一种大孔树脂富集纯化翅碱蓬茎叶总黄酮的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种植物有效成分的制备方法，特别是涉及一种从翅碱蓬茎叶中纯化总黄酮的方法。
【背景技术】
[0002]翅碱蓬(Suaedasalsa)，又名盐吸菜，黄须菜，属中央种子目、黎科(Chenopodiaceac)、碱蓬属(SuaedaForsk)，为一年生耐盐湿生草本植被。翅碱蓬对于生境变化异常敏感，是北方滨海湿地生态环境变化的指示性植物。而在东营，有食用翅碱蓬的习惯。其嫩苗可供蔬食。夏季采摘开花前的幼苗，洗净后下沸水锅焯一下，可以凉拌、炝、炒、制馅、做汤等。翅碱蓬具有多种保健功能:含有多种矿物质，其成分符合人体需要。此外还含有丰富的膳食纤维，能刺激胃肠蠕动，帮助消化，可预防直肠癌、糖尿病、胆结石、痔疮等疾病。
[0003]黄酮类化合物是植物中普遍存在的次生代谢物，具有多种有益的生理效应和药理作用。研宄发现黄酮类化合物具有保护心血管系统、护肝、抗肿瘤、抗病毒、抗消化性溃疡、镇痛、止咳、平喘等重要的药用价值，也可用作食品、化妆品的天然添加剂，还具有清除自由基、抗氧化等生物活性，应用价值广泛，市场开发潜力很大。目前国内外主要是从银杏叶、大豆、山楂叶、荷叶、芹菜叶、水芹、花生壳等中提取黄酮类化合物，其中尤其以银杏和大豆的研宄最为深入。但是，对翅碱蓬茎叶中黄酮类物质的研宄却鲜见报道。
[0004]大孔吸附树脂是一类不含交换基团并且具有大孔结构的高分子吸附树脂，孔径和比表面积都比较大。与凝胶树脂及天然吸附剂相比，大孔吸附树脂具有吸附容量大、吸附速度快、选择性好、易于解吸附、机械强度高、再生处理简便等优点，尤其适合于从水溶液中分离低极性或非极性的化合物，近年来广泛应用于中草药有效成分的提取、分离纯化工作中。
[0005]本发明以翅碱蓬茎叶为原料，采用大孔树脂法富集纯化其中的主要成分黄酮类化合物，使纯化后的提取物中该类成分含量达到20%以上，为翅碱蓬茎叶资源的综合开发利用奠定基础。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于是提供一种工艺简单，成本低，纯化效率高的一种大孔树脂富集纯化翅碱蓬茎叶总黄酮的方法
本发明的技术方案是:一种大孔树脂富集纯化翅碱蓬茎叶总黄酮的方法，其特征在于:具体步骤如下:1)取干燥碱蓬莖叶，粉碎，过二十目筛，，加入翅碱蓬莖叶重量8-12倍的提取试剂，米用回流提取法提取2_3次，所述提取试剂为浓度50-90%范围内的乙醇，每次提取1-2小时，用200-300目滤布过滤，合并提取液；
2)将步骤(I)得到的提取液浓缩至总黄酮质量浓度0.5-3.0mg/mL，用稀盐酸调浓缩液pH至5-6，采用大孔树脂，将浓缩液上样，上样流速1.0mL/min，最大上样量为1.5倍柱体积，上样完成后首先水洗，然后再用乙醇洗。用5倍柱体积浓度为70%的乙醇，洗脱流速为2.0mL/min ；
3)收集乙醇洗脱液，蒸发浓缩，干燥，即为所需的目标。
[0007]所述的步骤(2)中大孔树脂选用HPD-1OO、HPD-400、HPD600、HPD-700、D-1OUAB-8，优选 HPD-1OO、HPD-400，最优选 D-101。
[0008]所述的步骤(2)中提取液浓缩物为透明状黄褐色液体。
[0009]获得纯化的翅碱蓬茎叶总黄酮质量含量>20%。
[0010]本发明与现有技术相比，具有如下优点和积极效果:
本发明工艺简单，成本低，易操作，效率高，以DlOl (AB-8)大孔吸附树脂为吸附剂，上样液流速为1.0mL/min,上样液浓度为0.5-3.0mg/mL, pH值为5时，有最佳的吸附效果；当洗脱液为70%乙醇，洗脱液流速为2mL/min，洗脱液用量为5BV时，有最佳的解析效果。纯化后的提取物中总黄酮含量超过20%，具有进一步开发利用的价值。
【具体实施方式】
[0011]以下列举实例对本发明的上述内容作更具体和详细的说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实例。
[0012]实施例1:
将烘干的翅碱蓬茎叶用粉碎机粉碎，过10目的筛子，加入原料重量8倍的50%的乙醇对粉碎后的原料回流提取3次，每次提取2小时，滤过，合并滤液，对过滤后的提取液减压浓缩回收乙醇，检测浓缩浓度至大孔树脂上样浓度，即总黄酮质量浓度1.5mg/mL，提取液浓缩物为透明状棕黄色液体，调浓缩液pH至5-6，将溶液加入到DlOl (AB-8)大孔树脂柱中进行饱和吸附，上样流速1.0mL/min，最大上样量为1.5倍柱体积，先用5倍柱体积的水洗脱除去杂质，再用5倍柱体积的70%乙醇作为洗脱剂，对洗脱剂进行回收溶剂和浓缩处理，最后进行干燥，获得纯化的翅碱蓬茎叶总黄酮质量含量达22%。
[0013]实施例2:
将烘干的翅碱蓬茎叶用粉碎机粉碎，过过10目的筛子，加入原料重量10倍的70%的乙醇对粉碎后的原料回流提取3次，每次提取2小时，滤过，合并滤液，对过滤后的提取液减压浓缩回收乙醇，检测浓缩浓度至大孔树脂上样浓度，即总黄酮质量浓度2.4mg/mL，提取液浓缩物为透明状棕黄色液体，调浓缩液pH至5-6，将溶液加入到DlOl大孔树脂柱中进行饱和吸附，上样流速1.0mL/min,最大上样量为1.5倍柱体积，先用5倍柱体积的水洗脱除去杂质，再用5倍柱体积的70%乙醇作为洗脱剂，对洗脱剂进行回收溶剂和浓缩处理，最后进行干燥，获得纯化后的翅碱蓬茎叶总黄酮质量含量达24%。
[0014]实施例3:
将烘干的翅碱蓬茎叶用粉碎机粉碎，过10目的筛子，加入原料重量12倍的90%的乙醇对粉碎后的原料回流提取3次，每次提取2小时，滤过，合并滤液，对过滤后的提取液减压浓缩回收乙醇，检测浓缩浓度至大孔树脂上样浓度，即总黄酮质量浓度3.6mg/mL，提取液浓缩物为透明状棕黄色液体，调浓缩液pH至5-6，将溶液加入到DlOl (AB-8)大孔树脂柱中进行饱和吸附，上样流速1.0mL/min，最大上样量为1.5倍柱体积，先用5倍柱体积的水洗脱除去杂质，再用5倍柱体积的70%乙醇作为洗脱剂，对洗脱剂进行回收溶剂和浓缩处理，最后进行干燥，获得纯化的翅碱蓬茎叶总黄酮质量含量达27%。
【主权项】
1.一种大孔树脂富集纯化翅碱蓬茎叶总黄酮的方法，其特征在于:具体步骤如下:1)取干燥碱蓬茎叶，粉碎，过二十目筛，，加入翅碱蓬茎叶重量8-12倍的提取试剂，采用回流提取法提取2-3次，所述提取试剂为浓度50-90%范围内的乙醇，每次提取1-2小时，用200-300目滤布过滤，合并提取液； 2)将步骤(I)得到的提取液浓缩至总黄酮质量浓度0.5-3.0mg/mL，用稀盐酸调浓缩液pH至5-6，采用大孔树脂，将浓缩液上样，上样流速1.0mL/min，最大上样量为1.5倍柱体积，上样完成后首先水洗，然后再用乙醇洗；用5倍柱体积浓度为70%的乙醇，洗脱流速为2.0mL/min ； 3)收集乙醇洗脱液，蒸发浓缩，干燥，即为所需的目标。
2.一种大孔树脂富集纯化翅碱蓬茎叶中总黄酮的方法，其特征在于:所述的步骤(2)中大孔树脂选用 HPD-100、HPD-400、HPD600、HPD-700、D-1O1、AB-8，优选 HPD-100、HPD-400，最优选D-1Ol。
3.根据权利要求1所述的一种大孔树脂富集纯化翅碱蓬茎叶总黄酮的方法，其特征在于:所述的步骤(2)中提取液浓缩物为透明状黄褐色液体。
4.根据权利要求1所述的一种大孔树脂富集纯化翅碱蓬茎叶总黄酮的方法，其特征在于:获得纯化的翅碱蓬茎叶总黄酮质量含量>20%。
【专利摘要】一种大孔树脂富集纯化翅碱蓬茎叶总黄酮的方法，其特征在于：具体步骤如下：1）取干燥碱蓬茎叶,粉碎,过二十目筛,，加入翅碱蓬茎叶重量8-12倍的提取试剂，采用回流提取法提取2-3次，所述提取试剂为浓度50-90%范围内的乙醇，每次提取1-2小时，用200-300目滤布过滤，合并提取液；2)将步骤(1)得到的提取液浓缩至总黄酮质量浓度0.5-3.0mg/mL，用稀盐酸调浓缩液pH至5-6，采用大孔树脂，将浓缩液上样，上样流速1.0mL/min，最大上样量为1.5倍柱体积，上样完成后首先水洗，然后再用乙醇洗。用5倍柱体积浓度为70%的乙醇，洗脱流速为2.0mL/min；3)收集乙醇洗脱液，蒸发浓缩，干燥，即为所需的目标。有益效果是：本发明工艺简单，成本低，易操作，效率高，纯化后的提取物中总黄酮含量超过20%，具有进一步开发利用的价值。
【IPC分类】A61K36-185
【公开号】CN104644702
【申请号】CN201510015606
【发明人】刘永刚, 张世玲
【申请人】东营合生生物科技有限公司
【公开日】2015年5月27日
【申请日】2015年1月13日