.0015 957E223.0026,000 680 80.00 80.00 1,860.00984W220.5022,400 4400.00 40.00 680.00平均值 22.2120,000 1,029 97.14 57.14 1,800.00标准偏差 2.80 8,004 1,053 158.36 51.75 1,013.065 Pyraclofos 388W121.5034,200800.00 0.00 0.0020 30mg/kg 392E117.5014,000400.00 0.0080.00398E122.0014,800 1200.00 0.00 280.00400E124.5020,800 360 40.00 40.00 1,760.00900W226.0016,800 1200.00 0.00 320.00905W224.5026,200 2000.00 0.00 1,520.0025 941E223.0034,400400.00 80.0080.00平均值 22.7123,029 1370.71 17.14 577.14标准偏差 2.58 5,081 104 14.00 29.14 683.476 Pyraclofos386W122.00 22,6002400.00 0.00 280.0010mg/kg 367W120.509,400 800.00 80.00 800.00+ 390E121.50 12,0002000.00 120.00 320.00丙硫咪唑 391E119.50 20,600 800.00 0.00 280.005 3.8mg/kg 921E223.00 25,2001200.00 80.00 240.00944W226.00 25,800 0 40.00 0.00 680.00947W230.50 16, 800 00.00 0.00 280.00平均值23.29 18,9141035.71 40.00 411.43标准偏差 3.516,930 85 14.00 47.81 211.35107 Pyraclofos 389E124.00 20,200 00.00 0.00 400.0020mg/kg 396E122.00 28,400 00.00 0.00 200.00+ 485W219.00 45,200 400.00 0.00 0.00丙硫咪唑le709W225.50 22,400 00.00 0.00 0.003.8mg/kg 917E216.50 27,400 800.00 80.00 320.0015 940W224.50 23,800 00.00 0.00 200.00956W230.00 15,8001600.00 0.00 440.00平均值 23.07 26,171 400.00 11.43 222.86标准偏差4.108,715 570.00 27.99 164.038 Pyraclofos393E122.50 13,400 00.00 0.0080.0020 30mg/kg 487W220.00 37,800 00.00 0.0040.00+ 926E216.50 21,400 00.00 0.0040.00丙硫咪唑le931E223.50 22,800 00.00 0.00 0.003.8mg/kg 932W226.00 43,800 00.00 0.00 0.0025 981W224.50 14,400 400.00 0.0080.00983W225.50 16,200 00.00 0.00 160.00平均值 22.64 24,257 60.00 0.0057.14标准偏差3.12 11,056 140.00 0.0051.75
表3组剂量 动物状态*重量药剂体积微丝蚴**结 果# (mg/kg) #/性别 (kg) (μl) 0 1 3 5 81 10 A1/F 黄褐色 756+ - - - - 状态好凶猛A2/M 黄褐/白 13 104+ - - - - 粪便中有蛔虫(第2天)；状态好2 100 B1/M 黑色14.5 1200+ + +(+)- 状态好温驯B2/F 黑色 6 480+ + - - - 状态好腿黄褐猛烈B3/F 小猎犬 181440 + + -(+)- 状态好温驯3 1000 C1/M 亮黄褐色 129600 + - - - - 流涎猛烈 状态好C2/F 小猎犬 118800 + + + - - 流涎温驯 状态好实施例4-仅经体内给Pyraclofos药的驱体外寄生虫的生物学现场试验A.采用感染有蚤的狗(10.0～14.0kg，杂种狗)和猫(3.0～4.0kg，杂种猫)，将由Pyraclofos、CMC和生理盐水按照实施例1制备而成的注射液，通过腹膜内注射或静脉注射给予预定量的注射液。
为了评价效果，在施药后六小时内，在动物的毛皮内和铺在动物身下的白被单上有80％或80％以上的蚤死亡则确认为正反应(+，有效)，否则就认为没有反应(-，无效)。结果示于表4。
表4活性组份mg/动物给药途径动物种类 性别 数量 反应30 腹膜内注射 狗 公 1 +300腹膜内注射 猫 公 2 +对照 腹膜内注射 狗 母 1 -对照 腹膜内注射 猫 母 1 -B.除用Sorpol1200代替CMC外按实施例1制备出注射液，按照与上面A部分所述相同的方式对该注射液进行试验。结果示于表5。在治疗前寄生虫数目在30至40之间。
表5活性组份mg/动物给药途径动物种类 性别 数量 反应300腹膜内注射狗 公2 +1000 腹膜内注射狗 公1 +3 静脉注射 狗 公1 +30 静脉注射 狗 母2 +300静脉注射 狗 母1 +30 静脉注射 猫 公1 +对照 静脉注射 猫 公1 -
C.采用感染有蚤的狗(10.0～14.0kg，杂种狗)和猫(3.0～4.0kg，杂种猫)，将由Pyraclofos和玉米油按照实施例1制备而成的溶液，以予定的量通过导液管口服给药。
按与实施例5中所述相同的方法进行评价。在治疗前寄生虫的数量为每个动物30至40个。结果示于表6。
表6活性组份mg/动物动物种类 性别 数量 反应5 狗 公 2 +50狗 母 2 +500 狗 公 1 +2000 狗 母 1 +50猫 公 2 +500 猫 母 2 +对照 狗 公 1 -对照 猫 母 1 -实施例5Pyraclofos的毒性研究将对5周龄ddY-SLC属种的老鼠(公)的急性毒性值(LD50)列于下面的表7。
表7化合物序号 LD50(mg/kg) 化合物序号 LD50(mg/kg)1 ＞300 23 50～3002 ＞300 24 ＞3003 ＞300 25 ＞3004 ＞300 26 ＞3005 ＞300 27 50～3006 ＞300 28 ＞3007 ＞300 29 3008 ＞300 30 ＞3009 ＞300 31 ＞30010 ＞300 32 ＞30011 ＞300 33 ＞30012 300 34 ＞30013 ＞300 35 30014 ＞300 36 ＞30015 ＞300 37 ＞30016 ＞300 38 ＞30017 ＞300 3918 ＞300 4019 ＞300 41 50～30020 ＞300 42 ＞30021 ＞300 43 ＞30022 300
上面确定的说明书包括对本发明可以进行多种改型和变化，这些改型和变化对本领域的技术人员来说是显而易见的。例如，采用其它适宜的载体、稀释剂和配方中所用的任选试剂以及明显的给药方式和给药间隔都可能是本发明的组成部分。对本发明的组合物和方法所做出的这些改型和变化都应认为包括在权利要求书的范围之内。
权利要求
1.一种制备内用的抗内寄生虫药物组合物的方法，包括将苯并咪唑氨基甲酸酯或其药物前体和下式所示的与匹拉克罗福相关的化合物以1-80％重量混合、溶解或分散在载体或稀释剂中，
式中R1是低级烷基，R2是低级烷氧基或低级烷硫基，R3是氢原子或低级烷氧羰基，X是氧原子或硫原子，Y是低级烷基，低级烷氧基，低级烷硫基，卤原子，硝基或三氟甲基，n是整数0，1，2，或3，并且其中苯并咪唑氨基甲酸酯或其药物前体与匹拉克罗福的重量比为1∶50至2∶1。
2.权利要求1所述的方法，其中所述的与匹拉克罗福相关的化合物是匹拉克罗福。
3.权利要求1所述的方法，其中所述的苯并咪唑氨基甲酸酯选自下述物质丙硫咪唑、苯硫哒唑、氧丙哒唑、磺唑氨酯、丁苯咪酯、噻苯咪唑酯、甲苯咪唑、氟苯哒唑、里高噻苯达唑和鲁撒噻苯达唑。
4.权利要求1所述的方法，其中所述的药物前体选自托布津、苯硫醚胍和尼土比明。
5.权利要求1所述的方法，其中所述的苯并咪唑氨基甲酸酯是丙硫咪唑。
全文摘要
本发明提供了用于动物的驱寄生虫药组合物,它含有作为活性组分的单独的pyraclofos(或与pyraclofos有关的化合物)或pyraclofos与苯并咪唑组合。该组合物能有效地预防、治疗、控制和/或除去内部和外部寄生虫,特别是,它能在对动物非致毒的剂量范围内有效地杀灭抗苯并咪唑蠕虫。本文还包括有关这类用途的方法。
文档编号A61K31/66GK1173331SQ9710543
公开日1998年2月18日 申请日期1997年5月26日 优先权日1989年12月19日
发明者罗杰·帕里什, 弗雷德里克·W·蔡平, 河野义明, 津久井诚 申请人:美国辉瑞有限公司, 武田药品工业株式会社