专利名称：一种纯化银胶菊酮的方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，特别是涉及一种采用高速逆流色谱分离技术纯化银胶菊酮的方法。
背景技术：
银胶菊{Parthenium hysterophorus)为菊科银胶菊属植物，一年生草本，生于旷地、路旁、河边、荒地，从海岸附近到海拔1500m有分布，在西南地区垂直分布上限可达2400m。其原产于美国及墨西哥北部，是一种毒性植物。银胶菊酮是从银胶菊中分离出的一种倍半萜类化合物，具有抗真菌活性，在I. Omg/mL浓度时，8天后对黑曲霉生长抑制率为40%。银胶菊酮为黄色油状物，[α]25/D-0. 011。(c=0. 475，氯仿)。分子式=C14H18O3,分子量:234. 3，分子结构为
OCH30。
CHs CH3经检索，尚未见分离纯化银胶菊酮的相关报道。
发明内容
本发明的目的在于解决现有技术的不足和缺陷，提供一种纯化银胶菊酮的方法。为了实现上述目的，本发明的技术方案如下
取银胶菊粉碎，加80-90%乙醇超声提取60-100min，提取液减压回收试剂，依次用石油醚，二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，用3%碳酸钠溶液洗涤后，浓缩至小体积，再以正己烷-氯仿-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱分离，流分减压浓缩干燥即得银胶菊酮。本发明在超声提取时，选用超声波功率3_20kw，超声频率20-60KHZ。本发明在高速逆流色谱分离萃取物时，所述的正己烷-氯仿-甲醇-水溶剂系统比例为 3 :(10-18) (7-13) :8。本发明在高速逆流色谱分离萃取物时，是以溶剂系统上相为固定相，下相为流动相，设备转速控制在750-950rpm，流动相流速为l_3ml/min。本发明优势在于本发明采用超声提取，提取时间短，提取效率高；本发明采用高速逆流色谱分离，分离过程无产品损失，制备周期短，制备量大，易操作，克服了传统硅胶柱分离过程中样品死吸附、工艺繁琐、重现性差的技术缺陷。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例I :
取银胶菊1kg，粉碎，置于超声提取罐中，加10L90%乙醇超声提取60min，启动功率3kw，超声频率 20KHZ，提取液浓缩，加适量水分散，放入分液漏斗，依次用石油醚，二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，用5倍量3%碳酸钠溶液洗涤，再回收二氯甲烷得浓缩液。取正己烷-氯仿-甲醇-水按3 :18 13 8比例混合均匀，静置分层，取上相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为700rpm，同时把下相以每分钟6mL的流速泵入，当所有多余固定相溢出分离柱时，流动相流速调节为3ml/min，注入浓缩液，紫外检测器监测，收集流分，减压浓缩干燥即得银胶菊酮，含量98. 5%，收率83. 5%。实施例2:
取银胶菊1kg，粉碎，置于超声提取罐中，加12L80%乙醇超声提取lOOmin，启动功率20kw,超声频率20KHZ，提取液浓缩，加适量水分散，放入分液漏斗，依次用石油醚，二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，用3倍量3%碳酸钠溶液洗涤，再回收二氯甲烷得浓缩液。取正己烷-氯仿-甲醇-水按3 :10 13 8比例混合均匀，静置分层，取上相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为850rpm，同时把下相以每分钟6mL的流速泵入，当所有多余固定相溢出分离柱时，流动相流速调节为lml/min，注入浓缩液，紫外检测器监测，收集流分，减压浓缩干燥即得银胶菊酮，含量97. 3%，收率78. 5%。
权利要求
1.I. 一种纯化银胶菊酮的方法，其特征在于包括以下步骤取银胶菊粉碎，加80-90%乙醇超声提取60-100min，提取液减压回收试剂，依次用石油醚，二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，用3%碳酸钠溶液洗涤后，浓缩至小体积，再以正己烷-氯仿-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱分离，流分减压浓缩干燥即得银胶菊酮。
2.2.根据权利要求I所述纯化银胶菊酮的方法，其特征在于所述的正己烷-氯仿-甲醇-水溶剂系统比例为3 : (10-18) : (7-13) :8。
全文摘要
本发明属于生物技术领域，特别是涉及一种纯化银胶菊酮的方法。方法步骤如下取银胶菊粉碎，加80-90%乙醇超声提取60-100min，提取液减压回收试剂，依次用石油醚，二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，用3%碳酸钠溶液洗涤后，浓缩至小体积，再以正己烷-氯仿-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱分离，流分减压浓缩干燥即得银胶菊酮。采用本发明纯化银胶菊酮，工艺简单易操作，收率高，易于工业化制备。
文档编号C07C49/753GK102659548SQ20121012490
公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月26日 优先权日2012年4月26日
发明者刘东锋, 吴艳波 申请人:南京泽朗医药科技有限公司