一种大孔树脂分离纯化橘皮黄酮的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种从植物中分离纯化有机化合物的方法，特别涉及一种用大孔树脂分离纯化柚皮黄酮的方法。
【背景技术】
[0002]橘皮为芸香植物橘及其栽培变种的成熟果皮。橘皮中除含有芳香油、果胶、色素夕卜，还含有丰富的黄酮类物质。黄酮是一中可以广泛使用的具有生物活性的物质。它具有强抗氧化性，尤其是应用在医疗领域，对于抗肿瘤、抗病毒、防止心血管疾病具有显著的作用。目前国内对于橘皮的使用研究主要集中在与对于果胶、色素和芳香油等的提取和应用上，有关橘皮黄酮的使用研究研究和报道较少。
[0003]在橘皮黄酮的使用研究上，如果分离纯化黄酮是一个很重要的环节。目前的分离纯化方法的缺陷在于工艺比较复杂，纯化效果不佳等。因此，需要一种工艺简单、迅速且稳定性好，节约经济成本的分离纯化橘皮黄酮的方法。
【发明内容】
[0004]本发明为了解决上述的技术问题，提出一种工艺简单、迅速且稳定性好，节约经济成本的大孔树脂分离纯化橘皮黄酮的方法。
[0005]本发明的技术方案如下:
[0006]一种大孔树脂分离纯化橘皮黄酮的方法，步骤如下:
[0007]( I)将橘皮洗净晾干，粉碎成粉末；
[0008](2)将上述橘皮粉末加入到80%的乙醇在温度30_40°C下提取两次，抽滤得橘皮提取液；
[0009](3)将步骤(2)所得的橘皮提取液按照体积比大孔树脂柱:橘皮提取液=1:15-30匀速注入经过预处理的大孔树脂柱中，在橘皮提取液注入到大孔树脂柱时，将1%的FeCl3加入到上述混合溶液的流出液中，待流出液的出现棕褐色沉淀，停止橘皮提取液注入，得混合溶液；
[0010](4)将上述步骤(3)中的混合溶液先用水洗至无色，再加入浓硫酸至产生棕褐色沉淀，然后加入90%的乙醇洗脱液洗脱至无色，再将混合溶液浓缩，并进行结晶处理，得黄酮晶体。
[0011]步骤(2)中的提取为两次提取。第一次提取时橘皮粉末和乙醇质量比为1:30，第二次提取时橘皮粉末和乙醇质量比为1:60。上述的提取为对分离提纯的预处理，两次提取可以帮助从橘皮粉末中提取出纯度更高的提取物。
[0012]步骤(2)中大孔树脂柱的预处理具体方法如下:将大孔树脂依次用3倍体积的5%Na0H溶液、I倍体积的蒸馏水、2倍体积的10%盐酸进行洗涤，然后用蒸馏水洗涤至中性，最后将大孔树脂用乙醇湿法进行装柱，得大孔树脂柱。
[0013]步骤(2)中大孔树脂柱的预处理中的乙醇湿法装柱的具体方法如下:将大孔树脂全部浸入93%的乙醇溶液中，向柱内灌装，等到流出的乙醇溶液无白色浑浊时停止灌装，然后用蒸馏水洗去乙醇溶液。
[0014]优选的，大孔树脂柱中的大孔树脂为AB-8型大孔树脂。大孔树脂具有不同的种类。不同种类的大孔树脂的分离纯化性能不同，本发明优选的AB-8型大孔树脂在分离纯化橘皮黄酮中可以明显提高分离纯化的效果。
[0015]优选的，步骤(I)中的经过粉碎的橘皮粉末为80-120目。橘皮粉末粒径的控制对于后续的分离纯化将会起到很好的预备和影响。本发明优选的橘皮粉末的粒径可以更好的进行后续的分离纯化。
[0016]本发明的技术方案的有益效果如下:
[0017]第一、本发明所述的技术方案大孔树脂分离纯化橘皮黄酮的方法中所使用的大孔树脂具有吸附容量大、吸附速度快、选择性好、再生简单等特点，使得本技术方案在分离纯化橘皮黄酮上效果明显。
[0018]第二、本发明所述的技术方案工艺简单，工艺迅速，工艺过程稳定性好，且可节约经济成本，且可分离纯化所得的提取物纯度高，本发明的技术方案可以在橘皮的应用中进行大规模地推广和使用。
【具体实施方式】
[0019]下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。
[0020]实施例
[0021]称取200g的橘皮洗净晾干，粉碎成粉末，橘皮粉末的粒径为100目。然后将橘皮粉末加入到80%的乙醇在温度30?C下进行两次提取。第一次提取时橘皮粉末和乙醇质量比为1:30，第二次提取时橘皮粉末和乙醇质量比为1:60，得浓度为50mg / ml的橘皮提取液，按照体积比大孔树脂柱:橘皮提取液=1:20匀速注入经过预处理的大孔树脂柱中。
[0022]大孔树脂柱的预处理具体方法如下:将大孔树脂依次用3倍体积的5%Na0H溶液、I倍体积的蒸馏水、2倍体积的10%盐酸进行洗涤，然后用蒸馏水洗涤至中性，最后将大孔树脂用乙醇湿法进行装柱，得大孔树脂柱。
[0023]大孔树脂柱的预处理中的乙醇湿法装柱方法如下:将大孔树脂全部浸入93%的乙醇溶液中，向柱内灌装，等到流出的乙醇溶液无白色浑浊时停止灌装，然后用蒸馏水洗去乙醇溶液。
[0024]在橘皮提取液注入到大孔树脂柱时，将1%的FeCl3加入到上述混合溶液的流出液中，待流出液的出现棕褐色沉淀，停止橘皮提取液注入，得混合溶液。混合溶液先用水洗至无色，再加入浓硫酸至产生棕褐色沉淀，然后加入90%的乙醇洗脱液洗脱至无色，再将混合溶液浓缩，并进行结晶处理，得黄酮晶体。
[0025]后经过检测分析可得，本实施例所提取的橘皮黄酮的纯度为90%以上。
【主权项】
1.一种大孔树脂分离纯化橘皮黄酮的方法，其特征在于:所述的方法的步骤如下: (1)将橘皮洗净晾干，粉碎成粉末； (2)将上述橘皮粉末加入到80%的乙醇在温度30-40°C下提取两次，抽滤得橘皮提取液； (3)将步骤(2)所得的橘皮提取液按照体积比大孔树脂柱:橘皮提取液=1:15-30匀速注入经过预处理的大孔树脂柱中，在橘皮提取液注入到大孔树脂柱时，将1%的FeCl3加入到上述混合溶液的流出液中，待流出液的出现棕褐色沉淀，停止橘皮提取液注入，得混合溶液； (4)将上述步骤(3)中的混合溶液先用水洗至无色，再加入浓硫酸至产生棕褐色沉淀，然后加入90%的乙醇洗脱液洗脱至无色，再将混合溶液浓缩，并进行结晶处理，得黄酮晶体。
2.根据权利要求1所述的大孔树脂分离纯化橘皮黄酮的方法，其特征在于:步骤(2)中的提取为两次提取，第一次提取时橘皮粉末和乙醇质量比为1:30，第二次提取时橘皮粉末和乙醇质量比为1:60。
3.根据权利要求1所述的大孔树脂分离纯化橘皮黄酮的方法，其特征在于:步骤(2)中大孔树脂柱的预处理具体方法如下:将大孔树脂依次用3倍体积的5%NaOH溶液、I倍体积的蒸馏水、2倍体积的10%盐酸进行洗涤，然后用蒸馏水洗涤至中性，最后将大孔树脂用乙醇湿法进行装柱，得大孔树脂柱。
4.根据权利要求3所述的大孔树脂分离纯化橘皮黄酮的方法，其特征在于:步骤(2)中大孔树脂柱的预处理中的乙醇湿法装柱的具体方法如下:将大孔树脂全部浸入93%的乙醇溶液中，向柱内灌装，等到流出的乙醇溶液无白色浑浊时停止灌装，然后用蒸馏水洗去乙醇溶液。
5.根据权利要求1所述的大孔树脂分离纯化橘皮黄酮的方法，其特征在于:所述的大孔树脂柱中的大孔树脂为AB-8型大孔树脂。
6.根据权利要求1所述的大孔树脂分离纯化橘皮黄酮的方法，其特征在于:所述的步骤(I)中的经过粉碎的橘皮粉末为80-120目。
【专利摘要】一种大孔树脂分离纯化橘皮黄酮的方法，包括将橘皮粉碎成末，抽滤提取，与大孔树脂混合分离纯化，然后清洗处理等步骤。本方法所使用的大孔树脂具有吸附容量大、吸附速度快、选择性好、再生简单等特点，使得本技术方案在分离纯化橘皮黄酮上效果明显。本发明所述的技术方案工艺简单，工艺迅速，工艺过程稳定性好，且可节约经济成本，且可分离纯化所得的提取物纯度高，本发明的技术方案可以在橘皮的应用中进行大规模地推广和使用。
【IPC分类】A61K36-752, A61K131-00
【公开号】CN104547163
【申请号】CN201310508799
【发明人】秦宏佳
【申请人】大连市沙河口区中小微企业服务中心
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2013年10月21日